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主题

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15 篇 序列分析
14 篇 原核表达
11 篇 分离鉴定
10 篇 克隆
10 篇 氧化损伤
10 篇 prrsv
10 篇 细胞凋亡
9 篇 免疫功能
9 篇 苦马豆素
9 篇 奶牛乳房炎
9 篇 黄曲霉毒素b1
8 篇 中国畜牧兽医学会
8 篇 雏鸭
8 篇 临床诊断
8 篇 猪繁殖与呼吸综合...
7 篇 家畜内科学
7 篇 学术研讨会
7 篇 猪
7 篇 口蹄疫病毒

机构

38 篇 华南农业大学
34 篇 江西农业大学
27 篇 湖南农业大学
24 篇 军事医学科学院军...
23 篇 南京农业大学
22 篇 吉林大学
20 篇 西北农林科技大学
18 篇 中国农业大学
16 篇 广西大学
13 篇 广西兽医研究所
12 篇 云南农业大学
11 篇 广东省农科院兽医...
10 篇 四川农业大学
9 篇 四川大学生命科学...
8 篇 北京市农林科学院...
8 篇 山东畜牧兽医职业...
8 篇 华中农业大学
7 篇 中国农业科学院上...
7 篇 东北农业大学
7 篇 山东农业大学

作者

24 篇 曹华斌
22 篇 金宁一
22 篇 唐兆新
20 篇 胡国良
17 篇 袁慧
16 篇 张彩英
16 篇 文利新
15 篇 郭小权
15 篇 赵宝玉
15 篇 鲁会军
13 篇 路浩
12 篇 蒋玉雯
12 篇 李斌
12 篇 黄安国
12 篇 梁家幸
12 篇 赵武
12 篇 黄爱民
12 篇 王红宁
12 篇 姚瑞英
12 篇 苏荣胜

语言

432 篇 中文
32 篇 英文

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兔出血症病毒次结构蛋白(VP2)的生物学功能研究

兔出血症病毒次结构蛋白(VP2)的生物学功能研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘光清倪征陈柳中国农业科学院上海兽医研究所浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所

兔出血症病毒(RHDV)的基因组仅编码两个结构蛋白,其中一种为衣壳蛋白(VP60),另一种为次结构蛋白(VP2)。目前,对衣壳蛋白的生物学功能已基本清楚。但是,关于次结构蛋白的生物学功能还不是很清楚。为此,本研究利用反向遗传学技术结合体外... 详细信息

兔出血症病毒(RHDV)的基因组仅编码两个结构蛋白,其中一种为衣壳蛋白(VP60),另一种为次结构蛋白(VP2)。目前,对衣壳蛋白的生物学功能已基本清楚。但是,关于次结构蛋白的生物学功能还不是很清楚。为此,本研究利用反向遗传学技术结合体外表达技术,系统研究了该蛋白的生物学功能。研究结果表明,RHDV的基因组缺失次结构蛋白(VP2)后,病毒的侵染性有所降低,但是病毒基因组的复制能力和衣壳蛋白的表达水平有所提高,说明VP2不是维持RHDV侵染性所必需的蛋白。体外研究也表明,VP2的缺失并不影响病毒样颗粒的组装,提示该蛋白不是组成病毒衣壳的组成成分。通过对接种VP2的细胞进行DAPI染色和DNA片断分析研究,发现VP2具有诱导宿主细胞凋亡的功能.由此,可以推测VP2可能在RHDV的致病机制过程发挥重要作用.

关键词：结构蛋白基因组 VP2 兔出血症病毒生物学功能

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检测囊虫循环抗原胶体金试条的研制与初步应用

检测囊虫循环抗原胶体金试条的研制与初步应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘玉唐雨德王永山王长军王平冷欣彦南京军区疾病预防控制中心江苏省农业科学院兽医所南京农业大学动物医学院

目的研制一种简便快速检测囊虫循环抗原(CA)的新方法.方法以部分纯化囊虫抗原免疫BALB/c小鼠制备抗CA单克隆抗体(McAb),经筛选获得5株能稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株.用制备的McAb两两配对,制备了囊虫CA免疫胶体金快速诊断试条.结果以1A5... 详细信息

目的研制一种简便快速检测囊虫循环抗原(CA)的新方法.方法以部分纯化囊虫抗原免疫BALB/c小鼠制备抗CA单克隆抗体(McAb),经筛选获得5株能稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株.用制备的McAb两两配对,制备了囊虫CA免疫胶体金快速诊断试条.结果以1A5和1B6配对的试条对人体囊虫CA、囊虫CA标准抗原以及63份囊虫病患者血清、9份脑囊虫病患者脑脊液的检测结果均为阳性,对弓形虫病感染者、包虫病患者及非疫区献血员血清的检测结果均为阴性;与酶联免疫吸附试验(ELISA)的平行对比试验表明,试条检测敏感性与ELISA的敏感符合率为97.03%.结论研制的免疫胶体金诊断试条可用于人体囊虫病CA的特异性诊断和流行病学调查.

关键词：单克隆抗体(McAb) 囊虫循环抗原(CA) 金免疫层析(GICA)

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广西猪流感病毒的分离及NA基因的遗传进化分析

广西猪流感病毒的分离及NA基因的遗传进化分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：侯韶毅高永锐冯建远卢桂娟陆有飞黄庆南黄伟坚赵武李斌梁家幸梁保忠姚瑞英黄安国蒋玉雯广西大学动物科学技术学院广西丽原生物股份有限公司广西兽医研究所

本研究通过鸡胚接种分离到3株猪流感病毒,经HI、RT-PCR鉴定,其中GXHZ株为H1N2亚型毒株,GXLZ、GXXY株为H3N2亚型毒株,并对分离株进行EID测定及GXHZ株的猪体攻毒试验.所扩增分离到3株SIV病毒NA基因与A/Sw/Hainan/1/2005（H1N2）的核苷酸... 详细信息

本研究通过鸡胚接种分离到3株猪流感病毒,经HI、RT-PCR鉴定,其中GXHZ株为H1N2亚型毒株,GXLZ、GXXY株为H3N2亚型毒株,并对分离株进行EID测定及GXHZ株的猪体攻毒试验.所扩增分离到3株SIV病毒NA基因与A/Sw/Hainan/1/2005（H1N2）的核苷酸和氨基酸序列同源性最高.三株SIV分离株的NA基因在氨基端胞浆尾区均由K6→R6,在非极性跨膜区均由V20→M20。系统发育分析表明本实验所分离的三个SIV毒株与H1N2亚型毒株亲缘性最相近,且来源于猪源H1N2亚型流感病毒。从时间上也发现,三个分离株的NA基因与1996年以后获得的H3N2毒株亲缘关系很近,都隶属于一个亚分支。

关键词：猪流感病毒分离 NA基因

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H3/H1流感血凝素真核表达质粒构建及在HeLa细胞中的表达

H3/H1流感血凝素真核表达质粒构建及在HeLa细胞中的表达

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：南文龙金宁一鲁会军赵翠青田明尧张金双谭磊田宇飞吉林大学畜牧兽医学院军事医学科学院军事兽医研究所

通过PCR分别改造已获得的H1亚型HA1和H3亚型HA基因片段,在融合片段间引入（GS）柔性linker和口蹄疫2A蛋白linker。采用DNAstar结合生物信息学软件InsightⅡ分析后对其空间构象进行模拟和评价。将融合表达H1HA1和H3HA的基因片段克隆至真... 详细信息

通过PCR分别改造已获得的H1亚型HA1和H3亚型HA基因片段,在融合片段间引入（GS）柔性linker和口蹄疫2A蛋白linker。采用DNAstar结合生物信息学软件InsightⅡ分析后对其空间构象进行模拟和评价。将融合表达H1HA1和H3HA的基因片段克隆至真核表达载体pVAX1 CMV启动子下游。通过脂质体法转染HeLa细胞,进行RT-PCR与间接免疫荧光检测。结果表明,成功构建了表达双亚型（H3/H1）流感病毒血凝素真核表达载体pVAX1-H3HA-H1HA1,RT-RCR表明重组质粒在转染HeLa细胞后出现了目的基因的转录,IFA证实目的基因在HeLa细胞上可有效表达。真核表达质粒pVAX1-H3HA-H1HA1可以在HeLa细胞中正确转录与表达,为抗H3,H1亚型流感病毒双价核酸疫苗的研究奠定了基础。

关键词：流感真核表达 HeLa细胞血凝素

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表达Asia1型口蹄疫病毒P1-2A基因核酸疫苗质粒构建及小鼠免疫试验

表达Asia1型口蹄疫病毒P1-2A基因核酸疫苗质粒构建及小鼠免疫试验

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：鲁会军金宁一霍晓伟于长勇韩松胡博张丹金扩世军事医学科学院军事兽医研究所吉林大学畜牧兽医学院

通过RT-PCR方法扩增得到含有FMDV P1-2A编码区的目的基因,并将其克隆到pMD18-T载体上.将pMD18-T-P1-2A和pVAXⅠ分别经EcoRⅤ和xbaⅠ双酶切后连接构建真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A.将酶切鉴定正确后的重组质粒转染HeLa细胞进行IFA检测.再进... 详细信息

通过RT-PCR方法扩增得到含有FMDV P1-2A编码区的目的基因,并将其克隆到pMD18-T载体上.将pMD18-T-P1-2A和pVAXⅠ分别经EcoRⅤ和xbaⅠ双酶切后连接构建真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A.将酶切鉴定正确后的重组质粒转染HeLa细胞进行IFA检测.再进行小鼠血清特异性抗体试验、小鼠T淋巴细胞增殖试验和IFN-γELISPOT试验.结果酶切结果与预期目的条带大小相符;荧光结果中经pVAXⅠ-P1-2A转染的细胞有明显的黄绿色荧光。说明P1-2A基因在HeLa细胞中得到了表达;小鼠免疫结果表明,用免疫的小鼠都产生了较强的体液免疫和细胞免疫,并且T淋巴细胞增殖数和产生IFN-γ的细胞数和对照组相比显著提高(P<0.05).间接ELISA试验表明,在免疫第14天抗体水平比对照组明显增高(P<0.05)。构建的真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A在小鼠免疫试验中重组质粒试验组能能够诱导产生特异性的体液免疫和细胞免疫应答。

关键词： FMDV Asia1型 P1-2A基因核酸疫苗免疫

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广西猪戊型肝炎分子流行病学调查及基因型分析

广西猪戊型肝炎分子流行病学调查及基因型分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：秦毅斌赵武肖爱欢李斌梁家幸刘芳何颖梁保忠姚瑞英黄安国蒋玉雯黄伟坚广西大学动物科学技术学院广西兽医研究所

戊型肝炎病毒(HEV)是导致人急性肝炎的主要病原之一,它还可以感染多种动物,且大多都不出现临床症状.猪是HEV传播过程中的重要的储存器.本研究选取广西不同地方的25个猪场的294份3月龄左右的猪粪便以及采集市场销售的90份猪肝脏,用RT-nPC... 详细信息

戊型肝炎病毒(HEV)是导致人急性肝炎的主要病原之一,它还可以感染多种动物,且大多都不出现临床症状.猪是HEV传播过程中的重要的储存器.本研究选取广西不同地方的25个猪场的294份3月龄左右的猪粪便以及采集市场销售的90份猪肝脏,用RT-nPCR方法检测了HEV RNA,调查广西猪戊型肝炎的流行情况.结果,在131份粪便可检测到HEV RNA,阳性率为44.6%;被检的25个猪场中存在HEV的有18个场,猪场阳性率为72.0%;26份肝脏可检测到HEV RNA,肝脏带毒率为28.9%:结果表明,广西猪群普遍存在HEV感染.对获得的39株广西猪HEV部分ORF-2基因的核苷酸序列进行了测定、比对及进化分析.39株猪HEV的序列同源性为89.9%-100%;遗传进化分析表明,获得所有毒株都属于基因Ⅳ型.

关键词：猪戊型肝炎流行病学基因型

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禽传染性支气管炎病毒疫苗株H120全基因组序列测定分析

禽传染性支气管炎病毒疫苗株H120全基因组序列测定分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张毅王红宁王霆高荣张云飞张安云樊汶樵田浪四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病与食品安全四川省重点实验室”

本研究测定了IBV疫苗株H120的全基因组序列,通过与GenBank上公布的IBV全基因组序列进行比对,对其分子特征及系统进化分析。设计18对引物,用RT-PCR方法对IBV疫苗株H120的全基因组进行分段扩增、克隆和序列测定,测定结果表明,H120基因组全... 详细信息

本研究测定了IBV疫苗株H120的全基因组序列,通过与GenBank上公布的IBV全基因组序列进行比对,对其分子特征及系统进化分析。设计18对引物,用RT-PCR方法对IBV疫苗株H120的全基因组进行分段扩增、克隆和序列测定,测定结果表明,H120基因组全长27631bp(不包括polyA),包含有10个开放阅读框(ORF).H120全基因组序列与GenBank上公布的13株IBV基因组序列的同源率在84.6～94.5%之间,与ArkDPI11同源性最高为94.5%.本研究选择具有代表性的IBV H120疫苗株进行全基因组测序及序列分析,为对其分子特征及IBV的系统进化分析提供基础.

关键词：禽传染性支气管炎病毒疫苗株H120 基因组序列分析

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肠出血性大肠杆菌O157:H7Tir基因的克隆、表达及生物学活性研究

肠出血性大肠杆菌O157:H7Tir基因的克隆、表达及生物学活性研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张雪寒何孔旺周俊明温立斌茅爱华倪艳秀郭容利俞正玉吕立新江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

克隆、表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7转位紧密素受体(Tir)基因,并研究其抗原性.选用pET28原核表达载体,体外构建Tir原核表达重组菌,并在大肠杆菌中获得高效表达.以Tir免疫家兔获得了高效价多克隆抗体,Western blot分析此抗体能与Ti... 详细信息

克隆、表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7转位紧密素受体(Tir)基因,并研究其抗原性.选用pET28原核表达载体,体外构建Tir原核表达重组菌,并在大肠杆菌中获得高效表达.以Tir免疫家兔获得了高效价多克隆抗体,Western blot分析此抗体能与Tir发生特异性抗原抗体反应.选用Hep-2细胞对Tir重组蛋白进行粘附特性分析,表达Tir蛋白能够抑制O157:H7对Hep-2细胞的粘附.表达Tir蛋白免疫Balb/c小鼠,并进行攻毒保护评价,结果显示表达Tir蛋白具有良好的免疫原性和反应性和一定的免疫保护性.在大肠杆菌中成功克隆表达了Tir基因,所获Tir具有良好的抗原性,可能用于肠出血性大肠杆菌0157基因工程疫苗的研究。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 转位紧密素受体基因表达免疫保护

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鸽源新城疫病毒陕西分离株P基因克隆与序列分析

鸽源新城疫病毒陕西分离株P基因克隆与序列分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：韩青松代鹏杨增岐张鹏张淑霞党如意樊荣王波张冲武小椿西北农林科技大学动物医学院

【目的】通过对鸽源新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)陕西分离株(NDV/Pigeon/ShX/China/2003)P基因的克隆和序列分析,为研究P基因及V基因的功能奠定基础,也为防治新城疫(Newcastle disease,ND)提供科学依据。【方法】用非免疫... 详细信息

【目的】通过对鸽源新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)陕西分离株(NDV/Pigeon/ShX/China/2003)P基因的克隆和序列分析,为研究P基因及V基因的功能奠定基础,也为防治新城疫(Newcastle disease,ND)提供科学依据。【方法】用非免疫鸡胚增值病毒,HA及HI试验鉴定增殖的病毒.参考GenBBnk发表的NDV基因序列设计1对特异性引物,RT-PCR扩增NDV/Pigeon/ShX/Chiha/2003 P基因的全长片段,并进行克隆、序列测定和序列分析.【结果】NDV/Pigeon/ShX/China/2003 P基因的全长1451 bp,其完整的ORF长度为1188 bp,编码395个氨基酸.同源性比较可知:NDV/Pigeon/ShX/China/2003与其他分离株P基因核苷酸序列同源性在63.6%～92.9%之间,推导氨基酸序列同源性在67.7%～92.2%之间.系统发育进化树表明NDV/Pigeon/ShX/China/2003与P68亲缘关系最近,与F48E9和La Sota毒株处于进化树的不同分支.【结论】NDV/Pigeon/ShX/China/2003与国内外已报道的毒株间存在较大变异.

关键词：新城疫病毒 P基因序列分析

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IBV DNA疫苗重组质粒pVAX1-S1在大肠杆菌DH5α中的稳定性研究

IBV DNA疫苗重组质粒pVAX1-S1在大肠杆菌DH5α中的稳定性研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：鲁丹王红宁高荣阳泰郭自成张云飞四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室” 四川农业大学动物医学院

为保证DNA疫苗的质量,需要对重组质粒pVAX1-S1在重组大肠杆菌DH5a中的稳定性进行研究。成功构建了含IBV S1基因的真核表达质粒pVAX1-S1,将含有质粒pVAX1-S1的基因工程菌DH5α分别在含有和不含卡那霉素(Kan)的LB平板上划线接种连续传代.... 详细信息

为保证DNA疫苗的质量,需要对重组质粒pVAX1-S1在重组大肠杆菌DH5a中的稳定性进行研究。成功构建了含IBV S1基因的真核表达质粒pVAX1-S1,将含有质粒pVAX1-S1的基因工程菌DH5α分别在含有和不含卡那霉素(Kan)的LB平板上划线接种连续传代.结果表明,在含有Kan的LB平板上连续传代100代后,质粒的目的基因片断没有缺失,具有结构稳定性;但在无抗生素选择压力下,连续传代20代开始出现质粒丢失的细胞,连续传代100代后80%的细胞含有正常质粒.结论:本实验构建的IBV真核表达质粒pVAX1-S1在宿主菌DH5α中具有稳定性,为进一步扩大生产提供技术支持。

关键词： IBV S1 真核质粒大肠杆菌DH5α 稳定性

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