为了探讨水牛精子在分离过程中对精子地损伤程度,以便进一步优化分离和冷冻精子程序,本文利用精子图像分析仪(CASA)和SYBR-14/PI方法检测了水牛精子分离过程中不同阶段(新鲜、染色后、分离后及冷冻-解冻后)精子的运动特性和质膜完整性。研究发现,新鲜和染色后的水牛精子的活力(84.14%和84.64%)都显著高于分选后和冷冻-解冻后精子(52.82%和38.69%)(p<0.05),而分离后的水牛精子的活力也显著高于冷冻-解冻后的水牛精子(p<0.05)。分离后水牛精子的VCL与新鲜、染色后和冷冻-解冻后精子均有显著差异(216.43μm/sec Vs 182.25μm/sec、154.19μm/sec and 116.72μm/sec)(p<0.05),冷冻-解冻后精子的BCF明显降低(p<0.05)。而在质膜完整性方面,新鲜和分离后的水牛精子的活精子率(74.86%和72.10%)显著高于染色后和冷冻-解冻后的精子(65.81%和57.00%)(p<0.05)。结果表明,用流式细胞仪分离水牛精子,分离和冷冻过程对精子造成损伤,影响了精子的运动特性和膜的完整性。
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