检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：任志华邓又天张超周锐邓惠丹邓俊良左之才彭西崔恒敏四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室环境公害与动物疾病四川省高校重点实验室四川雅安625014

为研究DON、ZEA及其联合染毒对小鼠肝脏功能和肝脏细胞凋亡的影响,成年雌性昆明小鼠360只(体重为20±1g),随机分为9组.腹腔单独或联合注射(每隔24h 1次,连续注射4次)不同浓度的镰刀菌素[DON 1.5 mg/(kg·BW)和2.5 mg/(kg·B... 详细信息

为研究DON、ZEA及其联合染毒对小鼠肝脏功能和肝脏细胞凋亡的影响,成年雌性昆明小鼠360只(体重为20±1g),随机分为9组.腹腔单独或联合注射(每隔24h 1次,连续注射4次)不同浓度的镰刀菌素[DON 1.5 mg/(kg·BW)和2.5 mg/(kg·BW),ZEA 20 mg/(kg·BW)和30 mg/(kg·BW)].在试验第0、3、5、8和12天测定小鼠肝脏AST、ALT的活性和TP、ALB的含量;试验第3、5和8天测定肝细胞凋亡率的变化.结果表明,DON、ZEA单独或联合均显著升高小鼠肝脏AST、ALT活性,肝细胞凋亡率(P＜0.01或0.05),显著降低TP、ALB含量(P＜0.05),联合染毒组与相应单一染毒组相比差异显著(P＜0.01或0.05),呈现明显的剂量—效应关系.联合染毒具有亚加性效应,以2.5 mg/(kg·BW)DON与30mg/(kg·BW) ZEA联合染毒所呈现的亚加性效应更明显.

关键词：动物医学脱氧雪腐镰刀菌烯醇玉米赤霉烯酮联合毒性肝脏功能细胞凋亡

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第16届学术研讨会在哈尔滨召开

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黑龙江动物繁殖 2012年第5期20卷 63-63页

本刊讯：中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第16届学术研讨会于2012年8月15～17日在黑龙江省哈尔滨市昆仑大酒店召开。

关键词：中国畜牧兽医学会学术研讨会动物繁殖哈尔滨市学分黑龙江省

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ApoBR在布鲁氏菌侵染过程中对细胞凋亡影响的研究

ApoBR在布鲁氏菌侵染过程中对细胞凋亡影响的研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会

作者：车召堂李亚王浩陈创夫郭飞王远志张辉石河子大学

研究目的:载脂蛋白B(Apo BR)受体是鼠源巨噬细胞膜上载脂蛋白B的受体,定位于巨噬细胞膜上的外围膜蛋白。已有研究证明Apo BR为外膜蛋白OMP-25与巨噬细胞膜作用的潜在受体,它能够调节TNF-α的分泌,同时导致一系列的细胞因子表达水平变化... 详细信息

研究目的:载脂蛋白B(Apo BR)受体是鼠源巨噬细胞膜上载脂蛋白B的受体,定位于巨噬细胞膜上的外围膜蛋白。已有研究证明Apo BR为外膜蛋白OMP-25与巨噬细胞膜作用的潜在受体,它能够调节TNF-α的分泌,同时导致一系列的细胞因子表达水平变化和免疫力下降,促进布鲁氏菌在巨噬细胞内的生存和繁殖。本文探讨载脂蛋白B受体基因Apo BR在布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7所引起的细胞凋亡的影响。材料方法:本实验通过构建、筛选干扰Apo BR基因的慢病毒干扰载体,干扰小鼠巨噬细胞Apo BR的表达;并以牛种布鲁氏菌2308株侵染巨噬细胞,分别在侵染后4、8、12和24h收集细胞和上清液,采用实时荧光定量PCR和ELISA法检测Apo BR基因、肿瘤坏死因子TNF-α以及凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达水平;并通过CFU计数检测胞内菌数量,利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果:慢病毒转染后p Lenti Lox-253和p Lenti Lox-1325组Apo BR RNA细胞抑制率分别为53.3%和57.4%;TNF-α表达水平较对照组升高(P<0.05);CFU计数显示,细菌侵染后8h,巨噬细胞对细菌的抑制率达到最高,253实验组抑制率为71.7%,1325实验组抑制率为67.0%;干扰Apo BR基因后,其细胞凋亡率显著上调(P<0.05),在不同时间点促凋亡基因Bax表达水平上调,而抑制凋亡基因Bcl-2表达水平下调。讨论与小结:载脂蛋白B受体蛋白在布鲁氏菌早期感染引起的细胞凋亡过程中起到减缓细胞凋亡的作用,为进一步研究布鲁氏菌在巨噬细胞内的分子机制奠定了基础,也为寻找治疗布鲁氏菌的有效药物和疫苗提供了理论依据。

关键词：布鲁氏菌巨噬细胞侵染过程 ApoBR 细胞凋亡

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ApoBR在布鲁氏菌侵染过程中对细胞凋亡影响的研究

ApoBR在布鲁氏菌侵染过程中对细胞凋亡影响的研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会

作者：车召堂李亚王浩陈创夫王远志张辉石河子大学新疆·石河子832000

研究目的：载脂蛋白B(ApoBR)受体是鼠源巨噬细胞膜上载脂蛋白B 的受体,定位于巨噬细胞膜上的外围膜蛋白.已有研究证明ApoBR 为外膜蛋白OMP-25 与巨噬细胞膜作用的潜在受体,它能够调节TNF-α的分泌,同时导致一系列的细胞因子表达水平变...

研究目的：载脂蛋白B(ApoBR)受体是鼠源巨噬细胞膜上载脂蛋白B 的受体,定位于巨噬细胞膜上的外围膜蛋白.已有研究证明ApoBR 为外膜蛋白OMP-25 与巨噬细胞膜作用的潜在受体,它能够调节TNF-α的分泌,同时导致一系列的细胞因子表达水平变化和免疫力下降,促进布鲁氏菌在巨噬细胞内的生存和繁殖.本文探讨载脂蛋白B 受体基因ApoBR 在布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7 所引起的细胞凋亡的影响.材料方法：本实验通过构建、筛选干扰ApoBR 基因的慢病毒干扰载体,干扰小鼠巨噬细胞ApoBR 的表达;并以牛种布鲁氏菌2308 株侵染巨噬细胞,分别在侵染后4、8、12 和24h 收集细胞和上清液,采用实时荧光定量PCR 和ELISA 法检测ApoBR 基因、肿瘤坏死因子TNF-α以及凋亡相关基因Bax、Bcl-2 表达水平;并通过CFU 计数检测胞内菌数量,利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果：慢病毒转染后pLentiLox-253 和pLentiLox-1325 组ApoBRRNA 细胞抑制率分别为53.3％和57.4％;TNF-α表达水平较对照组升高(P＜0.05);CFU 计数显示,细菌侵染后8h,巨噬细胞对细菌的抑制率达到最高,253 实验组抑制率为71.7％,1325 实验组抑制率为67.0％;干扰ApoBR 基因后,其细胞凋亡率显著上调(P＜0.05),在不同时间点促凋亡基因Bax表达水平上调,而抑制凋亡基因Bcl-2 表达水平下调.讨论与小结：载脂蛋白B 受体蛋白在布鲁氏菌早期感染引起的细胞凋亡过程中起到减缓细胞凋亡的作用,为进一步研究布鲁氏菌在巨噬细胞内的分子机制奠定了基础,也为寻找治疗布鲁氏菌的有效药物和疫苗提供了理论依据.

关键词：

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饲粮添加脯氨酸对妊娠环江香猪繁殖性能和血浆生化参数的影响

饲粮添加脯氨酸对妊娠环江香猪繁殖性能和血浆生化参数的影响

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中国畜牧兽医学会动物营养分会第七届中国猪营养学术研讨会

作者：查伟孔祥峰谭敏捷耿梅梅许丽卫游金明江西农业大学江西省动物营养重点实验室南昌330045 中国科学院亚热带农业生态研究所中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室长沙410125 中国科学院环江喀斯特农业生态试验站香猪研究中心环中国科学院亚热带农业生态研究所中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室长沙410125 中国科学院环江喀斯特农业生态试验站香猪研究中心环江547100 中国科学院亚热带农业生态研究所中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室长沙410125 江西农业大学江西省动物营养重点实验室南昌330045

研究脯氨酸代谢对妊娠环江香猪繁殖性能和血浆生化参数的影响.选取48头后备环江母猪,自然交配后前15d饲喂基础饲粮,配种15d后随机分成3组,每组8个重复(栏),每个重复2头猪.分别饲喂添加0.77％L-丙氨酸(等氮对照)、1％L-脯氨酸、0.77％L-... 详细信息

研究脯氨酸代谢对妊娠环江香猪繁殖性能和血浆生化参数的影响.选取48头后备环江母猪,自然交配后前15d饲喂基础饲粮,配种15d后随机分成3组,每组8个重复(栏),每个重复2头猪.分别饲喂添加0.77％L-丙氨酸(等氮对照)、1％L-脯氨酸、0.77％L-丙氨酸+0.0167％DFMO的试验饲粮.每天饲喂量约为体重的3％,分两次饲喂,自由饮水.分别于配种第45和70 d,称取母猪体重,每栏随机取1头母猪,颈动脉放血处死,收集血液,肝素抗凝,离心分离血浆,用于生化参数分析;解剖母猪,记录黄体数、胎儿数和胎儿重.

关键词：脯氨酸多胺生化参数胎儿发育环江香猪

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猪圆环病毒2型CC12毒株感染性克隆构建与病毒拯救

猪圆环病毒2型CC12毒株感染性克隆构建与病毒拯救

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：贾川川鲁海冰邢泽黎朱利塞郭昌明盖小春王明月王新平吉林大学动物医学学院

前言猪圆环病毒感染是由猪圆环病毒2型引起的一种严重危害养猪业发展的新发传染病,以断奶仔猪生长发育不良、呼吸困难、皮下淋巴结高度肿大、出血和坏死,母猪繁殖障碍为主要特征。本研究构建PCV2 CC12毒株基因组。材料与方法以长春市某... 详细信息

前言猪圆环病毒感染是由猪圆环病毒2型引起的一种严重危害养猪业发展的新发传染病,以断奶仔猪生长发育不良、呼吸困难、皮下淋巴结高度肿大、出血和坏死,母猪繁殖障碍为主要特征。本研究构建PCV2 CC12毒株基因组。材料与方法以长春市某猪场爆发的疑似猪圆环病毒2感染发病猪的脾脏和淋巴结为材料,提取组织的DNA或总RNA,应用PCR/RT-PCR扩增PCV2的基因组,并将其克隆到pBluescriptⅡSK载体,构建PCV2 CC12基因组重组质粒,然后以LF2000将重组质粒转染到PK15细胞,通过PCR、TCID50测定、免疫过氧化物酶单层细胞试验、免疫荧光技术和免疫印迹技术检测病毒基因序列或病毒编码蛋白,进而确定PCV2 CC12是否拯救成功。结果与讨论应用酶切和序列测定,确定成功构建出CC12病毒的完整基因组重组质粒。构建的感染性克隆以脂质体介导方法转染PK15细胞后,应用PCR方法、IFA、IPMA和Western blot检测到病毒核酸分子和病毒Cap结构蛋白表达,表明CC12毒株拯救成功。拯救出的CC12毒株（rCC12）与亲本病毒具有相似的TCID病毒滴度和生物学特性,为进一步研究病毒的复制、病毒的致病机理与免疫打下基础。结论本研究构建出CC12病毒基因组的感染性克隆,通过转染成功拯救出rCC12病毒,拯救病毒与亲本毒株具有相似的生物学特性,为进一步研究病毒的复制、病毒的致病机理与免疫提供平台和打下基础。

关键词：猪圆环病毒感染性克隆病毒拯救

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表达猪白细胞介素-4的重组PRRSV在猪体内的免疫效果评价

表达猪白细胞介素-4的重组PRRSV在猪体内的免疫效果评价

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：李治军王刚王妍张冲黄柏成李琼毅李亮亮薛碧云丁培阳蔡学辉王承宝周恩民西北农林科技大学动物医学院兽医免疫学研究所农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)仍旧是危害世界养猪业的重要传染病之一,现有的疫苗不能够提供完全的免疫保护。研究报道称猪白细胞介素-4可以作为免疫佐剂提高PRRSV疫苗的免疫效果。本研究的目的是构建在PRRSV致弱毒株(CH-1R株)基因组N基因和... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)仍旧是危害世界养猪业的重要传染病之一,现有的疫苗不能够提供完全的免疫保护。研究报道称猪白细胞介素-4可以作为免疫佐剂提高PRRSV疫苗的免疫效果。本研究的目的是构建在PRRSV致弱毒株(CH-1R株)基因组N基因和3·-UTR之间表达猪白细胞介素-4(pIL-4)的重组病毒,同时评价该重组病毒在猪体内的免疫效果。运用RT-PCR、IFA和Western Blotting检测手段表明,在PRRSV基因组N基因和3′-UTR之间插入转录调控序列(TRS6)启动的pIL-4后,可以拯救出病毒。测定病毒的生长动力学曲线表明,病毒生物学特性与亲本毒株也基本一致。在Marc-145细胞连续传15代后,重组病毒仍保持遗传稳定性。这表明我们获得了稳定表达(pIL-4)重组PRRS病毒株。猪体内实验表明,重组病毒组免疫组具有与亲本毒株相似的体液免疫水平。细胞免疫方面,在免疫28天刺激PBMC分泌的上清中,重组病毒组产生的IL-4显著高于亲本毒株。同时重组病毒组在攻毒后第7天,血液中CD4+CD8+T细胞数量和IL-4的水平明显高于亲本毒株。临床症状,病理变化,病毒血症等结果显示,免疫组之间没有明显差别。综上所述,重组表达pIL-4的PRRSV并不能显著提高CH-1R的免疫效果。

关键词： PRRSV 基因组免疫效果评价白细胞介素

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牛传染性鼻气管炎病gB蛋白的截短表达及间接ELISA方法的建立

牛传染性鼻气管炎病gB蛋白的截短表达及间接ELISA方法的建立

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中国畜牧兽医学会养牛学分会第八届全国会员代表大会暨2015年学术研讨会

作者：曹翀曹永生宋林高明春彭统全张树栋王君伟东北农业大学动物医学学院黑龙江水产研究所

为建立一种检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的间接ELISA方法,本研究根据GenBank发表的IBRV全基因组序列,利用软件DNAStar对糖蛋白B(gB)的氨基酸序列进行亲水性和抗原性分析。同时结合已发表的gB信息,设计引物扩增g B开放阅读框第190～52... 详细信息

为建立一种检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的间接ELISA方法,本研究根据GenBank发表的IBRV全基因组序列,利用软件DNAStar对糖蛋白B(gB)的氨基酸序列进行亲水性和抗原性分析。同时结合已发表的gB信息,设计引物扩增g B开放阅读框第190～524氨基酸残基(aa)的基因,PCR产物插入p ET-30a并成功构建重组质粒p ET-30a-gB。SDS-PAGE结果显示目的蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达,大小约为41.4 ku。Western-Blot鉴定表明目的蛋白具有良好的反应原性。以纯化的gB蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA检测,该方法敏感性好,特异性强,与其他病原血清无交叉反应,其组内组间变异系数均低于11%。与IDEXX公司的gB-ELISA试剂盒进行对比,阳性符合率为84.28%,阴性符合率为85.71%。对黑龙江省10农场的血清样品进行了IBR的流行性调查,阳性率最高为65.52%,最低为5.56%,平均阳性率为18.01%。本研究建立的ELISA方法有望商品化并为进出口检疫和疾病防制工作提供参考。

关键词：牛传染性鼻气管炎 gB蛋白原核表达间接ELISA

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绵羊Toll样受体7基因多态性

绵羊Toll样受体7基因多态性

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会

作者：梁田杨霞杨素芳张勋吴鹏肖媛媛陈新凯宋佳伟盛金良石河子大学动物科技学院

研究目的:Toll样受体7是TLRs家族的重要成员之一,能通过识别单链RNA激活天然免疫系统,同时通过诱导浆细胞树突状细胞(p DC)分泌Ι型干扰素(IFN-α)来调控获得性免疫反应。一些关于TLR7的研究认为在免疫反应中TLR7能够识别单链RNA病毒,... 详细信息

研究目的:Toll样受体7是TLRs家族的重要成员之一,能通过识别单链RNA激活天然免疫系统,同时通过诱导浆细胞树突状细胞(p DC)分泌Ι型干扰素(IFN-α)来调控获得性免疫反应。一些关于TLR7的研究认为在免疫反应中TLR7能够识别单链RNA病毒,包括水泡口腔咽喉病毒和流感病毒[1]。有研究显示,TLR7单核苷酸多态性与丙型肝炎病毒感染引起的炎症反应密切相关。研究显示,TLR7的遗传变异影响丙型肝炎病毒感染后的免疫反应[2]。本研究探讨绵羊TLR7胞外结构域的区域的遗传变异,这些研究结果可以用来进一步研究遗传易感性羊感染与TLR7基因变异的关系。材料方法:新疆维吾尔自治区昌吉市羊场随机采集200份萨福克羊血液样本和玛纳斯市羊场随机采集400份萨福克羊血液样本,提取其DNA,根据文章报道的12对引物[3],采用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析方法检测萨福克羊Toll样受体7基因外显子核酸序列的单核苷酸多态性。结果表明12对引物扩增产物中,第2、5、6、7对引物具有多态性。其中第2对和第7对引物存在错义突变,第5,6对引物扩增产物存在同义突变。经SSCP分析,第2对引物扩增产物有三种带型。有三个基因型,分别是AA,AB,BB型和第7对引物有两种基因型,分别是AA型,GG型。经序列比对分析存在A343G、A350G、A1244G的错义突变,和G864A和T1185C的同义突变。其中343位核苷酸的突变导致了赖氨酸突变为谷氨酸。350位核苷酸的突变导致天冬氨酸突变为丝氨酸。115位氨基酸的替换导致氨基酸从带正电荷变为带负电荷,415位氨基酸替换使它带正电荷。这3个错义突变都位于TLR7胞外区的富含亮氨酸重复区。讨论:在本篇文章中,我们发现TLR7胞外区是保守的,只有5个点突变。发现的115和415位的氨基酸突变都是在绵羊TLR7的LRR区外的基序上,也导致了氨基酸极性和带电荷量的改变,这种替换可能会影响TLR7的结构或功能,从而改变对疾病的易感性。

关键词： Toll样受体7 多态性胞外区突变

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三株与HP-PRRSV疫苗株高度同源的高致病性猪繁殖和呼吸综合征病毒的分离鉴定

三株与HP-PRRSV疫苗株高度同源的高致病性猪繁殖和呼吸综合征病毒...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：姜一峰夏天奇周艳君虞凌雪杨莘黄勤锋李丽薇高飞曲泽慧童武童光志中国农业科学院上海兽医研究所

引言 2012年江苏省桌未使用过Hp-PRRSV疫苗的猪场保育猪群中出现疑似PRRS症状,导致大部分仔楮死亡。从发病猪血清中分离到三株猪繁殖和呼吸综合征病毒,命名为NT1、NT2和NT3,鉴定分析结果显示三株病毒可能来源于HP-PRRSV疫苗株毒力反强... 详细信息

引言 2012年江苏省桌未使用过Hp-PRRSV疫苗的猪场保育猪群中出现疑似PRRS症状,导致大部分仔楮死亡。从发病猪血清中分离到三株猪繁殖和呼吸综合征病毒,命名为NT1、NT2和NT3,鉴定分析结果显示三株病毒可能来源于HP-PRRSV疫苗株毒力反强。材料和方法将采集的发病猪血清在MARC-145细胞上进行病毒分离,在PAM和MARC-145细胞上进行生长曲线的测定。对病毒全基因组进行扩增并测序,对获得的全长基因组序列进行遗传演化分析、同源性分析及氨基酸比对分析。最后感染仔猪,对分离的病毒进行体内致病性分析。结果与讨论三株病毒在PAM和MARC-145细胞上均有较高的生长滴度。全基因组序列分析结果显示:三株病毒在NSP2编码区存在与HP-PRRSV分子特征一致的不连续的30个氨基酸的缺失,提示三株病毒均属于HP-PRRSV。全基因组序列进行比较分析结果显示:3株NT病毒在全基因组与JXA1传代的同源性最高,在99.5-99.7%之间。遗传演化分析结果显示:三株NT病毒与JXA1传代病毒在同一进化分支上,同属于北美型PRRSV种HP-PRRSV分支。氨基酸分析结果显示:三株NT病毒一共具有12个JXA1-P80特征性氨基酸位点,分别位于基因组ORF1a(Asp686,Thr782,Va1958,Arg981,Gly987,Met1092,Leu1422和Asp1659)、ORF1b(Gly420,His844和Thr1033)和GP4(Val172)编码区。体内致病性试验结果显示:三株NT病毒能够引起包括发热在内的PRRS临床症状,均能导致超过半数的仔猪死亡。结论三株NT病毒可能来源于HP-PRRSV疫苗株JXA1-P80毒力反强。

关键词： HP-PRRSV 疫苗株高致病性同源的分离鉴定

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