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7 篇 猪繁殖与呼吸综合...
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机构

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6 篇 河南科技大学
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6 篇 北京市畜牧兽医总...
6 篇 石河子大学
6 篇 河南农业大学
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作者

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15 篇 张勇
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10 篇 杨小淦
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9 篇 石德顺
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7 篇 张璐
7 篇 刘国世
7 篇 高超
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6 篇 李树静
6 篇 阎萍
6 篇 陆凤花
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6 篇 王亮
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语言

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排序：

L-肉碱对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活早期胚胎发育能力的影响

L-肉碱对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活早期胚胎发育能力的影响

引用

中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会

作者：吴国权贾宝瑜李俊杰岳明星杜明王亮朱士恩中国农业大学动物科技学院

实验旨在探讨L-肉碱对猪卵母细胞核成熟、胞内活性氧含量及早期胚胎发育能力的影响。在卵母细胞成熟过程中添加0、0.25、0.5、1、2 mg/ml的L-肉碱,测定(1)44小时后卵母细胞的成熟效果及早期胚胎发育能力;(2)卵母细胞内活性氧的含量。结... 详细信息

实验旨在探讨L-肉碱对猪卵母细胞核成熟、胞内活性氧含量及早期胚胎发育能力的影响。在卵母细胞成熟过程中添加0、0.25、0.5、1、2 mg/ml的L-肉碱,测定(1)44小时后卵母细胞的成熟效果及早期胚胎发育能力;(2)卵母细胞内活性氧的含量。结果表明:在成熟液中添加0.5 mg/mlL-肉碱组成熟率显著高于2 mg/ml组(P<0.05);但与对照组之间差异不显著(P>0.05)。孤雌激活卵裂率和囊胚率在各处理组之间无显著差异(P>0.05);囊胚细胞数以0.5 mg/ml组最高,显著高于对照组和2 mg/ml组(P<0.05),其它各组之间差异不显著(P>0.05)。0.5 mg/ml的L-肉碱与对照组相比,能够显著降低胞质内活性氧含量(P>0.05)。由此可见,在猪卵母细胞成熟过程中添加适当浓度的L-肉碱可以降低胞内活性氧含量,并提高早期胚胎的质量。

关键词：猪卵母细胞 L-肉碱体外成熟孤雌激活活性氧

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5-AZA-2'-Deoxyctidine对猪核移植胚胎体外发育的影响

5-AZA-2'-Deoxyctidine对猪核移植胚胎体外发育的影响

引用

中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会

作者：郇延军朱江王健宇刘忠华东北农业大学生命科学学院

与体内胚胎相比,核移植来源的体外胚胎往往具有较高的DNA甲基化水平,减少供体细胞或克隆胚胎中DNA甲基化水平,或许能够提高克隆效率。5-aza-2'-deoxyctidine(5-aza-dC)是一种DNA甲基转移酶的抑制剂,随着DNA复制进入基因组中,从而降... 详细信息

与体内胚胎相比,核移植来源的体外胚胎往往具有较高的DNA甲基化水平,减少供体细胞或克隆胚胎中DNA甲基化水平,或许能够提高克隆效率。5-aza-2'-deoxyctidine(5-aza-dC)是一种DNA甲基转移酶的抑制剂,随着DNA复制进入基因组中,从而降低供体细胞或胚胎DNA甲基化水平,具有提高克隆胚胎发育的潜能。本研究分别利用5-aza-dC处理猪胎儿成纤维细胞和克隆胚胎来探讨5-aza-dC能否提高猪体外克隆胚胎的发育潜能。首先,采用不同浓度(0,10,25和50nmol/L)5-aza-dC处理第四代猪胎儿成纤维细胞72h,观察细胞生长状态、细胞周期、基因组DNA甲基化和核移植效率的变化。发现:1)与对照组相比,处理组均能抑制细胞生长,并且差异显著(6.88×10～5vs4.06×10～5,3.56×10～5,4.28×10～5),而处理组之间差异不显著;2)随着处理浓度增大,处于S期细胞减少(6.16%,5.91%,5.19%,5.03%);3)利用5-MeC抗体对细胞基因组进行标记后进行流式分析,药物处理后基因组整体甲基化水平下降;4)药物处理组细胞作为供体细胞,移入去核的卵母细胞中,融合率、卵裂率和囊胚率均降低,但与对照组相比差异不显著(融合率:59.35%vs 55.65%,57.48%,55.58%;卵裂率:89.65%vs 85.01%,82.21%,82.25%;囊胚率:24.36%vs 20.04%,20.08%,16.65%),囊胚细胞数随处理浓度的增大无明显变化(35.11,33.37,36.00,35.71)。其次,未处理细胞作为供体细胞,电激活后进行不同浓度(0,10,25和50nmol/L)5-aza-dC处理重构胚20h,然后选取最适浓度处理48h,观察克隆胚胎体外发育情况。结果表明:1)与对照组相比,25 nmol/L处理20h能够明显促进克隆胚胎的发育,囊胚率差异显著(21.08%vs 12.80%,p<0.05),而处理组之间差异不显著,与其它组相比2 5nmol/L处理20h能够增加卵裂率和囊胚细胞数,但差异不显著;2)与处理24h相比,25nmol/L处理48h降低了卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数,但差异不显著(87.94%vs 84.89%,22.23%vs 22.01%,39.25 vs 31)。就研究来看,体细胞经5-aza-dC处理后,生长状态和甲基化水平出现下降,但其作为供体细胞会降低核移植效率;利用5-aza-dC处理猪核移植胚胎会促进胚胎的发育,其中25nmol/L处理20h效果最佳。

关键词： 5-aza-dC 核移植胚胎猪

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低滴度慢病毒生产转基因胚胎和小鼠的新方法

低滴度慢病毒生产转基因胚胎和小鼠的新方法

引用

中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会

作者：苗凯郭敏安磊许晓玲武韩王栋吴中红田见晖中国农业大学动物科技学院

卵周隙注射病毒悬液是介导慢病毒感染卵母细胞或受精卵的常用方法,但是这种方法常常受限于高滴度病毒的制备。本研究介绍了利用Piezo技术将慢病毒注射到2细胞期胚胎卵周隙,或者注射到经高渗溶液处理后的1细胞期胚胎的卵周隙中的新方法... 详细信息

卵周隙注射病毒悬液是介导慢病毒感染卵母细胞或受精卵的常用方法,但是这种方法常常受限于高滴度病毒的制备。本研究介绍了利用Piezo技术将慢病毒注射到2细胞期胚胎卵周隙,或者注射到经高渗溶液处理后的1细胞期胚胎的卵周隙中的新方法。采用这两种新的注射策略可减少对病毒滴度的依赖,注射后胚胎的存活率可以达到98%以上。当注射病毒滴度为2×108I.U./ml时,胚胎GFP阳性率超过90%。即使注射低滴度病毒悬液(2×106I.U./ml)也可以得到相对较高的转基因阳性率,2细胞期注射和1细胞蔗糖处理注射所得囊胚阳性率分别为53.26%和40.85%,而采用传统的1细胞期注射仅获得25.39%的阳性率。此外,2细胞期注射得到的阳性囊胚的荧光比1细胞注射得到的阳性囊胚的荧光要强烈,这说明外源基因在2细胞期胚胎的整合效率更高。根据以上结果,我们提出了一种高效的慢病毒介导的生产转基因胚胎的新方法,这种方法在病毒滴度较低时也同样适用。

关键词：慢病毒阳性率

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性别控制与体外受精技术快速繁育高产奶牛群体

性别控制与体外受精技术快速繁育高产奶牛群体

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会

作者：杜福良徐捷兰诺生物技术无锡有限公司美国Renova Life生物技术公司

使用流式细胞分离仪进行精子的分离可以将X精子从Y精子中选离出含量高达90%或更高的X精子的精度。这种性别控制(性控)技术给牧民和畜牧业带来了近两倍的生产潜力,用以生产性别预选的家畜,以及优化育种的方案。然而,精子分离的速度以及... 详细信息

使用流式细胞分离仪进行精子的分离可以将X精子从Y精子中选离出含量高达90%或更高的X精子的精度。这种性别控制(性控)技术给牧民和畜牧业带来了近两倍的生产潜力,用以生产性别预选的家畜,以及优化育种的方案。然而,精子分离的速度以及其性控精液的不同受精力仍然限制着该技术的广泛应用,尤其是在传统的人工授精育种中。体外受精技术(In vitro fertilization,IVF)提供了一个可行而有效的手段来增加奶牛性控精子的受精效率。本文介绍了有关用IVF技术来增加奶牛性控胚胎的发育率和提高雌性胚胎质量,从而提高胚胎生产的效率,达到快速繁育高产奶牛的目的。这些IVF程序包括了以优化的方法,遴选出合适于用每头公牛X精子进行IVF所需的最佳肝素浓度;减少IVF受精液的体积,以确定每卵子获得受精所需的最少精子数目,增加精子受精的效率,即用最少量的精子促使更多的卵子受精;在体外培养液中使用果糖(fructose)来替代葡萄糖(glucose),以及使用能超速降温的玻璃化冷冻技术。

关键词：体外受精奶牛性别控制胚胎体外培养肝素

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小鼠卵母细胞体外成熟过程中乙酰化程度升高对卵丘扩展的影响

小鼠卵母细胞体外成熟过程中乙酰化程度升高对卵丘扩展的影响

引用

中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会

作者：杜明袁佃帅梁莹王亮曾艳朱士恩中国农业大学动物科技学院

本试验在小鼠卵母细胞体外成熟过程中添加去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(TSA)研究乙酰化程度升高对卵丘扩展的影响,对照组A和C中未添加TSA,与之分别对应的处理组B和D采用在成熟液中全程添加TSA,E组将GV期卵母细胞用TSA处理30min后和去除卵... 详细信息

本试验在小鼠卵母细胞体外成熟过程中添加去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(TSA)研究乙酰化程度升高对卵丘扩展的影响,对照组A和C中未添加TSA,与之分别对应的处理组B和D采用在成熟液中全程添加TSA,E组将GV期卵母细胞用TSA处理30min后和去除卵母细胞的卵丘细胞复合体(包括透明带,00X)共培养,F组则与之相反,并进行相关基因的的实时定量PCR分析和蛋白的Western Blot检测。结果显示,在小鼠卵母细胞体外成熟过程中添加TSA提高组蛋白乙酰化水平使卵丘扩展受到明显抑制,卵丘扩展时表达上调的基因(Ptx3、Ptgs2)也受到抑制,显著低于对照组(P<0.05),卵丘细胞经在含有TSA的成熟液中培养30min组的MAPK活性低于未添加组,可能是由于TSA作用于卵丘细胞影响其MAPK的活化而导致卵丘扩展受到抑制。

关键词：小鼠体外成熟卵丘扩展 TSA MAPK

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精卵因素对母牛卵胞质内精子显微注射效果的影响

精卵因素对母牛卵胞质内精子显微注射效果的影响

引用

中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会

作者：卞江涛赵鑫胡高博吕自立张居农石河子大学动物科技学院新疆金牛生物有限公司

本实验探讨了精卵因素对母牛卵母细胞胞质内精子显微注射效果的影响。实验结果:新鲜精液组和性控冻精组ICSI对卵母细胞存活率、卵裂率和囊胚率均无显著差异(P>0.05);采用A、B、C级精子穿刺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级卵母细胞时,穿刺卵受精率、卵... 详细信息

本实验探讨了精卵因素对母牛卵母细胞胞质内精子显微注射效果的影响。实验结果:新鲜精液组和性控冻精组ICSI对卵母细胞存活率、卵裂率和囊胚率均无显著差异(P>0.05);采用A、B、C级精子穿刺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级卵母细胞时,穿刺卵受精率、卵裂率和囊胚率在三者之间无显著差异(P>0.05),总体效果A>B>C、Ⅰ>Ⅱ>Ⅲ;D级精子穿刺Ⅱ级卵母细胞后的穿刺卵受精率显著低于Ⅰ级卵母细胞(P<0.05),卵裂率和囊胚率与Ⅰ级卵母细胞相比无显著差异(P>0.05),穿刺Ⅲ级卵母细胞后的穿刺卵受精率和囊胚率均显著低于Ⅰ级卵母细胞(P<0.05),受精卵的卵裂率与Ⅰ级卵母细胞相比则无显著差异(P>0.05)。本实验表明:采用流式细胞仪分离的性控冻精与新鲜精液相比,对ICSI后的受精率和囊胚率无显著影响;精子活动力和卵子质量对ICSI的效果均有一定程度影响,且随精子活动力的降低和卵母细胞质量的下降而逐渐显著。

关键词：精卵因素显微注射胞质内精子注射母牛

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不同月份荷斯坦青年母牛超排效果的比较

不同月份荷斯坦青年母牛超排效果的比较

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会

作者：李强张建军肖锐牛志宏刘水涛张光伟张健新疆动物胚胎工程技术研究中心

共分析了919头青年荷斯坦青年供体母牛在1-12月份的超排结果。结果表明,在冬季的12-2月份,供体母牛的排卵模式是类似的。其规律是,致密桑葚胚的比率逐渐降低,早期囊胚、囊胚和扩张囊胚的比率不断增加。从3月份开始,致密桑葚胚的比率开... 详细信息

共分析了919头青年荷斯坦青年供体母牛在1-12月份的超排结果。结果表明,在冬季的12-2月份,供体母牛的排卵模式是类似的。其规律是,致密桑葚胚的比率逐渐降低,早期囊胚、囊胚和扩张囊胚的比率不断增加。从3月份开始,致密桑葚胚的比率开始出现小幅上升,囊胚和扩张囊胚的比率略有下降,持续到4月份。自5月份开始,致密桑葚胚的比率出现上升势头,扩张囊胚比率明显降低,一直持续到8月份。从9月份开始,致密桑葚胚比率出现下降,而扩张囊胚比率增加,持续到10月份。从超排与卵回收效果来看,4月份最高(12.71),最低是在10月份(8.16),8月份也较差(8.42)。从平均有效胚胎数看,2、3、4和12月份较高,分别为6.87、7.16、6.77和6.18。7、8和10月份较低,分别为4.94、4.45和4.65。从有效胚胎率看,1、7和8月份最低,分别为47.24%、51.98%和52.86%。结论:供体母牛的排卵模式和时间与季节和月份有关。

关键词：月份荷斯坦青年母牛超排

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模拟微重力对小鼠卵母细胞凋亡的影响

模拟微重力对小鼠卵母细胞凋亡的影响

引用

中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会

作者：张景锋郭欣政李莉张守全华南农业大学动物科学学院

本论文采用转壁式生物反应器(RWVB)产生的模拟微重力条件对6-7周龄的昆明母鼠的GV期的卵母细胞进行体外成熟培养(实验组),以平面培养1g重力条件为对照(对照组),通过在基础培养液中分别添加IBMX(3-异丁基-1-甲基黄嘌呤,抑制卵母细胞体外... 详细信息

本论文采用转壁式生物反应器(RWVB)产生的模拟微重力条件对6-7周龄的昆明母鼠的GV期的卵母细胞进行体外成熟培养(实验组),以平面培养1g重力条件为对照(对照组),通过在基础培养液中分别添加IBMX(3-异丁基-1-甲基黄嘌呤,抑制卵母细胞体外生长)、Caspase-3抑制因子(细胞凋亡抑制因子)和地塞米松(促进细胞凋亡)来探讨模拟微重力条件下小鼠卵母细胞的凋亡情况。结果显示:模拟微重力条件下采用基础培养基培养的卵母细胞的体外成熟率显著地低于平面培养;在出现细胞早期凋亡形态方面,模拟微重力条件下培养的卵母细胞有凋亡形态细胞出现,而平面对照组未出现;添加IBMX实验组中没有出现早期凋亡形态的卵母细胞;Caspase-3抑制因子能有效地抑制卵母细胞的早期凋亡;地塞米松对卵母细胞早期凋亡有促进作用。本实验结论:在小鼠卵母细胞体外成熟过程中,模拟微重力对卵母细胞的成熟有抑制作用,而对卵母细胞的凋亡有促进作用。

关键词：模拟微重力小鼠卵母细胞凋亡

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抑制素免疫及其在肉牛繁殖中的应用

抑制素免疫及其在肉牛繁殖中的应用

引用

中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会

作者：郭宪阎萍梁春年包鹏甲朱新书褚敏裴杰中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所

抑制素是由雄性动物睾丸支持细胞和雌性动物卵巢颗粒细胞分泌的一种糖蛋白激素,具有抑制垂体促卵泡素合成和分泌的作用,抑制素免疫可提高肉牛的繁殖力。文章对抑制素的特性、抑制素的来源及免疫原性、抑制素的免疫方式及其抑制素免疫在... 详细信息

抑制素是由雄性动物睾丸支持细胞和雌性动物卵巢颗粒细胞分泌的一种糖蛋白激素,具有抑制垂体促卵泡素合成和分泌的作用,抑制素免疫可提高肉牛的繁殖力。文章对抑制素的特性、抑制素的来源及免疫原性、抑制素的免疫方式及其抑制素免疫在肉牛繁殖中的应用进行了综述,并展望了抑制素免疫在肉牛繁殖中的应用前景。

关键词：肉牛抑制素免疫繁殖性能

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不同分离方法及培养方式对绵羊腔前卵泡发育能力的影响

不同分离方法及培养方式对绵羊腔前卵泡发育能力的影响

引用

中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会

作者：常迪崔旭高雅梁鸿斌倪和民北京农学院动物科学技术系

研究的目的在于分析用不同的方法分离绵羊腔前卵泡以及用不同的培养方式对分离得到的腔前卵泡进行培养,对于绵羊腔前卵泡存活和发育能力的影响。实验分两部分进行:实验1为分离卵巢皮质,分别用显微分离法和胶原酶法分离腔前卵泡。实验2... 详细信息

研究的目的在于分析用不同的方法分离绵羊腔前卵泡以及用不同的培养方式对分离得到的腔前卵泡进行培养,对于绵羊腔前卵泡存活和发育能力的影响。实验分两部分进行:实验1为分离卵巢皮质,分别用显微分离法和胶原酶法分离腔前卵泡。实验2是在实验1的基础上,将较优方法获得的腔前卵泡分别进行单独培养和群体培养。结果显示,显微分离法与胶原酶法相比,在获得的腔前卵泡数量上差异不显著,但显微分离法获得的腔前卵泡基膜完整率显著高于胶原酶法(P<0.05)。获得的腔前卵泡使用单独和群体两种方式进行培养,其直径增加值在第三天和第六天差异不显著,但单独培养法在第三天和第六天的存活率显著高于群体培养法(P<0.05),且有卵泡腔形成。研究显示使用显微分离法分离腔前卵泡与胶原酶法相比具有优势,相对简单,廉价并且对卵泡的损害很小。经显微分离法获得的腔前卵泡,使用单独培养法进行培养能够促进卵泡的生长发育。

关键词：分离培养腔前卵泡发育能力

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