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440 篇 会议
5 篇 期刊文献

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445 篇 电子文献
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434 篇 农学
- 416 篇 兽医学
- 12 篇 畜牧学
- 6 篇 作物学
- 4 篇 林学
9 篇 医学
- 9 篇 基础医学(可授医学...
- 1 篇 临床医学
7 篇 工学
- 6 篇 生物工程
- 1 篇 食品科学与工程（可...
6 篇 理学
- 6 篇 生物学
1 篇 经济学
- 1 篇 应用经济学

主题

24 篇 原核表达
23 篇 序列分析
19 篇 prrsv
16 篇 猪繁殖与呼吸综合...
14 篇 克隆
13 篇 pcr
11 篇 猪流感病毒
10 篇 副猪嗜血杆菌
10 篇 分离鉴定
9 篇 疫苗
9 篇 检测
9 篇 猪
8 篇 混合感染
8 篇 新城疫病毒
8 篇 分离
8 篇 应用
8 篇 猪细小病毒
8 篇 防控技术
8 篇 口蹄疫病毒
7 篇 免疫原性

机构

27 篇 广西兽医研究所
24 篇 吉林大学
23 篇 华南农业大学
23 篇 军事医学科学院军...
20 篇 广西大学
18 篇 河南农业大学
14 篇 河南省动物疫病预...
11 篇 山东农业大学
10 篇 南京农业大学
10 篇 青岛农业大学
10 篇 山东省滨州畜牧兽...
10 篇 华中农业大学
9 篇 湖南农业大学
9 篇 中国农业大学
9 篇 四川大学生命科学...
8 篇 南京天邦生物科技...
8 篇 云南农业大学
7 篇 黑龙江八一农垦大...
7 篇 北京市农林科学院...
7 篇 山东绿都生物科技...

作者

23 篇 金宁一
17 篇 李斌
17 篇 梁家幸
17 篇 赵武
16 篇 蒋玉雯
16 篇 黄安国
16 篇 姚瑞英
16 篇 梁保忠
15 篇 沈志强
15 篇 鲁会军
13 篇 丁壮
12 篇 黄伟坚
12 篇 王红宁
11 篇 吴志明
11 篇 闫若潜
11 篇 罗满林
10 篇 杨霞
10 篇 母连志
10 篇 高荣
10 篇 王川庆

语言

442 篇 中文
3 篇 英文

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抗人红细胞单链抗体与猪瘟E2蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学活性检测

抗人红细胞单链抗体与猪瘟E2蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：覃绍敏白安斌吴健敏廖文军袁书智华俊关忠谊广西兽医研究所惠朋动物药业有限责任公司

为构建既具有凝集性又具有抗原性的双功能融合蛋白,本研究以重组质粒PMD-2E8ScFv和PETmE2为模板,应用PCR方法分别扩增出目的基因2E8ScFv(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和mE2(猪瘟E2蛋白主要抗原编码区基因).采用重叠延伸(SOE)PCR的方法... 详细信息

为构建既具有凝集性又具有抗原性的双功能融合蛋白,本研究以重组质粒PMD-2E8ScFv和PETmE2为模板,应用PCR方法分别扩增出目的基因2E8ScFv(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和mE2(猪瘟E2蛋白主要抗原编码区基因).采用重叠延伸(SOE)PCR的方法将2E8ScFv和mE2拼接成融合基因2E8mE2,经测序正确后,将2E8mE2亚克隆入PET-DsbA原核表达载体,经PCR和酶切鉴定,表明重组表达质粒PET-DsbA-2E8mE2构建成功.将该重组表达质粒转化入宿主菌BL21(DE3)PlysS中,用IPTG进行诱导表达,表达的融合蛋白经SDS-PAGE电泳、免疫印迹和BandScan软件分析.结果表明:2E8mE2融合基因在大肠杆菌中获得了高效表达,表达产物大部分以不溶的包涵体形式存在,分子量约为65KDa,与预期的大小一致;融合蛋白的表达量约占菌体总量的30%左右.Western-blotting与红细胞凝集试验证实:2E8mE2融合蛋白既能够与人红细胞结合,又能够与CSFV抗体反应,具有双功能特性。

关键词：猪瘟单链抗体双功能蛋白原核表达红细胞凝集试验

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H9N2禽流感病毒感染哺乳动物的潜力研究

H9N2禽流感病毒感染哺乳动物的潜力研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：伍锐梁望旺杨克礼刘泽文熊忠良邓均华段正赢徐涤平湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

H9N2禽流感病毒已成全球性分布与流行,对各国的养禽业造成了巨大的经济损失。此外,H9N2禽流感病毒能够感染人类,严重威胁着人类健康。对于它存在的潜在危害已经越来越多地受到关注,相关的研究也相继开展。本研究,我们旨在探讨H9N2禽流... 详细信息

H9N2禽流感病毒已成全球性分布与流行,对各国的养禽业造成了巨大的经济损失。此外,H9N2禽流感病毒能够感染人类,严重威胁着人类健康。对于它存在的潜在危害已经越来越多地受到关注,相关的研究也相继开展。本研究,我们旨在探讨H9N2禽流感病毒地方分离株能否感染哺乳动物、感染哺乳动物的损害程度、能否在哺乳动物间传播等问题。以禽流感病毒H9N2分离株为研究对象,经呼吸道感染传代后,获取了能完全致死BALB/c小鼠的适应株,该小鼠适应株还能致死NIH小鼠、Kunming小鼠和C578BL/6小鼠,并能在多个脏器复制。全基因组序列分析表明,与野生型病毒序列相比,小鼠适应株病毒的多个基因发生了变异,共涉及25个氨基酸,这表明H9N2禽流感病毒的小鼠适应株的毒力是受多基因调控。此外,我们还评估了小鼠适应株能否在小鼠中传播。结果表明,小鼠适应株能在Kunming小鼠中传播,其传播途径可以是直接接触,也可通过空气传播。上述的研究结果表明,H9N2禽流感病毒具有感染哺乳动物的潜力,对人类健康构成了一定的威胁,需进行严密的监控。

关键词：禽流感 H9N2 哺乳动物致病力传播

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牛分枝杆菌细胞壁相关蛋白表达及免疫原性分析

牛分枝杆菌细胞壁相关蛋白表达及免疫原性分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：亓英芳杜艳芬刘慧芳赫明雷司微倪洪波王春来刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室

牛结核病是由牛分枝杆菌引起的严重危害奶牛业的人畜共患病,可以通过吸入含菌气溶胶或食用受污染的乳制品而从牛传染到人,对人类的健康也造成了威胁.传统的BCG苗保护力低,因此研究更加特异准确的结核病新型诊断方法并加快新型疫苗的研... 详细信息

牛结核病是由牛分枝杆菌引起的严重危害奶牛业的人畜共患病,可以通过吸入含菌气溶胶或食用受污染的乳制品而从牛传染到人,对人类的健康也造成了威胁.传统的BCG苗保护力低,因此研究更加特异准确的结核病新型诊断方法并加快新型疫苗的研制具有重要的实际意义与应用前景.外膜蛋白具有良好免疫原性,可加快巨噬细胞对抗原的递呈作用,激活淋巴细胞增殖反应,刺激机体产生体液免疫和细胞免疫,从而抵抗同源菌和异源菌的攻击,而ompA是编码外膜蛋白抗原的重要基因之一.本实验应用PCR方法扩增出牛分枝杆菌外膜蛋白基因ompA(1041bp),采用DNA重组技术,将这个基因片段连接表达载体pGEX6p-1,并在大肠杆菌中诱导表达外膜蛋白ompA,用glutathioneSepharose 4B纯化蛋白.Western blot分析了两个重组蛋白的免疫学活性.结果本实验构建的重组质粒pGEX6p-1-ompA在大肠杆菌中得到高效表达,western-blot分析表明纯化的重组蛋白具有良好的免疫原性,为结核分枝杆菌的准确诊断以及基因工程疫苗的研制奠定了基础。

关键词：牛分枝杆菌 ompA 原核表达纯化 Western-blot 免疫原性

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猪传染性胃肠炎病毒M蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

猪传染性胃肠炎病毒M蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张小波左玉柱刘媛范京惠李潭清李建辉孙彦新河北农业大学动物科技学院

本研究根据GenBank发表的TGEV TS株全基因核苷酸序列,设计了1对用以扩增TGEV主要结构蛋白M基因的特异性引物.利用RT-PCR方法扩增TGEV HB06株M基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,进行EcoRI和XhoI双酶切鉴定,将获得的M基因片段定向亚克隆入... 详细信息

本研究根据GenBank发表的TGEV TS株全基因核苷酸序列,设计了1对用以扩增TGEV主要结构蛋白M基因的特异性引物.利用RT-PCR方法扩增TGEV HB06株M基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,进行EcoRI和XhoI双酶切鉴定,将获得的M基因片段定向亚克隆入原核表达载体pGEX-6P-1中,构建了重组原核表达质粒pGEX-6P-M,转化Rossetta(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导重组菌株表达了融合蛋白.结果表明,从TGEV HB06株扩增得到了M基因片段,该基因全长789 bp,编码262个氨基酸,与TS株、Purdue-115株、TFI株和H16株的M基因同源性分别为97%、99%、96%和97%.SDS-PAGE电泳结果显示,重组表达质粒获得了约56 kDa的目的带,其中M蛋白的分子质量约为30kDa,与预期的结果一致,并且表达产物主要以包涵体的形式存在;Western-blot分析表明,表达的M重组蛋白可以被兔源抗TGEV阳性血清识别;试验结果证明,TGEV的M基因高度保守,在大肠杆菌表达系统内成功表达了TGEV M蛋白.

关键词：猪传染性胃肠炎病毒 M基因克隆原核表达

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抗H3N2亚型猪流感病毒血凝素单克隆抗体的制备与鉴定

抗H3N2亚型猪流感病毒血凝素单克隆抗体的制备与鉴定

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：孔维乔传玲陈艳杨焕良展小过辛晓光陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室

采用纯化的H3N2亚型猪流感病毒（SIV）作为免疫原免疫6～8周龄BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞（SP2/0）融合,用间接ELISA方法筛选分泌抗H3N2亚型SIV的阳性细胞株,经克隆获得7株亲和力较高的杂交瘤细胞株,分别命名为1C9、2C5、... 详细信息

采用纯化的H3N2亚型猪流感病毒（SIV）作为免疫原免疫6～8周龄BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞（SP2/0）融合,用间接ELISA方法筛选分泌抗H3N2亚型SIV的阳性细胞株,经克隆获得7株亲和力较高的杂交瘤细胞株,分别命名为1C9、2C5、2F10、3D3、4E8、5C7、5D12,用其制备的腹水ELISA效价分别为1:10～5、1:10～6、1:10～4、1:10～5、1:10～6、1:10～5、1:10～6;其中1C9、2C5、2F10、3D3单抗亚类为IgG,而4E8、5C7、5D12则是IgG,所有的单抗轻链均为κ型.Western-blot结果显示,这7株单抗都能识别HA蛋白,均能分泌针对血凝素的抗体。将本实验室构建的pCAGGS-H3HA质粒转染到293T细胞后,分别用7株单抗进行间接免疫荧光试验,能观察到特异性绿色荧光,证实该7株单抗具有良好的特异性。该亚型单克隆抗体的制备,为SIV鉴别诊断方法的建立奠定了基础.

关键词：猪流感病毒血凝素单克隆抗体

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猪传染性胃肠炎病毒河南株S基因的克隆与序列分析

猪传染性胃肠炎病毒河南株S基因的克隆与序列分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：杨霞陈陆董加才常洪涛王新卫王川庆河南农业大学禽病研究所

根据Gen Bank上已发表的TGEV的S基因序列,利用自行设计的一对引物,以TGEV疫苗株和四个河南分离株XZ、NY、YM、XX、KF株的PK-15细胞增殖物为材料,采用RT-PCR技术扩增出S基因,运用PGEM-T和PMD18-T两种载体,通过TA克隆,获得重组质粒PGEM-X... 详细信息

根据Gen Bank上已发表的TGEV的S基因序列,利用自行设计的一对引物,以TGEV疫苗株和四个河南分离株XZ、NY、YM、XX、KF株的PK-15细胞增殖物为材料,采用RT-PCR技术扩增出S基因,运用PGEM-T和PMD18-T两种载体,通过TA克隆,获得重组质粒PGEM-XZ-S、PGEM-NY-S、PGEM-YM-S、PMD-XX-S和PMD-KF-S。经S基因序列测序分析发现,TGEV河南分离株之间的核苷酸同源性为99.0%-99.8%,氨基酸同源性为97.0%-99.0%;和疫苗分离株(YM)的核苷酸同源性为99.0%-99.7%,氨基酸同源性为97.0%-98.5%;和国内毒株相比,四个毒株与SC-Y株氨基酸同源性均在98.5%以上;和国外毒株相比:XZ株与国外的Purdue株和PUR46-MAD核苷酸同源性最高达99.7%。XZ株与PUR46-MAD氨基酸同源性最高达99.0%。说明S基因是高度保守的,也说明不同地方的分离株存在一定的差异。从本实验蛋白疏水区分析结果可以看出该蛋白存在亲、疏水区相间隔的情况,而且可能存在抗原表位,这说明河南分离毒株的S蛋白是一个膜蛋白,与其具有较强的免疫原性和唯一能诱导产生中和抗体的功能相一致,因此河南分离株S蛋白可作分子诊断抗原,以及研制基因工程疫苗和免疫检测试剂盒的重要材料。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒河南株疫苗株 S基因克隆序列分析抗原位点

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我国猪场PCV2a和PCV2b共感染情况的调查与分析

我国猪场PCV2a和PCV2b共感染情况的调查与分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：翟少伦龙进学韦祖樟张建武岳城禤雄标袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心/猪传染病防治研究室新疆农业大学动物医学学院广西兽医研究所

近年来我国猪场中猪圆环病毒2型的阳性率有所增加,给我国的养猪业带来了巨大的挑战.本研究主要是为了调查和分析我国猪2型圆环病毒两型间的共感染情况.我们采用差异PCR方法对2008年到2009年间采集的经普通PCR鉴定为PCV2型阳性的病料进... 详细信息

近年来我国猪场中猪圆环病毒2型的阳性率有所增加,给我国的养猪业带来了巨大的挑战.本研究主要是为了调查和分析我国猪2型圆环病毒两型间的共感染情况.我们采用差异PCR方法对2008年到2009年间采集的经普通PCR鉴定为PCV2型阳性的病料进行检测,对差异PCR方法扩增出来的部分PCV2a和PCV2b目的序列进行克隆、测序及分析.通过对70份临床病料的检测,并配合PCR产物测序的验证,结果发现该方法易操作,特异性高,可重复性好,可以鉴别出PCV2a与PCV2b,其中PCV2a株25份(25/70),PCV2b株23份(23/70),PCV2a与PCV2b共感染株22份(22/70),参照PCV2a或PCV2b的标准毒株,序列比对显示,我国的PCV2型毒株大多发生了很大的变异,包括碱基的变化及同源重组.本研究确定了我国猪场存在PCV2a与PCV2b的共感染情况,共感染率为31.4%.共感染机制及共感染是否会促进病毒的重组,是否会加重猪体的病情还需要进一步的研究.

关键词： PCV2a PCV2b 差异PCR 共感染同源重组

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结核分枝杆菌和牛分枝杆菌二重实时荧光PCR检测方法的建立

结核分枝杆菌和牛分枝杆菌二重实时荧光PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：谢志勤谢芝勋雷剑明刘加波庞耀珊邓显文谢丽基蓝如束广西兽医研究所广西壮族自治区疾病预防控制中心

目的:建立二重实时荧光定量PCR方法,用于结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的鉴别检测.方法:根据结核分枝杆菌和牛分枝杆菌特殊基因序列,设计了结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针;对反应条件和试剂... 详细信息

目的:建立二重实时荧光定量PCR方法,用于结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的鉴别检测.方法:根据结核分枝杆菌和牛分枝杆菌特殊基因序列,设计了结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针;对反应条件和试剂浓度进行优化,建立了能够同时检测鉴别结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的二重实时荧光定量PCR方法,对建立的实时荧光定量PCR方法的敏感性和特异性进行了检测.应用该方法对保存的临床样品进行二重荧光定量PCR检测。结果:所建立的方法特异性好,对结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的检测敏感性均达到10个模板拷贝数,比常规PCR敏感性高100倍;抗干扰能力强,对结核分枝杆菌和牛分枝杆菌不同模板浓度进行组合,仍可有效地同时检测出这两种细菌。对50份PPD检测阳性的牛的临床样品进行二重荧光定量PCR检测,结果结核分枝杆菌阳性的临床样品有6份,牛分枝杆菌阳性的临床样品有1份,其它均为阴性.结论:建立了用于检洲结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的二重荧光定量PCR法,该方法特异、敏感、快速、可定量,对检测鉴别区分结核分枝杆菌和牛分枝杆菌有重要意义。

关键词：结核分枝杆菌牛分枝杆菌二重荧光定量PCR

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猪白细胞介素4、6融合基因和CpG基序对猪蓝耳病疫苗免疫的强化效应

猪白细胞介素4、6融合基因和CpG基序对猪蓝耳病疫苗免疫的强化效应

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：陈建林杨肖王泽洲章欢程驰李栋王红宁李江凌高荣四川大学生命科学学院动物疾病防控与食品安全重点实验室四川省动物疾病预防控制中心四川省畜牧科学研究院

为探索新型高效安全的猪蓝耳病疫苗免疫佐剂,本实验用离子交联法制备壳聚糖纳米颗粒包裹猪融合基因PIL-46和CpG基序的真核表达质粒(CNP-(VRIL-46+VR1C)),将CNP-(VRIL-46+VR1C)肌注接种过猪蓝耳病灭活苗的长白川白杂交猪,接种后1、2、4、... 详细信息

为探索新型高效安全的猪蓝耳病疫苗免疫佐剂,本实验用离子交联法制备壳聚糖纳米颗粒包裹猪融合基因PIL-46和CpG基序的真核表达质粒(CNP-(VRIL-46+VR1C)),将CNP-(VRIL-46+VR1C)肌注接种过猪蓝耳病灭活苗的长白川白杂交猪,接种后1、2、4、6和8周采取实验猪静脉血,用Sandwich ELISA检测血清中白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-6和IgG、IgA、IgM及特异抗体的含量,同时检测外周血液免疫细胞数量的变化.结果发现实验猪接种CNP-(VRIL-46+VR1C)后1-8周内,其血清中IL-2、IL-4、IL-6和IgG、IgA、IgM及特异抗体的含量较对照组均显著增多(P<0.05),淋巴细胞和单核细胞数量也明显升高(P<0.05).这些表明接种CNP-(VRIL-46+VR1C)的实验猪的特异体液和细胞免疫水平均显著多于对照组,提示PIL-46基因和CpG基序组合能显著增强猪的特异体液和细胞免疫机能,明显提高其免疫防御力,具有研制为高效安全的分子免疫增强剂的应用前景.

关键词：猪猪白细胞介素4、6融合基因 CpG基序蓝耳病免疫

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我国部分地区猪圆环病毒2型流行毒株的遗传变异分析

我国部分地区猪圆环病毒2型流行毒株的遗传变异分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：郭龙军陆月华危艳武黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

临床上由猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染引起的相关疾病日益严重,流行毒株基因不断发生变异,为了了解我国PCV2流行毒株遗传变异情况,本试验对来自全国10个省份不同地区送检的90份病料中分离到19株PCV2流行毒株.通... 详细信息

临床上由猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染引起的相关疾病日益严重,流行毒株基因不断发生变异,为了了解我国PCV2流行毒株遗传变异情况,本试验对来自全国10个省份不同地区送检的90份病料中分离到19株PCV2流行毒株.通过病毒基因组克隆和测序,将19株病毒分为2个大基因群和3个亚群,基因组组成分别为1766nt、1767nt和1768nt,各占15.8%、73.7%和10.5%.以1767nt毒株为基准,其第39或1039位有1个碱基缺失后突变成1766nt毒株;第1040位有1个碱基插入后突变成1768nt毒株.对19株病毒ORF2编码的Cap蛋白分析发现,有4株病毒编码基因发生了突变,出现了705nt和708nt两种突变型,使ORF2编码的Cap蛋白C末端分别有1和2个氨基酸延伸.本试验选用AccⅠ和FbaⅠ内切酶对19株病毒基因组PCR产物进行了限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP),其结果可作为流行毒株分型鉴别手段.研究表明,我国猪群中流行的PCV2以基因组1767nt毒株为主,但也出现了1766nt基因变异毒株。此外,试验也证实上述毒株的ORF2编码Cap蛋白的C末端有突变现象,表明我国PCV2流行毒株呈现多样性。本研究建立的PCR-RFLP方法可为PCV2流行毒株分型提供鉴别手段.

关键词：猪圆环病毒2型流行毒株遗传变异 PCR-RFLP

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