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AND代表“并且”；OR代表“或者”；NOT代表“不包含”；(注意必须大写,运算符两边需空一格)

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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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1,479 篇 会议
4 篇 期刊文献

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- 5 篇 农业资源与环境
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- 1 篇 农林经济管理
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2 篇 教育学
- 2 篇 教育学

主题

55 篇 原核表达
54 篇 序列分析
41 篇 分离鉴定
39 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 基因克隆
35 篇 大肠杆菌
33 篇 猪
32 篇 牛
28 篇 临床诊断
26 篇 卵母细胞
24 篇 流行病学
22 篇 乳酸菌
21 篇 猪圆环病毒2型
21 篇 奶牛
21 篇 prrsv
21 篇 益生菌
21 篇 禽流感病毒
19 篇 新城疫病毒
18 篇 鉴别诊断
18 篇 病毒检测

机构

88 篇 中国农业大学
67 篇 华南农业大学
57 篇 吉林大学
56 篇 广西大学
54 篇 广西兽医研究所
49 篇 河北农业大学
48 篇 军事医学科学院军...
43 篇 南京农业大学
43 篇 华中农业大学
42 篇 河南农业大学
40 篇 四川农业大学
36 篇 山东农业大学
31 篇 吉林农业大学
28 篇 河南省动物疫病预...
27 篇 河南科技大学
23 篇 云南农业大学
21 篇 湖南农业大学
18 篇 青岛农业大学
18 篇 山东省滨州畜牧兽...
17 篇 东北农业大学

作者

44 篇 金宁一
34 篇 李斌
34 篇 梁家幸
34 篇 赵武
32 篇 蒋玉雯
32 篇 黄安国
32 篇 姚瑞英
32 篇 梁保忠
29 篇 沈志强
29 篇 鲁会军
28 篇 丁壮
25 篇 潘康成
24 篇 黄伟坚
22 篇 吴志明
22 篇 王红宁
22 篇 闫若潜
22 篇 罗满林
21 篇 程相朝
20 篇 杨霞
20 篇 母连志

语言

1,430 篇 中文
53 篇 英文

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Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因在昆虫细胞中的表达

Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因在昆虫细胞中的表达

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：廖俊伟尹秀凤刘大伟毛火云胡来根张小飞南京天邦生物科技有限公司江苏南京 211102 安徽农业大学动物科技学院安徽合肥 230036 南京天邦生物科技有限公司江苏南京 211102 安徽农业大学动物科技学院安徽合肥 230036

根据DHV-Ⅰ基因组序列设计并合成一对特异性引物，通过RT-PCR方法扩增DHV-Ⅰ(A66株)VP1基因。用限制性内切酶EcoR /HindⅢ消化VP1基因和转移载体pFastbacⅠ，在T4 DNA连接酶作用下将二者连接构建转移质粒pFastbac-VP1。经PCR，双酶切及... 详细信息

根据DHV-Ⅰ基因组序列设计并合成一对特异性引物，通过RT-PCR方法扩增DHV-Ⅰ(A66株)VP1基因。用限制性内切酶EcoR /HindⅢ消化VP1基因和转移载体pFastbacⅠ，在T4 DNA连接酶作用下将二者连接构建转移质粒pFastbac-VP1。经PCR，双酶切及测序鉴定后将其转化含穿梭载体Bacmd的感受态细胞DH10bac中，蓝白斑筛选获得重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-VP1，在脂质体的介导下转染昆虫细胞Sf9，获得重组杆状病毒rvBac-VP1。SDS-PAGE分析表明，VP1基因在昆虫细胞中获得表达，表达产物分子量约为***-blot检测表明，表达产物能与抗DHV-Ⅰ阳性血清发生反应，具有良好的反应原性。

关键词：鸭病毒性肝炎 DHV-Ⅰ病毒 VP1基因重组杆状病毒昆虫细胞真核表达系统

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猪O型合成肽疫苗与猪O型灭活疫苗免疫效果监测结果比较报告

猪O型合成肽疫苗与猪O型灭活疫苗免疫效果监测结果比较报告

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：马立峰特木尔巴根李瑞刚乌日罕郭金贵张娜焱力宝音达来赵心力内蒙古自治区动物疫病预防控制中心呼和浩特市内蒙古自治区 010020 内蒙古自治区动物卫生监督所呼和浩特市内蒙古自治区 010051 赤峰喀拉沁旗人才中心赤峰市内蒙古自治区 024400

应用猪O型口蹄疫合成肽疫苗、猪O型口蹄疫灭活疫苗两种疫苗分别免疫仔猪,观察疫苗反应情况,经口蹄疫O型液相阻断ELISA和猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白ELISA交叉检测,确定两种疫苗的免疫效果,比较两种实验方法。结果显示猪O型合成肽疫苗免疫... 详细信息

应用猪O型口蹄疫合成肽疫苗、猪O型口蹄疫灭活疫苗两种疫苗分别免疫仔猪,观察疫苗反应情况,经口蹄疫O型液相阻断ELISA和猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白ELISA交叉检测,确定两种疫苗的免疫效果,比较两种实验方法。结果显示猪O型合成肽疫苗免疫转阳率高于猪O型口蹄疫灭活疫苗,口蹄疫O型液相阻断ELISA不适合检测猪O型合成肽疫苗免疫抗体。

关键词：猪O型口蹄疫抗体检测合成肽疫苗灭活疫苗免疫效果

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2001～2008年湖南猪群主要疫病流行态势与分析

2001～2008年湖南猪群主要疫病流行态势与分析

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘道新邱伯根鲁杏华何世成谈志祥郭成玲邱立新范仲鑫湖南省动物疫病预防控制中心湖南省兽医局湖南省动物卫生监督所

对近8年来的1424个临床猪病例诊断结果进行统计,系统分析8年来各种疫病的发病情况.结果显示,2001年至2005年猪瘟、猪伪狂犬病是我省猪场内的主要疫病;2006年起猪蓝耳病病例显着增加,迅速成为主要疫病;猪2型圆环病毒每年都有较高的感染率... 详细信息

对近8年来的1424个临床猪病例诊断结果进行统计,系统分析8年来各种疫病的发病情况.结果显示,2001年至2005年猪瘟、猪伪狂犬病是我省猪场内的主要疫病;2006年起猪蓝耳病病例显着增加,迅速成为主要疫病;猪2型圆环病毒每年都有较高的感染率,呈持续平稳态势;细菌病例中以猪胸膜肺炎放线杆菌的检测比较较高,其次是大肠杆菌和猪链球菌.在主要疫病中,猪瘟和猪蓝耳病的流行似有此消彼长的趋势,猪伪狂犬病近年流行有所下降,但似有每3年一流行周期的态势。另外,多重感染病例在各年的病例中均有较高的比例,且一度呈上升趋势,是近年我省疫病复杂化的主要原因之一。

关键词：猪场猪瘟蓝耳病伪狂犬病圆环病毒病

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乙型脑炎病毒E蛋白在大肠杆菌中的高效表达

乙型脑炎病毒E蛋白在大肠杆菌中的高效表达

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张丹刘昊鲁会军金扩世于长勇胡博颜雯金宁一军事医学科学院军事兽医研究所吉林大学畜牧兽医学院云南农业大学动物科技学院

目的将乙型脑炎病毒E蛋白基因克隆至pET-28a(+)表达载体,构建原核表达质粒pET-28a(+)/E,并使该基因在***中高效表达,为进一步研制乙脑早期诊断试剂奠定基础。方法以乙型脑炎病毒疫苗株全基因序列为模板设计引物,通过RT-PCR方法扩增目的... 详细信息

目的将乙型脑炎病毒E蛋白基因克隆至pET-28a(+)表达载体,构建原核表达质粒pET-28a(+)/E,并使该基因在***中高效表达,为进一步研制乙脑早期诊断试剂奠定基础。方法以乙型脑炎病毒疫苗株全基因序列为模板设计引物,通过RT-PCR方法扩增目的片段,将其克隆到pMD18-T载体中,得到克隆质粒pMD18-T/***18-T/E经XhoⅠ和EcoRⅠ酶切,测序后连接pET-28a(+)载体,构建了重组原核表达质粒pET-28a(+)/E.转化至大肠杆菌BL21(DE3)后,利用IPTG诱导获得高效表达。结果扩增出了1500bp的基因片段,与预期大小一致,测序后经Blast验证与已发表乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白基因序列同源性为98%,成功克隆至表达载体pET-28a(+)并获得高效表达,表达产物分子量约为53kDa.结论该表达产物的稳定高效表达为乙脑的诊断试剂开发提供了依据.

关键词：乙型脑炎病毒 RT-PCR 克隆基因表达

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松鼠葡萄球菌脱皮毒素C的细胞毒性作用以及对先天性免疫的影响

松鼠葡萄球菌脱皮毒素C的细胞毒性作用以及对先天性免疫的影响

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：李海花王永强李夏莹李晓齐曹红唐军陈福勇甘孟侯郑世军中国农业大学动物医学院

松鼠葡萄球菌(***)是引起猪渗出性皮炎(Exudative epidermitis,EE)和人外伤感染的重要病原.脱皮毒素是该病原主要的致病因子之一.为了进一步了解松鼠萄萄球菌的致病机理,本研究根据猪葡萄球菌脱皮毒素C(ExhC)基因序列设计引物,从松鼠葡... 详细信息

松鼠葡萄球菌(***)是引起猪渗出性皮炎(Exudative epidermitis,EE)和人外伤感染的重要病原.脱皮毒素是该病原主要的致病因子之一.为了进一步了解松鼠萄萄球菌的致病机理,本研究根据猪葡萄球菌脱皮毒素C(ExhC)基因序列设计引物,从松鼠葡萄球菌基因组中克隆到全长的ExhC并在大肠杆菌中进行了表达.我们以BHK、L-929、RAW264.7以及乳鼠为模型研究ExhC对哺乳动物细胞和皮肤的毒性作用.流式细胞仪、细胞形态学和组织学检查分析表明,ExhC作用于体外培养的BHK和L-929细胞后,能使细胞的Annexin-V/PI双染细胞比例显著增加,随后使细胞崩解:ExhC引起乳鼠真皮细胞坏死;ExhC显著降低巨噬细胞的吞噬功能。这些实验证据说明ExhC不仅具有较强的细胞杀伤活性,也具有抑制先天性免疫的作用.

关键词：松鼠葡萄球菌 ExhC 细胞凋亡

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表达H3N2亚型猪流感病毒NP基因重组腺病毒的构建

表达H3N2亚型猪流感病毒NP基因重组腺病毒的构建

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：展小过乔传玲陈艳杨焕良孔维吴运谱辛晓光陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室

以含有猪流感病毒A/Swine/Guangdong/9/2005(H3N2)NP基因的重组质粒pMD18-NP为模板,利用带特定酶切位点的引物PCR扩增NP基因,将其亚克隆质粒pIRES2-EGFP中,再次将含有NP及EGFP的基因片段克隆到腺病毒的穿梭质粒pDC315,构建重组穿梭质粒p... 详细信息

以含有猪流感病毒A/Swine/Guangdong/9/2005(H3N2)NP基因的重组质粒pMD18-NP为模板,利用带特定酶切位点的引物PCR扩增NP基因,将其亚克隆质粒pIRES2-EGFP中,再次将含有NP及EGFP的基因片段克隆到腺病毒的穿梭质粒pDC315,构建重组穿梭质粒pDC315-NP-EGFP。利用脂质体转染方法将穿梭质粒pDC315-NP-EGFP和腺病毒骨架质粒pBHGloxΔE1,E3Cre共转染HEK293细胞,基于腺病毒感染后形成的典型细胞病变及EGFP基因在细胞中的表达筛选到重组腺病毒rAd-NP-EGFP。经PCR和Western-blot鉴定,结果表明NP基因已被重组到腺病毒的基因组中,并能够伴随病毒的复制而表达,表达蛋白具有良好的生物性活性.

关键词：猪流感病毒 NP基因重组腺病毒

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间接血凝试验与酶联免疫吸附试验检测猪瘟抗体的比较

间接血凝试验与酶联免疫吸附试验检测猪瘟抗体的比较

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：戴爱玲沈绍新李晓华杨小燕龙岩学院生命科学学院福建省高等学校预防兽医学重点实验室福建省人畜寄生与病毒性疫病防控工程技术研究中心

应用间接血凝试验(IHA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪瘟抗体,IHA试验以1:16为判定孔,抗体效价大于或等于1:16为抗体阳性;ELISA试验以抗体阻断率40%为判定标准,阻断率大于或等于40%为抗体阳性,同步检测了122份规模化猪场不同阶段猪血... 详细信息

应用间接血凝试验(IHA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪瘟抗体,IHA试验以1:16为判定孔,抗体效价大于或等于1:16为抗体阳性;ELISA试验以抗体阻断率40%为判定标准,阻断率大于或等于40%为抗体阳性,同步检测了122份规模化猪场不同阶段猪血清,结果ELISA检测抗体阳性率比IHA检测抗体阳性率低,阴性、阳性相符的血清数为92,相关性为75.4%,不同抗体水平分布的血清数也不同,个别血清出现较大差异,卡方检验P值为0.13(>0.05),两种检测方法无统计上的差异,研究结果为选择猪瘟抗体检测方法提供参考。

关键词：猪瘟间接血凝试验(IHA) 酶联免疫吸附试验(ELISA) 抗体效价抗体阻断率

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利用反转录聚合酶链式反应检测H5亚型禽流感病毒的研究

利用反转录聚合酶链式反应检测H5亚型禽流感病毒的研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：张文惠王铁峰孟庆峰张宇迟媛钱爱东吉林农业大学动物科技学院长春市新城大街2888号 130118

目的：利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测H5亚型禽流感病毒(AIV)。方法：在Genbank中搜索H5亚型禽流感病毒的血凝素基因序列，设计了1对针对H5亚型AIV的特异性引物，这对引物所扩增的cDNA片段大小为427bp，并且对RT-PCR反应体... 详细信息

目的：利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测H5亚型禽流感病毒(AIV)。方法：在Genbank中搜索H5亚型禽流感病毒的血凝素基因序列，设计了1对针对H5亚型AIV的特异性引物，这对引物所扩增的cDNA片段大小为427bp，并且对RT-PCR反应体系进行优化。结果：该RT-PCR对H5亚型AIV能扩增出1条大小为427 bp的cDNA片段，将回收产物的测序结果在BLAST上进行序列相似性比较，提示这些扩增基因的序列是H5亚型AIV的HA基因。扩增结果表明与其他常见禽病病原的核酸不存在交叉反应。该RT-PCR对H5亚型AIV cDNA的最低检出量为10pg。结论：成功建立了快速检测H5亚型AIV的RT-PCR技术。

关键词：禽流感病毒 H5亚型 RT-PCR技术快速检测

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牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立及应用

牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立及应用

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：陈云霞侯韶毅卢桂娟陆有飞高永锐王成业黄伟坚广西大学动物科学技术学院南宁广西 530005 广西丽源生物股份有限公司南宁广西 530001

根据牛病毒性腹泻病毒(Bovinc viral diarrhea virus，BVDV)代表株NADL的NS5B基因序列，设计合成2对引物进行套式PCR,利用该方法扩增出360bp的特异性片段，通过对此特异性片段的克隆片列测定以及计算机系统分析证实，该片段的基因序列与... 详细信息

根据牛病毒性腹泻病毒(Bovinc viral diarrhea virus，BVDV)代表株NADL的NS5B基因序列，设计合成2对引物进行套式PCR,利用该方法扩增出360bp的特异性片段，通过对此特异性片段的克隆片列测定以及计算机系统分析证实，该片段的基因序列与BVDV Ⅰ代表株有94％的同源性。应用该方法检测了某生物制品厂提供的鼢样品(血清、细胞等)，其中2份为阳性。试验表明，该方法可以用做BVDV快速检测的方法，并证实了生物制品生产中常用的细胞和血清已经存在着BVDV的污染.所以生物制品生产过程中的材料以及制成品进行BVDV的检测是排除其BVDV污染的一个重要手段，也是非常重要的。

关键词：牛病毒性腹泻 BVDV病毒 RT-PCR检测基因序列

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PRRSV分离株GP5的基因序列分析及msyB-GP5融合表达质粒的构建

PRRSV分离株GP5的基因序列分析及msyB-GP5融合表达质粒的构建

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：林志雄何晓明马静云罗琼谢青梅陈茹罗长保陈荣光田纯见广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心华南农业大学动物科学学院

根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的基因序列,设计1对包含完整ORF5基因序列的特异引物,利用RT-PCR技术扩增PRRSV GD-I1分离株的ORF5基因,并时其进行序列测定,同时与已发表的13株PRRSV进行同源性比较。将扩增的PRRSV GD-I1分... 详细信息

根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的基因序列,设计1对包含完整ORF5基因序列的特异引物,利用RT-PCR技术扩增PRRSV GD-I1分离株的ORF5基因,并时其进行序列测定,同时与已发表的13株PRRSV进行同源性比较。将扩增的PRRSV GD-I1分离株的ORF5基因克隆到含msyB伴侣基因的可溶表达载体pBCX上构建重组表达质粒。结果显示,扩增获得的DNA片段约为603bp,与国内经典的CH-1a株核苷酸同源性最高,为98.7%,氨基酸同源性为97.5%.msyB-GP5重组表达质粒经双酶切后分为两个片段,大小与预期一致,表明已成功获得重组表达质粒.该基因的序列分析与重组表达质粒的成功构建,为对GP5蛋白的研究奠定基础.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 克隆序列分析表达

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