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- 2 篇 教育学

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41 篇 分离鉴定
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38 篇 基因克隆
35 篇 大肠杆菌
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24 篇 流行病学
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21 篇 猪圆环病毒2型
21 篇 奶牛
21 篇 prrsv
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18 篇 鉴别诊断
18 篇 病毒检测

机构

88 篇 中国农业大学
67 篇 华南农业大学
57 篇 吉林大学
56 篇 广西大学
54 篇 广西兽医研究所
49 篇 河北农业大学
48 篇 军事医学科学院军...
43 篇 南京农业大学
43 篇 华中农业大学
42 篇 河南农业大学
40 篇 四川农业大学
36 篇 山东农业大学
31 篇 吉林农业大学
28 篇 河南省动物疫病预...
27 篇 河南科技大学
23 篇 云南农业大学
21 篇 湖南农业大学
18 篇 青岛农业大学
18 篇 山东省滨州畜牧兽...
17 篇 东北农业大学

作者

44 篇 金宁一
34 篇 李斌
34 篇 梁家幸
34 篇 赵武
32 篇 蒋玉雯
32 篇 黄安国
32 篇 姚瑞英
32 篇 梁保忠
29 篇 沈志强
29 篇 鲁会军
28 篇 丁壮
25 篇 潘康成
24 篇 黄伟坚
22 篇 吴志明
22 篇 王红宁
22 篇 闫若潜
22 篇 罗满林
21 篇 程相朝
20 篇 杨霞
20 篇 母连志

语言

1,430 篇 中文
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鹅主要病毒性疾病多重PCR方法的建立及应用

鹅主要病毒性疾病多重PCR方法的建立及应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：陈宗艳李国新周艳君于海闫丽萍张善瑞许傲天童光志中国农科院上海兽医研究所

近年来,临床常见小鹅瘟病毒(GPV)、鹅副粘病毒(GPMV)、鹅疱疹病毒(GHV)、鹅腺病氟GAV)的病例报道.是鹅主要的病毒性疾病病原。本研究根据各病毒基因组序列特征,设计4对针对这4种病毒的特异性引物,对已知4种混合样品中GPV、GHV、GAV的DNA... 详细信息

近年来,临床常见小鹅瘟病毒(GPV)、鹅副粘病毒(GPMV)、鹅疱疹病毒(GHV)、鹅腺病氟GAV)的病例报道.是鹅主要的病毒性疾病病原。本研究根据各病毒基因组序列特征,设计4对针对这4种病毒的特异性引物,对已知4种混合样品中GPV、GHV、GAV的DNA和GPMV反转录后的cDNA进行扩增,并对其最佳反应条件、特异性及敏感性进行了测定。结果表明:多重PCR扩增得到与试验设计相符的226bp(GPV),302bp(GPMV),501bp(GHV)和401bp(GAV)特异性扩增带,而对其它常见水禽病原及1日龄正常雏鹅的血清扩增结果均为阴性:最低检测浓度为43.6ng/LGPV,34.0 ng/L GPMV,11.5 ng/L GHV和23.6ng/L GAV;最佳反应条件为50ul反应体系中,引物10pmol、200μM dNTP、TaqTM DNA Polymerase 1.5U,退火温度58℃,进行35个循环.应用建立的多重PCR方法对来自上海、浙江、安徽等地的76份临床病例进行检测,阳性检测率分别为GPV 36.8%(28/76)、GPMV 11.8%(9/76)、GHV3.9%(3n6)、GAV 15.8%(12/76);GAV与GPV或GPMV混合感染率为47.4%(36/76).结果表明:建立的多重PCR方法具有快速、敏感、特异的特点,可用于鹅临床病例的快速鉴别诊断以及流行病学的调查研究;分别对混合感染和单独感染病例中GAV分离并进行动物回归实验及GAV分子生物学实验研究对GAV的发病机理、免疫机制将为生产中预防、临床诊断和治疗提供理论依据和有益的帮助。

关键词：鹅细小病毒鹅副粘病毒鹅疱疹病毒鹅腺病毒多重PCR

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S2菌苗对奶牛布氏杆菌病防制效果及安全性试验

S2菌苗对奶牛布氏杆菌病防制效果及安全性试验

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：凤英刘晓松牧仁内蒙古农牧业科学院动物医学研究所内蒙古鄂尔多斯市鄂托克前旗农牧业局

2004年内蒙古呼和浩特市地区新建的3个奶牛场,于2005年发生严重流产,作者从流产胎儿中分离到牛型布氏杆菌;7～8月份对3个奶牛场全面进行布病血清学检疫,阳性率分别为36.4%,46.8%,66.2%.根据疫病情况和以往防制布病经验,在疫区和爆发点... 详细信息

2004年内蒙古呼和浩特市地区新建的3个奶牛场,于2005年发生严重流产,作者从流产胎儿中分离到牛型布氏杆菌;7～8月份对3个奶牛场全面进行布病血清学检疫,阳性率分别为36.4%,46.8%,66.2%.根据疫病情况和以往防制布病经验,在疫区和爆发点采取免疫为主的综合性防制措施.免疫组Ⅰ场,阳性牛隔离饲养,流产牛隔离治疗,阳性牛和阴性牛连续3年S菌苗口服免疫,一次免疫即起到基本控制流产作用;免疫组Ⅱ场,阳性牛和阴性牛没有隔离淘汰,与阴性性同群饲养,每年进行S菌苗口服免疫,连续三年免疫后该场布病得到稳定控制;未免疫对照组,未进行免疫,采取以检疫为主,阳性牛隔离淘汰,环境消毒等措施,第四次检疫布病阳性率6.7%,流产率4.2%。从S菌苗对阴性反应奶牛免疫血清抗体消长规律看出,阴性泌乳牛和阴性育成牛免疫后20～30天的血清效价达到1:400,血清抗体在8个月后基本消失.对免疫组Ⅱ场同群饲养的62头泌乳牛免疫前后乳清SAT检测布病抗体,分别为45.2%和21%,但隔离饲养的阴性泌乳牛免疫后乳清SAT检测全部为阴性,因此乳清SAT检测法可作泌乳牛自然感染与免疫的鉴别诊断方法手段之一。布病阴性牛S菌苗口服免疫后,不同时期采集牛奶进行细菌学检菌,培养于布氏杆菌选择性培养基上,均无分离到病原菌,因此,阴性反应牛S菌苗口服免疫后乳品是安全的.

关键词：奶牛布鲁氏菌病 S2菌苗安全性

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我国部分地区猪圆环病毒2型流行毒株的遗传变异分析

我国部分地区猪圆环病毒2型流行毒株的遗传变异分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：郭龙军陆月华危艳武黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

临床上由猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染引起的相关疾病日益严重,流行毒株基因不断发生变异,为了了解我国PCV2流行毒株遗传变异情况,本试验对来自全国10个省份不同地区送检的90份病料中分离到19株PCV2流行毒株.通... 详细信息

临床上由猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染引起的相关疾病日益严重,流行毒株基因不断发生变异,为了了解我国PCV2流行毒株遗传变异情况,本试验对来自全国10个省份不同地区送检的90份病料中分离到19株PCV2流行毒株.通过病毒基因组克隆和测序,将19株病毒分为2个大基因群和3个亚群,基因组组成分别为1766nt、1767nt和1768nt,各占15.8%、73.7%和10.5%.以1767nt毒株为基准,其第39或1039位有1个碱基缺失后突变成1766nt毒株;第1040位有1个碱基插入后突变成1768nt毒株.对19株病毒ORF2编码的Cap蛋白分析发现,有4株病毒编码基因发生了突变,出现了705nt和708nt两种突变型,使ORF2编码的Cap蛋白C末端分别有1和2个氨基酸延伸.本试验选用AccⅠ和FbaⅠ内切酶对19株病毒基因组PCR产物进行了限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP),其结果可作为流行毒株分型鉴别手段.研究表明,我国猪群中流行的PCV2以基因组1767nt毒株为主,但也出现了1766nt基因变异毒株。此外,试验也证实上述毒株的ORF2编码Cap蛋白的C末端有突变现象,表明我国PCV2流行毒株呈现多样性。本研究建立的PCR-RFLP方法可为PCV2流行毒株分型提供鉴别手段.

关键词：猪圆环病毒2型流行毒株遗传变异 PCR-RFLP

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中国部分地区猪流感病毒的遗传演化分析

中国部分地区猪流感病毒的遗传演化分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：于海周艳君李国新闫丽萍陈宗艳童光志中国农业科学院上海兽医研究所猪病研究室

猪的呼吸道上皮细胞具有禽流感病毒和人流感病毒受体,具有感染禽流感和人流感病毒的能力,被认为是新型流感病毒产生的"混合器"和古老流感病毒长期在猪体内存在的"贮存器"。近年来,为了更好防控猪流感,我们开展了中... 详细信息

猪的呼吸道上皮细胞具有禽流感病毒和人流感病毒受体,具有感染禽流感和人流感病毒的能力,被认为是新型流感病毒产生的"混合器"和古老流感病毒长期在猪体内存在的"贮存器"。近年来,为了更好防控猪流感,我们开展了中国部分地区的猪流感流行病学调查.2006和2007年我们在广东省和浙江省的猪群中各分离到1株人源H1N1亚型和欧洲系禽源H1N1亚型SIV,并首次在中国进行相关报道;2007年我们从上海的猪群中分离到1株新型三源重组的H1N2亚型SIV,基因进化树分析表明,我们分离株的HA、NP、M和NS基因起源于古典的H1N1亚型SIV,PB2和PA基因来源禽流感病毒,NA和PB1基因来源于人流感病毒;2005和2006年我们分别在黑龙江和广东省的猪群中分离到4株人源H3N2亚型SIV病毒,在此基础上,进行了1970～2006年的44株H3N2亚型SIV进行了遗传演化分析;2007年我们从广西省猪群中分离到了4株H9N2亚型SIV,进而进行了禽源H9N2亚型SIV的分子进化研究.所有这些研究使我们对我国SIV的分子进化有了全新的理解,为猪流感疫情监测及预防控制提供理论依据.

关键词： H1N1亚型SIV H1N2亚型SIV H3N2亚型SIV H9N2亚型SIV 遗传演化

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猪圆环病毒2型感染性DNA的构建及体外拯救

猪圆环病毒2型感染性DNA的构建及体外拯救

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：李俊于周徐绍建程凯慧王金宝山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南250100 山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南250100 青岛农业大学青岛266109

感染性分子克隆是研究病毒复制和致病机制的有力工具。本研究首次应用PCR诱变技术解决了外源片段易于自连的难题,成功将两个PCV2 SD1株全基因组(DQ346683)头尾相接插入到真核生物表达载体pSK的多克隆位点中,构建重组质粒pSK-2PCV2;另外... 详细信息

感染性分子克隆是研究病毒复制和致病机制的有力工具。本研究首次应用PCR诱变技术解决了外源片段易于自连的难题,成功将两个PCV2 SD1株全基因组(DQ346683)头尾相接插入到真核生物表达载体pSK的多克隆位点中,构建重组质粒pSK-2PCV2;另外构建含单个PCV2全基因组的pSK-PCV2和自身环化质粒ds-PCV2。pSK-PCV2中含有一个线性化PCV2全基因组,长1767bp,载体中PCV2从496nt开始,其起始位点(Ori)含有保守序列的茎环结构未被破坏;ds-PCV2为单个全基因自连产物。将所得3种质粒分别转染无PCV污染的PK-15细胞系,经10次连续传代后,间接免疫荧光试验检测显示三者均在细胞核中含有大量的病毒抗原;提取mRNA后经RT-PcR检测都有PCV2特异性基因转录;透射电镜下可观察到直径约为17-20nm的典型PCV2病毒粒子;经测序鉴定所拯救出的病毒与亲本病毒核苷酸同源性为100％。所构建的3种重组质粒均可表达并在体外组装出有感染性的PCV2病毒粒子,拯救出的PCV2与亲本病毒具有相同的病毒学及分子生物学特性。本研究在国内首次应用PCR诱变技术成功构建PCV2双拷贝感染性克隆,并经体外拯救证实其具有感染性,为进行PCV2分子特性、疫苗免疫及致病机理研究打下了基础。

关键词：猪圆环病毒2型感染性DNA PK-15细胞系体外拯救 PCR诱变技术

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动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O157：H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O...

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：夏兴霞刘洁王永山诸玉梅欧阳伟何孔旺张雪寒江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京 210014 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京 210014 南京农业大学动物医学院江苏南京 210095

将*** O157：H7(EHEC-O157：H7)用甲醛灭活、超声破碎，免疫BALB/c小鼠，制备免疫脾细胞：与SP/20骨髓瘤细胞融合后，获得七株分泌抗*** O157：H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株，分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3，Ig亚类分别是... 详细信息

将*** O157：H7(EHEC-O157：H7)用甲醛灭活、超声破碎，免疫BALB/c小鼠，制备免疫脾细胞：与SP/20骨髓瘤细胞融合后，获得七株分泌抗*** O157：H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株，分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3，Ig亚类分别是IgG2aκ、IgG2aκ、IgG1κ，IgMκ、IgMλ.、IgMκ和lgG2aκ。用间接ELISA检测，E7和F1细胞培养上清液的效价为1.6×10(3)，腹水效价均为1×10(11);C3、F5、B8、G9和G11细胞培养上清液的效价为1×10(1)％～2×10(2)，腹水效价均为1×10(3)。相加ELISA结果显示，F1、G9和G11三株mAbs对应相同的抗原表位，而其它4株对应不同的抗原表位。用间接ELISA分析特异性，七株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应。Western blotting表明，C3、E7和F1三株mAbs在蛋白分子量28kD处有特异性条带，而其它四株mAbs则未显示蛋白带。

关键词：肠出血性大肠杆菌单克隆抗体生物制剂病原菌检测人畜共患病

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口蹄疫病毒三价复合多表位佐剂DNA疫苗构建及其免疫原性研究

口蹄疫病毒三价复合多表位佐剂DNA疫苗构建及其免疫原性研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：马鸣潇金宁一李昌尹革芬鲁会军李宵中国人民解放军军事医学科学院全军基因工程重点实验室云南农业大学动物科技学院辽宁医学院畜牧兽医学院

本研究以O型、A型FMDV结构蛋白VP1全基因和AsiaⅠ型FMDV 2个基因拓扑型的结构蛋白VP1基因上的5个抗原表位基因作为主要免疫原基因,以来源于非结构蛋白3ABC和结构蛋白VP4上的3个Th2细胞表位基因作为辅助基因,构建了O型、A型和Asia1型FMD... 详细信息

本研究以O型、A型FMDV结构蛋白VP1全基因和AsiaⅠ型FMDV 2个基因拓扑型的结构蛋白VP1基因上的5个抗原表位基因作为主要免疫原基因,以来源于非结构蛋白3ABC和结构蛋白VP4上的3个Th2细胞表位基因作为辅助基因,构建了O型、A型和Asia1型FMDV复合多表位基因工程疫苗表达盒OAAT,在此基础上,以SEA为基因佐剂,通过分子设计构建了SEA与OAAT融合表达基因。将构建好的表达盒OAAT与SEA融合表达基因克隆至真极表达载体PVAX1 PCMV启动子下游,构建成口蹄疫三价基因佐剂DNA疫苗pEA。经Western blot和IFA检测,目的蛋白在HeLa细胞中获得正确表达。小鼠免疫实验表明,pA和pEA免疫组的血清抗体均能分别与O型、A型和AsiaⅠ抗原反应,与对照组相比差异已显著,且pEA免疫组和灭活疫苗免疫组抗体水平均显著高于pA免疫组;同时pA和pEA免疫小鼠细胞因子IL-2,IFN-γ,IL-4和IL-10较对照组显著提高,且pEA免疫组的IL-2,IFN-γ和IL-4水平明显高于pA免疫组.用O/NY00和Asia1/YNBS/58株FMDV进行豚鼠攻毒免疫保护试验,结果表明O型和Asia1型FMDV二联灭活疫苗免疫组均获得完全保护,pA免疫组均获得2/4保护,pEA免疫组均获得3/4保护,而pVAX1和PBS免疫组完全没有保护。实验结果表明,SEA与OAAT融合表达蛋白具有较好免疫原性,且SEA可以作为DNA疫苗的有效基因佐剂.

关键词：口蹄疫病毒 SEA DNA疫苗

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我国部分地区猪圆环病毒2型流行毒株的遗传变异分析

我国部分地区猪圆环病毒2型流行毒株的遗传变异分析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：郭龙军陆月华危艳武黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001

临床上由猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染引起的相关疾病日益严重,流行毒株基因不断发生变异,为了了解我国PCV2流行毒株遗传变异情况,本试验对来自全国10个省份不同地区送检的90份病料中分离到19株PCV2流行毒株.通过病毒基因组克隆和测序,将19株病毒分为2个大基因群和3个亚群,基因组组成分别为1766nt、1767nt和1768nt,各占15.8％、73.7％和10.5％.以1767nt毒株为基准,其第39或1039位有1个碱基缺失后突变成1766nt毒株;第1040位有1个碱基插入后突变成1768nt毒株。对19株病毒ORF2编码的Cap蛋白分析发现,有4株病毒编码基因发生了突变,出现了705nt和708nt两种突变型,使ORF2编码的Cap蛋白C末端分别有1和2个氨基酸延伸.本试验选用AccⅠ和Fba Ⅰ内切酶对19株病毒基因组PCR产物进行了限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP),其结果可作为流行毒株分型鉴别手段。研究表明,我国猪群中流行的PCV2以基因组1767nt毒株为主,但也出现了1766nt基因变异毒株。此外,试验也证实上述毒株的ORF2编码Cap蛋白的C末端有突变现象,表明我国PCV2流行毒株呈现多样性,本研究建立的PCR-RFLP方法可为PCV2流行毒株分型提供鉴别手段。

关键词：猪圆环病毒2型流行毒株遗传变异 PCR-RFLP法鉴别诊断

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中国部分地区猪流感病毒的遗传演化分析

中国部分地区猪流感病毒的遗传演化分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：于海周艳君李国新闫丽萍陈宗艳童光志中国农业科学院上海兽医研究所猪病研究室上海 200241

猪的呼吸道上皮细胞具有禽流感病毒和人流感病毒受体,具有感染禽流感和人流感病毒的能力,被认为是新型流感病毒产生的“混合器”和古老流感病毒长期在猪体内存在的“贮存器”。近年来,为了更好防控猪流感,我们开展了中国部分地区的猪流... 详细信息

猪的呼吸道上皮细胞具有禽流感病毒和人流感病毒受体,具有感染禽流感和人流感病毒的能力,被认为是新型流感病毒产生的“混合器”和古老流感病毒长期在猪体内存在的“贮存器”。近年来,为了更好防控猪流感,我们开展了中国部分地区的猪流感流行病学调查。2006和2007年我们在广东省和浙江省的猪群中各分离到1株人源H1N1亚型和欧洲系禽源H1N1亚型SIV,并首次在中国进行相关报道;2007年我们从上海的猪群中分离到1株新型三源重组的H1N2亚型SIV,基因进化树分析表明,我们分离株的HA、NP、M和NS基因起源于古典的H1N1亚型SIV,PB2和PA基因来源禽流感病毒,NA和PB1基因来源于人流感病毒;2005和2006年我们分别在黑龙江和广东省的猪群中分离到4株人源H3N2亚型SIV病毒,在此基础上,进行了1970-2006年的44株H3N2亚型SIV进行了遗传演化分析;2007年我们从广西省猪群中分离到了4株H9N2亚型SIV,进而进行了禽源H9N2亚型SIV的分子进化研究。所有这些研究使我们对我国SIV的分子进化有了全新的理解,为猪流感疫情监测及预防控制提供理论依据。

关键词：猪流感流行病学调查遗传演化禽源H9N2亚型SIV 病毒分离分子进化

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猪同时分点注射O型口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病疫苗对免疫效果的影响试验报告

猪同时分点注射O型口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病疫苗对免疫效...

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：特木尔巴根乌日罕焱力宝音达来赵心力毕可心郭振海吴晓芳潘志强柴永珍郭金贵李瑞刚马立峰内蒙古自治区动物疫病预防控制中心呼和浩特市内蒙古自治区 010020 赤峰喀拉沁旗人才中心赤峰市内蒙古自治区 024400 赤峰市喀喇沁旗种猪场赤峰市内蒙古自治区 024400 赤峰市喀喇沁旗动物疫病防控中心赤峰市内蒙古自治区024400

选择没有注射过口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病疫苗的30日龄左右仔猪45头,随机分成三个组。每组15头。其中对照组间隔10d分别注射O型口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病疫苗。试验1组分点同时注射O型口蹄疫、猪瘟和高致病性猪蓝耳病疫苗,... 详细信息

选择没有注射过口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病疫苗的30日龄左右仔猪45头,随机分成三个组。每组15头。其中对照组间隔10d分别注射O型口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病疫苗。试验1组分点同时注射O型口蹄疫、猪瘟和高致病性猪蓝耳病疫苗,试验2组分点同时注射O型口蹄疫和猪瘟疫苗,间隔10d后注射高致病性猪蓝耳病疫苗。免疫后30d、60d、9叫分别采集血清,监测。型口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病免疫抗体,抗体结果按病种分类统计,用SPSS软件进行方差分析。通过监测分析得出三种免疫试验方法对O型口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病的抗体值影响差异不显著。生产实践中可以推广使用分点同时注射猪O型口蹄疫灭活疫苗、猪瘟活疫苗(脾淋源)和高致病性猪蓝耳病灭活疫苗,从而减少防疫员工作量,缩短集中免疫时间,加大免疫密度。

关键词： O型口蹄疫猪瘟高致病性猪蓝耳病免疫抗体灭活疫苗同时分点注射法

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