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9 篇 医学
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- 1 篇 临床医学
7 篇 工学
- 6 篇 生物工程
- 1 篇 食品科学与工程（可...
6 篇 理学
- 6 篇 生物学
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主题

24 篇 原核表达
23 篇 序列分析
19 篇 prrsv
16 篇 猪繁殖与呼吸综合...
14 篇 克隆
13 篇 pcr
11 篇 猪流感病毒
10 篇 副猪嗜血杆菌
10 篇 分离鉴定
9 篇 疫苗
9 篇 检测
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8 篇 新城疫病毒
8 篇 分离
8 篇 应用
8 篇 猪细小病毒
8 篇 防控技术
8 篇 口蹄疫病毒
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机构

27 篇 广西兽医研究所
24 篇 吉林大学
23 篇 华南农业大学
23 篇 军事医学科学院军...
20 篇 广西大学
18 篇 河南农业大学
14 篇 河南省动物疫病预...
11 篇 山东农业大学
10 篇 南京农业大学
10 篇 青岛农业大学
10 篇 山东省滨州畜牧兽...
10 篇 华中农业大学
9 篇 湖南农业大学
9 篇 中国农业大学
9 篇 四川大学生命科学...
8 篇 南京天邦生物科技...
8 篇 云南农业大学
7 篇 黑龙江八一农垦大...
7 篇 北京市农林科学院...
7 篇 山东绿都生物科技...

作者

23 篇 金宁一
17 篇 李斌
17 篇 梁家幸
17 篇 赵武
16 篇 蒋玉雯
16 篇 黄安国
16 篇 姚瑞英
16 篇 梁保忠
15 篇 沈志强
15 篇 鲁会军
13 篇 丁壮
12 篇 黄伟坚
12 篇 王红宁
11 篇 吴志明
11 篇 闫若潜
11 篇 罗满林
10 篇 杨霞
10 篇 母连志
10 篇 高荣
10 篇 王川庆

语言

442 篇 中文
3 篇 英文

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猪圆环病毒2型ORF2与猪γ-干扰素基因的重组腺病毒转移载体的构建

猪圆环病毒2型ORF2与猪γ-干扰素基因的重组腺病毒转移载体的构建

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘根梅陈瑞爱韩静芳罗满林华南农业大学广东大华农动物保健品股份有限公司

以重组腺病毒转移载体P-ORF2,P-γ-IFN为模板,应用Primer5.0设计了2对引物,其中一对引物P1,P2用于猪圆环病毒2型ORF2基因的扩增,另一对引物P3,P4则用于γ-IFN基因的扩增。再以所扩增的2段基因为模板,P1,P4为引物扩增融合基因ORF2-γ-IF... 详细信息

以重组腺病毒转移载体P-ORF2,P-γ-IFN为模板,应用Primer5.0设计了2对引物,其中一对引物P1,P2用于猪圆环病毒2型ORF2基因的扩增,另一对引物P3,P4则用于γ-IFN基因的扩增。再以所扩增的2段基因为模板,P1,P4为引物扩增融合基因ORF2-γ-IFN。将所扩增的串联基因连接PMD-18T-Simple Vector,经PCR方法和限制性内切酶分析鉴定该串联基因已成功转入重组质粒中(命为PMD-ORF2-γ-IFN)。腺病毒转移载体Pshuttle-CMV和PMD-ORF2-γ-IFN经双酶切后再切胶回收并连接后,经PCR方法和限制性内切酶酶切法及测序证明两基因已成功连接,由此获得了重组腺病毒转移载体Pshuttle-CMV-ORF2-γ-IFN。重组腺病毒转移载体经PmeI酶切线性化后,在BJ5173细菌中与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组获得重组腺病毒质粒pAD-CMV-ORF2-γ-IFN.经PCR方法和PacI酶切方法及测序鉴定表明该重组腺病毒载体已得到成功构建。

关键词： ORF2 猪γ-干扰素转移载体重组腺病毒

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传染性胸膜肺炎放线杆菌apxC基因缺失疫苗菌株的构建及生物学特性的研究

传染性胸膜肺炎放线杆菌apxC基因缺失疫苗菌株的构建及生物学特性...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：宣春玲王贵平李春玲罗满林贾爱卿广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生公共实验室华南农业大学兽医学院

【目的】构建猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的apxⅠC基因与apxⅡC基因缺失突变弱毒菌株APP85,为最终研制出APP的基因工程菌苗奠定基础。【方法】以标准菌株APP259中apxⅠC基因与apxⅡC基因为目的缺失... 详细信息

【目的】构建猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的apxⅠC基因与apxⅡC基因缺失突变弱毒菌株APP85,为最终研制出APP的基因工程菌苗奠定基础。【方法】以标准菌株APP259中apxⅠC基因与apxⅡC基因为目的缺失基因,根据APP 1型菌apx基因组序列,利用软件设计分别扩增apxⅠCA上下游同源臂以及apxⅡCA上下游同源臂引物,构建重组自杀转移质粒,将该重组自杀转移质粒先后转移到亲本菌APP259后,利用同源重组筛选到基因缺失突变株。并对该重组菌株主要生物学特性,如溶血性、对小鼠的致病力以及免疫保护作用进行研究。【结果】经鉴定表明目的基因已经丢失、APP95基因缺失突变菌株丧失对绵羊血的溶血活性,毒力显著下降,并对免疫小鼠具有良好的安全性。免疫保护性实验表明,用该菌株免疫小鼠后,不仅对同血清型菌株的再次攻击保护率达到85%,对异种血清型菌株(7型)的攻击保护率达到75%。【结论】成功获得了apxⅠC基因与apxⅡC基因缺失突变弱毒菌株,可作为预防APP感染的疫苗候选株,为最终研制出APP的基因工程菌苗奠定基础。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失突变弱毒疫苗

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猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒多重TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用

猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒多重TaqMan实时荧光定量RT...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：袁秀芳刘邓徐丽华王一成浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)是引起仔猪腹泻和死亡的主要病因之一,本实验根据TaqMan探针荧光定量分析原理,设计两对引物和两条探针,分别以FAM和JOE标记探针。以T7体外转录试剂盒得到的RNA为标准品,通过对反应条... 详细信息

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)是引起仔猪腹泻和死亡的主要病因之一,本实验根据TaqMan探针荧光定量分析原理,设计两对引物和两条探针,分别以FAM和JOE标记探针。以T7体外转录试剂盒得到的RNA为标准品,通过对反应条件的优化,建立了一步法TaqMan双重实时荧光定量RT-PCR(FQ-RT-PCR)检测PEDV和TGEV的方法。该方法具有良好的敏感性、重复性和特异性,能够检测到2×10～0拷贝/ul的病毒RNA,重复性试验中Ct值变异系数CV%均不超过2%,对猪圆环病毒、猪乙脑病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒进行FQ-RT-PCR,均检测不到荧光信号。应用本方法对浙江省176份病料进行检测时,其中PEDV阳性率97.7%,TGEV阳性率6.3%,混合感染率6.3%,表明浙江省猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎均有发生,但以猪流行性腹泻为主。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒猪流行性腹泻病毒双重TaqMan探针荧光定量RT-PCR

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株分离鉴定及遗传变异分析

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株分离鉴定及遗传变异分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘长明危艳武张朝霞袁婧黄立平中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

床"高热综合征"病例分离到高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）变异株,经细胞传代和蚀斑克隆,培育成功增殖性能稳定的新毒株,命名为PRRSV-HBR.该毒株接种细胞后能够产生细胞病变（CPE）,随传代次数增加毒价显著提升,第45... 详细信息

床"高热综合征"病例分离到高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）变异株,经细胞传代和蚀斑克隆,培育成功增殖性能稳定的新毒株,命名为PRRSV-HBR.该毒株接种细胞后能够产生细胞病变（CPE）,随传代次数增加毒价显著提升,第45～60代毒价测定达10TCID/mL。采用免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）检测病毒抗原分布在细胞浆中;电镜观察到的病毒粒子呈圆形,直径约50～55nm。分离株Nsp2基因序列中第483和535～563位氨基酸存在缺失,属PRRSV变异株。用该毒株第5代培养物滴鼻接种试验猪(1×10 TCID),临床表现为持续高热（≥40.5℃,9d～12d）、食欲下降、精神萎靡、消瘦、眼睑水肿、体表淋巴结肿大等,发病率为100%（10/10）,死亡率为30%（3/10）。研究表明,PRRSV-HBR分离株对靶动物具有高致病力,培育的细胞适应毒株体外繁殖能力稳定,并产生了标志性基因突变,为该病毒致病机理、遗传变异规律、疫苗免疫等研究奠定了基础.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性遗传变异分析

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猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒实验中免疫保护性研究

猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒实验中免疫保护性研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张宁侯韶毅陈云霞韦英益李茂宁肖爱欢兰家暖廖承球谢丽华黄伟坚张远波刘芳禤雄标高永锐卢桂娟陆有飞曾晓飞广西大学动物科学技术学院梧州动物疫病预防控制中心广西兽医研究所广西丽原生物股份有限公司

猪圆环病毒2型(PCV2)是与猪的一种新的传染病—断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemicwasting syndrome,PMWS)密切相关,该病以进行性消瘦、呼吸困难、淋巴结肿大、发育迟缓及皮肤苍白等为主要特征.PCV-2广泛存在于世界很... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)是与猪的一种新的传染病—断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemicwasting syndrome,PMWS)密切相关,该病以进行性消瘦、呼吸困难、淋巴结肿大、发育迟缓及皮肤苍白等为主要特征.PCV-2广泛存在于世界很多的养猪国家和地区。到目前为止,还没有有效的疫苗来预防此疾病,因此PCV-2成了近几年国内外兽医领域关注的研究热点之一。研究证实:猪圆环病毒2型的Cap蛋白能够诱导猪体产生特异性抗体,产生免疫保护作用.本研究用克隆到的PCV-2 GXWZ-1株的ORF2基因以及其截短基因片段构建真核表达质粒,通过组合免疫的方法肌肉注射小鼠,然后用经处理过的猪圆环病毒2型GXWZ-2株的阳性病料悬液腹腔注射免疫组和阳性对照组小鼠,对其进行体重记录、病理切片制作及PCR检测,以研究核酸疫苗在抵抗PCV-2方面的效果,以望能找到有效的候选疫苗,为该疾病的防控提供科学研究数据。

关键词：猪圆环病毒阳性对照注射免疫核酸疫苗攻毒实验免疫保护性

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猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白末端序列在病毒复制过程中的作用分析

猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白末端序列在病毒复制过程中的作...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：谭菲菲韦祖樟孙志庄金山袁世山中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病研究室

核衣壳蛋白(Nucleocapsid protein)是猪繁殖与呼吸综合征病毒((Porcine Reproductive andRespiratory Syndrome,PRRS))的最主要的结构蛋白,在病毒粒子的包装中起着重要作用,但是对于病毒感染性所必需的N蛋白的最小结构域还不确定.本研... 详细信息

核衣壳蛋白(Nucleocapsid protein)是猪繁殖与呼吸综合征病毒((Porcine Reproductive andRespiratory Syndrome,PRRS))的最主要的结构蛋白,在病毒粒子的包装中起着重要作用,但是对于病毒感染性所必需的N蛋白的最小结构域还不确定.本研究在本实验室所拥有的感染性克隆的基础上,构建了N蛋白末端系列缺失的突变体,通过转染Marc-145细胞,观察细胞病变,检测基因组的复制、亚基因组的转录,表明N蛋白C端可以承受4个氨基酸的缺失而不影响病毒的感染性.值得说明的是N蛋白C端所有缺失突变体转染细胞后拯救出的病毒都发生了额外的突变,包括点突变和缺失.其中C端缺失3个氨基酸的突变体拯救病毒经空斑纯化后出现了5种形式的病毒,包括两种额外缺失和三种额外的点突变.C端缺失4个氨基酸的突变体拯救病毒也发生了额外的点突变.C端缺失5个氨基酸的突变体转染细胞后没有拯救出活的病毒,但可以检测到亚基因组的转录,说明可能影响了病毒粒子的包装.这些拯救病毒都可以在细胞上至少稳定传5代,从而为缺失疫苗的研究奠定基础.

关键词：核衣壳蛋白点突变拯救病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞病变 PRRSV 空斑纯化感染性克隆突变体氨基酸末端序列病毒复制

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猪源绿色气球菌的分离鉴定与药敏特性研究

猪源绿色气球菌的分离鉴定与药敏特性研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：谢彬袁洁袁书智白安斌黄红梅吴健敏广西兽医研究所惠朋动物药业有限责任公司广东省农业科学院兽医研究所

2006年和2008年本实验室分别从广东清远和广西北流两个猪场发病小猪的膝关节积液中分离到两株革兰阳性球菌,呈四联状或成对排列,在山羊血琼脂平板上能形成明显的α-溶血圈.经小白鼠致病性试验、生理生化鉴定及16srRNA序列分析,确定这两... 详细信息

2006年和2008年本实验室分别从广东清远和广西北流两个猪场发病小猪的膝关节积液中分离到两株革兰阳性球菌,呈四联状或成对排列,在山羊血琼脂平板上能形成明显的α-溶血圈.经小白鼠致病性试验、生理生化鉴定及16srRNA序列分析,确定这两株革兰阳性球菌为正常情况下非致病性绿色气球菌,分别命名为GDQY-1、GXBL-1(登录号分别为:GQ161096;GQ161097).经系统发育分析表明,GDQY-1、GXBL-1菌株与绿色气球菌15MS(登录号:EU075039.1)同源性最高,分别达到99.4%和98.7%.药敏试验结果表明,这2株绿色气球菌除了对新霉素、氟哌酸、恩诺沙星、菌必治、环丙沙星等5种药物高度敏感外,对大部分抗菌素均不敏感.绿色气球菌为条件性致病菌,广泛分布于自然界,一般情况下不致病。近年来由于免疫抑制剂的广泛应用、抗菌药物滥用增加,该菌在人类临床上引起严重感染的报道不断增多,但从发病猪膝关节积液中分离到为首次报道.

关键词：猪绿色气球菌分离鉴定 16S Rrna 药敏特性

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非特异性转移因子对犬淋巴细胞转化增殖的影响

非特异性转移因子对犬淋巴细胞转化增殖的影响

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘艳田立志张翔林洋单春乔涂岳江国托大连三仪动物药品有限公司生物工程研究所黑龙江省牡丹江农垦分局畜牧水产局

目的研究采用淋巴细胞体外培养方法制备的非特异性转移因子的理化性质及不同浓度非特异性转移因子对犬淋巴细胞转化增殖的影响.方法通过福林酚测定法检测制备的非特异性转移因子中多肽的含量,采用核糖含量测定测定法检测其核糖的含量.使... 详细信息

目的研究采用淋巴细胞体外培养方法制备的非特异性转移因子的理化性质及不同浓度非特异性转移因子对犬淋巴细胞转化增殖的影响.方法通过福林酚测定法检测制备的非特异性转移因子中多肽的含量,采用核糖含量测定测定法检测其核糖的含量.使用GENMED—MTS细胞繁殖定量检测试剂盒测定不同浓度的非特异性转移因子对犬淋巴细胞转化增殖的影响。结果本研究所制得的非特异性转移因子具有和牛、羊、鸡等脾源转移因子相似的理化性质,其多肽含量为0.81mg/mL,核糖含量为17.96μg/mL,同时浓度在0.01～0.43 mg/mL的范围内非特异性转移因子还能较显著刺激犬淋巴细胞的增殖.结论本研究所采用的制备方法不但降低了产品研制的成本,而且避免了大量传染病水平传播的可能.同时通过细胞免疫方面考察了非特异性转移因子生物学功能,以期为探讨转移因子的作用机制及其临床应用提供可供参考的实验依据.

关键词：非特异性转移因子多肽核酸犬淋巴细胞增殖

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猪源2型链球菌福建株CPS2J基因PCR检测及序列分析

猪源2型链球菌福建株CPS2J基因PCR检测及序列分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：俞伏松郭长明车勇良林天龙陈少莺福建省农业科学院生物技术研究所福建省农业科学院畜牧兽医研究所

设计并合成一对扩增2型猪链球菌CPS基因的特异性引物,以猪2型链球菌福建株DNA为模板,筛选最佳反应条件,建立检测CPS2J基因的PCR方法,并对PCR扩增产物进行序列测定和同源性比较分析.结果如下:应用该方法对猪2型链球菌福建株和标准阳性株... 详细信息

设计并合成一对扩增2型猪链球菌CPS基因的特异性引物,以猪2型链球菌福建株DNA为模板,筛选最佳反应条件,建立检测CPS2J基因的PCR方法,并对PCR扩增产物进行序列测定和同源性比较分析.结果如下:应用该方法对猪2型链球菌福建株和标准阳性株进行扩增,均获得与预期大小一致的675bp特异性目的片段,而对8株非2型猪链球菌的扩增结果均呈阴性:敏感性测定最低可检出100cfu细菌量或50pg细菌DNA;SSPFJ06CPS2J基因部分核苷酸及其推导的氨基酸序列与猪链球菌2型不同菌株的同源性分别达98.7%-100%和97.8%～100%.上述结果表明建立并优化的猪2型链球菌CPS2J基因的PCR检测方法敏感性好、特异性高,能用于2型猪链球菌的分子流行病学调查和快速检测;序列分析表明猪2型链球菌福建株与国内外8株标准株之间同源性高、亲缘关系密切.

关键词：猪链球菌2型福建株 CPS2J基因 PCR

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H9N2禽流感病毒感染哺乳动物的潜力研究

H9N2禽流感病毒感染哺乳动物的潜力研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：伍锐梁望旺杨克礼刘泽文熊忠良邓均华段正赢徐涤平湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

H9N2禽流感病毒已成全球性分布与流行,对各国的养禽业造成了巨大的经济损失。此外,H9N2禽流感病毒能够感染人类,严重威胁着人类健康。对于它存在的潜在危害已经越来越多地受到关注,相关的研究也相继开展。本研究,我们旨在探讨H9N2禽流... 详细信息

H9N2禽流感病毒已成全球性分布与流行,对各国的养禽业造成了巨大的经济损失。此外,H9N2禽流感病毒能够感染人类,严重威胁着人类健康。对于它存在的潜在危害已经越来越多地受到关注,相关的研究也相继开展。本研究,我们旨在探讨H9N2禽流感病毒地方分离株能否感染哺乳动物、感染哺乳动物的损害程度、能否在哺乳动物间传播等问题。以禽流感病毒H9N2分离株为研究对象,经呼吸道感染传代后,获取了能完全致死BALB/c小鼠的适应株,该小鼠适应株还能致死NIH小鼠、Kunming小鼠和C578BL/6小鼠,并能在多个脏器复制。全基因组序列分析表明,与野生型病毒序列相比,小鼠适应株病毒的多个基因发生了变异,共涉及25个氨基酸,这表明H9N2禽流感病毒的小鼠适应株的毒力是受多基因调控。此外,我们还评估了小鼠适应株能否在小鼠中传播。结果表明,小鼠适应株能在Kunming小鼠中传播,其传播途径可以是直接接触,也可通过空气传播。上述的研究结果表明,H9N2禽流感病毒具有感染哺乳动物的潜力,对人类健康构成了一定的威胁,需进行严密的监控。

关键词：禽流感 H9N2 哺乳动物致病力传播

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