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- 5 篇 农业资源与环境
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- 3 篇 生态学
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- 1 篇 农林经济管理
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- 2 篇 教育学

主题

55 篇 原核表达
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41 篇 分离鉴定
39 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 基因克隆
35 篇 大肠杆菌
33 篇 猪
32 篇 牛
28 篇 临床诊断
26 篇 卵母细胞
24 篇 流行病学
22 篇 乳酸菌
21 篇 猪圆环病毒2型
21 篇 奶牛
21 篇 prrsv
21 篇 益生菌
21 篇 禽流感病毒
19 篇 新城疫病毒
18 篇 鉴别诊断
18 篇 病毒检测

机构

88 篇 中国农业大学
67 篇 华南农业大学
57 篇 吉林大学
56 篇 广西大学
54 篇 广西兽医研究所
49 篇 河北农业大学
48 篇 军事医学科学院军...
43 篇 南京农业大学
43 篇 华中农业大学
42 篇 河南农业大学
40 篇 四川农业大学
36 篇 山东农业大学
31 篇 吉林农业大学
28 篇 河南省动物疫病预...
27 篇 河南科技大学
23 篇 云南农业大学
21 篇 湖南农业大学
18 篇 青岛农业大学
18 篇 山东省滨州畜牧兽...
17 篇 东北农业大学

作者

44 篇 金宁一
34 篇 李斌
34 篇 梁家幸
34 篇 赵武
32 篇 蒋玉雯
32 篇 黄安国
32 篇 姚瑞英
32 篇 梁保忠
29 篇 沈志强
29 篇 鲁会军
28 篇 丁壮
25 篇 潘康成
24 篇 黄伟坚
22 篇 吴志明
22 篇 王红宁
22 篇 闫若潜
22 篇 罗满林
21 篇 程相朝
20 篇 杨霞
20 篇 母连志

语言

1,430 篇 中文
53 篇 英文

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2株PRRSV变异株动物回归试验及其病毒特性

2株PRRSV变异株动物回归试验及其病毒特性

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：孙彦伟王连想蒋启荣任裕其田云毕英佐马静云广东省动物防疫监督总所广东广州 510230 广东省动物防疫监督总所广东广州 510230 华南农业大学动物科学学院广东广州 510642 华南农业大学动物科学学院广东广州 510642

为进一步证实PRRSV变异株(NSP2 1594-1680bp缺失)感染发病规律,本研究时2株分离鉴定的PRRSV变异株进行动物回归试验。结果表明高热是PRRSV变异株感染猪群的特征性反应,攻毒17d左右存活猪体温恢复正常;试验发病猪症状及病理变化与临床发... 详细信息

为进一步证实PRRSV变异株(NSP2 1594-1680bp缺失)感染发病规律,本研究时2株分离鉴定的PRRSV变异株进行动物回归试验。结果表明高热是PRRSV变异株感染猪群的特征性反应,攻毒17d左右存活猪体温恢复正常;试验发病猪症状及病理变化与临床发病猪相似,因此在临床诊断上具有重要意义。不同毒株致病性不同,在发病、死亡时间和死亡率上存在较大差别,GDQJ株攻毒后临床发病而未死亡,因此将PRRSV变异株感染引起的PRRS都归为“高致病性PRRS”有待商榷;攻毒后第3d部分血清检测到N蛋白抗体,9d后所有攻毒猪血清PRRS抗体均为阳性,且S/P值呈规律曲线,15d以后存活猪抗体维持在较高水平;攻毒后病毒血症快速产生,但存活猪只血清中病毒在攻毒15d后逐渐消退,36d后完全消失：病毒可通过粪便及鼻、口等排出物传播,携带PRRSV变异株的生猪及其产品或废弃物是疫情快速扩散和蔓延的主要原因。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 PRRSV变异株动物回归试验病毒特性病理变化临床诊断

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B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株HA基因重组3型腺病毒的构建

B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株HA基因重组3型腺病毒的构建

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：鲁俊鹏田新贵罗满林李海涛周志超周荣华南农业大学兽医学院广州市儿童医院中心实验室

目的:构建包含有B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株血凝素(HA)基因的重组3型腺病毒.方法:用PCR方法扩增得到HA基因,酶切后克隆至3型腺病毒穿梭质粒pSK-CMV,构建重组穿梭质粒pSK-CMV-HA,然后在大肠杆菌BJ5183内进行经Not I和EcoR V线性化... 详细信息

目的:构建包含有B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株血凝素(HA)基因的重组3型腺病毒.方法:用PCR方法扩增得到HA基因,酶切后克隆至3型腺病毒穿梭质粒pSK-CMV,构建重组穿梭质粒pSK-CMV-HA,然后在大肠杆菌BJ5183内进行经Not I和EcoR V线性化的pSK-CMV-HA和经RsrⅡ线性化的骨架质粒pBRAdV3△E3的同源重组,AsiS I酶切线性化重组腺病毒质粒pBRAdV3△E3-HA后脂质体法转染HEp-2细胞,进行病毒包装和增殖后得到重组腺病毒rAdv3△E3-HA,并且通过病变观察、扫描电镜、RT-PCR、免疫细胞化学方法对基因组的包装和HA基因的表达进行检测.结果:将HA基因克隆入psK-CMV获得重组穿梭质粒psK-CMV-HA,线性化的pSK-CMV-HA与pBRAdv3△E3同源重组后获得pBRAdV3△E3-HA,线性化的pBRAdV3△E3-HA转染HEp-2细胞观察到细胞病变和HA基因的表达.结论:成功构建了带有HA基因的重组腺病毒rAdV3△E3-HA,为B型流感病毒-3型腺病毒二联活苗的研究提供了依据。

关键词： B型流感病毒 HA基因重组腺病毒

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猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒多重TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用

猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒多重TaqMan实时荧光定量RT...

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：袁秀芳刘邓徐丽华王一成浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江杭州 310021

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)是引起仔猪腹泻和死亡的主要病因之一，本实验根据TaqMan探针荧光定量分析原理，设计两对引物和两条探针，分别以FAM和JOE标记探针。以T7体外转录试剂盒得到的RNA为标准品，通过对反... 详细信息

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)是引起仔猪腹泻和死亡的主要病因之一，本实验根据TaqMan探针荧光定量分析原理，设计两对引物和两条探针，分别以FAM和JOE标记探针。以T7体外转录试剂盒得到的RNA为标准品，通过对反应条件的优化，建立了一步法TaqMan双重实时荧光定量RT-PCR(FQ-RT-PCR)检测PEDV和TGEV的方法。该方法具有良好的敏感性、重复性和特异性，能够检测到2×10(0)拷贝/ul的病毒RNA，重复性试验中Ct值变异系数CV％均不超过2％，对猪圆环病毒、猪乙脑病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒进行FQ-RT-PCR，均检测不到荧光信号。应用本方法对浙江省176份病料进行检测时，其中PEDV阳性率97.7％，TGEV阳性率6.3％，混合感染率6.3％，表明浙江省猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎均有发生，但以猪流行性腹泻为主。

关键词：猪传染性胃肠炎猪流行性腹泻 TGEV病毒 PEDV病毒 RT-PCR检测鉴别诊断

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H9N2禽流感病毒感染哺乳动物的潜力研究

H9N2禽流感病毒感染哺乳动物的潜力研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：伍锐梁望旺杨克礼刘泽文熊忠良邓均华段正赢徐涤平湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

H9N2禽流感病毒已成全球性分布与流行,对各国的养禽业造成了巨大的经济损失。此外,H9N2禽流感病毒能够感染人类,严重威胁着人类健康。对于它存在的潜在危害已经越来越多地受到关注,相关的研究也相继开展。本研究,我们旨在探讨H9N2禽流... 详细信息

H9N2禽流感病毒已成全球性分布与流行,对各国的养禽业造成了巨大的经济损失。此外,H9N2禽流感病毒能够感染人类,严重威胁着人类健康。对于它存在的潜在危害已经越来越多地受到关注,相关的研究也相继开展。本研究,我们旨在探讨H9N2禽流感病毒地方分离株能否感染哺乳动物、感染哺乳动物的损害程度、能否在哺乳动物间传播等问题。以禽流感病毒H9N2分离株为研究对象,经呼吸道感染传代后,获取了能完全致死BALB/c小鼠的适应株,该小鼠适应株还能致死NIH小鼠、Kunming小鼠和C578BL/6小鼠,并能在多个脏器复制。全基因组序列分析表明,与野生型病毒序列相比,小鼠适应株病毒的多个基因发生了变异,共涉及25个氨基酸,这表明H9N2禽流感病毒的小鼠适应株的毒力是受多基因调控。此外,我们还评估了小鼠适应株能否在小鼠中传播。结果表明,小鼠适应株能在Kunming小鼠中传播,其传播途径可以是直接接触,也可通过空气传播。上述的研究结果表明,H9N2禽流感病毒具有感染哺乳动物的潜力,对人类健康构成了一定的威胁,需进行严密的监控。

关键词：禽流感 H9N2 哺乳动物致病力传播

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猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒多重TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用

猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒多重TaqMan实时荧光定量RT...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：袁秀芳刘邓徐丽华王一成浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)是引起仔猪腹泻和死亡的主要病因之一,本实验根据TaqMan探针荧光定量分析原理,设计两对引物和两条探针,分别以FAM和JOE标记探针。以T7体外转录试剂盒得到的RNA为标准品,通过对反应条... 详细信息

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)是引起仔猪腹泻和死亡的主要病因之一,本实验根据TaqMan探针荧光定量分析原理,设计两对引物和两条探针,分别以FAM和JOE标记探针。以T7体外转录试剂盒得到的RNA为标准品,通过对反应条件的优化,建立了一步法TaqMan双重实时荧光定量RT-PCR(FQ-RT-PCR)检测PEDV和TGEV的方法。该方法具有良好的敏感性、重复性和特异性,能够检测到2×10～0拷贝/ul的病毒RNA,重复性试验中Ct值变异系数CV%均不超过2%,对猪圆环病毒、猪乙脑病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒进行FQ-RT-PCR,均检测不到荧光信号。应用本方法对浙江省176份病料进行检测时,其中PEDV阳性率97.7%,TGEV阳性率6.3%,混合感染率6.3%,表明浙江省猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎均有发生,但以猪流行性腹泻为主。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒猪流行性腹泻病毒双重TaqMan探针荧光定量RT-PCR

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猪圆环病毒2型感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响

猪圆环病毒2型感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：司兴奎张济培陈建红顾万军马春全佛山科学技术学院广东省高校预防兽医学重点实验室

为明确PCV2感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响,采用阻断ELISA方法对单独接种猪伪狂犬疫苗组(A组,n=3)及PCV2人工感染3周后接种猪伪狂犬疫苗组(PA组,n=5)后不同时相血清中的猪伪狂犬gB抗体进行检测;同时对不同时相前腔静脉血进行CD4/CD8流... 详细信息

为明确PCV2感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响,采用阻断ELISA方法对单独接种猪伪狂犬疫苗组(A组,n=3)及PCV2人工感染3周后接种猪伪狂犬疫苗组(PA组,n=5)后不同时相血清中的猪伪狂犬gB抗体进行检测;同时对不同时相前腔静脉血进行CD4/CD8流式细胞术及血常规分析.结果表明,在PCV2感染后2周至5周间,A组白细胞含量均高于PA组,随后PA组白细胞恢复至与A组略高的正常水平;在整个试验中,除接种猪伪狂犬疫苗后1和9周(WPI)外的所有时相PA组的淋巴细胞含量均略高于A组;PCV2感染后可使记忆/激活Th细胞数量略有升高,幼稚型Th细胞含量的下降;PCV2感染后2-7周PA组Tc细胞均高于A组,在9WPI PA组Tc细胞数量显著下降(P<0.05);除9WPI外,A组的S/N值均低于PA组.结果提示,PCV2感染看降低机体产生针对PRV gB特异性抗体水平,且在一定程度上降低了幼稚型Th细胞及Tc细胞含量.

关键词：猪圆环病毒2型猪伪狂犬疫苗免疫应答阻断ELISA 流式细胞术

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猪细小病毒自然弱毒N株(PPV-N株)VP1基因的扩增与生物信息学分析

猪细小病毒自然弱毒N株(PPV-N株)VP1基因的扩增与生物信息学分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：赵武李斌梁家幸梁保忠白安斌姚瑞英黄安国何颖蒋玉雯广西兽医研究所

对猪细小病毒自然弱毒PPV-N株VP1基因扩增及测序,利用生物信息学技术预测VP1蛋白的二级结构与B细胞抗原表位以及分析该蛋白的氨基酸差异位点及密码子偏爱性.结果表明,PPV-N株VP1基因与弱毒参考毒株NADL-2VP1基因同源性最高,亲缘关系最近... 详细信息

对猪细小病毒自然弱毒PPV-N株VP1基因扩增及测序,利用生物信息学技术预测VP1蛋白的二级结构与B细胞抗原表位以及分析该蛋白的氨基酸差异位点及密码子偏爱性.结果表明,PPV-N株VP1基因与弱毒参考毒株NADL-2VP1基因同源性最高,亲缘关系最近,为PPV-N株和NADL-2株同属弱毒株提供了分子生物学依据.PPV-N株VP1蛋白的二级结构较为复杂,以β-折叠为主,并有较多的转角和无规则卷曲区域,在序列的20-56,61-80,86-130,136-188区域为B细胞抗原表位的优势区域.PPV强、弱毒株VP1蛋白存在5个氨基酸差异位点(T-365-I,G-528-D,Q-533-H,P-586-S,K-715-R),这些位点处氨基酸残基抗原性与毒力成正相关.PPV-N株VP1蛋白在A、C、E、G、H、I、K、N、Q、R、S、T、V和Y氨基酸于密码子选择上存在一定的偏爱性.

关键词： PPV-N株 VP1基因扩增生物信息学分析

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抗人红细胞单链抗体与猪伪狂犬gE蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学活性检测

抗人红细胞单链抗体与猪伪狂犬gE蛋白双功能融合蛋白的构建及生物...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：廖文军覃绍敏吴健敏王仰杰白安斌覃建飞广西大学动物科学技术学院广西兽医研究所

为构建既具有凝集性又具有抗原性的双功能融合蛋白,本研究利用特异性引物从重组质粒PMD-2E8ScFv和PMD-gE中PCR扩增得2E8基因(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和kgE基因(PRVgE主要抗原编码区),采用重叠延伸(SOE)PCR法拼接成融合的双功能分... 详细信息

为构建既具有凝集性又具有抗原性的双功能融合蛋白,本研究利用特异性引物从重组质粒PMD-2E8ScFv和PMD-gE中PCR扩增得2E8基因(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和kgE基因(PRVgE主要抗原编码区),采用重叠延伸(SOE)PCR法拼接成融合的双功能分子2E8kgE,经BamHI和EcoRI双酶切处理,纯化后,克隆至BamHI和EcoRI双酶切处理的表达载体pET-Trx中,构建了原核表达载体pET-Trx-2E8kgE;将pET-Trx-2E8kgE转化至BL21plysS中,在IPTG的诱导下表达具有双功能的融合蛋白,经过SDS-PAGE和Western-blot检测;结果表明,重组菌BL21plysS表达出约60.1kDa的目的蛋白,与猪伪狂犬标准阳性血清发生特异性反应.红细胞凝集试验证实:2E8kgE融合蛋白既能够与人红细胞结合,又能够与PRV抗体反应,具有双功能特性.

关键词：猪伪狂犬病毒 gE基因原核表达

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肠出血性大肠杆菌O157：H7Tir基因的克隆、表达及生物学活性研究

肠出血性大肠杆菌O157：H7Tir基因的克隆、表达及生物学活性研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：张雪寒何孔旺周俊明温立斌茅爱华倪艳秀郭容利俞正玉吕立新江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京 210014

克隆、表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157：H7转位紧密素受体(Tir)基因，并研究其抗原性。选用pET28原核表达载体，体外构建Tir原核表达重组菌，并在大肠杆菌中获得高效表达。以Tir免疫家兔获得了高效价多克隆抗体，Western blot分析此抗... 详细信息

克隆、表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157：H7转位紧密素受体(Tir)基因，并研究其抗原性。选用pET28原核表达载体，体外构建Tir原核表达重组菌，并在大肠杆菌中获得高效表达。以Tir免疫家兔获得了高效价多克隆抗体，Western blot分析此抗体能与Tir发生特异性抗原抗体反应。选用Hep-2细胞对Tir重组蛋白进行粘附特性分析，表达Tir蛋白能够抑制O157：H7对Hep-2细胞的粘附。表达Tir蛋白免疫Balb/c小鼠，并进行攻毒保护评价，结果显示表达Tir蛋白具有良好的免疫原性和反应性和一定的免疫保护性。在大肠杆菌中成功克隆表达了Tir基因，所获Tir具有良好的抗原性，可能用于肠出血性大肠杆菌O157基因工程疫苗的研究。

关键词：肠出血性大肠杆菌转位紧密素受体 Tir蛋白基因克隆原核表达免疫保护性

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凝胶过滤与镍柱亲和纯化基因工程蛋白金葡菌-溶血素的生物学特性比较

凝胶过滤与镍柱亲和纯化基因工程蛋白金葡菌-溶血素的生物学特性...

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：张海燕杨宏军王长法何洪彬马卫明杨少华山东省农业科学院奶牛研究中心济南 250100 山东农业大学动物科技学院泰安 271O18 山东省农业科学院奶牛研究中心济南 250100 山东农业大学动物科技学院泰安 271O18

以在宿主菌株BL21(DE3)中成功表达的重组金黄色葡萄球菌 -溶血素蛋白作为研究对象，分析比较通过凝胶过滤层析(Gel Filtration Chromatography)和镍柱亲和层析纯化试剂盒(Ni-NTA Spin Columns)纯化所得到的重组蛋白的蛋白含量和生物特... 详细信息

以在宿主菌株BL21(DE3)中成功表达的重组金黄色葡萄球菌 -溶血素蛋白作为研究对象，分析比较通过凝胶过滤层析(Gel Filtration Chromatography)和镍柱亲和层析纯化试剂盒(Ni-NTA Spin Columns)纯化所得到的重组蛋白的蛋白含量和生物特性方面的差异。SDS-PAGE分析检测纯化产物，Bradfbrd法测定蛋白含量，兔红细胞测定半数溶血效价。结果显示这两种方法得到的纯化产物在53 kD处均呈现单一清晰带，达电泳级纯度。与此同时，凝胶过滤对目的蛋白的纯化率为14.04％，蛋白含量为0.337 mg/mL，溶血活性为1519 HU/mg;镍柱亲和层析的纯化率为17.5％，蛋白含量为0.35 mg，mL，溶血活性为1463 Hu/mg。由此可见，凝胶过滤得到的纯化产物在蛋白含量和蛋白活性方面丝毫不亚于镍柱亲和层析纯化试剂盒。

关键词：金黄色葡萄球菌溶血素重组蛋白生物学特性凝胶过滤亲和层析纯化基因工程疫苗

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