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1,479 篇 会议
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1,392 篇 农学
- 1,127 篇 兽医学
- 257 篇 畜牧学
- 41 篇 作物学
- 7 篇 林学
- 7 篇 水产
- 5 篇 农业资源与环境
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- 1 篇 草学
97 篇 理学
- 93 篇 生物学
- 3 篇 生态学
- 1 篇 物理学
94 篇 工学
- 66 篇 生物工程
- 15 篇 化学工程与技术
- 7 篇 轻工技术与工程
- 5 篇 农业工程
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- 3 篇 食品科学与工程（可...
- 1 篇 仪器科学与技术
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66 篇 医学
- 35 篇 药学(可授医学、理...
- 31 篇 基础医学(可授医学...
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- 4 篇 医学技术（可授医学...
- 1 篇 中西医结合
3 篇 经济学
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3 篇 管理学
- 1 篇 农林经济管理
- 1 篇 公共管理
2 篇 教育学
- 2 篇 教育学

主题

55 篇 原核表达
54 篇 序列分析
41 篇 分离鉴定
39 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 基因克隆
35 篇 大肠杆菌
33 篇 猪
32 篇 牛
28 篇 临床诊断
26 篇 卵母细胞
24 篇 流行病学
22 篇 乳酸菌
21 篇 猪圆环病毒2型
21 篇 奶牛
21 篇 prrsv
21 篇 益生菌
21 篇 禽流感病毒
19 篇 新城疫病毒
18 篇 鉴别诊断
18 篇 病毒检测

机构

88 篇 中国农业大学
67 篇 华南农业大学
57 篇 吉林大学
56 篇 广西大学
54 篇 广西兽医研究所
49 篇 河北农业大学
48 篇 军事医学科学院军...
43 篇 南京农业大学
43 篇 华中农业大学
42 篇 河南农业大学
40 篇 四川农业大学
36 篇 山东农业大学
31 篇 吉林农业大学
28 篇 河南省动物疫病预...
27 篇 河南科技大学
23 篇 云南农业大学
21 篇 湖南农业大学
18 篇 青岛农业大学
18 篇 山东省滨州畜牧兽...
17 篇 东北农业大学

作者

44 篇 金宁一
34 篇 李斌
34 篇 梁家幸
34 篇 赵武
32 篇 蒋玉雯
32 篇 黄安国
32 篇 姚瑞英
32 篇 梁保忠
29 篇 沈志强
29 篇 鲁会军
28 篇 丁壮
25 篇 潘康成
24 篇 黄伟坚
22 篇 吴志明
22 篇 王红宁
22 篇 闫若潜
22 篇 罗满林
21 篇 程相朝
20 篇 杨霞
20 篇 母连志

语言

1,430 篇 中文
53 篇 英文

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猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立

猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：逯晓敏冯志新刘茂军吴叙苏甘源张映邵国青山西农业大学动物科技学院江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏省生物兽药筛选服务中心

根据GeneBank中登录的猪肺炎支原体P36(L-乳酸脱氢酶)全基因序列,设计合成了2对引物,建立了适合猪肺炎支原体检测的套式PCR方法.运用该方法对猪肺炎支原体(168株)培养物进行了检测.结果显示,该培养物能扩增出427bp的目的条带.特异性试... 详细信息

根据GeneBank中登录的猪肺炎支原体P36(L-乳酸脱氢酶)全基因序列,设计合成了2对引物,建立了适合猪肺炎支原体检测的套式PCR方法.运用该方法对猪肺炎支原体(168株)培养物进行了检测.结果显示,该培养物能扩增出427bp的目的条带.特异性试验结果表明:鸡毒支原体、猪絮状支原体、猪鼻支原体、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪链球菌2型和猪流感病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组DNA或cDNA扩增结果均为阴性.该方法的敏感性高,最低可以检测出10个猪肺炎支原体。建立的套式PCR方法可以用于猪肺炎支原体的临床诊断检测和分子流行病学调查。

关键词：猪肺炎支原体 P36 套式PCR

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猪细小病毒自然弱毒N株的免疫原性研究

猪细小病毒自然弱毒N株的免疫原性研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：杜坚姚瑞英陈西宁蒋玉雯白安斌梁保忠梁家幸赵武李斌黄安国郑儒标冯军广西兽医研究所南宁530001

用PPV-N株接种PPV HI抗体阴性后备母猪,5天产生PPV HI抗体,7天产生保护性抗体(HI>256),14天达高峰.用该毒株对四月龄小猪、后备母猪和怀孕母猪进行免疫原性试验,结果攻毒后5.7、9天未检测到病毒血症和分离到病毒。攻毒后49 天剖杀2... 详细信息

用PPV-N株接种PPV HI抗体阴性后备母猪,5天产生PPV HI抗体,7天产生保护性抗体(HI>256),14天达高峰.用该毒株对四月龄小猪、后备母猪和怀孕母猪进行免疫原性试验,结果攻毒后5.7、9天未检测到病毒血症和分离到病毒。攻毒后49 天剖杀2头母猪,胎儿正常,胎儿心血HI抗体阴性,取胎儿脏器未分离出病毒,让其自然分娩,母猪产仔正常,仔猪吃初乳前PPV HI抗体阴性,而对照猪攻毒后产生病毒血症,并产下不同组合异常仔,从死胎儿脏器分离到病毒,活仔PPV HI抗体阳性,说明接种猪完全能够抵抗PPV强毒攻击。试验还表明豚鼠和猪对PPV-N株的抗体反应相似,豚鼠可作为PPV弱毒株效力检测的首选实验动物,廉价而易饲养。以上研究证明PPV自然弱毒N株具有良好的免疫原性。

关键词：猪细小病毒自然弱毒N株免疫原性试验抗PPV强毒攻击

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株分离鉴定及遗传变异分析

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株分离鉴定及遗传变异分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘长明危艳武张朝霞袁婧黄立平中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

床"高热综合征"病例分离到高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）变异株,经细胞传代和蚀斑克隆,培育成功增殖性能稳定的新毒株,命名为PRRSV-HBR.该毒株接种细胞后能够产生细胞病变（CPE）,随传代次数增加毒价显著提升,第45... 详细信息

床"高热综合征"病例分离到高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）变异株,经细胞传代和蚀斑克隆,培育成功增殖性能稳定的新毒株,命名为PRRSV-HBR.该毒株接种细胞后能够产生细胞病变（CPE）,随传代次数增加毒价显著提升,第45～60代毒价测定达10TCID/mL。采用免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）检测病毒抗原分布在细胞浆中;电镜观察到的病毒粒子呈圆形,直径约50～55nm。分离株Nsp2基因序列中第483和535～563位氨基酸存在缺失,属PRRSV变异株。用该毒株第5代培养物滴鼻接种试验猪(1×10 TCID),临床表现为持续高热（≥40.5℃,9d～12d）、食欲下降、精神萎靡、消瘦、眼睑水肿、体表淋巴结肿大等,发病率为100%（10/10）,死亡率为30%（3/10）。研究表明,PRRSV-HBR分离株对靶动物具有高致病力,培育的细胞适应毒株体外繁殖能力稳定,并产生了标志性基因突变,为该病毒致病机理、遗传变异规律、疫苗免疫等研究奠定了基础.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性遗传变异分析

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基因工程蛋白金葡菌 -溶血素的纯化及活性检测

基因工程蛋白金葡菌 -溶血素的纯化及活性检测

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：张海燕马卫明杨宏军王长法何洪彬曹永芝山东农业大学动物科技学院山东泰安 271018 山东省农业科学院奶牛研究中心山东济南 250100 山东农业大学动物科技学院山东泰安 271018 山东省农业科学院奶牛研究中心山东济南 250100

目的：分离纯化基因工程重组蛋白金黄色葡萄球菌溶血素并检测其生物学活性，为疫苗研发奠定基础。方法：对含pET32a+- -HL质粒的BL21(DE3)进行诱导表达，诱导成功之后，将重组菌BL21(DE3)培养物用超声波裂解，并用凝胶过滤层析法对... 详细信息

目的：分离纯化基因工程重组蛋白金黄色葡萄球菌溶血素并检测其生物学活性，为疫苗研发奠定基础。方法：对含pET32a+- -HL质粒的BL21(DE3)进行诱导表达，诱导成功之后，将重组菌BL21(DE3)培养物用超声波裂解，并用凝胶过滤层析法对该基因工程蛋白进行分离纯化，用Bradford法兔红细胞分别测定纯化产物的蛋白含量和溶血比活。结果：纯化产物在SDS-PAGE电泳中53 ku处呈现出单一清晰带，达电泳级纯度。纯化产物含量约为0.1277mg/mL，溶血比活为8192HU/mg。结论：成功获得了金黄色葡萄球菌~HL，且所获的~HL具有良好的溶血活性。

关键词：奶牛乳腺炎溶血素金黄色葡萄球菌重组蛋白原核表达溶血活性基因工程疫苗

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猪圆环病毒Ⅱ型(DBN-SX07株)的分离及生物学特性研究

猪圆环病毒Ⅱ型(DBN-SX07株)的分离及生物学特性研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：邢海云刘长辉赵建增赵亚荣福州大北农生物技术有限公司动物医学研究中心

猪圆环病毒病是猪的主要病毒病之一,它引起宿主免疫抑制并导致合并感染而造成动物发病甚至死亡,还能使其他疫苗免疫失败.本研究利用细胞克隆技术从病猪组织中分离出一株猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）,该分离毒全基因序列与GenBank已报导毒株... 详细信息

猪圆环病毒病是猪的主要病毒病之一,它引起宿主免疫抑制并导致合并感染而造成动物发病甚至死亡,还能使其他疫苗免疫失败.本研究利用细胞克隆技术从病猪组织中分离出一株猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）,该分离毒全基因序列与GenBank已报导毒株的同源性为98-99%,其在PK15a细胞上增殖性能良好且稳定,第6-25代毒价保持在10TCID/ml。利用该分离毒按常规法制备成油佐剂灭活疫苗,免疫无PCV2暴露的3-4周龄仔猪,两周后加强免疫.结果在加强免疫后2周所有免疫猪都能产生具有保护力的PCV2 ELISA抗体,能抵抗PCV2的实验感染.未免猪在实验感染本分离毒3周后,90%陆续出现了病毒血症,40%同时还出现了肉眼可见的病理变化。提示利用本分离株可制备预防PCV2感染的疫苗。

关键词： PCV2 PK15a 间接免疫荧光 PCR 免疫原性毒力

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应用焦磷酸测序技术检测猪流感病毒金刚烷胺耐药性的分子标签

应用焦磷酸测序技术检测猪流感病毒金刚烷胺耐药性的分子标签

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘华雷王志亮吕艳黄伟坚鄢明华张维李明义王清华李金明郑东霞赵云玲孙承英中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心广西大学动物科学技术学院天津市畜牧兽医研究所

流感病毒M2蛋白五个关键位点氨基酸残基(第26、27、30、31和34位)中的任何一个发生突变会导致抗流感病毒药物中金刚烷胺抗药性的产生。本研究利用焦磷酸测序技术对2004年～2008年国内分离的10株猪流感病毒进行了鉴定,并初步进行了抗药... 详细信息

流感病毒M2蛋白五个关键位点氨基酸残基(第26、27、30、31和34位)中的任何一个发生突变会导致抗流感病毒药物中金刚烷胺抗药性的产生。本研究利用焦磷酸测序技术对2004年～2008年国内分离的10株猪流感病毒进行了鉴定,并初步进行了抗药性分析。结果表明基于M2蛋白基因保守区序列建立的焦磷酸测序技术能用于国内猪流感病毒的快速检测,且具有较好的特异性和重复性。抗药性分析表明10株猪流感病毒国内分离株中5株H1N1分离株全部耐药,主要存在M2蛋白的V27T、V27I或S31N位点的突变,而4株H3N2和1株H9N2猪流感病毒分离株在M2蛋白5个关键位点上均未出现变异,表明其对金刚烷胺敏感。

关键词：猪流感病毒焦磷酸测序抗药性分析

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三种亚群PCV-2感染性克隆的构建及体内外感染性试验

三种亚群PCV-2感染性克隆的构建及体内外感染性试验

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：李薇李晶余兴龙罗维白霞李润成黎满香葛猛王亚向卫军湖南农业大学动物医学院长沙湖南 410128

本研究通过PCR扩增出猪圆环病毒2(PCV-2)三个亚群(1A、1B和1C)毒株的全基因组DNA序列,并分别克隆入pMD-18T载体,获得含有PCV-2全基因组的3个重组质粒,分别命名为RP8、P0、P4-1,将重组质粒大量提取后,用Sac Ⅱ切出1767bp的PCV-2全基因组... 详细信息

本研究通过PCR扩增出猪圆环病毒2(PCV-2)三个亚群(1A、1B和1C)毒株的全基因组DNA序列,并分别克隆入pMD-18T载体,获得含有PCV-2全基因组的3个重组质粒,分别命名为RP8、P0、P4-1,将重组质粒大量提取后,用Sac Ⅱ切出1767bp的PCV-2全基因组,在体外用T4 DNA连接酶使其自身连接环化。用脂质体将连接产物转染无PCV-1污染的PK-15细胞,并按常规病毒培养方法传代,第5代细胞培养物用间接免疫荧光试验(IFA)及PCR方法检测,并同时腹腔接种小鼠。结果：IFA和PCR实验均证实已经获得子代PCV-2病毒,并可在接种小鼠的血液中检测到PCV-2的基因组DNA。表明本试验构建的自身环化的PCV-2全基因组DNA在体内、外均具有感染性,为研究PCV-2的不同基因群毒株与毒力之间的关系打下了基础。

关键词：猪圆环病毒2群感染性克隆 PCR扩增基因群毒株全基因组DNA

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猪霍乱沙门氏菌为载体在鸡体内传递外源基因的可行性研究

猪霍乱沙门氏菌为载体在鸡体内传递外源基因的可行性研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：王亚余余兴龙陈招娣李波湖南农业大学动物医学院湖南长沙 410128

将真核表达空质粒pVAx1转化减毒猪霍乱沙门氏菌C500株，构建成重组菌c500(pVAX1)，通过体外培养和体内接种的方法，研究该真核表达质粒在体外和体内的稳定性。将重组菌C500(pVAX1)分别以不同剂量口服接种雏鸡，并在雏鸡体内传代接种的... 详细信息

将真核表达空质粒pVAx1转化减毒猪霍乱沙门氏菌C500株，构建成重组菌c500(pVAX1)，通过体外培养和体内接种的方法，研究该真核表达质粒在体外和体内的稳定性。将重组菌C500(pVAX1)分别以不同剂量口服接种雏鸡，并在雏鸡体内传代接种的方法，研究该重组菌对雏鸡的安全性。结果显示重组菌在体外培养过程中，所携带质粒的重组菌在有抗性选择压力条件下传代过程中存在一定的稳定性。在体内接种过程中，粪便分离菌，血液，肝脏，脾脏，肠道粘膜均能检测到目的基因，表明重组菌侵入雏鸡体内的过程中是稳定的。上述结果提示，利用该减毒沙门菌作为载体传递外源基因接种雏鸡具有相对稳定性和安全性，为减毒猪霍乱沙门氏菌作为免疫基因佐剂活载体提供了前提。

关键词：减毒猪霍乱沙门氏菌安全性稳定性重组菌株真核表达质粒外源基因载体

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水貂阿留申病毒主要VP2基因的原核表达

水貂阿留申病毒主要VP2基因的原核表达

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：孟庆峰梁艳婷蔡阳钱爱东王伟利吉林出入境检验检疫局长春吉林 130062 吉林农业大学动物科学技术学院长春吉林 130118 吉林农业大学动物科学技术学院长春吉林 130118 吉林出入境检验检疫局长春吉林 130062

根据GenBank中已发表的水貂阿留申病毒(ADV)VP2基因核苷酸序列设计合成1对特异引物，利用PCR方法扩增ADV国内分离株部分VP2基因片段，将其克隆到原核表达载体pET-28a的多克隆位点中。经酶切、PCR扩增和测序分析证实其已正确插入到表达... 详细信息

根据GenBank中已发表的水貂阿留申病毒(ADV)VP2基因核苷酸序列设计合成1对特异引物，利用PCR方法扩增ADV国内分离株部分VP2基因片段，将其克隆到原核表达载体pET-28a的多克隆位点中。经酶切、PCR扩增和测序分析证实其已正确插入到表达载体中，构建原核表达载体pET-28a-VP2。阳性重组质粒转化宿主菌BL21，用IPTG进行诱导表达，对表达产物进行SDS-PAGE检测和免疫印迹分析。结果表明蛋白获得了表达，表达产物的分子质量为21KD，与理论推测的分子质量一致;终浓度为1mmol/L的IPTG诱导下，5h时其表达量达到高峰;Westernblot分析表明表达蛋白能被兔抗水貂抗体所识别，具有相应的抗原性。

关键词：水貂阿留申病毒 VP2基因原核表达免疫蛋白

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猪干扰素-α基因经密码子改造在毕赤酵母菌中的高效分泌表达

猪干扰素-α基因经密码子改造在毕赤酵母菌中的高效分泌表达

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：刘健陈瑞爱朱杰仪唐明森罗满林华南农业大学广东广州 510642 广东大华农动物保健品股份有限公司广东新兴 527439 华南农业大学广东广州 510642 广东大华农动物保健品股份有限公司广东新兴 527439

根据毕赤酵母表达系统对于密码子的偏嗜性，将去除信号肽的猪干扰素α(PoIFN-α)基因重新设计改造和重新合成一段新的核苷酸序列，置于毕赤酵母菌α因子分泌信号的DNA序列后，构建成pPICZαC-PoIFN-α分泌型重组表达载体，电转化进入野... 详细信息

根据毕赤酵母表达系统对于密码子的偏嗜性，将去除信号肽的猪干扰素α(PoIFN-α)基因重新设计改造和重新合成一段新的核苷酸序列，置于毕赤酵母菌α因子分泌信号的DNA序列后，构建成pPICZαC-PoIFN-α分泌型重组表达载体，电转化进入野生型毕赤酵母菌X-33中，经ZeocinTM抗性筛选后获得大量多拷贝插入的重组子，SDS-PAGE和Western blot分析结果表明，所获得的重组子能够分泌表达出19KD左右的PoIFN-α特异蛋白，表达更容易，其有效蛋白表达量为54.105mg/L，并且经Vero-VSV系统测定，PoINF-α效价达到5.87×10(7)U/L。试验首次将猪干扰素α成熟肽蛋白的全基因密码子进行改造，重新设计实现了在毕赤酵母菌表达系统中的PoIFN-α基因的高效分泌表达。

关键词：猪干扰素-α 密码子改造 PoIFN-α基因毕赤酵母菌分泌表达

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