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2019中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第十届会员代表大会暨第24次学术研讨会

作者：俞演古玉王承东胡静杨瑗宁杨乔李德生张和民邓林华凌珊珊左之才彭广能钟志军马晓平四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川农业大学生命科学院中国大熊猫保护研究中心

本试验旨在研究石膏样小孢子菌经皮肤感染小鼠后皮肤损伤组织中Dectin-1,TLR-2和TLR-4受体和细胞因子动态变化规律。通过对C57BL/6小鼠皮下接种大熊猫源石膏样小孢子菌,分别在第3、7和14 d取病变皮肤组织用PAS染色和HE染色观察孢子定植... 详细信息

本试验旨在研究石膏样小孢子菌经皮肤感染小鼠后皮肤损伤组织中Dectin-1,TLR-2和TLR-4受体和细胞因子动态变化规律。通过对C57BL/6小鼠皮下接种大熊猫源石膏样小孢子菌,分别在第3、7和14 d取病变皮肤组织用PAS染色和HE染色观察孢子定植部位和病理损伤;分别在第3、6和12h取病变皮肤组织用荧光定量PCR检测受体mRNA的转录表达量;分别在第1、3、7和14d取样,用荧光定量PCR检测细胞因子mRNA的转录表达量。结果表明:石膏样小孢子感染小鼠后导致皮下脓肿,大量的炎性细胞浸润,并伴有角质层增厚。试验中受体Dectin-1、TLR-2和TLR4的转录表达量增加(P<0.01),细胞因子IL-6、IL-1β、IL-23、TGF-β、IL-17A、IL-17F和IL-22的转录表达量增加(P<0.01)。模式识别受体能识别石膏样小孢子菌表面模式识别分子从而激活Th17途径,分化成熟的Th17细胞分秘细胞因子IL-22、IL-17A和IL-17F。模式识别受体能识别石膏样小孢子菌表面模式识别分子从而激活Th17途径,分化成熟的Th17细胞分秘细胞因子IL-22、IL-17A和IL-17F,从而发挥抗石膏样小孢子菌的作用。

关键词：石膏样小孢子菌 Dectin-1 TLR-2 TLR-4 细胞因子病理学检测 qRT-PCR

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新疆北疆地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查及病毒全基因组序列分析

新疆北疆地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查及病毒全基...

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十三次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第三次学术研讨会、中国兽医病理学家第三次学术研讨会

作者：蔡卓轩周子恒李岩肖盛中张彦红杨艳杨霞盛金良新疆石河子大学动物科技学院

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS virus,PRRSV)引起的一种严重危害全球猪业生产的高度传染病。目前,我国呈现欧洲型和美洲型PRRSV毒株稳定共存,经典毒株、高... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS virus,PRRSV)引起的一种严重危害全球猪业生产的高度传染病。目前,我国呈现欧洲型和美洲型PRRSV毒株稳定共存,经典毒株、高致病毒株和NADC30-like毒株混合感染的情形,同时PRRSV的易变异和高频率基因重组等特性,共同导致我国PRRS的流行状况尤为复杂。本研究从PRRSV分子流行病学入手,对本区毒株的遗传变异和进化特征进行研究,更好的为北疆地区PRRSV的防控提供参考依据。从发病猪场采集疑似PRRS病料,通过保守基因ORF7引物进行PRRSV检测,使用RT-PCR方法扩增病毒nsp2部分基因和ORF5基因进行测序,选取国内外代表毒株进行核苷酸和氨基酸序列对比,采用最大似然法进行系统进化分析。结果显示100份样品中,33份为PRRSV阳性,阳性率为33%;随机抽取的13份阳性病料,使用RT-PCR方法获得8段nsp2部分基因和12段ORF5基因,序列比对和系统进化分析显示,13份样品中,除1株为经典毒株变异株,2株为疫苗毒株,其余均为高致病毒株,虽未检测到NADC30-like毒株存在,但在GP5蛋白分析中发现本试验部分毒株具有NADC30-like毒株变异特征。为更加准确的掌握本地区PRRSV毒株特征,使用Marc-145和PAM细胞对经典毒株变异株PRRSVXJzx1进行分离,参考HK13毒株设计9对特异性引物扩增全基因组片段测序,选取国内外代表毒株进行序列一致性比对,构建最大似然法系统进化树进行分析。结果显示,XJzx1株是目前国内外发现的突变频率较高的美洲型毒株,为NA2型美洲型毒株,与HB-2(sh)/2002、QYYZ和HK13遗传进化关系较近;基因重组分析显示,XJzx1为BJ-4和QYYZ重组毒株。本实验证明北疆地区呈现高致病毒株不断蔓延的趋势,同时经典毒株不断变异和重组,导致新型毒株层次不断;虽然尚未发现NADC30-like毒株存在,但PRRS防控形势依然严峻,对新疆地区PRRS的预防、控制具有重要意义。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查全基因组

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疫苗抗体选择压下H9N2亚型禽流感病毒的演化

疫苗抗体选择压下H9N2亚型禽流感病毒的演化

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作者：晋海云王婉杨雪芹苏海龙朱睿石火英扬州大学兽医学院江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD) 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

本研究以中国华东区H9N2亚型禽流感病毒疫苗株A/chicken/Shanghai/F/1988(F/98,H9N2)作为母本病毒,分别在有和没有疫苗抗体鸡胚模型中连续传代至80代,发现疫苗选择压下传代至第47代病毒出现抗原变异(vF47),无疫苗选择压下传代至第52代... 详细信息

本研究以中国华东区H9N2亚型禽流感病毒疫苗株A/chicken/Shanghai/F/1988(F/98,H9N2)作为母本病毒,分别在有和没有疫苗抗体鸡胚模型中连续传代至80代,发现疫苗选择压下传代至第47代病毒出现抗原变异(vF47),无疫苗选择压下传代至第52代病毒出现抗原变异(nF52)。序列分析显示,疫苗抗体选择压下抗原变异病毒从第47代到80代有3个基因发生7个氨基酸的置换,其中3个氨基酸置换发生在PB2蛋白(I185K,C228Y,K375R)、4个氨基酸置换发生在HA蛋白(K131R,S145 N,G181E,A198V);相同代次无疫苗抗体选择压下传代病毒n F47有3个基因发生4个氨基酸的替换,但是抗原没有变异;无疫苗抗体选择压下抗原变异病毒从第52代到第80代有6个基因发生12个氨基酸的替换,其中3个氨基酸置换发生在PB2蛋白(S155 N,C228Y,K375R)、2个氨基酸置换发生在PB1(T156A,R189K)、4个氨基酸置换发生在HA蛋白(K131R,S145 N,G181E,A198V)、NP(R99K)、NA(A459T)和NS蛋白(A143T)各有1个氨基酸置换发生。特别是,VF47和nF52的HA基因的同源性为100%。通过病毒复制和致病性实验,与亲本病毒F/98株相比,v F47和n F52病毒均表现出更强的复制能力,而且n F52病毒的复制能力和致病能力比v F47病毒更强。免疫保护实验结果表明,亲本病毒F/98株的灭活疫苗无法有效保护v F47或n F52病毒的感染,但v F47病毒或n F52病毒的灭活疫苗却可以有效保护F/98株的感染。总之,我们的研究表明,H9N2流感病毒在具有母源抗体的鸡胚和SPF鸡胚中连续传代的过程中,在含有母源抗体的鸡胚传代获得的病毒发生氨基酸置换的数量较少,但比SPF鸡胚传代获得的病毒更早地表现出抗原漂变。相反,在SPF鸡胚传代获得的病毒发生了更多的遗传突变。这些突变使传代病毒在SPF鸡中表现出更强的复制能力和致病能力。母源抗体选择压似乎在本研究的鸡胚模型中并未发挥关键作用,但在病毒传代过程中可能加速了抗原漂变的发生,通过限制了基因变异的方向,影响病毒的遗传变异和复制能力。

关键词：灭活疫苗抗原变异禽流感病毒母源抗体氨基酸置换

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一种饲料添加剂对育肥期肉牛抗氧化应激水平的影响

一种饲料添加剂对育肥期肉牛抗氧化应激水平的影响

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中国畜牧兽医学会动物营养学分会2018年能量营养学术研讨会

作者：黄宝银黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319

本实验旨在研究一种饲料添加剂对育肥期肉牛抗氧化应激水平的影响.本实验选择在某集约化肉牛养殖场进行,选择同一品种、同一性别,年龄、体况相近的健康育肥期肉牛12头,分为实验组和对照组,每组6头.对照组饲喂基础日粮,实验组基础日粮与... 详细信息

本实验旨在研究一种饲料添加剂对育肥期肉牛抗氧化应激水平的影响.本实验选择在某集约化肉牛养殖场进行,选择同一品种、同一性别,年龄、体况相近的健康育肥期肉牛12头,分为实验组和对照组,每组6头.对照组饲喂基础日粮,实验组基础日粮与本饲料添加剂混合饲喂.分别于清晨进行采集血液,分离血清,并对血清中的T-AOC、GSH-Px和SOD活性,MDA含量四个指标进行检测.结果表明:两组实验牛实验初始时血清中各项抗氧化指标差异均不显著(P＞0.05);实验开始第14d与28d时实验组GSH-Px活性均极显著高于对照组GSH-Px活性(P＜0.01);实验开始第14d时实验组T-AOC浓度显著高于对照组T-AOC浓度(P＜0.05),28d时实验组T-AOC浓度极显著高于对照组(P＜0.01);整个实验过程中实验组与对照组SOD活性差异均不显著(P＞0.05),但实验组SOD的活性也高于对照组;实验开始14d与28d时实验组MDA含量极显著低于对照组(P＜0.01).由此可见,本饲料添加剂提高了育肥期肉牛的抗氧化能力,有利于肉牛的生长发育.

关键词：肉牛饲料添加剂抗氧化应激水平生长发育

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壳聚糖纳米银水凝胶对犬感染创的治疗效果

壳聚糖纳米银水凝胶对犬感染创的治疗效果

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2019中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第十届会员代表大会暨第24次学术研讨会

作者：刘倩倩陈玉琪杨斯琪林婷婷邓益锋南京农业大学动物医学院

为探讨壳聚糖纳米银水凝胶体外抑菌性能和对犬感染创的治疗效果,选用外科感染常见的绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌进行抑菌试验。将12只中华田园犬随机分为阴性对照组、阳性对照组(磺胺嘧啶锌软膏组)、低pH凝胶组(pH=5.5,低pH壳聚糖纳米银... 详细信息

为探讨壳聚糖纳米银水凝胶体外抑菌性能和对犬感染创的治疗效果,选用外科感染常见的绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌进行抑菌试验。将12只中华田园犬随机分为阴性对照组、阳性对照组(磺胺嘧啶锌软膏组)、低pH凝胶组(pH=5.5,低pH壳聚糖纳米银水凝胶组)、高pH凝胶组(pH=6.5,高pH壳聚糖纳米银水凝胶组),每组3只,造24个创口,建立感染创模型。连续给药14 d,于用药后第3、7、14 d观察创面,记录肉芽形成及完全愈合时间,计算创口体积愈合率、面积愈合率,HE染色和Masson染色观察组织形态学变化,通过免疫组化分析影响创面愈合的细胞因子FGF-2、SMAD2/3、TGF-β1的表达情况。结果表明,抑菌试验中壳聚糖纳米银抑菌活性优于纯壳聚糖且显著随pH减小而增强(P<0.01)。临床试验中低pH凝胶组较其他三组最早出现肉芽组织,高pH凝胶组较其他三组最早出现上皮化,凝胶组伤口愈合和组织再上皮化时间小于对照组,低pH凝胶组的表达量高于对照组。免疫组化结果显示第3 d,FGF-2在阴性对照组、低pH凝胶组强阳性或阳性表达,阴性对照组显著高于低pH凝胶组和阳性对照组(P<0.05),SMAD2/3和TGF-β1在四组均弱阳性表达,但TGF-β1在高pH凝胶组极显著高于阳性对照组(P<0.01),显著高于阴性对照组(P<0.05),低pH凝胶组显著高于阳性对照组(P<0.05);第7d,FGF-2在凝胶组强阳性表达,极显著高于阴性对照组(P<0.01)并显著高于阳性对照组(P<0.05),FGF-2在阳性对照组阳性表达,显著高于阴性对照组(P<0.05),SMAD2/3和TGF-β1在低pH凝胶组阳性表达,SMAD2/3在其他三组弱阳性表达,TGF-β1在对照组阳性表达,在高pH凝胶组弱阳性表达;第14d,FGF-2在凝胶组和阳性对照组阳性表达,SMAD2/3和TGF-β1在低pH凝胶组阳性表达,显著高于阳性对照组(P<0.05),TGF-β1在低pH凝胶组极显著高于阴性对照组和高pH凝胶组(P<0.01)。壳聚糖纳米银水凝胶能抑菌消炎,加速成纤维细胞及胶原形成,促进伤口的愈合。

关键词：壳聚糖纳米银水凝胶抑菌试验感染创犬

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布鲁氏菌分泌蛋白BspG的亚细胞定位分析

布鲁氏菌分泌蛋白BspG的亚细胞定位分析

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作者：马忠臣王勇胡尊楠陈创夫石河子大学动物科技学院

胞内寄生菌布鲁氏菌感染动物机体引起布鲁氏菌病(简称布病)。感染此疾病会造成公畜睾丸炎,母畜流产、死胎,人类关节炎及波浪热等。布鲁氏菌的致病作用主要依靠其毒力因子,包括膜蛋白、脂多糖、分泌蛋白等,具有抵抗宿主杀伤机制和致病的... 详细信息

胞内寄生菌布鲁氏菌感染动物机体引起布鲁氏菌病(简称布病)。感染此疾病会造成公畜睾丸炎,母畜流产、死胎,人类关节炎及波浪热等。布鲁氏菌的致病作用主要依靠其毒力因子,包括膜蛋白、脂多糖、分泌蛋白等,具有抵抗宿主杀伤机制和致病的作用。布鲁氏菌分泌蛋白Bsp G(基因大小为651bp)可被分泌进入宿主细胞核及核周围,但其功能目前还不十分清楚。研究思路及目的:本研究主要包括三部分内容,p Ds Red2-Bsp G真核表达载体的构建、Bsp G蛋白的亚细胞定位以及Bsp G基因的RT-PCR分析。通过载体构建及亚细胞定位初步分析了Bsp G蛋白可能进入到宿主细胞中的位置,通过RT-PCR分析确定Bsp G基因是否转录,间接分析Bsp G蛋白的表达。这将对分泌蛋白Bsp G的功能及布鲁氏菌胞内生存机制的研究奠定一定的实验基础。材料方法:通过查找基因序列、设计引物、分别以16M株和2308株布鲁氏菌为模板进行扩增,再进行片段回收、连接至p MD19-T载体,经过提质粒、双酶切验证后连接至p Ds Red2真核载体,酶切验证,然后经过质粒大提后转染入HEK293T肾源细胞,进行激光共聚焦显微镜观察,接下来进行RT-PCR鉴定Bsp G的转录。结果及结论:结果表明,成功构建了p MD19-T-Bsp G质粒和p Ds Red2-Bsp G重组真核质粒;RT-PCR成功扩出Bsp G基因,证明了质粒成功转入细胞并转录;激光共聚焦结果显示,Bsp G蛋白进入宿主细胞与细胞核共定位,存在于细胞核及核周围。这为Bsp G的进入细胞核的分子机制及其功能研究奠定了基础。讨论:布鲁氏菌16M株和2308株的Bsp G,核酸序列上存在三个核苷酸的差异,分别是第54、181、365位核苷酸;所对应的第61、122位氨基酸也不相同。氨基酸的差异可能会引起蛋白质空间结构上的差异,进而导致蛋白质功能的不同以及入核后的定位。T4SS作为毒力因子,其分泌的蛋白在布鲁氏菌感染机体与抗细胞凋亡中有重要作用,如Bsp A、Bsp B、Bsp F等,Bsp G的作用也可能与Bsp A等有相似之处。亚细胞定位分析,两种模板表达的Bsp G均定位于宿主细胞核及核周围。我们猜测,在进入宿主细胞核后,Bsp G可能会与核内遗传物质发生作用,通过与核酸序列互作来影响宿主细胞的遗传与增殖,而在核周围的Bsp G可能会与胞质内的蛋白质发生作用,影响蛋白质的正常功能,这都将可能通过降低宿主细胞免疫活性、抑制细胞凋亡等满足布鲁氏菌长期的胞内生存与繁殖。最后,可以初步确定Bsp G被分泌到宿主细胞核及核周围,但其在感染动物机体过程中的作用以及布鲁氏菌胞内生存机制还有待进一步的研究。

关键词：布鲁氏菌宿主细胞亚细胞定位细胞核分泌蛋白

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猪细小病毒诱导PTCs自噬及其机制研究

猪细小病毒诱导PTCs自噬及其机制研究

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作者：张秀娟黄勇童德文西北农林科技大学动物医学院

【目的】猪细小病毒(Porcine Parvovirus,PPV)主要引起母猪繁殖障碍性疾病,临床表现为母猪流产、产死胎、畸形胎、木乃伊胎及弱仔等特征。近年来,大量研究证实多种病毒的感染、致病与宿主细胞自噬密切相关,但是PPV是否诱导细胞自噬,细... 详细信息

【目的】猪细小病毒(Porcine Parvovirus,PPV)主要引起母猪繁殖障碍性疾病,临床表现为母猪流产、产死胎、畸形胎、木乃伊胎及弱仔等特征。近年来,大量研究证实多种病毒的感染、致病与宿主细胞自噬密切相关,但是PPV是否诱导细胞自噬,细胞自噬在PPV的感染与致病过程中的作用及机制迄今未见报道。本研究旨在明确PPV诱导猪胎盘滋养层细胞(porcine placental trophoblasts,PTCs)自噬及其机制,为揭示PPV诱导母猪繁殖障碍发病机理提供理论依据。【材料方法】PPV感染PTCs 0 h、6 h、12 h、24 h、36h、48 h后,western blotting检测PPV VP2、LC3和p62的表达,荧光显微镜、透射电镜检测PPV感染24h后PTCs中自噬体和自噬溶酶体的形成。UV-PPV感染PTCs 0 h、6 h、12 h、24 h、36 h、48 h后,western blotting检测PPV VP2、LC3和p62的表达,荧光显微镜观察PPV感染24 h后PTCs中自噬体与自噬溶酶体的形成。PPV感染RAPA、3MA、BAF、RAPA+BAF处理和对照PTCs 24 h后,TCID50检测PPV滴度、real time Q-PCR检测PPV DNA拷贝数、western blotting检测NS1的表达。PPV感染RAPA、3MA处理和对照PTCs 24 h后,流式细胞术检测细胞死亡和凋亡率。在凋亡抑制剂存在的情况下,将PPV感染RAPA、3MA处理和对照PTCs 24 h后,流式细胞术检测细胞死亡率和溶酶体膜通透性,western blotting检测细胞中溶酶体酶Cathepsin D和Cathepsin L。【结果】PPV感染后western blotting结果显示,PPV感染PTCs中VP2持续增加;与对照相比,PPV感染PTCs中LC3Ⅱ显著增加而LC3Ⅰ有所下降,p62随着感染时间延长而增加;荧光显微镜和透射电镜结果显示,PPV感染PTCs中存在代表自噬体的LC3荧光聚集点和0.2～1.0μm的双层膜囊泡结构。UV-PPV感染后,western blotting结果显示,随着感染时间延长UV-PPV感染PTCs中VP2无变化;与PPV感染组相比,UV-PPV感染PTCs中LC3无明显变化,而p62明显降低;荧光显微镜结果显示UV-PPV感染PTCs中存在大量代表自噬溶酶体的黄色荧光聚集点。TCID50、real time Q-PCR和western blotting结果显示RAPA和RAPA+BAF处理PTCs中PPV病毒滴度、DNA拷贝数和NS1水平显著高于3MA、BAF处理和对照细胞。流式细胞术结果显示,PPV感染引起的PTCs死亡,只有部分细胞发生的是凋亡;与对照PTCs相比,PPV感染RAPA处理组PTCs的凋亡率降低,PPV感染3MA处理组PTCs的凋亡率升高。进一步流式细胞术结果显示,在凋亡抑制剂存在的情况下PPV感染24 h引起PTCs死亡;与PPV感染对照PTCs相比,PPV感染RAPA处理组PTCs的死亡率升高、溶酶体膜通透性增加,PPV感染3MA处理PTCs的死亡率降低,溶酶体膜通透性无明显变化;western blotting结果显示,PPV感染PTCs胞浆中有溶酶体酶Cathepsin D和Cathepsin L,3MA处理抑制了PPV引起的溶酶体酶Cathepsin D和Cathepsin L向胞浆中释放。【结论】PPV能够诱导PTCs形成不完全细胞自噬,UV-PPV诱导PTCs形成完全细胞自噬,细胞自噬促进PPV在PTCs中复制。细胞自噬抑制PPV诱导的PTCs凋亡,PPV感染引起的PTCs死亡,只有少部分细胞发生的是凋亡,大部分是以溶酶体损伤为特征的自噬性死亡。

关键词：猪细小病毒 PTCs 细胞自噬

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第17届学术研讨会

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黑龙江动物繁殖 2014年第5期 44-44页

作者：本刊讯

本刊讯:中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第17届学术研讨会于2014年8月23;5日在福建省福州市阿波罗大酒店召开。本次会议由中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会主办,福建农林大学承办,宁波市三生药业有限公司、北京安伯胚胎生物技术中心、上... 详细信息

本刊讯:中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第17届学术研讨会于2014年8月23;5日在福建省福州市阿波罗大酒店召开。本次会议由中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会主办,福建农林大学承办,宁波市三生药业有限公司、北京安伯胚胎生物技术中心、上海卡苏生物科技有限公司、宁波第二激素厂等4家单位协办。会议主要内容为交流和研讨近年来国内动物繁殖与繁殖生物技术领域基础研究、前沿技术及产业开发的

关键词：动物繁殖学中国畜牧兽医学会学术研讨会分会

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犬IL-31受体的多克隆抗体的制备及其治疗效果的评估

犬IL-31受体的多克隆抗体的制备及其治疗效果的评估

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2019中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第十届会员代表大会暨第24次学术研讨会

作者：曲燕燕董汉琦丁一华中农业大学动物医学院

犬特应性皮炎是犬最常见的过敏性皮肤病,以瘙痒、皮肤炎症为主要特征,组织病理表现为皮肤过度角质化,T细胞、嗜酸性粒细胞和肥大细胞浸润。最近发现的细胞因子白介素-31 （IL-31）已被证明在瘙痒诱导过程中具有很重要的作用。IL-31信号... 详细信息

犬特应性皮炎是犬最常见的过敏性皮肤病,以瘙痒、皮肤炎症为主要特征,组织病理表现为皮肤过度角质化,T细胞、嗜酸性粒细胞和肥大细胞浸润。最近发现的细胞因子白介素-31 （IL-31）已被证明在瘙痒诱导过程中具有很重要的作用。IL-31信号通过一个由IL-31受体α（IL-31R）和抑瘤霉素M受体组成的异二聚体传递。本研究的目的是制备抗犬IL-31R多克隆抗体,并评估其对CAD模型犬抑制瘙痒的效果。首先建立了犬特应性皮炎的模型,对151只年龄为6月到3岁的比格犬采血进行IgE浓度的检测,筛选出高IgE的比格犬,对筛选的犬进行粉尘螨皮试,最终选取12只阳性犬作为造模犬。随机分为实验组（n=9）和对照组（n=3）,实验组将粉尘螨(浓度400mg·mL)以0.3ml/只剂量涂抹在犬腋窝和腹股沟处,每周2次,共12周;对照组将生理盐水以0.3ml/只剂量涂抹在腋窝和腹股沟处,每周2次,共12周。造模结束后,每晚8点,对实验组和对照组录制2小时视频,连续8d,统计瘙痒得分,并对两组犬进行皮肤病理切片。用BL21 （DE3）大肠杆菌表达重组IL31R蛋白,纯化蛋白后作为免疫原,免疫犬(剂量为10μg·kg,每15天免疫一次,共4次),于最后一次免疫周期结束后第10d,收集血清。选取5段IL-31R序列上膜外的配体结合位点处的短肽,分别进行合成,偶联BSA后做免疫原,免疫犬(浓度1mg·mL,每次100μL,每15d免疫一次,共4次),于最后一次免疫周期结束后第10天,收集血清。将6种纯化的血清以5.0 mg·kg的剂量静脉注射6只CAD模型犬,另外3只CAD模型犬以5.0 ml·kg的剂量静脉注射生理盐水。每晚8点,对实验组和对照组录制2小时视频,连续8d,统计瘙痒得分。造模结果发现实验组的瘙痒得分显著高于对照组,且实验组皮肤的嗜酸性粒细胞和肥大细胞的数量显著高于对照组,这表明CAD模型造模成功。治疗效果评估结果显示,用制备的血清治疗的CAD模型犬的癌痒得分均显著低于用生理盐水治疗的CAD模型犬的瘙痒得分。因此,本研究结果表明犬源化的抗犬IL-31R多克隆抗体可能通过与天然的IL-31R竞争性结合IL-31,阻断瘙痒通路,显著减少了特应性皮炎犬的瘙痒行为。

关键词： IL-31R 特应性皮炎多克隆抗体 CAD模型

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Fucoidan alleviates dyslipidemia and modulates gut microbiota in high-fat diet-induced mice

Fucoidan alleviates dyslipidemia and modulates gut microbiot...

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十三次全国学术研讨会

作者： Min Liu Lin Ma Qichao Chen Pengyu Zhang Chao Chen Lilin Jia Huajun Li Department of Microecology College of Basic Medical SciencesDalian Medical University Department of Internal Medicine-Cardiovascular Third People's HospitalDalian

Fucoidan is a functional food that possesses various biological *** study aims to determine the effects of fucoidan from Undaria pinnatifida on gut microbiota and dyslipidemia in BALB/c *** vitro,fucoidan could support the growth of three lactic acid bacteria *** test groups with high fat diet(HFD) were gavaged with fucoidan at a dose of 50 mg/kg/day or 100 mg/kg/day for 8 *** decreased total serum cholesterol(P < 0.05),LDL-C(P < 0.05) and liver cholesterol levels(P < 0.05).The steatosis of liver was improved in fucoidan-supplemented *** also decreased the expression of cholesterol related proteins(HMGCR,SREBP-2) in liver(P <0.05).The 16 S rRNA gene sequence analysis of gut microbiota showed that fucoidan increased abundance of Bacteroidetes and Alloprevotella,whereas decreased abundance of Firmicutes,Staphylococcus and *** together,the results suggest fucoidan alleviates dyslipidemia and modulates gut microbiota in HFD-fed mice.

关键词： Fucoidan Highfat diet Dyslipidemia Gut microbiota Lipid metabolism

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