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1,392 篇 农学
- 1,127 篇 兽医学
- 257 篇 畜牧学
- 41 篇 作物学
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- 5 篇 农业资源与环境
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- 1 篇 草学
97 篇 理学
- 93 篇 生物学
- 3 篇 生态学
- 1 篇 物理学
94 篇 工学
- 66 篇 生物工程
- 15 篇 化学工程与技术
- 7 篇 轻工技术与工程
- 5 篇 农业工程
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- 3 篇 食品科学与工程（可...
- 1 篇 仪器科学与技术
- 1 篇 材料科学与工程（可...
- 1 篇 环境科学与工程（可...
66 篇 医学
- 35 篇 药学(可授医学、理...
- 31 篇 基础医学(可授医学...
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- 4 篇 医学技术（可授医学...
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3 篇 经济学
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3 篇 管理学
- 1 篇 农林经济管理
- 1 篇 公共管理
2 篇 教育学
- 2 篇 教育学

主题

55 篇 原核表达
54 篇 序列分析
41 篇 分离鉴定
39 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 基因克隆
35 篇 大肠杆菌
33 篇 猪
32 篇 牛
28 篇 临床诊断
26 篇 卵母细胞
24 篇 流行病学
22 篇 乳酸菌
21 篇 猪圆环病毒2型
21 篇 奶牛
21 篇 prrsv
21 篇 益生菌
21 篇 禽流感病毒
19 篇 新城疫病毒
18 篇 鉴别诊断
18 篇 病毒检测

机构

88 篇 中国农业大学
67 篇 华南农业大学
57 篇 吉林大学
56 篇 广西大学
54 篇 广西兽医研究所
49 篇 河北农业大学
48 篇 军事医学科学院军...
43 篇 南京农业大学
43 篇 华中农业大学
42 篇 河南农业大学
40 篇 四川农业大学
36 篇 山东农业大学
31 篇 吉林农业大学
28 篇 河南省动物疫病预...
27 篇 河南科技大学
23 篇 云南农业大学
21 篇 湖南农业大学
18 篇 青岛农业大学
18 篇 山东省滨州畜牧兽...
17 篇 东北农业大学

作者

44 篇 金宁一
34 篇 李斌
34 篇 梁家幸
34 篇 赵武
32 篇 蒋玉雯
32 篇 黄安国
32 篇 姚瑞英
32 篇 梁保忠
29 篇 沈志强
29 篇 鲁会军
28 篇 丁壮
25 篇 潘康成
24 篇 黄伟坚
22 篇 吴志明
22 篇 王红宁
22 篇 闫若潜
22 篇 罗满林
21 篇 程相朝
20 篇 杨霞
20 篇 母连志

语言

1,430 篇 中文
53 篇 英文

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类高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒特殊变异株的分离鉴定与序列分析

类高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒特殊变异株的分离鉴定与序列分...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：何世成唐小明汪洪冰郭成玲吴发兴谈志祥黄建龙张燕霞刘道新邱立新鲁杏华范仲鑫湖南省动物疫病预防控制中心长沙410007 湖南省动物卫生监督所长沙410007 中国动物卫生与流行病学中心青岛266032

在2008年送检病猪病料中分离获得一株致细胞病变产生的代次、时间以及细胞病变形态均与典型高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒培养特性不同的PRRS病毒(LD812株),进一步对该株病毒的Nsp2和ORF5基因进行测序,结果发现,该株病毒与标准高致病... 详细信息

在2008年送检病猪病料中分离获得一株致细胞病变产生的代次、时间以及细胞病变形态均与典型高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒培养特性不同的PRRS病毒(LD812株),进一步对该株病毒的Nsp2和ORF5基因进行测序,结果发现,该株病毒与标准高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒JXA1株(相较与VR2332株,Nsp2基因上第477和538-566位氨基酸缺失,缺失形式为1+29个氨基酸)的Nsp2基因同源性为98.3％,但分离株Nsp2基因上第475-520和538-566位氨基酸缺失,缺失形式为46+29个氨基酸,比JXA1株在1号缺失位多缺失45个氨基酸;LD812 ORFS序列相较与JXA1株未出现明显变异。结合该病例的临床和该毒株培养及分子特性,初步认为该株病毒为一弱毒毒株;对该毒株的深入研究可能有助于进一步认识JXA1株高致病性的内在机制。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征高致病性病毒变异株分离鉴定序列分析

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流行性乙型脑炎病毒E蛋白可溶性原核表达

流行性乙型脑炎病毒E蛋白可溶性原核表达

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：何晓明林志雄田纯见罗琼谢青梅毕英佐马静云广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心广州广东510623 华南农业大学动物科学学院广州广东510642 广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心广州广东510623 华南农业大学动物科学学院广州广东510642

本研究旨在表达出可溶性流行性乙型脑炎E蛋白，为乙脑的诊断提供抗原。根据GenBank上公布的JEV基因序列，设计带酶切位点的特异性引物，通过RT-PCR方法获得E蛋白基因，将其克隆测序后插入pBCX表达载体。PCR筛选和酶切鉴定后，提取阳性... 详细信息

本研究旨在表达出可溶性流行性乙型脑炎E蛋白，为乙脑的诊断提供抗原。根据GenBank上公布的JEV基因序列，设计带酶切位点的特异性引物，通过RT-PCR方法获得E蛋白基因，将其克隆测序后插入pBCX表达载体。PCR筛选和酶切鉴定后，提取阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG(0.5mM)诱导后，取样进行SDS-PAGE电泳和western blot分析。结果显示表达的融合蛋白大小为88KD，表达量占菌体蛋白30％，且为绝大部分为可溶。转膜后用化学发光底物显色，在约88KDa位置出现目的条带，说明抗原性较好。表明已成功地表达出该可溶蛋白。

关键词：流行性乙型脑炎 JEV病毒 E蛋白基因序列原核表达 RT-PCR法

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鸽源新城疫病毒陕西分离株P基因克隆与序列分析

鸽源新城疫病毒陕西分离株P基因克隆与序列分析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：韩青松武小椿代鹏杨增岐张鹏张淑霞党如意樊荣王波张冲西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌 712100

目的：通过对鸽源新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)陕西分离株(NDV/Pigeon/ShX/China/2003)P基因的克隆和序列分析，为研究P基因及V基因的功能奠定基础，也为防治新城疫(Newcastle disease，ND)提供科学依据。方法：用非... 详细信息

目的：通过对鸽源新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)陕西分离株(NDV/Pigeon/ShX/China/2003)P基因的克隆和序列分析，为研究P基因及V基因的功能奠定基础，也为防治新城疫(Newcastle disease，ND)提供科学依据。方法：用非免疫鸡胚增值病毒，HA及HI试验鉴定增殖的病毒。参考GenBank发表的NDV基因序列设计1对特异性引物，RT-PCR扩增NDV/Pigeon/ShX/China/2003 P基因的全长片段，并进行克隆、序列测定和序列分析。结果：NDV/Pigeon/ShX/China/2003 P基因的全长1 451 bp，其完整的ORF长度为I 188 bp，编码395个氨基酸。同源性比较可知：NDV/Pigeon/ShX/China/2003与其他分离株P基因核苷酸序列同源性在63.6％～92.9％之间，推导氨基酸序列同源性在67.7％～92.2％之间。系统发育进化树表明NDV/Pigeon/Shx/china，2003与P68亲缘关系最近，与F48E9和La Sota毒株处于进化树的不同分支。结论：NDV/Pigeon/ShX/China/2003与国内外已报道的毒株间存在较大变异。

关键词：鸽源新城疫病毒 P基因序列分析基因克隆亲缘关系

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IBV DNA疫苗重组质粒pVAX1-S1在大肠杆菌DH5α中的稳定性研究

IBV DNA疫苗重组质粒pVAX1-S1在大肠杆菌DH5α中的稳定性研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：鲁丹王红宁高荣阳泰郭自成张云飞四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室” 四川农业大学动物医学院

为保证DNA疫苗的质量,需要对重组质粒pVAX1-S1在重组大肠杆菌DH5a中的稳定性进行研究。成功构建了含IBV S1基因的真核表达质粒pVAX1-S1,将含有质粒pVAX1-S1的基因工程菌DH5α分别在含有和不含卡那霉素(Kan)的LB平板上划线接种连续传代.... 详细信息

为保证DNA疫苗的质量,需要对重组质粒pVAX1-S1在重组大肠杆菌DH5a中的稳定性进行研究。成功构建了含IBV S1基因的真核表达质粒pVAX1-S1,将含有质粒pVAX1-S1的基因工程菌DH5α分别在含有和不含卡那霉素(Kan)的LB平板上划线接种连续传代.结果表明,在含有Kan的LB平板上连续传代100代后,质粒的目的基因片断没有缺失,具有结构稳定性;但在无抗生素选择压力下,连续传代20代开始出现质粒丢失的细胞,连续传代100代后80%的细胞含有正常质粒.结论:本实验构建的IBV真核表达质粒pVAX1-S1在宿主菌DH5α中具有稳定性,为进一步扩大生产提供技术支持。

关键词： IBV S1 真核质粒大肠杆菌DH5α 稳定性

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2株PRRSV变异株动物回归试验及其病毒特性

2株PRRSV变异株动物回归试验及其病毒特性

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：孙彦伟王连想蒋启荣任裕其田云毕英佐马静云广东省动物防疫监督总所华南农业大学动物科学学院

为进一步证实PRRSV变异株(NSP2 1594-1680bp缺失)感染发病规律,本研究对2株分离鉴定的PRRSV变异株进行动物回归试验。结果表明高热是PRRSV变异株感染猪群的特征性反应,攻毒17d左右存活猪体温恢复正常;试验发病猪症状及病理变化与临床发... 详细信息

为进一步证实PRRSV变异株(NSP2 1594-1680bp缺失)感染发病规律,本研究对2株分离鉴定的PRRSV变异株进行动物回归试验。结果表明高热是PRRSV变异株感染猪群的特征性反应,攻毒17d左右存活猪体温恢复正常;试验发病猪症状及病理变化与临床发病猪相似,因此在临床诊断上具有重要意义;不同毒株致病性不同,在发病、死亡时间和死亡率上存在较大差别,GDQJ株攻毒后临床发病而未死亡,因此将PRRSV变异株感染引起的PRRS都归为"高致病性PRRS"有待商榷;攻毒后第3d部分血清检测到N蛋白抗体,9d后所有攻毒猪血清PRRS抗体均为阳性,且S/P值呈规律曲线,15d以后存活猪抗体维持在较高水平;攻毒后病毒血症快速产生,但存活猪只血清中病毒在攻毒15d后逐渐消退,36d后完全消失;病毒可通过粪便及鼻、口等排出物传播,携带PRRSV变异株的生猪及其产品或废弃物是疫情快速扩散和蔓延的主要原因。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株回归试验特性

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流产布鲁氏菌强毒株544与疫苗株S2的差异基因筛选与鉴定

流产布鲁氏菌强毒株544与疫苗株S2的差异基因筛选与鉴定

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张俊敏韩文瑜雷连成孙长江赵瑞利冯新赵伟栋杜涛峰吉林大学农学部畜牧兽医学院

布鲁氏菌是世界范围内广泛分布的、人畜共患病的重要病原体之一。目前广泛使用的布病疫苗在免疫原性和生物安全方面均存在严重缺陷,无法将自然感染与疫苗接种的动物相区别,使得布病难以在畜群中彻底根除。代表性差异分析(Representation... 详细信息

布鲁氏菌是世界范围内广泛分布的、人畜共患病的重要病原体之一。目前广泛使用的布病疫苗在免疫原性和生物安全方面均存在严重缺陷,无法将自然感染与疫苗接种的动物相区别,使得布病难以在畜群中彻底根除。代表性差异分析(Representational Difference Analysis,RDA)是通过差减杂交与PCR的巧妙结合,特异性的使靶序列在三轮杂交后被富集100万倍以上。本研究运用RDA技术,以强毒株流产布鲁氏菌(***)544和目前国内应用广泛的疫苗株S2作为样品来源,经过三轮差减杂交和PCR富集,以非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳筛选,克隆测序后,最终得到在强毒株544中缺失,疫苗株S2上存在的的11条差异片段,以此11条差异片段设计特异性引物,进行PCR扩增后测序,与预期结果一致.经Blast分析及基因功能预测分析表明这些差异基因为具有相当毒力基因功能的已知基因和可能与毒力相关的新基因.对这些差异基因的功能研究为布鲁氏菌自然感染与疫苗接种鉴别诊断技术的建立奠定了基础,为毒力基因的研究提供参考。

关键词：布鲁氏菌鉴别诊断代表性差异分析

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广西猪流感病毒的分离及NA基因的遗传进化分析

广西猪流感病毒的分离及NA基因的遗传进化分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：侯韶毅高永锐冯建远卢桂娟陆有飞黄庆南黄伟坚赵武李斌梁家幸梁保忠姚瑞英黄安国蒋玉雯广西大学动物科学技术学院广西丽原生物股份有限公司广西兽医研究所

本研究通过鸡胚接种分离到3株猪流感病毒,经HI、RT-PCR鉴定,其中GXHZ株为H1N2亚型毒株,GXLZ、GXXY株为H3N2亚型毒株,并对分离株进行EID测定及GXHZ株的猪体攻毒试验.所扩增分离到3株SIV病毒NA基因与A/Sw/Hainan/1/2005（H1N2）的核苷酸... 详细信息

本研究通过鸡胚接种分离到3株猪流感病毒,经HI、RT-PCR鉴定,其中GXHZ株为H1N2亚型毒株,GXLZ、GXXY株为H3N2亚型毒株,并对分离株进行EID测定及GXHZ株的猪体攻毒试验.所扩增分离到3株SIV病毒NA基因与A/Sw/Hainan/1/2005（H1N2）的核苷酸和氨基酸序列同源性最高.三株SIV分离株的NA基因在氨基端胞浆尾区均由K6→R6,在非极性跨膜区均由V20→M20。系统发育分析表明本实验所分离的三个SIV毒株与H1N2亚型毒株亲缘性最相近,且来源于猪源H1N2亚型流感病毒。从时间上也发现,三个分离株的NA基因与1996年以后获得的H3N2毒株亲缘关系很近,都隶属于一个亚分支。

关键词：猪流感病毒分离 NA基因

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H3/H1流感血凝素真核表达质粒构建及在HeLa细胞中的表达

H3/H1流感血凝素真核表达质粒构建及在HeLa细胞中的表达

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：南文龙金宁一鲁会军赵翠青田明尧张金双谭磊田宇飞吉林大学畜牧兽医学院长春 130062 军事医学科学院军事兽医研究所长春 13006 军事医学科学院军事兽医研究所长春 13006 吉林大学畜牧兽医学院长春 130062

通过PCR分别改造已获得的H1亚型HA1和H3亚型HA基因片段，在融合片段间引入(G4s)3柔性linker和口蹄疫2A蛋白linker。采用NAstar结合生物信息学软件InsightⅡ分析后对其空间构象进行模拟和评价。将融合表达H1HA1和H3HA的基因片段克隆至真... 详细信息

通过PCR分别改造已获得的H1亚型HA1和H3亚型HA基因片段，在融合片段间引入(G4s)3柔性linker和口蹄疫2A蛋白linker。采用NAstar结合生物信息学软件InsightⅡ分析后对其空间构象进行模拟和评价。将融合表达H1HA1和H3HA的基因片段克隆至真核表达载体pVAX1 CMV启动子下游。通过脂质体法转染HeLa细胞，进行RT-PCR与间接免疫荧光检测。结果表明，成功构建了表达双亚型(H3/H1)流感病毒血凝素真核表达载体pVAX1-H3HA-H1HA1，RT-RCR表明重组质粒在转染HeLa细胞后出现了目的基因的转录，IFA证实目的基因在HeLa细胞上可有效表达。真核表达质粒pVAX1-H3HA-H1HA1可以在HeLa细胞中正确转录与表达，为抗H3、H1亚型流感病毒双价核酸疫苗的研究奠定了基础。

关键词：流感病毒 H3亚型 H1亚型血凝素真核表达质粒 HeLa细胞

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表达Asia1型口蹄疫病毒P1-2A基因核酸疫苗质粒构建及小鼠免疫试验

表达Asia1型口蹄疫病毒P1-2A基因核酸疫苗质粒构建及小鼠免疫试验

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：鲁会军金宁一霍晓伟于长勇韩松胡博张丹金扩世军事医学科学院军事兽医研究所吉林大学畜牧兽医学院

通过RT-PCR方法扩增得到含有FMDV P1-2A编码区的目的基因,并将其克隆到pMD18-T载体上.将pMD18-T-P1-2A和pVAXⅠ分别经EcoRⅤ和xbaⅠ双酶切后连接构建真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A.将酶切鉴定正确后的重组质粒转染HeLa细胞进行IFA检测.再进... 详细信息

通过RT-PCR方法扩增得到含有FMDV P1-2A编码区的目的基因,并将其克隆到pMD18-T载体上.将pMD18-T-P1-2A和pVAXⅠ分别经EcoRⅤ和xbaⅠ双酶切后连接构建真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A.将酶切鉴定正确后的重组质粒转染HeLa细胞进行IFA检测.再进行小鼠血清特异性抗体试验、小鼠T淋巴细胞增殖试验和IFN-γELISPOT试验.结果酶切结果与预期目的条带大小相符;荧光结果中经pVAXⅠ-P1-2A转染的细胞有明显的黄绿色荧光。说明P1-2A基因在HeLa细胞中得到了表达;小鼠免疫结果表明,用免疫的小鼠都产生了较强的体液免疫和细胞免疫,并且T淋巴细胞增殖数和产生IFN-γ的细胞数和对照组相比显著提高(P<0.05).间接ELISA试验表明,在免疫第14天抗体水平比对照组明显增高(P<0.05)。构建的真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A在小鼠免疫试验中重组质粒试验组能能够诱导产生特异性的体液免疫和细胞免疫应答。

关键词： FMDV Asia1型 P1-2A基因核酸疫苗免疫

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类高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒特殊变异株的分离鉴定与序列分析

类高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒特殊变异株的分离鉴定与序列分...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：何世成吴发兴谈志祥黄建龙张燕霞刘道新邱立新鲁杏华范仲鑫唐小明汪洪冰郭成玲湖南省动物疫病预防控制中心中国动物卫生与流行病学中心湖南省动物卫生监督所

在2008年送检病猪病料中分离获得一株致细胞病变产生的代次、时间以及细胞病变形态均与典型高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒培养特性不同的PRRS病毒(LD812株),进一步对该株病毒的Nsp2和ORF5基因进行测序,结果发现,该株病毒与标准高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒JXA1株(相较与VR2332株,Nsp2基因上第477和538～566位氨基酸缺失,缺失形式为1+29个氨基酸)的Nsp2基因同源性为98.3%,但分离株Nsp2基因上第475～520和538～566位氨基酸缺失,缺失形式为46+29个氨基酸,比JXA1株在1号缺失位多缺失45个氨基酸;LD812ORF5序列相较与JXA1株未出现明显变异。结合该病例的临床和该毒株培养及分子特性,初步认为该株病毒为一弱毒毒株;对该毒株的深入研究可能有助于进一步认识JXA1株高致病性的内在机制.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性变异株

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