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440 篇 会议
5 篇 期刊文献

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445 篇 电子文献
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日期分布

学科分类号

434 篇 农学
- 416 篇 兽医学
- 12 篇 畜牧学
- 6 篇 作物学
- 4 篇 林学
9 篇 医学
- 9 篇 基础医学(可授医学...
- 1 篇 临床医学
7 篇 工学
- 6 篇 生物工程
- 1 篇 食品科学与工程（可...
6 篇 理学
- 6 篇 生物学
1 篇 经济学
- 1 篇 应用经济学

主题

24 篇 原核表达
23 篇 序列分析
19 篇 prrsv
16 篇 猪繁殖与呼吸综合...
14 篇 克隆
13 篇 pcr
11 篇 猪流感病毒
10 篇 副猪嗜血杆菌
10 篇 分离鉴定
9 篇 疫苗
9 篇 检测
9 篇 猪
8 篇 混合感染
8 篇 新城疫病毒
8 篇 分离
8 篇 应用
8 篇 猪细小病毒
8 篇 防控技术
8 篇 口蹄疫病毒
7 篇 免疫原性

机构

27 篇 广西兽医研究所
24 篇 吉林大学
23 篇 华南农业大学
23 篇 军事医学科学院军...
20 篇 广西大学
18 篇 河南农业大学
14 篇 河南省动物疫病预...
11 篇 山东农业大学
10 篇 南京农业大学
10 篇 青岛农业大学
10 篇 山东省滨州畜牧兽...
10 篇 华中农业大学
9 篇 湖南农业大学
9 篇 中国农业大学
9 篇 四川大学生命科学...
8 篇 南京天邦生物科技...
8 篇 云南农业大学
7 篇 黑龙江八一农垦大...
7 篇 北京市农林科学院...
7 篇 山东绿都生物科技...

作者

23 篇 金宁一
17 篇 李斌
17 篇 梁家幸
17 篇 赵武
16 篇 蒋玉雯
16 篇 黄安国
16 篇 姚瑞英
16 篇 梁保忠
15 篇 沈志强
15 篇 鲁会军
13 篇 丁壮
12 篇 黄伟坚
12 篇 王红宁
11 篇 吴志明
11 篇 闫若潜
11 篇 罗满林
10 篇 杨霞
10 篇 母连志
10 篇 高荣
10 篇 王川庆

语言

442 篇 中文
3 篇 英文

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细胞病变法与免疫捕获ELISA法测定小反刍兽疫活疫苗TCID50结果的比较

细胞病变法与免疫捕获ELISA法测定小反刍兽疫活疫苗TCID50结果的...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王玉红支海兵黄炯李黎薛英刘宏贺笋朱刚李延涛王红巧新疆天康畜牧生物技术股份有限公司中国兽医药品监察所新疆畜牧科学院

参照中国兽医药品监察所提出的小反刍兽疫活疫苗制造及检验试行规程(草案),对新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产的16批小反刍兽疫弱毒冻干活疫苗进行病毒含量测定,通过观察细胞病变(CPE)及免疫捕获ELISA双重检验,每头份(1ml)病毒含... 详细信息

参照中国兽医药品监察所提出的小反刍兽疫活疫苗制造及检验试行规程(草案),对新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产的16批小反刍兽疫弱毒冻干活疫苗进行病毒含量测定,通过观察细胞病变(CPE)及免疫捕获ELISA双重检验,每头份(1ml)病毒含量均高于103TCID50,达到规程要求。在疫苗检验过程中,考虑规程中检验程序比较麻烦,历时较长(在试验比较顺利的情况下,一批苗最终得到结果至少花费8天),并且还受到细胞质量等因素的影响,同时还对每批成品疫苗直接进行捕获ELISA(病毒不接种细胞)测定,对不同时期的病毒细胞液也同时作了大量的测定,以期从中找到一定的相关性,从而达到简化检验步骤,缩短检验时间的目的。结果显示:16个冻干疫苗样品,每个样品重复两次,两组数据的相关性r=0.9213;若再加16个病毒液样品,两组数据的相关性r=0.8751,这可能由于病毒液中有时可能有细胞,导致取样没有成品疫苗均匀的原因。通过两组数据的比较,可以认为直接用捕获ELISA法对成品苗检测是比较可行可靠的。

关键词：细胞病变免疫捕获ELISA 小反刍兽疫弱毒活疫苗 TCID50

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应用焦磷酸测序技术检测猪流感病毒金刚烷胺耐药性的分子标签

应用焦磷酸测序技术检测猪流感病毒金刚烷胺耐药性的分子标签

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘华雷王志亮吕艳黄伟坚鄢明华张维李明义王清华李金明郑东霞赵云玲孙承英中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心广西大学动物科学技术学院天津市畜牧兽医研究所

流感病毒M2蛋白五个关键位点氨基酸残基(第26、27、30、31和34位)中的任何一个发生突变会导致抗流感病毒药物中金刚烷胺抗药性的产生。本研究利用焦磷酸测序技术对2004年～2008年国内分离的10株猪流感病毒进行了鉴定,并初步进行了抗药... 详细信息

流感病毒M2蛋白五个关键位点氨基酸残基(第26、27、30、31和34位)中的任何一个发生突变会导致抗流感病毒药物中金刚烷胺抗药性的产生。本研究利用焦磷酸测序技术对2004年～2008年国内分离的10株猪流感病毒进行了鉴定,并初步进行了抗药性分析。结果表明基于M2蛋白基因保守区序列建立的焦磷酸测序技术能用于国内猪流感病毒的快速检测,且具有较好的特异性和重复性。抗药性分析表明10株猪流感病毒国内分离株中5株H1N1分离株全部耐药,主要存在M2蛋白的V27T、V27I或S31N位点的突变,而4株H3N2和1株H9N2猪流感病毒分离株在M2蛋白5个关键位点上均未出现变异,表明其对金刚烷胺敏感。

关键词：猪流感病毒焦磷酸测序抗药性分析

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*** LTb与PRRSV gp5融合基因原核表达及小鼠免疫效果研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：袁秀芳刘焕王一成徐丽华张存浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

采用PCR重叠延伸技术将LTb和PRRSV ORF5基因通过柔性连接进行融合后,克隆入原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点中,经鉴定后得到重组质粒pET-LTb-gp5,将重组质粒转化到受体菌BL21(DE3)中,并用诱导剂IPTG进行诱导表达,经15%SDS-PAGE电泳... 详细信息

采用PCR重叠延伸技术将LTb和PRRSV ORF5基因通过柔性连接进行融合后,克隆入原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点中,经鉴定后得到重组质粒pET-LTb-gp5,将重组质粒转化到受体菌BL21(DE3)中,并用诱导剂IPTG进行诱导表达,经15%SDS-PAGE电泳检测,表达得到的蛋白大小为26KD.经WesternBlotting分析,表达蛋白均能与PRRSV阳性猪血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应.为了比较猪繁殖与呼吸综合症ORF5基因的原核表达蛋白gp5蛋白及融合表达的LTb-gp5蛋白的免疫效果.将表达产物gp5蛋白及融合表达的LTb-gp5蛋白免疫6-8周龄ICR小鼠,并设对照组,用间接ELISA法和MTT法检测小鼠血清中特异性抗体水平以及脾脏中T,B淋巴细胞增殖功能.结果gp5蛋白以肌肉注射途径免疫效果较好;三免后抗体达到较高水平,其中LTb-gp5 IM与gp5乳化组之间差异不显著,而这两组与gp5 IM差异显著;LTb-gp5 IM、gp5乳化组和gp5 IM均能够诱导脾脏T,B淋巴细胞增殖.

关键词： LTb PRRSV gp5 克隆表达免疫

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猴源细小病毒的分离鉴定

猴源细小病毒的分离鉴定

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：杨松涛王淑君冯浩张仁舟曾林夏志平邹啸环王承宇连海孙兆增孟轲音王泽夏咸柱军事医学科学院军事兽医研究所军事医学科学院实验动物中心

2008年我国某实验动物养殖基地发生猴传染性腹泻并引起死亡,临床症状类似犬猫细小病毒性肠炎。采集发病猴肠内容物,通过细胞培养进行病毒分离。采用血凝试验、PCR检测、免疫组织化学检测、电镜观察、直接免疫荧光检测、理化学鉴定、动... 详细信息

2008年我国某实验动物养殖基地发生猴传染性腹泻并引起死亡,临床症状类似犬猫细小病毒性肠炎。采集发病猴肠内容物,通过细胞培养进行病毒分离。采用血凝试验、PCR检测、免疫组织化学检测、电镜观察、直接免疫荧光检测、理化学鉴定、动物感染实验等方法对分离病毒进行了系统鉴定。结果F81细胞盲传三代后发生细小病毒样细胞病变,此分离病毒对猪红细胞的血凝效价为1:512;用845bp细小病毒通用引物进行PCR检测结果阳性;免疫组化检测肠绒毛上皮细胞呈细小病毒阳性反应;电镜负染和超薄切片观察见典型的细小病毒样粒子;直接免疫荧光检测结果阳性。用该病毒实验感染5只家猫,7日后相继发病死亡。序列分析结果表明,10个关键氨基酸位点中有8个与FPV相同,有2个与CPV相同。认为该病毒分离株为FPV变异株。该病毒是如何跨种传播给猴并发生致病性突变的尚需进一步研究。

关键词：细小病毒 FPV 猴分离

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B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株HA基因重组3型腺病毒的构建

B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株HA基因重组3型腺病毒的构建

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：鲁俊鹏田新贵罗满林李海涛周志超周荣华南农业大学兽医学院广州市儿童医院中心实验室

目的:构建包含有B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株血凝素(HA)基因的重组3型腺病毒.方法:用PCR方法扩增得到HA基因,酶切后克隆至3型腺病毒穿梭质粒pSK-CMV,构建重组穿梭质粒pSK-CMV-HA,然后在大肠杆菌BJ5183内进行经Not I和EcoR V线性化... 详细信息

目的:构建包含有B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株血凝素(HA)基因的重组3型腺病毒.方法:用PCR方法扩增得到HA基因,酶切后克隆至3型腺病毒穿梭质粒pSK-CMV,构建重组穿梭质粒pSK-CMV-HA,然后在大肠杆菌BJ5183内进行经Not I和EcoR V线性化的pSK-CMV-HA和经RsrⅡ线性化的骨架质粒pBRAdV3△E3的同源重组,AsiS I酶切线性化重组腺病毒质粒pBRAdV3△E3-HA后脂质体法转染HEp-2细胞,进行病毒包装和增殖后得到重组腺病毒rAdv3△E3-HA,并且通过病变观察、扫描电镜、RT-PCR、免疫细胞化学方法对基因组的包装和HA基因的表达进行检测.结果:将HA基因克隆入psK-CMV获得重组穿梭质粒psK-CMV-HA,线性化的pSK-CMV-HA与pBRAdv3△E3同源重组后获得pBRAdV3△E3-HA,线性化的pBRAdV3△E3-HA转染HEp-2细胞观察到细胞病变和HA基因的表达.结论:成功构建了带有HA基因的重组腺病毒rAdV3△E3-HA,为B型流感病毒-3型腺病毒二联活苗的研究提供了依据。

关键词： B型流感病毒 HA基因重组腺病毒

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不同日龄雏鸡各组织中氨肽酶N酶活性比较

不同日龄雏鸡各组织中氨肽酶N酶活性比较

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：明晓波张颖谭睿尹鑫魏萍东北农业大学动物医学学院

本实验通过采取5个不同日龄雏鸡的心、肝、脾、肺、肾、腺胃、胸肌、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、法氏囊等十二个组织器官,提取各组织中的总蛋白,通过BCA试剂盒测定各组织的蛋白浓度,使等量各组织总蛋白与等量Leu-PNA在37℃水浴中反应... 详细信息

本实验通过采取5个不同日龄雏鸡的心、肝、脾、肺、肾、腺胃、胸肌、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、法氏囊等十二个组织器官,提取各组织中的总蛋白,通过BCA试剂盒测定各组织的蛋白浓度,使等量各组织总蛋白与等量Leu-PNA在37℃水浴中反应一小时,然后采用分光光度计测定反应前后反应体系吸光度的改变.以这一改变反映氨肽酶N酶活性,可以揭示氨肽酶N在不同组织中的含量差异.由于氨肽酶N可能作为IBV的受体,本研究旨在揭示氨肽酶的自然分布状况与IBV感染雏鸡的组织嗜性之间的关系。结果表明,鸡氨肽酶N作为传染性支气管炎病毒的可能受体之一,广泛分布于雏鸡的各个组织中,氨肽酶N在不同日龄雏鸡各个组织中的存在差异且随着日龄改变存在着一定的变化规律,随着日龄的增长,肾脏、腺胃、肺脏、法氏囊、胸肌、心脏、肝脏中氨肽酶的含量逐渐降低,十二指肠、空肠、回肠、盲肠和脾脏内氨肽酶N的含量逐渐增高,与传染性支气管炎病毒组织嗜性基本一致.

关键词：蛋白质提取总蛋白浓度测定吸光度氨肽酶N 酶活性测定组织嗜性传染性支气管炎病毒细胞受体

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猪圆环病毒2型感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响

猪圆环病毒2型感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：司兴奎张济培陈建红顾万军马春全佛山科学技术学院广东省高校预防兽医学重点实验室

为明确PCV2感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响,采用阻断ELISA方法对单独接种猪伪狂犬疫苗组(A组,n=3)及PCV2人工感染3周后接种猪伪狂犬疫苗组(PA组,n=5)后不同时相血清中的猪伪狂犬gB抗体进行检测;同时对不同时相前腔静脉血进行CD4/CD8流... 详细信息

为明确PCV2感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响,采用阻断ELISA方法对单独接种猪伪狂犬疫苗组(A组,n=3)及PCV2人工感染3周后接种猪伪狂犬疫苗组(PA组,n=5)后不同时相血清中的猪伪狂犬gB抗体进行检测;同时对不同时相前腔静脉血进行CD4/CD8流式细胞术及血常规分析.结果表明,在PCV2感染后2周至5周间,A组白细胞含量均高于PA组,随后PA组白细胞恢复至与A组略高的正常水平;在整个试验中,除接种猪伪狂犬疫苗后1和9周(WPI)外的所有时相PA组的淋巴细胞含量均略高于A组;PCV2感染后可使记忆/激活Th细胞数量略有升高,幼稚型Th细胞含量的下降;PCV2感染后2-7周PA组Tc细胞均高于A组,在9WPI PA组Tc细胞数量显著下降(P<0.05);除9WPI外,A组的S/N值均低于PA组.结果提示,PCV2感染看降低机体产生针对PRV gB特异性抗体水平,且在一定程度上降低了幼稚型Th细胞及Tc细胞含量.

关键词：猪圆环病毒2型猪伪狂犬疫苗免疫应答阻断ELISA 流式细胞术

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H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白氨基酸差异与病毒抗原性差异的相关性研究

H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白氨基酸差异与病毒抗原性差异的相关性研...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：尹燕博张毅于明科李明义徐守振王建琳李吉达许江涛刘兴彩孙婷婷郭妍妍韩丽敏青岛农业大学动物科技学院中国农业大学动物医学院美国加州大学戴维斯分校中国动物卫生与流行病中心青岛澳兰百特生物工程有限公司

本试验从全国各地分离到的,已知HA基因序列的47株H9N2亚型禽流感病毒中,根据其HA蛋白氨基酸序列的差异,挑选出有代表性的12个毒株,比较这些HA蛋白的氨基酸序列的差异。用SPF鸡制备出这些毒株的免疫血清,通过交叉HI试验,计算出不同毒株... 详细信息

本试验从全国各地分离到的,已知HA基因序列的47株H9N2亚型禽流感病毒中,根据其HA蛋白氨基酸序列的差异,挑选出有代表性的12个毒株,比较这些HA蛋白的氨基酸序列的差异。用SPF鸡制备出这些毒株的免疫血清,通过交叉HI试验,计算出不同毒株间的抗原相关系数。通过对HA蛋白氨基酸序列的分析及抗原相关性的分析,我们发现这些毒株在抗原位点处,在第183位和188位氨基酸有所差异。通过对HA蛋白氨基酸序列差异性和抗原性差异的分析我们发现,二者呈正相关。HA蛋白氨基酸序列差异达到一定程度却可以造成抗原性的改变,当HA蛋白氨基酸序列差异大于7%时,抗原性的改变比较明显,而当HA蛋白氨基酸序列差异小于3.6%时,抗原性无明显差异。

关键词： H9N2 AIV HA蛋白抗原性相关性差异

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猪细小病毒自然弱毒N株(PPV-N株)VP1基因的扩增与生物信息学分析

猪细小病毒自然弱毒N株(PPV-N株)VP1基因的扩增与生物信息学分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：赵武李斌梁家幸梁保忠白安斌姚瑞英黄安国何颖蒋玉雯广西兽医研究所

对猪细小病毒自然弱毒PPV-N株VP1基因扩增及测序,利用生物信息学技术预测VP1蛋白的二级结构与B细胞抗原表位以及分析该蛋白的氨基酸差异位点及密码子偏爱性.结果表明,PPV-N株VP1基因与弱毒参考毒株NADL-2VP1基因同源性最高,亲缘关系最近... 详细信息

对猪细小病毒自然弱毒PPV-N株VP1基因扩增及测序,利用生物信息学技术预测VP1蛋白的二级结构与B细胞抗原表位以及分析该蛋白的氨基酸差异位点及密码子偏爱性.结果表明,PPV-N株VP1基因与弱毒参考毒株NADL-2VP1基因同源性最高,亲缘关系最近,为PPV-N株和NADL-2株同属弱毒株提供了分子生物学依据.PPV-N株VP1蛋白的二级结构较为复杂,以β-折叠为主,并有较多的转角和无规则卷曲区域,在序列的20-56,61-80,86-130,136-188区域为B细胞抗原表位的优势区域.PPV强、弱毒株VP1蛋白存在5个氨基酸差异位点(T-365-I,G-528-D,Q-533-H,P-586-S,K-715-R),这些位点处氨基酸残基抗原性与毒力成正相关.PPV-N株VP1蛋白在A、C、E、G、H、I、K、N、Q、R、S、T、V和Y氨基酸于密码子选择上存在一定的偏爱性.

关键词： PPV-N株 VP1基因扩增生物信息学分析

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猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立

猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：逯晓敏冯志新刘茂军吴叙苏甘源张映邵国青山西农业大学动物科技学院江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏省生物兽药筛选服务中心

根据GeneBank中登录的猪肺炎支原体P36(L-乳酸脱氢酶)全基因序列,设计合成了2对引物,建立了适合猪肺炎支原体检测的套式PCR方法.运用该方法对猪肺炎支原体(168株)培养物进行了检测.结果显示,该培养物能扩增出427bp的目的条带.特异性试... 详细信息

根据GeneBank中登录的猪肺炎支原体P36(L-乳酸脱氢酶)全基因序列,设计合成了2对引物,建立了适合猪肺炎支原体检测的套式PCR方法.运用该方法对猪肺炎支原体(168株)培养物进行了检测.结果显示,该培养物能扩增出427bp的目的条带.特异性试验结果表明:鸡毒支原体、猪絮状支原体、猪鼻支原体、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪链球菌2型和猪流感病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组DNA或cDNA扩增结果均为阴性.该方法的敏感性高,最低可以检测出10个猪肺炎支原体。建立的套式PCR方法可以用于猪肺炎支原体的临床诊断检测和分子流行病学调查。

关键词：猪肺炎支原体 P36 套式PCR

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