本实验从鸡胚肾组织中克隆到表达鸡氨肽酶N的全长基因,将扩增到的全长鸡氨肽酶N基因连接到pMD18-T载体并转化大肠杆菌感受态TG1,提取重组质粒,经PCR及酶切鉴定阳性后送测序,结果与公布序列符合率达99.48%,与预期表达蛋白符合率99.28%,构建鸡氨肽酶N与原核表达载体pET-32a(+)的重组载体,经鉴定无任何突变,转化大肠杆菌感受态Rosetta G,待菌体生长至A600为0.4~0.6时用1.5 mM IPTG诱导5 h获得最大蛋白表达量,切胶纯化目的蛋白免疫新西兰纯系雌兔,制备得到多克隆抗血清.
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