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主题

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19 篇 prrsv
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14 篇 克隆
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10 篇 分离鉴定
9 篇 疫苗
9 篇 检测
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8 篇 分离
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8 篇 防控技术
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23 篇 华南农业大学
23 篇 军事医学科学院军...
20 篇 广西大学
18 篇 河南农业大学
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11 篇 山东农业大学
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10 篇 青岛农业大学
10 篇 山东省滨州畜牧兽...
10 篇 华中农业大学
9 篇 湖南农业大学
9 篇 中国农业大学
9 篇 四川大学生命科学...
8 篇 南京天邦生物科技...
8 篇 云南农业大学
7 篇 黑龙江八一农垦大...
7 篇 北京市农林科学院...
7 篇 山东绿都生物科技...

作者

23 篇 金宁一
17 篇 李斌
17 篇 梁家幸
17 篇 赵武
16 篇 蒋玉雯
16 篇 黄安国
16 篇 姚瑞英
16 篇 梁保忠
15 篇 沈志强
15 篇 鲁会军
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12 篇 黄伟坚
12 篇 王红宁
11 篇 吴志明
11 篇 闫若潜
11 篇 罗满林
10 篇 杨霞
10 篇 母连志
10 篇 高荣
10 篇 王川庆

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排序：

动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：夏兴霞刘洁王永山诸玉梅欧阳伟何孔旺张雪寒江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

将*** O157:H7（EHEC-O157:H7）用甲醛灭活、超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP/20骨髓瘤细胞融合后,获得七株分泌抗*** O157:H7单克隆抗体（mAbs）的杂交瘤细胞株,分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2... 详细信息

将*** O157:H7（EHEC-O157:H7）用甲醛灭活、超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP/20骨髓瘤细胞融合后,获得七株分泌抗*** O157:H7单克隆抗体（mAbs）的杂交瘤细胞株,分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2aκ、IgG2aκ、IgG1κ、IgMκ、IgMλ、IgMκ和IgG2aκ。用间接ELISA检测,E7和F1细胞培养上清液的效价为1.6×10～3,腹水效价均为1×10;C3、F5、B8、G9和G11细胞培养上清液的效价为1×10～1～2×10～2,腹水效价均为1×10～3。相加ELISA结果显示,F1、G9和G11三株mAbs对应相同的抗原表位,而其它4株对应不同的抗原表位.用间接ELISA分析特异性,七株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应.Western blotting表明,C3、E7和F1三株mAbs在蛋白分子量28kD处有特异性条带,而其它四株mAbs则未显示蛋白带。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 单克隆抗体(mAb) 生物制剂人兽共患病

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小鹅瘟单管巢式PCR诊断方法的建立及初步应用

小鹅瘟单管巢式PCR诊断方法的建立及初步应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王暖成鲁承杜鑫王中光杜秋明延边大学农学院

小鹅瘟是由小鹅瘟病毒引起的主要侵害4-20日龄雏鹅和雏番鸭的一种急性或亚急性。高度接触性和败血性传染病,给养鹅业造成了严重危害.该病可从临床症状及流行病学特点作出初步诊断,但确诊需借助病原学检查、血清学方法和分子生物学技术... 详细信息

小鹅瘟是由小鹅瘟病毒引起的主要侵害4-20日龄雏鹅和雏番鸭的一种急性或亚急性。高度接触性和败血性传染病,给养鹅业造成了严重危害.该病可从临床症状及流行病学特点作出初步诊断,但确诊需借助病原学检查、血清学方法和分子生物学技术。病原学检查和血清学方法均存在不够敏感、检测所需时间长等不足,不能满足临床快速诊断小鹅瘟的需要.而PCR技术具有敏感性高、特异性强等优点,能够较好满足临床快速准确诊断疾病的需要.本试验根据GenBank发表的小鹅瘟病毒B株全基因序列,针对VP3基因保守区,设计了两对扩增主要结构蛋白VP3基因的特异性引物,对小鹅瘟病毒延边分离株基因组DNA进行了PCR扩增,建立了小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法,扩增出了与预期片段大小相符的长度为406bp的基因片段.特异性试验表明,只有小鹅瘟病毒模板能扩增出特异性条带.敏感性试验表明,当病料中小鹅瘟病毒核酸含量为0.02175fg/μL时,仍可以检测到,出现清晰的特异性片段.应用小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法对延边地区疑似小鹅瘟病死雏鹅80只进行了检测,有典型病理变化的20只病死雏鹅,阳性检出率均为100%(20/20),无典型病理变化的60只病死雏鹅,阳性检出率为93.3%(56/60).由此可见。本实验建立的小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法具有极高的敏感性和特异性且检出率极高,可作为一种有效的临床诊断方法。

关键词：小鹅瘟 GenBank 小鹅瘟病毒 PCR 初步应用

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猪圆环病毒2型感染性DNA的构建及体外拯救

猪圆环病毒2型感染性DNA的构建及体外拯救

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：李俊于周徐绍建程凯慧王金宝山东省农业科学院畜牧兽医研究所青岛农业大学

感染性分子克隆是研究病毒复制和致病机制的有力工具。本研究首次应用PCR诱变技术解决了外源片段易于自连的难题,成功将两个PCV2 SD1株全基因组(DQ346683)头尾相接插入到真核生物表达载体pSK的多克隆位点中,构建重组质粒pSK-2PCV2;另外... 详细信息

感染性分子克隆是研究病毒复制和致病机制的有力工具。本研究首次应用PCR诱变技术解决了外源片段易于自连的难题,成功将两个PCV2 SD1株全基因组(DQ346683)头尾相接插入到真核生物表达载体pSK的多克隆位点中,构建重组质粒pSK-2PCV2;另外构建含单个PCV2全基因组的pSK-PCV2和自身环化质粒***-PCV2中含有一个线性化PCV2全基因组,长1767bp,载体中PCV2从496nt开始,其起始位点(Ori)含有保守序列的茎环结构未被破坏;ds-PCV2为单个全基因自连产物。将所得3种质粒分别转染无PCV污染的PK-15细胞系,经10次连续传代后,间接免疫荧光试验检测显示三者均在细胞核中含有大量的病毒抗原;提取mRNA后经RT-PCR检测都有PCV2特异性基因转录;透射电镜下可观察到直径约为17～20nm的典型PCV2病毒粒子;经测序鉴定所拯救出的病毒与亲本病毒核苷酸同源性为100%。所构建的3种重组质粒均可表达并在体外组装出有感染性的PCV2病毒粒子,拯救出的PCV2与亲本病毒具有相同的病毒学及分子生物学特性。本研究在国内首次应用PCR诱变技术成功构建PCV2双拷贝感染性克隆,并经体外拯救证实其具有感染性,为进行PCV2分子特性、疫苗免疫及致病机理研究打下了基础。

关键词：猪圆环病毒2型单拷贝双拷贝自身环化感染性克隆体外拯救

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鹅主要病毒性疾病多重PCR方法的建立及应用

鹅主要病毒性疾病多重PCR方法的建立及应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：陈宗艳李国新周艳君于海闫丽萍张善瑞许傲天童光志中国农科院上海兽医研究所

近年来,临床常见小鹅瘟病毒(GPV)、鹅副粘病毒(GPMV)、鹅疱疹病毒(GHV)、鹅腺病氟GAV)的病例报道.是鹅主要的病毒性疾病病原。本研究根据各病毒基因组序列特征,设计4对针对这4种病毒的特异性引物,对已知4种混合样品中GPV、GHV、GAV的DNA... 详细信息

近年来,临床常见小鹅瘟病毒(GPV)、鹅副粘病毒(GPMV)、鹅疱疹病毒(GHV)、鹅腺病氟GAV)的病例报道.是鹅主要的病毒性疾病病原。本研究根据各病毒基因组序列特征,设计4对针对这4种病毒的特异性引物,对已知4种混合样品中GPV、GHV、GAV的DNA和GPMV反转录后的cDNA进行扩增,并对其最佳反应条件、特异性及敏感性进行了测定。结果表明:多重PCR扩增得到与试验设计相符的226bp(GPV),302bp(GPMV),501bp(GHV)和401bp(GAV)特异性扩增带,而对其它常见水禽病原及1日龄正常雏鹅的血清扩增结果均为阴性:最低检测浓度为43.6ng/LGPV,34.0 ng/L GPMV,11.5 ng/L GHV和23.6ng/L GAV;最佳反应条件为50ul反应体系中,引物10pmol、200μM dNTP、TaqTM DNA Polymerase 1.5U,退火温度58℃,进行35个循环.应用建立的多重PCR方法对来自上海、浙江、安徽等地的76份临床病例进行检测,阳性检测率分别为GPV 36.8%(28/76)、GPMV 11.8%(9/76)、GHV3.9%(3n6)、GAV 15.8%(12/76);GAV与GPV或GPMV混合感染率为47.4%(36/76).结果表明:建立的多重PCR方法具有快速、敏感、特异的特点,可用于鹅临床病例的快速鉴别诊断以及流行病学的调查研究;分别对混合感染和单独感染病例中GAV分离并进行动物回归实验及GAV分子生物学实验研究对GAV的发病机理、免疫机制将为生产中预防、临床诊断和治疗提供理论依据和有益的帮助。

关键词：鹅细小病毒鹅副粘病毒鹅疱疹病毒鹅腺病毒多重PCR

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动物及动物产品标识与可追溯体系研究的探讨——与《动物及动物产品标识与可追溯体系模式研究》和《对动物及动物产品标识与可追溯体系思考与建议》两篇文章作者的商榷

动物及动物产品标识与可追溯体系研究的探讨——与《动物及动物产...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：陆昌华胡肄农白云峰白红武江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏省农业科学院数字农业工程技术研究中心

现代化的动物产业发展模式,给动物产品安全带来诸多风险,导致食源性疾病患病人数增多,引发一系列动物产品安全事件.在养殖阶段,为控制疫病发生,提高生产效率,需要使用疫苗、药物及添加剂等,但是,超标准使用或违规使用,将导致动物产品药... 详细信息

现代化的动物产业发展模式,给动物产品安全带来诸多风险,导致食源性疾病患病人数增多,引发一系列动物产品安全事件.在养殖阶段,为控制疫病发生,提高生产效率,需要使用疫苗、药物及添加剂等,但是,超标准使用或违规使用,将导致动物产品药物残留、重金属等有害物质超标;在动物产品的加工、物流和销售等环节,均存在不合格卫生条件与违规使用添加剂等风险。在世界范围内,动物产品安全性成为重大公共安全问题,关系到产业可持续发展和人类身心健康,是亟待解决的社会问题。本文根据我国畜牧业生产现状、经济社会发展水平和动物源食品的消费特点,借鉴国外动物标识技术的经验,阐述作者2002年以来从事《动物及动物产品标识与可追溯体系研究》工作,提出建立我国动物及动物产品标识技术与可追溯管理的框架,如何与生产单位相结合推广溯源系统,跨省大流通格局与多部门管理的问题和可追溯体系的未来。

关键词：动物动物产品标识可追溯

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中国部分地区猪流感病毒的遗传演化分析

中国部分地区猪流感病毒的遗传演化分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：于海周艳君李国新闫丽萍陈宗艳童光志中国农业科学院上海兽医研究所猪病研究室

猪的呼吸道上皮细胞具有禽流感病毒和人流感病毒受体,具有感染禽流感和人流感病毒的能力,被认为是新型流感病毒产生的"混合器"和古老流感病毒长期在猪体内存在的"贮存器"。近年来,为了更好防控猪流感,我们开展了中... 详细信息

猪的呼吸道上皮细胞具有禽流感病毒和人流感病毒受体,具有感染禽流感和人流感病毒的能力,被认为是新型流感病毒产生的"混合器"和古老流感病毒长期在猪体内存在的"贮存器"。近年来,为了更好防控猪流感,我们开展了中国部分地区的猪流感流行病学调查.2006和2007年我们在广东省和浙江省的猪群中各分离到1株人源H1N1亚型和欧洲系禽源H1N1亚型SIV,并首次在中国进行相关报道;2007年我们从上海的猪群中分离到1株新型三源重组的H1N2亚型SIV,基因进化树分析表明,我们分离株的HA、NP、M和NS基因起源于古典的H1N1亚型SIV,PB2和PA基因来源禽流感病毒,NA和PB1基因来源于人流感病毒;2005和2006年我们分别在黑龙江和广东省的猪群中分离到4株人源H3N2亚型SIV病毒,在此基础上,进行了1970～2006年的44株H3N2亚型SIV进行了遗传演化分析;2007年我们从广西省猪群中分离到了4株H9N2亚型SIV,进而进行了禽源H9N2亚型SIV的分子进化研究.所有这些研究使我们对我国SIV的分子进化有了全新的理解,为猪流感疫情监测及预防控制提供理论依据.

关键词： H1N1亚型SIV H1N2亚型SIV H3N2亚型SIV H9N2亚型SIV 遗传演化

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猪轮状病毒广东分离株VP6基因的克隆及序列分析

猪轮状病毒广东分离株VP6基因的克隆及序列分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：田小艳邓雨修孙华苏润环王东东招丽婵宋延华广东省温氏集团研究院

参考GenBank中发表的猪轮状病毒PRV OSU毒株VP6基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计1对特异引物,分别以本实验室分离保存的6株RV反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1.4 kb的基因片段,并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定.测序结... 详细信息

参考GenBank中发表的猪轮状病毒PRV OSU毒株VP6基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计1对特异引物,分别以本实验室分离保存的6株RV反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1.4 kb的基因片段,并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定.测序结果表明:VP6基因全长1320bp,含有一个1194bp的开放阅读框,编码397个氨基酸。序列分析表明,6株GD分离毒株与已发表的10株国内外毒株序列进行核苷酸同源性在80.1%—95.6%之间,其中与中国JL94株的同源性最高为95.6%,与日本代表毒株R-13株的同源性最低为80.1%;氨基酸的同源性在90.7%—99.2%之间,其中与中国JL94株的同源性最高为99.2%,与R-13株的同源性最低为90.7%.6株GDRV分离株间的VP6基因核苷酸同源性为89.0%—100.0%之间,氨基酸同源性在97.5%—99.7%之间.通过核苷酸和氨基酸序列分析比较可知,轮状病毒VP6基因核苷酸同源性差异较大,但氨基酸同源性却很高,说明VP6基因存在较为普遍碱基的突变、插入和缺失现象,但大多数都为无意义突变。核苷酸系统发育进化树结果表明,GD1、GD4、GD5和GD6毒株与轮状病毒JL94毒株亲缘关系较近,GD2和GD3与美国代表毒株BRV033毒株亲缘关系较近,6个毒株同为一个进化群,且同属于A群轮状病毒中的第Ⅰ亚型。

关键词：氨基酸同源性 VP6 分离株克隆及序列分析猪轮状病毒

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S2菌苗对奶牛布氏杆菌病防制效果及安全性试验

S2菌苗对奶牛布氏杆菌病防制效果及安全性试验

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：凤英刘晓松牧仁内蒙古农牧业科学院动物医学研究所内蒙古鄂尔多斯市鄂托克前旗农牧业局

2004年内蒙古呼和浩特市地区新建的3个奶牛场,于2005年发生严重流产,作者从流产胎儿中分离到牛型布氏杆菌;7～8月份对3个奶牛场全面进行布病血清学检疫,阳性率分别为36.4%,46.8%,66.2%.根据疫病情况和以往防制布病经验,在疫区和爆发点... 详细信息

2004年内蒙古呼和浩特市地区新建的3个奶牛场,于2005年发生严重流产,作者从流产胎儿中分离到牛型布氏杆菌;7～8月份对3个奶牛场全面进行布病血清学检疫,阳性率分别为36.4%,46.8%,66.2%.根据疫病情况和以往防制布病经验,在疫区和爆发点采取免疫为主的综合性防制措施.免疫组Ⅰ场,阳性牛隔离饲养,流产牛隔离治疗,阳性牛和阴性牛连续3年S菌苗口服免疫,一次免疫即起到基本控制流产作用;免疫组Ⅱ场,阳性牛和阴性牛没有隔离淘汰,与阴性性同群饲养,每年进行S菌苗口服免疫,连续三年免疫后该场布病得到稳定控制;未免疫对照组,未进行免疫,采取以检疫为主,阳性牛隔离淘汰,环境消毒等措施,第四次检疫布病阳性率6.7%,流产率4.2%。从S菌苗对阴性反应奶牛免疫血清抗体消长规律看出,阴性泌乳牛和阴性育成牛免疫后20～30天的血清效价达到1:400,血清抗体在8个月后基本消失.对免疫组Ⅱ场同群饲养的62头泌乳牛免疫前后乳清SAT检测布病抗体,分别为45.2%和21%,但隔离饲养的阴性泌乳牛免疫后乳清SAT检测全部为阴性,因此乳清SAT检测法可作泌乳牛自然感染与免疫的鉴别诊断方法手段之一。布病阴性牛S菌苗口服免疫后,不同时期采集牛奶进行细菌学检菌,培养于布氏杆菌选择性培养基上,均无分离到病原菌,因此,阴性反应牛S菌苗口服免疫后乳品是安全的.

关键词：奶牛布鲁氏菌病 S2菌苗安全性

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云南省不同宿主H9N2感染调查和NA分子进化分析

云南省不同宿主H9N2感染调查和NA分子进化分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张泉鹏李作生鲍晓伟李乙江张富强郑钧丰王意银张应国张文东宋建领邱薇李刚山范泉水成都军区疾病预防控制中心吉林大学动物科技学院云南农业大学动物科学技术学院云南省动物疾病预防控制中心云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室

2006年6月至2007年10月从云南省十六地州随机采集的各种家禽、家猪的6033份样品,应用RT-PCR进行检测,选择具有代表性的阳性样品,克隆NA全基因并进行基因序列分和推导氨基酸的糖基化位点分析。结果表明,云南省2006～2007 H9N2亚型禽流感... 详细信息

2006年6月至2007年10月从云南省十六地州随机采集的各种家禽、家猪的6033份样品,应用RT-PCR进行检测,选择具有代表性的阳性样品,克隆NA全基因并进行基因序列分和推导氨基酸的糖基化位点分析。结果表明,云南省2006～2007 H9N2亚型禽流感病毒在全省16个地州均有流行,且检测的鸡、鸭、鹅和猪均有感染;分离的19个毒株中的13个鸡源和1个鹅源毒珠的NA全基因长1407bp,编码469个氨基酸,同源性为97-100%,是目前云南省流行的优势亚群;3个鸭源毒株、1个鹅源和1个猪源毒株NA基因长1398 bp,鳊码466个氨基酸,5个非鸡源毒株的NA基因的同源性为99%,构成云南目前流行的另一分支,推导氨基酸第62-64位3个氨基酸的缺失是与优势分支的特征性区别:两个分支间NA基因同源性为90%,与国内外其它毒株比较神经氨酸酶基因序列具有多态性.

关键词： H9N2亚型禽流感病毒神经氨酸酶基因糖基化位基因多态性

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不同细菌中质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrD调查及原核表达研究

不同细菌中质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrD调查及原核表达研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王霆王红宁张安云高荣张云飞邹立扣四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室” 四川农业大学动物医学院

本试验旨在调查不同地域采集的不同菌种,对喹诺酮类药物(Quinolones)的耐药表型和质粗介导的喹诺酮耐药基因qnrD的分子流行情况,并对qnrD基因进行克隆,原核表达.2006～2009年从四川、河南等地分离到的大肠杆菌(141株),沙门氏菌(31株),... 详细信息

本试验旨在调查不同地域采集的不同菌种,对喹诺酮类药物(Quinolones)的耐药表型和质粗介导的喹诺酮耐药基因qnrD的分子流行情况,并对qnrD基因进行克隆,原核表达.2006～2009年从四川、河南等地分离到的大肠杆菌(141株),沙门氏菌(31株),肺炎克雷伯氏菌(46株),肠球菌(50株),奇异变形杆菌(20株),共288株,采用微量稀释法测定试验菌株对环丙沙星(CIP)等四种喹诺酮类药物的MIC值;运用PCR方法调查qnrD基因的流行、分布情况;将qnrD基因定向克隆到表达载体pET-30b(+)中,转化大肠杆菌感受态BL21(DE3),经IPTG诱导阳性菌,通过SDS-PAGE检测qnrD基因的表达。试验菌株的总耐药率分别为:沙门氏菌(88.41%),奇异变形杆菌(82.65%),肺炎克雷伯氏菌(78.36%),肠球菌(72.81%),大肠杆菌(60.25%);qnrD基因的检出率分别为沙门氏菌(64.51%),肠球菌(38.00%),大肠杆菌(23.40%),肺炎克雷伯氏菌(6.52%),奇异变形杆菌(0%);SDS-PAGE分析表明,重组载体pET-qnrD可成功的在大肠杆菌中表达qnrD蛋白。本研究首次报道了qnrD基因在不同细菌中的流行情况,首次在肠球菌,大肠杆菌,肺炎克雷伯氏菌中发现了qnrD基因,对qnrD基因进行原核表达为后续试验提供了基础材料。

关键词：喹诺酮 qnrD基因耐药表型原核表达

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