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440 篇 会议
5 篇 期刊文献

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445 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

434 篇 农学
- 416 篇 兽医学
- 12 篇 畜牧学
- 6 篇 作物学
- 4 篇 林学
9 篇 医学
- 9 篇 基础医学(可授医学...
- 1 篇 临床医学
7 篇 工学
- 6 篇 生物工程
- 1 篇 食品科学与工程（可...
6 篇 理学
- 6 篇 生物学
1 篇 经济学
- 1 篇 应用经济学

主题

24 篇 原核表达
23 篇 序列分析
19 篇 prrsv
16 篇 猪繁殖与呼吸综合...
14 篇 克隆
13 篇 pcr
11 篇 猪流感病毒
10 篇 副猪嗜血杆菌
10 篇 分离鉴定
9 篇 疫苗
9 篇 检测
9 篇 猪
8 篇 混合感染
8 篇 新城疫病毒
8 篇 分离
8 篇 应用
8 篇 猪细小病毒
8 篇 防控技术
8 篇 口蹄疫病毒
7 篇 免疫原性

机构

27 篇 广西兽医研究所
24 篇 吉林大学
23 篇 华南农业大学
23 篇 军事医学科学院军...
20 篇 广西大学
18 篇 河南农业大学
14 篇 河南省动物疫病预...
11 篇 山东农业大学
10 篇 南京农业大学
10 篇 青岛农业大学
10 篇 山东省滨州畜牧兽...
10 篇 华中农业大学
9 篇 湖南农业大学
9 篇 中国农业大学
9 篇 四川大学生命科学...
8 篇 南京天邦生物科技...
8 篇 云南农业大学
7 篇 黑龙江八一农垦大...
7 篇 北京市农林科学院...
7 篇 山东绿都生物科技...

作者

23 篇 金宁一
17 篇 李斌
17 篇 梁家幸
17 篇 赵武
16 篇 蒋玉雯
16 篇 黄安国
16 篇 姚瑞英
16 篇 梁保忠
15 篇 沈志强
15 篇 鲁会军
13 篇 丁壮
12 篇 黄伟坚
12 篇 王红宁
11 篇 吴志明
11 篇 闫若潜
11 篇 罗满林
10 篇 杨霞
10 篇 母连志
10 篇 高荣
10 篇 王川庆

语言

442 篇 中文
3 篇 英文

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猪繁殖与呼吸综合征病毒HBKM2株ORF5基因的克隆与原核表达

猪繁殖与呼吸综合征病毒HBKM2株ORF5基因的克隆与原核表达

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：梁望旺伍锐杨克礼刘泽文熊忠良段正赢邓均华徐涤平湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

本研究采用RT-PCR方法扩增了猪繁殖与呼吸综合征病毒临床分离株(HBKM2)的ORF5全基因,并进行了测序分析,根据ORF5的结构特点,进一步扩增了截去N端信号肽序列的ORF5(nsORF5),并将其克隆到pGEX-KG原核表达载体,构建了重组质粒pKG-ns5,经酶... 详细信息

本研究采用RT-PCR方法扩增了猪繁殖与呼吸综合征病毒临床分离株(HBKM2)的ORF5全基因,并进行了测序分析,根据ORF5的结构特点,进一步扩增了截去N端信号肽序列的ORF5(nsORF5),并将其克隆到pGEX-KG原核表达载体,构建了重组质粒pKG-ns5,经酶切和测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blot分析表明:克隆的nsORF5基因与谷胱甘肤转移酶(GST)基因获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST-nsGP5分子量约为43KDa,并具有反应活性.本研究为进一步研究PRRSV GP5蛋白的功能及新型疫苗、血清学诊断方法的研制奠定了基础.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 囊膜蛋白(GP5) 克隆原核表达

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猪瘟强毒和疫苗毒RT-nPCR鉴别诊断方法的建立与初步应用

猪瘟强毒和疫苗毒RT-nPCR鉴别诊断方法的建立与初步应用

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：李安崔言顺沈志强谢金文王金良曲光刚李峰李建亮山东省滨州畜牧兽医研究院山东农业大学动物科技学院

对GenBank中登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析,在其高度保守区设计一对通用引物,扩增片段为609bp,并在该对引物扩增区域内设计针对弱毒疫苗的特异引物,扩增片段为237bp.该方法能将我国流行的不同基因... 详细信息

对GenBank中登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析,在其高度保守区设计一对通用引物,扩增片段为609bp,并在该对引物扩增区域内设计针对弱毒疫苗的特异引物,扩增片段为237bp.该方法能将我国流行的不同基因亚群的猪瘟病毒强毒与疫苗弱毒完全区分开采,且不与其他猪源病毒和牛病毒性腹泻病病毒发生非特异反应.应用本研究建立的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法可以及早对猪瘟做出准确诊断,并可将强毒感染猪迅速从弱毒疫苗免疫猪群中筛选出来,减少了未感染免疫猪被误杀的可能性。

关键词：猪瘟病毒反转录-复合套式聚合酶链式反应兔化弱毒疫苗鉴别

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不同代次的猪细小病毒(PPVs-1株)NS1基因的克隆与序列分析

不同代次的猪细小病毒(PPVs-1株)NS1基因的克隆与序列分析

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：谢巧李春华张婉华王英蒋凤英张春玲上海市农业科学院畜牧兽医研究所江西农业大学

根据GenBank中猪细小病毒PPV NADL-2株NS1序列设计了一对引物,以本课题组保存的PPVs-1分离株不同传代代次的DNA为模板,进行PCR扩增,将扩增产物分别克隆到pGEM-T载体中进行测序.结果表明,扩增片段长约2.2kb,包含完整的NS1基因,共编码662... 详细信息

根据GenBank中猪细小病毒PPV NADL-2株NS1序列设计了一对引物,以本课题组保存的PPVs-1分离株不同传代代次的DNA为模板,进行PCR扩增,将扩增产物分别克隆到pGEM-T载体中进行测序.结果表明,扩增片段长约2.2kb,包含完整的NS1基因,共编码662个氨基酸.应用DNAStar软件进行序列分析,结果显示所有代次的NS1核苷酸同源性在99.4%以上,氨基酸同源性在98.5%以上;PPVs-1分离株在传代致弱的过程中,NS1基因出现了一些变异,有4处较为一致的突变,即1052位的C→T、1636位G→A、1717位A→G、1732位T→G,对应的氨基酸变化分别为Thr→Met、Val→Met、Asn→Asp、Ser→Ala,可能是PPVs-1在ST细胞上传代致弱的分子基础之一.

关键词：猪细小病毒不同代次 NS1基因序列分析

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猪细小病毒(PPV)SD1株NS1基因的克隆与原核表达

猪细小病毒(PPV)SD1株NS1基因的克隆与原核表达

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：谢金文沈志强王金良任艳玲管宇苗立中山东省畜禽用蜂胶疫苗工程技术研究中心山东省滨州畜牧兽医研究院

设计合成1对PCR引物,应用PCR技术扩增出猪细小病毒SD1株NS1基因全序列,并将其克隆到pMD18-T载体中进行序列测定和分析.结果表明,测得结果与已发表的登录号为AY583318、AY684866、D00623、DQ675456、M38367和U44978的猪细小病毒相应基因... 详细信息

设计合成1对PCR引物,应用PCR技术扩增出猪细小病毒SD1株NS1基因全序列,并将其克隆到pMD18-T载体中进行序列测定和分析.结果表明,测得结果与已发表的登录号为AY583318、AY684866、D00623、DQ675456、M38367和U44978的猪细小病毒相应基因序列核苷酸的同源性分别为99.4%、98.6%、97.3%、98.8%、98.9%和98.7%,表明NS1基因具有高度保守性.进一步插入到原核表达载体中,并将构建的pET 30a/NS1转化*** BL21(DE3),IPTG诱导培养,提取的蛋白质经SDS-PAGE电泳,获得分子量约为86kDa的蛋白带,结果表明,所克隆的猪细小病毒NS1基因在原核细胞中得到表达,主要存在于包涵体中.

关键词：猪细小病毒 NS1基因克隆原核表达

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禽传染性支气管炎病毒疫苗株H120全基因组序列测定分析

禽传染性支气管炎病毒疫苗株H120全基因组序列测定分析

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张毅王红宁王霆高荣张云飞张安云樊汶樵田浪四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病与食品安全四川省重点实验室”

本研究测定了IBV疫苗株H120的全基因组序列,通过与GenBank上公布的IBV全基因组序列进行比对,对其分子特征及系统进化分析。设计18对引物,用RT-PCR方法对IBV疫苗株H120的全基因组进行分段扩增、克隆和序列测定,测定结果表明,H120基因组全... 详细信息

本研究测定了IBV疫苗株H120的全基因组序列,通过与GenBank上公布的IBV全基因组序列进行比对,对其分子特征及系统进化分析。设计18对引物,用RT-PCR方法对IBV疫苗株H120的全基因组进行分段扩增、克隆和序列测定,测定结果表明,H120基因组全长27631bp(不包括polyA),包含有10个开放阅读框(ORF).H120全基因组序列与GenBank上公布的13株IBV基因组序列的同源率在84.6～94.5%之间,与ArkDPI11同源性最高为94.5%.本研究选择具有代表性的IBV H120疫苗株进行全基因组测序及序列分析,为对其分子特征及IBV的系统进化分析提供基础.

关键词：禽传染性支气管炎病毒疫苗株H120 基因组序列分析

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放线杆菌外膜蛋白酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活与毒性检测

放线杆菌外膜蛋白酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活与毒性检测

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：倪宏波刘思国杜艳芬林靖凯刘慧芳王春来司薇常月红彭玮王聃赫明雷中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江八一农垦大学动物科技学院

目的:构建用于酵母双杂交系统的诱饵质粒载体pGBKT7-omp(胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白),并检测其是否具有自身激活及毒性作用.方法:从胸膜肺炎放线杆菌提取基因组DNA,用PCR方法获得omp,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7... 详细信息

目的:构建用于酵母双杂交系统的诱饵质粒载体pGBKT7-omp(胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白),并检测其是否具有自身激活及毒性作用.方法:从胸膜肺炎放线杆菌提取基因组DNA,用PCR方法获得omp,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-omp在酵母双杂交系统中的自激活和毒性作用.结果:实验成功构建了诱饵质粒载体pGBKT7-omp,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活及毒性作用.结论:pGBKT7-omp可应用在酵母双杂交系统中,寻找猪肺泡上皮细胞cDNA文库中与omp相互作用的蛋白质,为筛选胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白与肺泡上皮细胞相互作用的蛋白奠定了重要基础。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白诱饵质粒自激活作用毒性作用

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猪传染性胃肠炎和流行性腹泻病毒的分离与鉴定

猪传染性胃肠炎和流行性腹泻病毒的分离与鉴定

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王川庆陈陆杨霞董加才常洪涛王新卫河南农业大学禽病研究所

在临床综合诊断和PCR确诊的基础上,通过细胞培养技术,作者从7个发病猪场的病料中分离到TGE和PED混合感染的病毒株(HN-TGE-PED)。细胞培养结果表明,在PK-15细胞、Vero细胞上的多次传代和蚀斑克隆不能将二者分离开,两种病毒始终处于混合... 详细信息

在临床综合诊断和PCR确诊的基础上,通过细胞培养技术,作者从7个发病猪场的病料中分离到TGE和PED混合感染的病毒株(HN-TGE-PED)。细胞培养结果表明,在PK-15细胞、Vero细胞上的多次传代和蚀斑克隆不能将二者分离开,两种病毒始终处于混合感染状态。随后分别对混合分离物HN-TGE-PED中的TGEV部分S基因和PEDV M基因进行了克隆、测序、分析,结果表明TGEV S基因同猪胃-流二联弱毒活疫苗株之间的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.0%和97.6%,在进化关系中与四川分离株(DQ443743)之间的距离最近;PEDV M基因同猪胃-流二联弱毒活疫苗株之间的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.7%和97.0%,在进化关系中与同猪胃-流二联弱毒活疫苗株之间距离最近。

关键词：同源性氨基酸弱毒活疫苗猪传染性胃肠炎流行性腹泻病毒分离与鉴定

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检测囊虫循环抗原胶体金试条的研制与初步应用

检测囊虫循环抗原胶体金试条的研制与初步应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘玉唐雨德王永山王长军王平冷欣彦南京军区疾病预防控制中心江苏省农业科学院兽医所南京农业大学动物医学院

目的研制一种简便快速检测囊虫循环抗原(CA)的新方法.方法以部分纯化囊虫抗原免疫BALB/c小鼠制备抗CA单克隆抗体(McAb),经筛选获得5株能稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株.用制备的McAb两两配对,制备了囊虫CA免疫胶体金快速诊断试条.结果以1A5... 详细信息

目的研制一种简便快速检测囊虫循环抗原(CA)的新方法.方法以部分纯化囊虫抗原免疫BALB/c小鼠制备抗CA单克隆抗体(McAb),经筛选获得5株能稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株.用制备的McAb两两配对,制备了囊虫CA免疫胶体金快速诊断试条.结果以1A5和1B6配对的试条对人体囊虫CA、囊虫CA标准抗原以及63份囊虫病患者血清、9份脑囊虫病患者脑脊液的检测结果均为阳性,对弓形虫病感染者、包虫病患者及非疫区献血员血清的检测结果均为阴性;与酶联免疫吸附试验(ELISA)的平行对比试验表明,试条检测敏感性与ELISA的敏感符合率为97.03%.结论研制的免疫胶体金诊断试条可用于人体囊虫病CA的特异性诊断和流行病学调查.

关键词：单克隆抗体(McAb) 囊虫循环抗原(CA) 金免疫层析(GICA)

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轮状病毒VP7基因与LTB基因的融合表达

轮状病毒VP7基因与LTB基因的融合表达

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王延东杨少华高运东郭学军杨宏军刘晓王长法胡国良仲跻峰何洪彬山东省农科院奶牛研究中心江西农业大学动物科学技术学院军事医学科学院军事兽医研究所

牛轮状病毒是引起犊牛腹泻的主要病原体,VP7是轮状病毒的主要外壳蛋白和主要保护性抗原,是研制基因工程疫苗的首选。本实验首次把包含3个主要的抗原性区域的牛轮状病毒野毒株的VP7基因片段与LTB(大肠杆菌不耐热性肠毒素)联合,并在大肠... 详细信息

牛轮状病毒是引起犊牛腹泻的主要病原体,VP7是轮状病毒的主要外壳蛋白和主要保护性抗原,是研制基因工程疫苗的首选。本实验首次把包含3个主要的抗原性区域的牛轮状病毒野毒株的VP7基因片段与LTB(大肠杆菌不耐热性肠毒素)联合,并在大肠杆菌中得到了高效表达,表达产物经镍离子螯合次氨基三乙酸(Ni-NTA)亲和层析纯化,得到了高纯度的表达蛋白。牛轮状病毒属于肠道病毒,局部粘膜免疫是机体抵抗其感染的主要途径,国内研究表明LTB是一种公认的新型粘膜佐剂,与VP7融合表达可增强其粘膜免疫效果.本研究为牛轮状病毒基因工程疫苗的研究奠定了基础。

关键词：牛轮状病毒 VP7 LTB

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兔出血症病毒次结构蛋白(VP2)的生物学功能研究

兔出血症病毒次结构蛋白(VP2)的生物学功能研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘光清倪征陈柳中国农业科学院上海兽医研究所浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所

兔出血症病毒(RHDV)的基因组仅编码两个结构蛋白,其中一种为衣壳蛋白(VP60),另一种为次结构蛋白(VP2)。目前,对衣壳蛋白的生物学功能已基本清楚。但是,关于次结构蛋白的生物学功能还不是很清楚。为此,本研究利用反向遗传学技术结合体外... 详细信息

兔出血症病毒(RHDV)的基因组仅编码两个结构蛋白,其中一种为衣壳蛋白(VP60),另一种为次结构蛋白(VP2)。目前,对衣壳蛋白的生物学功能已基本清楚。但是,关于次结构蛋白的生物学功能还不是很清楚。为此,本研究利用反向遗传学技术结合体外表达技术,系统研究了该蛋白的生物学功能。研究结果表明,RHDV的基因组缺失次结构蛋白(VP2)后,病毒的侵染性有所降低,但是病毒基因组的复制能力和衣壳蛋白的表达水平有所提高,说明VP2不是维持RHDV侵染性所必需的蛋白。体外研究也表明,VP2的缺失并不影响病毒样颗粒的组装,提示该蛋白不是组成病毒衣壳的组成成分。通过对接种VP2的细胞进行DAPI染色和DNA片断分析研究,发现VP2具有诱导宿主细胞凋亡的功能.由此,可以推测VP2可能在RHDV的致病机制过程发挥重要作用.

关键词：结构蛋白基因组 VP2 兔出血症病毒生物学功能

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