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10 篇 prrsv
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23 篇 南京农业大学
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8 篇 华中农业大学
7 篇 中国农业科学院上...
7 篇 东北农业大学
7 篇 山东农业大学

作者

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22 篇 唐兆新
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17 篇 袁慧
16 篇 张彩英
16 篇 文利新
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15 篇 赵宝玉
15 篇 鲁会军
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12 篇 蒋玉雯
12 篇 李斌
12 篇 黄安国
12 篇 梁家幸
12 篇 赵武
12 篇 黄爱民
12 篇 王红宁
12 篇 姚瑞英
12 篇 苏荣胜

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432 篇 中文
32 篇 英文

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猪细小病毒自然弱毒N株(PPV-N株)VP1基因的扩增与生物信息学分析

猪细小病毒自然弱毒N株(PPV-N株)VP1基因的扩增与生物信息学分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：赵武李斌梁家幸梁保忠白安斌姚瑞英黄安国何颖蒋玉雯广西兽医研究所

对猪细小病毒自然弱毒PPV-N株VP1基因扩增及测序,利用生物信息学技术预测VP1蛋白的二级结构与B细胞抗原表位以及分析该蛋白的氨基酸差异位点及密码子偏爱性.结果表明,PPV-N株VP1基因与弱毒参考毒株NADL-2VP1基因同源性最高,亲缘关系最近... 详细信息

对猪细小病毒自然弱毒PPV-N株VP1基因扩增及测序,利用生物信息学技术预测VP1蛋白的二级结构与B细胞抗原表位以及分析该蛋白的氨基酸差异位点及密码子偏爱性.结果表明,PPV-N株VP1基因与弱毒参考毒株NADL-2VP1基因同源性最高,亲缘关系最近,为PPV-N株和NADL-2株同属弱毒株提供了分子生物学依据.PPV-N株VP1蛋白的二级结构较为复杂,以β-折叠为主,并有较多的转角和无规则卷曲区域,在序列的20-56,61-80,86-130,136-188区域为B细胞抗原表位的优势区域.PPV强、弱毒株VP1蛋白存在5个氨基酸差异位点(T-365-I,G-528-D,Q-533-H,P-586-S,K-715-R),这些位点处氨基酸残基抗原性与毒力成正相关.PPV-N株VP1蛋白在A、C、E、G、H、I、K、N、Q、R、S、T、V和Y氨基酸于密码子选择上存在一定的偏爱性.

关键词： PPV-N株 VP1基因扩增生物信息学分析

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一株鹅源副粘病毒分离株全基因组序列的克隆与序列分析

一株鹅源副粘病毒分离株全基因组序列的克隆与序列分析

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：魏雪涛李银刘宇卓张敬峰江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

从发病的鹅分离到一株鹅源副粘病毒（GPMV）,血清学鉴定表明该分离病毒为禽副粘病毒-Ⅰ型（PMV-Ⅰ）.运用RT-PCR方法获取了E01株鹅副粘病毒全基因组序列,并对其进行了比较分析.此株鹅副粘病毒（E01）的全基因组序列由15192个碱基组成,与... 详细信息

从发病的鹅分离到一株鹅源副粘病毒（GPMV）,血清学鉴定表明该分离病毒为禽副粘病毒-Ⅰ型（PMV-Ⅰ）.运用RT-PCR方法获取了E01株鹅副粘病毒全基因组序列,并对其进行了比较分析.此株鹅副粘病毒（E01）的全基因组序列由15192个碱基组成,与鸡NDV一致,基因由6个ORF组成,3'-NP-P-M-F-HN-L-5',但是在NP基因和P基因之间的非翻译区多了6个核苷酸ACACTC.测序后拼接的F基因长1672bp,包含完整的开放阅读框（1662bp）,编码553个氨基酸,F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为R-R-QK-R-F,具有强毒株序列特性,同时也与本实验分离该株鹅副粘病毒分离株致病性试验结果相符。根据NDV基因分型标准,鹅副粘病毒E01株归属基因Ⅶ型副粘病毒。F基因与国内外NDV代表株的核苷酸同源性为80.9%～97.7%测序后拼接的HN基因长为1716 bp,编码571个氨基酸,与国内外NDV代表株的核苷酸同源性为80.0%～98.1%。

关键词：副粘病毒全基因组测序与分析

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猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立

猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：逯晓敏冯志新刘茂军吴叙苏甘源张映邵国青山西农业大学动物科技学院江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏省生物兽药筛选服务中心

根据GeneBank中登录的猪肺炎支原体P36(L-乳酸脱氢酶)全基因序列,设计合成了2对引物,建立了适合猪肺炎支原体检测的套式PCR方法.运用该方法对猪肺炎支原体(168株)培养物进行了检测.结果显示,该培养物能扩增出427bp的目的条带.特异性试... 详细信息

根据GeneBank中登录的猪肺炎支原体P36(L-乳酸脱氢酶)全基因序列,设计合成了2对引物,建立了适合猪肺炎支原体检测的套式PCR方法.运用该方法对猪肺炎支原体(168株)培养物进行了检测.结果显示,该培养物能扩增出427bp的目的条带.特异性试验结果表明:鸡毒支原体、猪絮状支原体、猪鼻支原体、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪链球菌2型和猪流感病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组DNA或cDNA扩增结果均为阴性.该方法的敏感性高,最低可以检测出10个猪肺炎支原体。建立的套式PCR方法可以用于猪肺炎支原体的临床诊断检测和分子流行病学调查。

关键词：猪肺炎支原体 P36 套式PCR

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抗人红细胞单链抗体与猪伪狂犬gE蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学活性检测

抗人红细胞单链抗体与猪伪狂犬gE蛋白双功能融合蛋白的构建及生物...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：廖文军覃绍敏吴健敏王仰杰白安斌覃建飞广西大学动物科学技术学院广西兽医研究所

为构建既具有凝集性又具有抗原性的双功能融合蛋白,本研究利用特异性引物从重组质粒PMD-2E8ScFv和PMD-gE中PCR扩增得2E8基因(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和kgE基因(PRVgE主要抗原编码区),采用重叠延伸(SOE)PCR法拼接成融合的双功能分... 详细信息

为构建既具有凝集性又具有抗原性的双功能融合蛋白,本研究利用特异性引物从重组质粒PMD-2E8ScFv和PMD-gE中PCR扩增得2E8基因(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和kgE基因(PRVgE主要抗原编码区),采用重叠延伸(SOE)PCR法拼接成融合的双功能分子2E8kgE,经BamHI和EcoRI双酶切处理,纯化后,克隆至BamHI和EcoRI双酶切处理的表达载体pET-Trx中,构建了原核表达载体pET-Trx-2E8kgE;将pET-Trx-2E8kgE转化至BL21plysS中,在IPTG的诱导下表达具有双功能的融合蛋白,经过SDS-PAGE和Western-blot检测;结果表明,重组菌BL21plysS表达出约60.1kDa的目的蛋白,与猪伪狂犬标准阳性血清发生特异性反应.红细胞凝集试验证实:2E8kgE融合蛋白既能够与人红细胞结合,又能够与PRV抗体反应,具有双功能特性.

关键词：猪伪狂犬病毒 gE基因原核表达

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猪链球菌ZKHY株谷氨酸脱氢酶基因的克隆与序列分析

猪链球菌ZKHY株谷氨酸脱氢酶基因的克隆与序列分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘春生王新娟徐耀辉杨霞陈陆王川庆河南农业大学牧医工程学院郑州牧业高等专科学校

对猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因(gdh)进行克隆和序列分析,为进一步研究其功能打下基础.以ZKHY的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出谷氨酸脱氢酶基因片段,克隆于pMD-18T载体,构建成载体pMD-18T-gdh,转化宿主菌DH5α中进行筛选鉴定... 详细信息

对猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因(gdh)进行克隆和序列分析,为进一步研究其功能打下基础.以ZKHY的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出谷氨酸脱氢酶基因片段,克隆于pMD-18T载体,构建成载体pMD-18T-gdh,转化宿主菌DH5α中进行筛选鉴定和序列测定.测序结果与GenBank已登录序列进行核苷酸和氨基酸的同源性分析.成功地克隆了猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因,序列分析显示ZKHY与已报道的猪链球菌gdh基因有紧密的亲缘关系,核酸序列与2、7、9几个主要致病血清型的同源性在97.2%～98.4%,其中与2型菌株同源性在97.2%～97.3%;与7型菌株在98.4%;与9型在97.6%.其编码的氨基酸序列同源性则更高,与GenBank中已收录的序列同源性在98.9%以上。该分离株可能是属于2,7,9型之外的其它致病的血清型;所克隆的基因在猪链球菌之中非常保守,可以进行表达,进行免疫学方面的相关研究。

关键词：猪链球菌谷氨酸脱氢酶基因克隆序列分析

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猪源绿色气球菌的分离鉴定与药敏特性研究

猪源绿色气球菌的分离鉴定与药敏特性研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：谢彬袁洁袁书智白安斌黄红梅吴健敏广西兽医研究所惠朋动物药业有限责任公司广东省农业科学院兽医研究所

2006年和2008年本实验室分别从广东清远和广西北流两个猪场发病小猪的膝关节积液中分离到两株革兰阳性球菌,呈四联状或成对排列,在山羊血琼脂平板上能形成明显的α-溶血圈.经小白鼠致病性试验、生理生化鉴定及16srRNA序列分析,确定这两... 详细信息

2006年和2008年本实验室分别从广东清远和广西北流两个猪场发病小猪的膝关节积液中分离到两株革兰阳性球菌,呈四联状或成对排列,在山羊血琼脂平板上能形成明显的α-溶血圈.经小白鼠致病性试验、生理生化鉴定及16srRNA序列分析,确定这两株革兰阳性球菌为正常情况下非致病性绿色气球菌,分别命名为GDQY-1、GXBL-1(登录号分别为:GQ161096;GQ161097).经系统发育分析表明,GDQY-1、GXBL-1菌株与绿色气球菌15MS(登录号:EU075039.1)同源性最高,分别达到99.4%和98.7%.药敏试验结果表明,这2株绿色气球菌除了对新霉素、氟哌酸、恩诺沙星、菌必治、环丙沙星等5种药物高度敏感外,对大部分抗菌素均不敏感.绿色气球菌为条件性致病菌,广泛分布于自然界,一般情况下不致病。近年来由于免疫抑制剂的广泛应用、抗菌药物滥用增加,该菌在人类临床上引起严重感染的报道不断增多,但从发病猪膝关节积液中分离到为首次报道.

关键词：猪绿色气球菌分离鉴定 16S Rrna 药敏特性

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IBV N基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡免疫效应的研究

IBV N基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡免疫效应的研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：郭自成王红宁阳泰高荣汪雪李玉玲管中斌四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室”

为了研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)Nucleoprotetin基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡的免疫效应,本实验将携带禽传染性支气管炎病毒N基因的pvax1-N重组质粒通过肌肉注射对7日龄雏鸡进行免疫,并在2周后用灭活疫苗进行加强免疫.测定... 详细信息

为了研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)Nucleoprotetin基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡的免疫效应,本实验将携带禽传染性支气管炎病毒N基因的pvax1-N重组质粒通过肌肉注射对7日龄雏鸡进行免疫,并在2周后用灭活疫苗进行加强免疫.测定特异性IgG抗体,血清中和抗体,CD4+,CD8+T细胞含量为免疫指标,并进行攻毒实验.结果表明,采用DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫,在加强免疫后4周CD4+、CD8+T细胞含量显著升高(P<0.05),特异性IgG抗体,血清中和抗体与灭活疫苗组无显著差异(P>0.05).用剂量为103EID50的IBV M41株病毒攻毒,保护率达86.7%,高于单独免疫灭活疫苗组(80%)和单独免疫DNA疫苗组(66.7%).可见,采用IBV N基因DNA疫苗首免,灭活疫苗加强免疫具免疫增强效果.

关键词：禽传染性支气管炎病毒 DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫

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2株PRRSV变异株动物回归试验及其病毒特性

2株PRRSV变异株动物回归试验及其病毒特性

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：孙彦伟王连想蒋启荣任裕其田云毕英佐马静云广东省动物防疫监督总所华南农业大学动物科学学院

为进一步证实PRRSV变异株(NSP2 1594-1680bp缺失)感染发病规律,本研究对2株分离鉴定的PRRSV变异株进行动物回归试验。结果表明高热是PRRSV变异株感染猪群的特征性反应,攻毒17d左右存活猪体温恢复正常;试验发病猪症状及病理变化与临床发... 详细信息

为进一步证实PRRSV变异株(NSP2 1594-1680bp缺失)感染发病规律,本研究对2株分离鉴定的PRRSV变异株进行动物回归试验。结果表明高热是PRRSV变异株感染猪群的特征性反应,攻毒17d左右存活猪体温恢复正常;试验发病猪症状及病理变化与临床发病猪相似,因此在临床诊断上具有重要意义;不同毒株致病性不同,在发病、死亡时间和死亡率上存在较大差别,GDQJ株攻毒后临床发病而未死亡,因此将PRRSV变异株感染引起的PRRS都归为"高致病性PRRS"有待商榷;攻毒后第3d部分血清检测到N蛋白抗体,9d后所有攻毒猪血清PRRS抗体均为阳性,且S/P值呈规律曲线,15d以后存活猪抗体维持在较高水平;攻毒后病毒血症快速产生,但存活猪只血清中病毒在攻毒15d后逐渐消退,36d后完全消失;病毒可通过粪便及鼻、口等排出物传播,携带PRRSV变异株的生猪及其产品或废弃物是疫情快速扩散和蔓延的主要原因。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株回归试验特性

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传染性胸膜肺炎放线杆菌apxC基因缺失疫苗菌株的构建及生物学特性的研究

传染性胸膜肺炎放线杆菌apxC基因缺失疫苗菌株的构建及生物学特性...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：宣春玲王贵平李春玲罗满林贾爱卿广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生公共实验室华南农业大学兽医学院

【目的】构建猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的apxⅠC基因与apxⅡC基因缺失突变弱毒菌株APP85,为最终研制出APP的基因工程菌苗奠定基础。【方法】以标准菌株APP259中apxⅠC基因与apxⅡC基因为目的缺失... 详细信息

【目的】构建猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的apxⅠC基因与apxⅡC基因缺失突变弱毒菌株APP85,为最终研制出APP的基因工程菌苗奠定基础。【方法】以标准菌株APP259中apxⅠC基因与apxⅡC基因为目的缺失基因,根据APP 1型菌apx基因组序列,利用软件设计分别扩增apxⅠCA上下游同源臂以及apxⅡCA上下游同源臂引物,构建重组自杀转移质粒,将该重组自杀转移质粒先后转移到亲本菌APP259后,利用同源重组筛选到基因缺失突变株。并对该重组菌株主要生物学特性,如溶血性、对小鼠的致病力以及免疫保护作用进行研究。【结果】经鉴定表明目的基因已经丢失、APP95基因缺失突变菌株丧失对绵羊血的溶血活性,毒力显著下降,并对免疫小鼠具有良好的安全性。免疫保护性实验表明,用该菌株免疫小鼠后,不仅对同血清型菌株的再次攻击保护率达到85%,对异种血清型菌株(7型)的攻击保护率达到75%。【结论】成功获得了apxⅠC基因与apxⅡC基因缺失突变弱毒菌株,可作为预防APP感染的疫苗候选株,为最终研制出APP的基因工程菌苗奠定基础。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失突变弱毒疫苗

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猪源2型链球菌福建株CPS2J基因PCR检测及序列分析

猪源2型链球菌福建株CPS2J基因PCR检测及序列分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：俞伏松郭长明车勇良林天龙陈少莺福建省农业科学院生物技术研究所福建省农业科学院畜牧兽医研究所

设计并合成一对扩增2型猪链球菌CPS基因的特异性引物,以猪2型链球菌福建株DNA为模板,筛选最佳反应条件,建立检测CPS2J基因的PCR方法,并对PCR扩增产物进行序列测定和同源性比较分析.结果如下:应用该方法对猪2型链球菌福建株和标准阳性株... 详细信息

设计并合成一对扩增2型猪链球菌CPS基因的特异性引物,以猪2型链球菌福建株DNA为模板,筛选最佳反应条件,建立检测CPS2J基因的PCR方法,并对PCR扩增产物进行序列测定和同源性比较分析.结果如下:应用该方法对猪2型链球菌福建株和标准阳性株进行扩增,均获得与预期大小一致的675bp特异性目的片段,而对8株非2型猪链球菌的扩增结果均呈阴性:敏感性测定最低可检出100cfu细菌量或50pg细菌DNA;SSPFJ06CPS2J基因部分核苷酸及其推导的氨基酸序列与猪链球菌2型不同菌株的同源性分别达98.7%-100%和97.8%～100%.上述结果表明建立并优化的猪2型链球菌CPS2J基因的PCR检测方法敏感性好、特异性高,能用于2型猪链球菌的分子流行病学调查和快速检测;序列分析表明猪2型链球菌福建株与国内外8株标准株之间同源性高、亲缘关系密切.

关键词：猪链球菌2型福建株 CPS2J基因 PCR

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