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460 篇 会议
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441 篇 农学
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13 篇 工学
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主题

16 篇 奶牛
15 篇 序列分析
14 篇 原核表达
11 篇 分离鉴定
10 篇 克隆
10 篇 氧化损伤
10 篇 prrsv
10 篇 细胞凋亡
9 篇 免疫功能
9 篇 苦马豆素
9 篇 奶牛乳房炎
9 篇 黄曲霉毒素b1
8 篇 中国畜牧兽医学会
8 篇 雏鸭
8 篇 临床诊断
8 篇 猪繁殖与呼吸综合...
7 篇 家畜内科学
7 篇 学术研讨会
7 篇 猪
7 篇 口蹄疫病毒

机构

38 篇 华南农业大学
34 篇 江西农业大学
27 篇 湖南农业大学
24 篇 军事医学科学院军...
23 篇 南京农业大学
22 篇 吉林大学
20 篇 西北农林科技大学
18 篇 中国农业大学
16 篇 广西大学
13 篇 广西兽医研究所
12 篇 云南农业大学
11 篇 广东省农科院兽医...
10 篇 四川农业大学
9 篇 四川大学生命科学...
8 篇 北京市农林科学院...
8 篇 山东畜牧兽医职业...
8 篇 华中农业大学
7 篇 中国农业科学院上...
7 篇 东北农业大学
7 篇 山东农业大学

作者

24 篇 曹华斌
22 篇 金宁一
22 篇 唐兆新
20 篇 胡国良
17 篇 袁慧
16 篇 张彩英
16 篇 文利新
15 篇 郭小权
15 篇 赵宝玉
15 篇 鲁会军
13 篇 路浩
12 篇 蒋玉雯
12 篇 李斌
12 篇 黄安国
12 篇 梁家幸
12 篇 赵武
12 篇 黄爱民
12 篇 王红宁
12 篇 姚瑞英
12 篇 苏荣胜

语言

432 篇 中文
32 篇 英文

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11株猪繁殖与呼吸综合症病毒ORF5基因序列分析

11株猪繁殖与呼吸综合症病毒ORF5基因序列分析

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张冠群马静云何晓明王连想朱玲毛燕毕英佐华南农业大学动物科学学院

从广东省不同地区呼吸道症状明显的组织样品中分离到11株引起MARC-145细胞病变的病毒,经RT-PCR和序列分析鉴定为美洲型猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV),其ORF5全基因均为603bp,不存在核苷酸的插入或缺失,但存在多个位点的点突变,推导的... 详细信息

从广东省不同地区呼吸道症状明显的组织样品中分离到11株引起MARC-145细胞病变的病毒,经RT-PCR和序列分析鉴定为美洲型猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV),其ORF5全基因均为603bp,不存在核苷酸的插入或缺失,但存在多个位点的点突变,推导的氨基酸序列相似性在97.0%～99.5%,与国内外参考株推导的氨基酸序列的相似性在85.1%～99.0%,11个毒株处于同一个大分支下,又分属不同的小分支,与XH-GD、JXA1等遗传距离较近,与YN01、CC-1、MLV、VR-2332的遗传距离较远,与HL的遗传距离最远。11个毒株ORF5氨基酸序列在两端的高变区和中间的较保守区均有不同程度的突变,均存在位置和序列均一致的4个潜在糖基化位点;抗原表位分析结果显示,在不同的表位分别有不同位点的点突变,但这些位点的突变,可能不会改变该区域的疏水性能,不会引起抗原表位的变化.

关键词：猪繁殖与呼吸综合症病毒 ORF5基因序列分析

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PRRSV分离株GP5的基因序列分析及msyB-GP5融合表达质粒的构建

PRRSV分离株GP5的基因序列分析及msyB-GP5融合表达质粒的构建

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：林志雄何晓明马静云罗琼谢青梅陈茹罗长保陈荣光田纯见广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心华南农业大学动物科学学院

根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的基因序列,设计1对包含完整ORF5基因序列的特异引物,利用RT-PCR技术扩增PRRSV GD-I1分离株的ORF5基因,并时其进行序列测定,同时与已发表的13株PRRSV进行同源性比较。将扩增的PRRSV GD-I1分... 详细信息

根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的基因序列,设计1对包含完整ORF5基因序列的特异引物,利用RT-PCR技术扩增PRRSV GD-I1分离株的ORF5基因,并时其进行序列测定,同时与已发表的13株PRRSV进行同源性比较。将扩增的PRRSV GD-I1分离株的ORF5基因克隆到含msyB伴侣基因的可溶表达载体pBCX上构建重组表达质粒。结果显示,扩增获得的DNA片段约为603bp,与国内经典的CH-1a株核苷酸同源性最高,为98.7%,氨基酸同源性为97.5%.msyB-GP5重组表达质粒经双酶切后分为两个片段,大小与预期一致,表明已成功获得重组表达质粒.该基因的序列分析与重组表达质粒的成功构建,为对GP5蛋白的研究奠定基础.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 克隆序列分析表达

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PCR-DGGE技术研究荣昌猪、长白、杜洛克猪肠道微生物群落多样性

PCR-DGGE技术研究荣昌猪、长白、杜洛克猪肠道微生物群落多样性

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：曾志光王红宁高荣唐俊妮管仲兵四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病与食品安全四川省重点实验室”

本文采用PCR-DGGE指纹图谱技术研究荣昌猪、长白、杜洛克猪肠道微生物群落的多样性,进行了不同品种间肠道微生物群落差异比较。通过提取猪粪样总DNA,进行16S rDNA的V3区扩增及DGGE电泳分析.结果表明,在DGGE图谱中,荣昌猪肠道微生物群落... 详细信息

本文采用PCR-DGGE指纹图谱技术研究荣昌猪、长白、杜洛克猪肠道微生物群落的多样性,进行了不同品种间肠道微生物群落差异比较。通过提取猪粪样总DNA,进行16S rDNA的V3区扩增及DGGE电泳分析.结果表明,在DGGE图谱中,荣昌猪肠道微生物群落多样性最高,共34条较明显的种\属菌条带,长白、杜洛克猪分别有31条,27条种\属菌条带.其中有10个条带是三个品种猪共有的优势种\属菌条带.荣昌猪与杜洛克猪的肠道微生物群落差异为37.3%;荣昌猪与长白猪的肠道微生物群落差异为31.8%.研究初步表明,相同生长环境中,猪肠道微生物群落差异可能与品种不同有关.

关键词：变性梯度凝胶电泳(DGGE) 荣昌猪肠道微生物

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兔病毒性出血症病毒次结构蛋白(VP12)的细胞内定位研究

兔病毒性出血症病毒次结构蛋白(VP12)的细胞内定位研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：陈柳刘光清倪征余斌云涛华炯钢李双茂浙江省农业科学院农业部病毒学与生物技术重点实验室

目的)VP12是兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)一种次要结构蛋白。本文旨在构建VP12与绿色荧光蛋白融合的真核表达载体,进而利用它研究VP12在细胞内的定位情况。(方法)首先在大肠杆菌中表达了GST-VP12融合蛋白,然后... 详细信息

目的)VP12是兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)一种次要结构蛋白。本文旨在构建VP12与绿色荧光蛋白融合的真核表达载体,进而利用它研究VP12在细胞内的定位情况。(方法)首先在大肠杆菌中表达了GST-VP12融合蛋白,然后用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备抗VP12的抗血清。再利用该抗体对转染pEGFP-VP12的BHK-21细胞进行检测,以研究VP12蛋白在细胞内的定位情况.(结果)结果表明,pEGFP-VP12转染BHK-21细胞后,不仅VP12蛋白得到了成功表达,而且通过检测偶联的绿色荧光蛋白可判断Vp12在细胞内的定位。检测结果显示,VP12蛋白主要分布于BHK-21细胞的细胞质.(结论)成功构建了VP12与绿色荧光蛋白融合的表达载体,并在真核细胞内实现了表达,通过检测荧光蛋白,发现VP12主要在细胞质内表达并分布,本研究为深入探讨VP12的生物学功能奠定了基础。

关键词：兔出血症病毒 VP12 次级结构蛋白细胞内定位

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H9N2亚型河南分离毒株HA基因的扩增及序列分析比较

H9N2亚型河南分离毒株HA基因的扩增及序列分析比较

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王泽霖柴丽娜李和平王新卫河南农业大学禽病研究所

从不同致病力的25株H9N2亚型毒株中选出6株(3#、18#,17#、20#、6#、10#)有代表性的毒株,利用RT-PCR技术扩增其HA基因,并对其序列进行分析比较。结果表明:(1)所扩增的HA基因全长1683bp,编码560个氨基酸.在HA1和HA2的氨基酸裂解位点上有... 详细信息

从不同致病力的25株H9N2亚型毒株中选出6株(3#、18#,17#、20#、6#、10#)有代表性的毒株,利用RT-PCR技术扩增其HA基因,并对其序列进行分析比较。结果表明:(1)所扩增的HA基因全长1683bp,编码560个氨基酸.在HA1和HA2的氨基酸裂解位点上有三种模式:RSSR↓GLF、RLSR↓GLF和VSSR↓GLF三种模式,均无出现高致病性禽流感R-X-R/K-R模式,因此均为典型的低致病性毒株。7个受体结合位点3#、6#、、17#、18#为YWTNVLY,20#为YWTHELY,10#为YWTSELY.潜在糖基化位点除了3#和18#多出一个之外,其余均为8个。(2)6个毒株核苷酸同源性为82.9%～100%,氨基酸同源性为85.6%～99.8%。除了20#之外,其余5个毒株之间核苷酸与氨基酸的同源性都在93%以上。与国内代表株DK/HK/G9/97核苷酸的同源性分别为:96.6%、95.7%、93.3%、95.7%、94.7%、82.5%;氨基酸同派性分别为:96.4%、95.9%、94.9%、95.9%、95.1%、88.0%,表明亲源关系比较近.HA基因系统进化树表明:3#、6#、10#、17#、18#毒株属于欧亚分支,而20#属于北荚分支.(3)个别毒株受体结合位点,潜在糖基化位点、裂解位点也发生了变化。其中3#和18#毒株在145aa-147aa多了一个糖基化位点NGT,20#毒株在141aa-143aa和305aa-307aa两处糖基化位点分别为NVT和NIS,在191aa和198aa处受体结合位点为H和E,裂解位点VSSRGLF,与其它毒株不同。3#和18#所表现出较强的致病性可能与其在HA的头部(HA1)的A抗原位点上多了一个糖基化位点(145aa-147aa),改变了HA基因空间构型有关,空间构型的改变导致2A4、F6、H、B4单抗作用位点的变异或缺失并影响其较近的受体结合位点,从而改变该毒株的抗原性。3#和18#致病力性的增强是否与除HA以外的其它基因的改变有关尚需进一步探讨。该研究结果不仅在分子流行病学上丰富了H9N2基础理论,而且为我国政府制定禽流感扑灭政策有效地防制H9N2流行提供了科学的指导.

关键词：氨基酸糖基化位点序列分析

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细胞病变法与免疫捕获ELISA法测定小反刍兽疫活疫苗TCID50结果的比较

细胞病变法与免疫捕获ELISA法测定小反刍兽疫活疫苗TCID50结果的...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王玉红支海兵黄炯李黎薛英刘宏贺笋朱刚李延涛王红巧新疆天康畜牧生物技术股份有限公司中国兽医药品监察所新疆畜牧科学院

参照中国兽医药品监察所提出的小反刍兽疫活疫苗制造及检验试行规程(草案),对新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产的16批小反刍兽疫弱毒冻干活疫苗进行病毒含量测定,通过观察细胞病变(CPE)及免疫捕获ELISA双重检验,每头份(1ml)病毒含... 详细信息

参照中国兽医药品监察所提出的小反刍兽疫活疫苗制造及检验试行规程(草案),对新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产的16批小反刍兽疫弱毒冻干活疫苗进行病毒含量测定,通过观察细胞病变(CPE)及免疫捕获ELISA双重检验,每头份(1ml)病毒含量均高于103TCID50,达到规程要求。在疫苗检验过程中,考虑规程中检验程序比较麻烦,历时较长(在试验比较顺利的情况下,一批苗最终得到结果至少花费8天),并且还受到细胞质量等因素的影响,同时还对每批成品疫苗直接进行捕获ELISA(病毒不接种细胞)测定,对不同时期的病毒细胞液也同时作了大量的测定,以期从中找到一定的相关性,从而达到简化检验步骤,缩短检验时间的目的。结果显示:16个冻干疫苗样品,每个样品重复两次,两组数据的相关性r=0.9213;若再加16个病毒液样品,两组数据的相关性r=0.8751,这可能由于病毒液中有时可能有细胞,导致取样没有成品疫苗均匀的原因。通过两组数据的比较,可以认为直接用捕获ELISA法对成品苗检测是比较可行可靠的。

关键词：细胞病变免疫捕获ELISA 小反刍兽疫弱毒活疫苗 TCID50

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应用焦磷酸测序技术检测猪流感病毒金刚烷胺耐药性的分子标签

应用焦磷酸测序技术检测猪流感病毒金刚烷胺耐药性的分子标签

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘华雷王志亮吕艳黄伟坚鄢明华张维李明义王清华李金明郑东霞赵云玲孙承英中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心广西大学动物科学技术学院天津市畜牧兽医研究所

流感病毒M2蛋白五个关键位点氨基酸残基(第26、27、30、31和34位)中的任何一个发生突变会导致抗流感病毒药物中金刚烷胺抗药性的产生。本研究利用焦磷酸测序技术对2004年～2008年国内分离的10株猪流感病毒进行了鉴定,并初步进行了抗药... 详细信息

流感病毒M2蛋白五个关键位点氨基酸残基(第26、27、30、31和34位)中的任何一个发生突变会导致抗流感病毒药物中金刚烷胺抗药性的产生。本研究利用焦磷酸测序技术对2004年～2008年国内分离的10株猪流感病毒进行了鉴定,并初步进行了抗药性分析。结果表明基于M2蛋白基因保守区序列建立的焦磷酸测序技术能用于国内猪流感病毒的快速检测,且具有较好的特异性和重复性。抗药性分析表明10株猪流感病毒国内分离株中5株H1N1分离株全部耐药,主要存在M2蛋白的V27T、V27I或S31N位点的突变,而4株H3N2和1株H9N2猪流感病毒分离株在M2蛋白5个关键位点上均未出现变异,表明其对金刚烷胺敏感。

关键词：猪流感病毒焦磷酸测序抗药性分析

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*** LTb与PRRSV gp5融合基因原核表达及小鼠免疫效果研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：袁秀芳刘焕王一成徐丽华张存浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

采用PCR重叠延伸技术将LTb和PRRSV ORF5基因通过柔性连接进行融合后,克隆入原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点中,经鉴定后得到重组质粒pET-LTb-gp5,将重组质粒转化到受体菌BL21(DE3)中,并用诱导剂IPTG进行诱导表达,经15%SDS-PAGE电泳... 详细信息

采用PCR重叠延伸技术将LTb和PRRSV ORF5基因通过柔性连接进行融合后,克隆入原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点中,经鉴定后得到重组质粒pET-LTb-gp5,将重组质粒转化到受体菌BL21(DE3)中,并用诱导剂IPTG进行诱导表达,经15%SDS-PAGE电泳检测,表达得到的蛋白大小为26KD.经WesternBlotting分析,表达蛋白均能与PRRSV阳性猪血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应.为了比较猪繁殖与呼吸综合症ORF5基因的原核表达蛋白gp5蛋白及融合表达的LTb-gp5蛋白的免疫效果.将表达产物gp5蛋白及融合表达的LTb-gp5蛋白免疫6-8周龄ICR小鼠,并设对照组,用间接ELISA法和MTT法检测小鼠血清中特异性抗体水平以及脾脏中T,B淋巴细胞增殖功能.结果gp5蛋白以肌肉注射途径免疫效果较好;三免后抗体达到较高水平,其中LTb-gp5 IM与gp5乳化组之间差异不显著,而这两组与gp5 IM差异显著;LTb-gp5 IM、gp5乳化组和gp5 IM均能够诱导脾脏T,B淋巴细胞增殖.

关键词： LTb PRRSV gp5 克隆表达免疫

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猴源细小病毒的分离鉴定

猴源细小病毒的分离鉴定

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：杨松涛王淑君冯浩张仁舟曾林夏志平邹啸环王承宇连海孙兆增孟轲音王泽夏咸柱军事医学科学院军事兽医研究所军事医学科学院实验动物中心

2008年我国某实验动物养殖基地发生猴传染性腹泻并引起死亡,临床症状类似犬猫细小病毒性肠炎。采集发病猴肠内容物,通过细胞培养进行病毒分离。采用血凝试验、PCR检测、免疫组织化学检测、电镜观察、直接免疫荧光检测、理化学鉴定、动... 详细信息

2008年我国某实验动物养殖基地发生猴传染性腹泻并引起死亡,临床症状类似犬猫细小病毒性肠炎。采集发病猴肠内容物,通过细胞培养进行病毒分离。采用血凝试验、PCR检测、免疫组织化学检测、电镜观察、直接免疫荧光检测、理化学鉴定、动物感染实验等方法对分离病毒进行了系统鉴定。结果F81细胞盲传三代后发生细小病毒样细胞病变,此分离病毒对猪红细胞的血凝效价为1:512;用845bp细小病毒通用引物进行PCR检测结果阳性;免疫组化检测肠绒毛上皮细胞呈细小病毒阳性反应;电镜负染和超薄切片观察见典型的细小病毒样粒子;直接免疫荧光检测结果阳性。用该病毒实验感染5只家猫,7日后相继发病死亡。序列分析结果表明,10个关键氨基酸位点中有8个与FPV相同,有2个与CPV相同。认为该病毒分离株为FPV变异株。该病毒是如何跨种传播给猴并发生致病性突变的尚需进一步研究。

关键词：细小病毒 FPV 猴分离

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猪圆环病毒2型感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响

猪圆环病毒2型感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：司兴奎张济培陈建红顾万军马春全佛山科学技术学院广东省高校预防兽医学重点实验室

为明确PCV2感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响,采用阻断ELISA方法对单独接种猪伪狂犬疫苗组(A组,n=3)及PCV2人工感染3周后接种猪伪狂犬疫苗组(PA组,n=5)后不同时相血清中的猪伪狂犬gB抗体进行检测;同时对不同时相前腔静脉血进行CD4/CD8流... 详细信息

为明确PCV2感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响,采用阻断ELISA方法对单独接种猪伪狂犬疫苗组(A组,n=3)及PCV2人工感染3周后接种猪伪狂犬疫苗组(PA组,n=5)后不同时相血清中的猪伪狂犬gB抗体进行检测;同时对不同时相前腔静脉血进行CD4/CD8流式细胞术及血常规分析.结果表明,在PCV2感染后2周至5周间,A组白细胞含量均高于PA组,随后PA组白细胞恢复至与A组略高的正常水平;在整个试验中,除接种猪伪狂犬疫苗后1和9周(WPI)外的所有时相PA组的淋巴细胞含量均略高于A组;PCV2感染后可使记忆/激活Th细胞数量略有升高,幼稚型Th细胞含量的下降;PCV2感染后2-7周PA组Tc细胞均高于A组,在9WPI PA组Tc细胞数量显著下降(P<0.05);除9WPI外,A组的S/N值均低于PA组.结果提示,PCV2感染看降低机体产生针对PRV gB特异性抗体水平,且在一定程度上降低了幼稚型Th细胞及Tc细胞含量.

关键词：猪圆环病毒2型猪伪狂犬疫苗免疫应答阻断ELISA 流式细胞术

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