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9 篇 临床诊断
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7 篇 学术研讨会
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机构

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28 篇 湖南农业大学
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23 篇 南京农业大学
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20 篇 西北农林科技大学
18 篇 中国农业大学
16 篇 广西大学
16 篇 山东畜牧兽医职业...
13 篇 广西兽医研究所
12 篇 云南农业大学
11 篇 广东省农科院兽医...
10 篇 四川农业大学
9 篇 四川大学生命科学...
8 篇 北京市农林科学院...
8 篇 山东农业大学
8 篇 华中农业大学
7 篇 上海市奶牛研究所
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作者

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22 篇 唐兆新
21 篇 胡国良
17 篇 袁慧
17 篇 文利新
16 篇 郭小权
16 篇 张彩英
15 篇 赵宝玉
15 篇 鲁会军
13 篇 路浩
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12 篇 李斌
12 篇 戴永海
12 篇 黄安国
12 篇 梁家幸
12 篇 赵武
12 篇 黄爱民
12 篇 王红宁
12 篇 姚瑞英

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我国鸡传染性支气管炎流行现状及疫苗使用

我国鸡传染性支气管炎流行现状及疫苗使用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘宇卓李银魏雪涛张敬峰江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

因鸡传染性支气管炎病毒血清型众多,目前已报道的血清型有30余种,不同血清型毒株在毒力、致病性和组织嗜性上存在着很大差异,相互间没有或仅有部分交叉免疫性,同时新的血清型不断出现,尤其是近些年,国内广泛地流行H9亚型禽流感,在临床... 详细信息

因鸡传染性支气管炎病毒血清型众多,目前已报道的血清型有30余种,不同血清型毒株在毒力、致病性和组织嗜性上存在着很大差异,相互间没有或仅有部分交叉免疫性,同时新的血清型不断出现,尤其是近些年,国内广泛地流行H9亚型禽流感,在临床表现上也有相似的呼吸道及产蛋鸡产蛋下降的症状,同时,临床上混合感染的增加,给鸡传染性支气管病的诊断带来了诸多困难,因此,加强免疫预防显得尤为重要。现将国内外常见的血清型及免疫特点及常用疫苗使用情况介绍如下。

关键词：传染性支气管炎病毒肾型传支疫苗使用流行现状

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口蹄疫重组鸡痘病毒vUTAL3CP1在牛体内的毒性、分布、抗体消长规律的研究

口蹄疫重组鸡痘病毒vUTAL3CP1在牛体内的毒性、分布、抗体消长规...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：金明兰金宁一鲁会军马鸣潇郑敏计越李旭霍晓伟刘慧娟军事医学科学院十一所全军基因工程重点实验室吉林建筑工程学院

为检测重组鸡痘病毒在牛体内的安全性和免疫原性,通过临床观察、病理组织学检测、病毒分离培养、PCR、RT-PCR、ELISA和中和抗体等方法进行了其在犊牛体内的毒性,分布以及抗体消长规律研究.试验结果:在整个试验期间,免疫动物精神状态良... 详细信息

为检测重组鸡痘病毒在牛体内的安全性和免疫原性,通过临床观察、病理组织学检测、病毒分离培养、PCR、RT-PCR、ELISA和中和抗体等方法进行了其在犊牛体内的毒性,分布以及抗体消长规律研究.试验结果:在整个试验期间,免疫动物精神状态良好、饮水、采食等临床表现一切正常;解剖实验动物,各个组织脏器未见病变,与对照组动物的组织形态、大小相同;在免疫3h时接种肌肉可分离病毒;在被检组织内检测到病毒基因,且在大部分组织能存留1d;加大剂量后在体内残留3d;诱导体内产生较高水平的抗FMDV特异性抗体和中和抗体.本试验结果进一步验证重组鸡痘病毒的良好生物安全性和较高的免疫原性。

关键词：重组鸡痘病毒毒性分布抗体消长

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兔支气管败血波氏杆菌菌毛粗提物三种抗体检测方法的建立及比较

兔支气管败血波氏杆菌菌毛粗提物三种抗体检测方法的建立及比较

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：范志宇王欣王芳熊富强胡波张则斌徐为中江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心苏州药明康德新药开发有限公司

利用超声波处理结合TritonX-100溶解法制备粗提的菌毛抗原,建立了三种用于支气管败血波氏杆菌的抗体检测方法:琼脂免疫扩散试验(AGID)、玻片凝集试验(SAT)、间接血凝试验(IHA).临床检测了458份兔血清样品,结果发现,IHA试验的阳性检出率... 详细信息

利用超声波处理结合TritonX-100溶解法制备粗提的菌毛抗原,建立了三种用于支气管败血波氏杆菌的抗体检测方法:琼脂免疫扩散试验(AGID)、玻片凝集试验(SAT)、间接血凝试验(IHA).临床检测了458份兔血清样品,结果发现,IHA试验的阳性检出率最高73.36%(336/458),AGID试验阳性63.54%(291/458)和SAT试验阳性61.79%(283/458),三者均阳性为57.20%(262/458);IHA与AGID的符合率为90.17%,IHA与SAT试验的符合率为86.68%,AGID与SAT的符合率为89.08%。可见IHA试验更为敏感,可用于支气管败血波氏杆菌的血清学监测.

关键词：支气管败血波氏杆菌琼脂免疫扩散试验玻片凝集试验间接血凝试验抗体检测

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猪细小病毒主要非结构蛋白与结构蛋白的密码子偏爱性分析

猪细小病毒主要非结构蛋白与结构蛋白的密码子偏爱性分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：赵武李斌梁家幸梁保忠姚瑞英黄安国何颖蒋玉雯广西兽医研究所病毒研究室

通过分析猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)主要非结构蛋白(non-structural protein,NS1)及结构蛋白(VP1、VP2)的密码子偏爱性,为三种蛋白基因表达中宿主系统的选择提供参考.运用EMBOSS(The European MolecularBiology Open Software Suite)的CHIPS(Codon Heterozygosity in a Protein Coding Sequence)和CUSP(Create a codonusage table)程序对PPV的NS1、VP1和VP2蛋白基因进行分析,并将分析结果与大肠杆菌、酵母及人的密码子偏爱性进行比较.结果显示,PPV NS1、VP1、VP2基因的Nc(Effective number of codons)值分别为39.696、36.638、36.482,表明三种蛋白存在较明显的密码子偏爱性,并且均偏爱选择第三位核苷酸为A的密码子.PPV三种蛋白与大肠杆菌、酵母及人的密码子偏爱性也有一定差异,其中与酵母的密码子偏爱性差异最小,其表达系统选择在酵母较为合适.

关键词：猪细小病毒非结构蛋白结构蛋白密码子偏爱性

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乙型脑炎病毒E蛋白在大肠杆菌中的高效表达

乙型脑炎病毒E蛋白在大肠杆菌中的高效表达

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张丹刘昊鲁会军金扩世于长勇胡博颜雯金宁一军事医学科学院军事兽医研究所吉林大学畜牧兽医学院云南农业大学动物科技学院

目的将乙型脑炎病毒E蛋白基因克隆至pET-28a(+)表达载体,构建原核表达质粒pET-28a(+)/E,并使该基因在***中高效表达,为进一步研制乙脑早期诊断试剂奠定基础。方法以乙型脑炎病毒疫苗株全基因序列为模板设计引物,通过RT-PCR方法扩增目的... 详细信息

目的将乙型脑炎病毒E蛋白基因克隆至pET-28a(+)表达载体,构建原核表达质粒pET-28a(+)/E,并使该基因在***中高效表达,为进一步研制乙脑早期诊断试剂奠定基础。方法以乙型脑炎病毒疫苗株全基因序列为模板设计引物,通过RT-PCR方法扩增目的片段,将其克隆到pMD18-T载体中,得到克隆质粒pMD18-T/***18-T/E经XhoⅠ和EcoRⅠ酶切,测序后连接pET-28a(+)载体,构建了重组原核表达质粒pET-28a(+)/E.转化至大肠杆菌BL21(DE3)后,利用IPTG诱导获得高效表达。结果扩增出了1500bp的基因片段,与预期大小一致,测序后经Blast验证与已发表乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白基因序列同源性为98%,成功克隆至表达载体pET-28a(+)并获得高效表达,表达产物分子量约为53kDa.结论该表达产物的稳定高效表达为乙脑的诊断试剂开发提供了依据.

关键词：乙型脑炎病毒 RT-PCR 克隆基因表达

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基因工程蛋白金葡菌-溶血素的纯化及活性检测

基因工程蛋白金葡菌-溶血素的纯化及活性检测

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张海燕马卫明杨宏军王长法何洪彬曹永芝山东农业大学动物科技学院山东省农业科学院奶牛研究中心

【目的】分离纯化基因工程重组蛋白金黄色萄萄球菌溶血素（-hemolysin,HL）并检测其生物学活性,为疫苗研发奠定基础.【方法】对含pET32a- -HL质粒的BL21（DE3）进行诱导表达,诱导成功之后,将重组菌BL21（DE3）培养物用超声波裂解,并用... 详细信息

【目的】分离纯化基因工程重组蛋白金黄色萄萄球菌溶血素（-hemolysin,HL）并检测其生物学活性,为疫苗研发奠定基础.【方法】对含pET32a- -HL质粒的BL21（DE3）进行诱导表达,诱导成功之后,将重组菌BL21（DE3）培养物用超声波裂解,并用凝胶过滤层析法对该基因工程蛋白进行分离纯化,用Bradford法及兔红细胞分别测定纯化产物的蛋白含量和溶血比活.【结果】纯化产物在SDS-PAGE电泳中53 ku处呈现出单一清晰带,达电泳级纯度.纯化产物含量约为0.1277mg/mL,溶血比活为8 192HU/mg.【结论】成功获得了金黄色萄萄球菌HL,且所获的HL具有良好的溶血活性.

关键词：溶血素金黄色葡萄球菌溶血活性基因工程蛋白原核表达

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猪瘟兔化弱毒疫苗株荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

猪瘟兔化弱毒疫苗株荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘大伟张小飞胡来根薛家宾尹秀凤毛火云南京天邦生物科技有限公司安徽农业大学江苏省农业科学院

在猪瘟兔化弱毒株较保守的E0基因序列区内设计一对引物和一条TaqMan探针,经优化反应条件,建立了定量检测HCLV的方法.结果表明:本方法检测的最低拷贝数为3.84拷贝/μL,线性范围是10～7～10～0;分别以猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)... 详细信息

在猪瘟兔化弱毒株较保守的E0基因序列区内设计一对引物和一条TaqMan探针,经优化反应条件,建立了定量检测HCLV的方法.结果表明:本方法检测的最低拷贝数为3.84拷贝/μL,线性范围是10～7～10～0;分别以猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、牛病毒性腹泻(BVDV)作为模板进行扩增,未出现阳性信号;试验组内变异系数1.05%～1.84%,组间变异系数为3.70%～5.43%。对32批猪瘟兔化弱毒细胞培养抗原样品进行定量检测,同时用兔定型热反应法测定兔体感染量(rabbit infection dose,RID)进行比较,两者有较好的相关性。本方法具有快速、敏感、特异性强、稳定性好的优点,初步应用表明对猪瘟疫苗生产配制及成品检验具有指导作用。

关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV) 荧光定量PCR 初步应用

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凝胶过滤与镍柱亲和纯化基因工程蛋白金葡菌-溶血素的生物学特性比较

凝胶过滤与镍柱亲和纯化基因工程蛋白金葡菌-溶血素的生物学特性...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张海燕杨宏军王长法何洪彬马卫明杨少华山东省农业科学院奶牛研究中心山东农业大学动物科技学院

以在宿主菌株BL21(DE3)中成功表达的重组金黄色葡萄球菌溶血素蛋白作为研究对象,分析比较通过凝胶过滤层析(Gel Filtration Chromatography)和镍柱亲和层析纯化试剂盒(Ni-NTA Spin Columns)纯化所得到的重组蛋白的蛋白含量和生物特性方... 详细信息

以在宿主菌株BL21(DE3)中成功表达的重组金黄色葡萄球菌溶血素蛋白作为研究对象,分析比较通过凝胶过滤层析(Gel Filtration Chromatography)和镍柱亲和层析纯化试剂盒(Ni-NTA Spin Columns)纯化所得到的重组蛋白的蛋白含量和生物特性方面的差异。SDS-PAGE分析检测纯化产物,Bradford法测定蛋白含量,兔红细胞测定半数溶血效价.结果显示这两种方法得到的纯化产物在53 kD处均呈现单一清晰带,达电泳级纯度.与此同时,凝胶过滤对目的蛋白的纯化率为14.04%,蛋白含量为0.337 mg/mL,溶血活性为1519 HU/mg;镍柱亲和层析的纯化率为17.5%,蛋白含量为0.35 mg/mL,溶血活性为1463 HU/mg。由此可见,凝胶过滤得到的纯化产物在蛋白含量和蛋白活性方面丝毫不亚于镍柱亲和层析纯化试剂盒。

关键词：溶血素凝胶过滤层析镍柱亲和层析

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水貂阿留申病毒主要VP2基因的原核表达

水貂阿留申病毒主要VP2基因的原核表达

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：孟庆峰梁艳婷蔡阳钱爱东王伟利吉林出入境检验检疫局吉林农业大学动物科学技术学院

根据GenBank中已发表的水貂阿留申病毒(ADV)VP2基因核苷酸序列设计合成1对特异引物,利用PCR方法扩增ADV国内分离株部分VP2基因片段,将其克隆到原核表达载体pET-28a的多克隆位点中。经酶切、PCR扩增和测序分析证实其已正确插入到表达载体... 详细信息

根据GenBank中已发表的水貂阿留申病毒(ADV)VP2基因核苷酸序列设计合成1对特异引物,利用PCR方法扩增ADV国内分离株部分VP2基因片段,将其克隆到原核表达载体pET-28a的多克隆位点中。经酶切、PCR扩增和测序分析证实其已正确插入到表达载体中,构建原核表达载体pET-28a-VP2.阳性重组质粒转化宿主菌BL21,用IPTG进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE检测和免疫印迹分析.结果表明蛋白获得了表达,表达产物的分子质量为21KD,与理论推测的分子质量一致;终浓度为1mmol/L的IPTG诱导下,5h时其表达量达到高峰;Westernblot分析表明表达蛋白能被兔抗水貂抗体所识别,具有相应的抗原性.

关键词：水貂阿留申病毒 VP2基因原核表达

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共表达PRRSV GP5和M蛋白重组腺病毒的构建与鉴定

共表达PRRSV GP5和M蛋白重组腺病毒的构建与鉴定

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：云涛余斌陈柳倪征华炯钢王根荣张彦明刘光清浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所西北农林科技大学动医学院嘉兴市秀城区畜牧兽医站

本研究利用口蹄疫病毒(FMDV)2A蛋白具有自我裂解的功能,将其作为连接肽将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的GP5和M蛋白编码基因串联,置于复制缺陷型腺病毒载体的表达盒中,通过一次转录和翻译,可以同时实现两个蛋白的表达,以发挥GP5蛋白... 详细信息

本研究利用口蹄疫病毒(FMDV)2A蛋白具有自我裂解的功能,将其作为连接肽将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的GP5和M蛋白编码基因串联,置于复制缺陷型腺病毒载体的表达盒中,通过一次转录和翻译,可以同时实现两个蛋白的表达,以发挥GP5蛋白的病毒中和优势和M蛋白的细胞免疫优势作用.分别利用RT-PCR、间接免疫荧光和Western blot等方法,对获得的重组腺病毒(rAd-GP5-2A-M)进行检测,结果均证明GP5-2A-M蛋白不仅获得了正确表达,而且能自我裂解为GP5和M蛋白。上述研究表明,在GP5和M蛋白之间插入具有自我裂解功能的FMDV2A策略是切实可行的,并为PRRSV多个蛋白的共表达奠定了基础,也为其它病毒的基因工程疫苗研制提供了全新的思路.

关键词：重组腺病毒共表达 HEK GPS PRRSV GP5 基因工程疫苗

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