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主题

16 篇 奶牛
15 篇 序列分析
14 篇 原核表达
11 篇 分离鉴定
10 篇 克隆
10 篇 氧化损伤
10 篇 prrsv
10 篇 细胞凋亡
9 篇 免疫功能
9 篇 苦马豆素
9 篇 奶牛乳房炎
9 篇 黄曲霉毒素b1
8 篇 中国畜牧兽医学会
8 篇 雏鸭
8 篇 临床诊断
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7 篇 家畜内科学
7 篇 学术研讨会
7 篇 猪
7 篇 口蹄疫病毒

机构

38 篇 华南农业大学
34 篇 江西农业大学
27 篇 湖南农业大学
24 篇 军事医学科学院军...
23 篇 南京农业大学
22 篇 吉林大学
20 篇 西北农林科技大学
18 篇 中国农业大学
16 篇 广西大学
13 篇 广西兽医研究所
12 篇 云南农业大学
11 篇 广东省农科院兽医...
10 篇 四川农业大学
9 篇 四川大学生命科学...
8 篇 北京市农林科学院...
8 篇 山东畜牧兽医职业...
8 篇 华中农业大学
7 篇 中国农业科学院上...
7 篇 东北农业大学
7 篇 山东农业大学

作者

24 篇 曹华斌
22 篇 金宁一
22 篇 唐兆新
20 篇 胡国良
17 篇 袁慧
16 篇 张彩英
16 篇 文利新
15 篇 郭小权
15 篇 赵宝玉
15 篇 鲁会军
13 篇 路浩
12 篇 蒋玉雯
12 篇 李斌
12 篇 黄安国
12 篇 梁家幸
12 篇 赵武
12 篇 黄爱民
12 篇 王红宁
12 篇 姚瑞英
12 篇 苏荣胜

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432 篇 中文
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11株猪繁殖与呼吸综合症病毒ORF5基因序列分析

11株猪繁殖与呼吸综合症病毒ORF5基因序列分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张冠群马静云何晓明王连想朱玲毛燕毕英佐华南农业大学动物科学学院

从广东省不同地区呼吸道症状明显的组织样品中分离到11株引起MARC-145细胞病变的病毒,经RT-PCR和序列分析鉴定为美洲型猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV),其ORF5全基因均为603bp,不存在核苷酸的插入或缺失,但存在多个位点的点突变,推导的... 详细信息

从广东省不同地区呼吸道症状明显的组织样品中分离到11株引起MARC-145细胞病变的病毒,经RT-PCR和序列分析鉴定为美洲型猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV),其ORF5全基因均为603bp,不存在核苷酸的插入或缺失,但存在多个位点的点突变,推导的氨基酸序列相似性在97.0%～99.5%,与国内外参考株推导的氨基酸序列的相似性在85.1%～99.0%,11个毒株处于同一个大分支下,又分属不同的小分支,与XH-GD、JXA1等遗传距离较近,与YN01、CC-1、MLV、VR-2332的遗传距离较远,与HL的遗传距离最远。11个毒株ORF5氨基酸序列在两端的高变区和中间的较保守区均有不同程度的突变,均存在位置和序列均一致的4个潜在糖基化位点;抗原表位分析结果显示,在不同的表位分别有不同位点的点突变,但这些位点的突变,可能不会改变该区域的疏水性能,不会引起抗原表位的变化.

关键词：猪繁殖与呼吸综合症病毒 ORF5基因序列分析

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细胞病变法与免疫捕获ELISA法测定小反刍兽疫活疫苗TCID50结果的比较

细胞病变法与免疫捕获ELISA法测定小反刍兽疫活疫苗TCID50结果的...

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王玉红支海兵黄炯李黎薛英刘宏贺笋朱刚李延涛王红巧新疆天康畜牧生物技术股份有限公司中国兽医药品监察所新疆畜牧科学院

参照中国兽医药品监察所提出的小反刍兽疫活疫苗制造及检验试行规程(草案),对新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产的16批小反刍兽疫弱毒冻干活疫苗进行病毒含量测定,通过观察细胞病变(CPE)及免疫捕获ELISA双重检验,每头份(1ml)病毒含... 详细信息

参照中国兽医药品监察所提出的小反刍兽疫活疫苗制造及检验试行规程(草案),对新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产的16批小反刍兽疫弱毒冻干活疫苗进行病毒含量测定,通过观察细胞病变(CPE)及免疫捕获ELISA双重检验,每头份(1ml)病毒含量均高于103TCID50,达到规程要求。在疫苗检验过程中,考虑规程中检验程序比较麻烦,历时较长(在试验比较顺利的情况下,一批苗最终得到结果至少花费8天),并且还受到细胞质量等因素的影响,同时还对每批成品疫苗直接进行捕获ELISA(病毒不接种细胞)测定,对不同时期的病毒细胞液也同时作了大量的测定,以期从中找到一定的相关性,从而达到简化检验步骤,缩短检验时间的目的。结果显示:16个冻干疫苗样品,每个样品重复两次,两组数据的相关性r=0.9213;若再加16个病毒液样品,两组数据的相关性r=0.8751,这可能由于病毒液中有时可能有细胞,导致取样没有成品疫苗均匀的原因。通过两组数据的比较,可以认为直接用捕获ELISA法对成品苗检测是比较可行可靠的。

关键词：细胞病变免疫捕获ELISA 小反刍兽疫弱毒活疫苗 TCID50

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猪源绿色气球菌的分离鉴定与药敏特性研究

猪源绿色气球菌的分离鉴定与药敏特性研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：谢彬袁洁袁书智白安斌黄红梅吴健敏广西兽医研究所惠朋动物药业有限责任公司广东省农业科学院兽医研究所

2006年和2008年本实验室分别从广东清远和广西北流两个猪场发病小猪的膝关节积液中分离到两株革兰阳性球菌,呈四联状或成对排列,在山羊血琼脂平板上能形成明显的α-溶血圈.经小白鼠致病性试验、生理生化鉴定及16srRNA序列分析,确定这两... 详细信息

2006年和2008年本实验室分别从广东清远和广西北流两个猪场发病小猪的膝关节积液中分离到两株革兰阳性球菌,呈四联状或成对排列,在山羊血琼脂平板上能形成明显的α-溶血圈.经小白鼠致病性试验、生理生化鉴定及16srRNA序列分析,确定这两株革兰阳性球菌为正常情况下非致病性绿色气球菌,分别命名为GDQY-1、GXBL-1(登录号分别为:GQ161096;GQ161097).经系统发育分析表明,GDQY-1、GXBL-1菌株与绿色气球菌15MS(登录号:EU075039.1)同源性最高,分别达到99.4%和98.7%.药敏试验结果表明,这2株绿色气球菌除了对新霉素、氟哌酸、恩诺沙星、菌必治、环丙沙星等5种药物高度敏感外,对大部分抗菌素均不敏感.绿色气球菌为条件性致病菌,广泛分布于自然界,一般情况下不致病。近年来由于免疫抑制剂的广泛应用、抗菌药物滥用增加,该菌在人类临床上引起严重感染的报道不断增多,但从发病猪膝关节积液中分离到为首次报道.

关键词：猪绿色气球菌分离鉴定 16S Rrna 药敏特性

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IBV N基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡免疫效应的研究

IBV N基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡免疫效应的研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：郭自成王红宁阳泰高荣汪雪李玉玲管中斌四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室”

为了研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)Nucleoprotetin基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡的免疫效应,本实验将携带禽传染性支气管炎病毒N基因的pvax1-N重组质粒通过肌肉注射对7日龄雏鸡进行免疫,并在2周后用灭活疫苗进行加强免疫.测定... 详细信息

为了研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)Nucleoprotetin基因DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫对鸡的免疫效应,本实验将携带禽传染性支气管炎病毒N基因的pvax1-N重组质粒通过肌肉注射对7日龄雏鸡进行免疫,并在2周后用灭活疫苗进行加强免疫.测定特异性IgG抗体,血清中和抗体,CD4+,CD8+T细胞含量为免疫指标,并进行攻毒实验.结果表明,采用DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫,在加强免疫后4周CD4+、CD8+T细胞含量显著升高(P<0.05),特异性IgG抗体,血清中和抗体与灭活疫苗组无显著差异(P>0.05).用剂量为103EID50的IBV M41株病毒攻毒,保护率达86.7%,高于单独免疫灭活疫苗组(80%)和单独免疫DNA疫苗组(66.7%).可见,采用IBV N基因DNA疫苗首免,灭活疫苗加强免疫具免疫增强效果.

关键词：禽传染性支气管炎病毒 DNA疫苗初免灭活疫苗加强免疫

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2株PRRSV变异株动物回归试验及其病毒特性

2株PRRSV变异株动物回归试验及其病毒特性

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：孙彦伟王连想蒋启荣任裕其田云毕英佐马静云广东省动物防疫监督总所华南农业大学动物科学学院

为进一步证实PRRSV变异株(NSP2 1594-1680bp缺失)感染发病规律,本研究对2株分离鉴定的PRRSV变异株进行动物回归试验。结果表明高热是PRRSV变异株感染猪群的特征性反应,攻毒17d左右存活猪体温恢复正常;试验发病猪症状及病理变化与临床发... 详细信息

为进一步证实PRRSV变异株(NSP2 1594-1680bp缺失)感染发病规律,本研究对2株分离鉴定的PRRSV变异株进行动物回归试验。结果表明高热是PRRSV变异株感染猪群的特征性反应,攻毒17d左右存活猪体温恢复正常;试验发病猪症状及病理变化与临床发病猪相似,因此在临床诊断上具有重要意义;不同毒株致病性不同,在发病、死亡时间和死亡率上存在较大差别,GDQJ株攻毒后临床发病而未死亡,因此将PRRSV变异株感染引起的PRRS都归为"高致病性PRRS"有待商榷;攻毒后第3d部分血清检测到N蛋白抗体,9d后所有攻毒猪血清PRRS抗体均为阳性,且S/P值呈规律曲线,15d以后存活猪抗体维持在较高水平;攻毒后病毒血症快速产生,但存活猪只血清中病毒在攻毒15d后逐渐消退,36d后完全消失;病毒可通过粪便及鼻、口等排出物传播,携带PRRSV变异株的生猪及其产品或废弃物是疫情快速扩散和蔓延的主要原因。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株回归试验特性

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应用焦磷酸测序技术检测猪流感病毒金刚烷胺耐药性的分子标签

应用焦磷酸测序技术检测猪流感病毒金刚烷胺耐药性的分子标签

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：刘华雷王志亮吕艳黄伟坚鄢明华张维李明义王清华李金明郑东霞赵云玲孙承英中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心广西大学动物科学技术学院天津市畜牧兽医研究所

流感病毒M2蛋白五个关键位点氨基酸残基(第26、27、30、31和34位)中的任何一个发生突变会导致抗流感病毒药物中金刚烷胺抗药性的产生。本研究利用焦磷酸测序技术对2004年～2008年国内分离的10株猪流感病毒进行了鉴定,并初步进行了抗药... 详细信息

流感病毒M2蛋白五个关键位点氨基酸残基(第26、27、30、31和34位)中的任何一个发生突变会导致抗流感病毒药物中金刚烷胺抗药性的产生。本研究利用焦磷酸测序技术对2004年～2008年国内分离的10株猪流感病毒进行了鉴定,并初步进行了抗药性分析。结果表明基于M2蛋白基因保守区序列建立的焦磷酸测序技术能用于国内猪流感病毒的快速检测,且具有较好的特异性和重复性。抗药性分析表明10株猪流感病毒国内分离株中5株H1N1分离株全部耐药,主要存在M2蛋白的V27T、V27I或S31N位点的突变,而4株H3N2和1株H9N2猪流感病毒分离株在M2蛋白5个关键位点上均未出现变异,表明其对金刚烷胺敏感。

关键词：猪流感病毒焦磷酸测序抗药性分析

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兔病毒性出血症病毒次结构蛋白(VP12)的细胞内定位研究

兔病毒性出血症病毒次结构蛋白(VP12)的细胞内定位研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：陈柳刘光清倪征余斌云涛华炯钢李双茂浙江省农业科学院农业部病毒学与生物技术重点实验室

目的)VP12是兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)一种次要结构蛋白。本文旨在构建VP12与绿色荧光蛋白融合的真核表达载体,进而利用它研究VP12在细胞内的定位情况。(方法)首先在大肠杆菌中表达了GST-VP12融合蛋白,然后... 详细信息

目的)VP12是兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)一种次要结构蛋白。本文旨在构建VP12与绿色荧光蛋白融合的真核表达载体,进而利用它研究VP12在细胞内的定位情况。(方法)首先在大肠杆菌中表达了GST-VP12融合蛋白,然后用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备抗VP12的抗血清。再利用该抗体对转染pEGFP-VP12的BHK-21细胞进行检测,以研究VP12蛋白在细胞内的定位情况.(结果)结果表明,pEGFP-VP12转染BHK-21细胞后,不仅VP12蛋白得到了成功表达,而且通过检测偶联的绿色荧光蛋白可判断Vp12在细胞内的定位。检测结果显示,VP12蛋白主要分布于BHK-21细胞的细胞质.(结论)成功构建了VP12与绿色荧光蛋白融合的表达载体,并在真核细胞内实现了表达,通过检测荧光蛋白,发现VP12主要在细胞质内表达并分布,本研究为深入探讨VP12的生物学功能奠定了基础。

关键词：兔出血症病毒 VP12 次级结构蛋白细胞内定位

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猪源2型链球菌福建株CPS2J基因PCR检测及序列分析

猪源2型链球菌福建株CPS2J基因PCR检测及序列分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：俞伏松郭长明车勇良林天龙陈少莺福建省农业科学院生物技术研究所福建省农业科学院畜牧兽医研究所

设计并合成一对扩增2型猪链球菌CPS基因的特异性引物,以猪2型链球菌福建株DNA为模板,筛选最佳反应条件,建立检测CPS2J基因的PCR方法,并对PCR扩增产物进行序列测定和同源性比较分析.结果如下:应用该方法对猪2型链球菌福建株和标准阳性株... 详细信息

设计并合成一对扩增2型猪链球菌CPS基因的特异性引物,以猪2型链球菌福建株DNA为模板,筛选最佳反应条件,建立检测CPS2J基因的PCR方法,并对PCR扩增产物进行序列测定和同源性比较分析.结果如下:应用该方法对猪2型链球菌福建株和标准阳性株进行扩增,均获得与预期大小一致的675bp特异性目的片段,而对8株非2型猪链球菌的扩增结果均呈阴性:敏感性测定最低可检出100cfu细菌量或50pg细菌DNA;SSPFJ06CPS2J基因部分核苷酸及其推导的氨基酸序列与猪链球菌2型不同菌株的同源性分别达98.7%-100%和97.8%～100%.上述结果表明建立并优化的猪2型链球菌CPS2J基因的PCR检测方法敏感性好、特异性高,能用于2型猪链球菌的分子流行病学调查和快速检测;序列分析表明猪2型链球菌福建株与国内外8株标准株之间同源性高、亲缘关系密切.

关键词：猪链球菌2型福建株 CPS2J基因 PCR

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传染性胸膜肺炎放线杆菌apxC基因缺失疫苗菌株的构建及生物学特性的研究

传染性胸膜肺炎放线杆菌apxC基因缺失疫苗菌株的构建及生物学特性...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：宣春玲王贵平李春玲罗满林贾爱卿广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生公共实验室华南农业大学兽医学院

【目的】构建猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的apxⅠC基因与apxⅡC基因缺失突变弱毒菌株APP85,为最终研制出APP的基因工程菌苗奠定基础。【方法】以标准菌株APP259中apxⅠC基因与apxⅡC基因为目的缺失... 详细信息

【目的】构建猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的apxⅠC基因与apxⅡC基因缺失突变弱毒菌株APP85,为最终研制出APP的基因工程菌苗奠定基础。【方法】以标准菌株APP259中apxⅠC基因与apxⅡC基因为目的缺失基因,根据APP 1型菌apx基因组序列,利用软件设计分别扩增apxⅠCA上下游同源臂以及apxⅡCA上下游同源臂引物,构建重组自杀转移质粒,将该重组自杀转移质粒先后转移到亲本菌APP259后,利用同源重组筛选到基因缺失突变株。并对该重组菌株主要生物学特性,如溶血性、对小鼠的致病力以及免疫保护作用进行研究。【结果】经鉴定表明目的基因已经丢失、APP95基因缺失突变菌株丧失对绵羊血的溶血活性,毒力显著下降,并对免疫小鼠具有良好的安全性。免疫保护性实验表明,用该菌株免疫小鼠后,不仅对同血清型菌株的再次攻击保护率达到85%,对异种血清型菌株(7型)的攻击保护率达到75%。【结论】成功获得了apxⅠC基因与apxⅡC基因缺失突变弱毒菌株,可作为预防APP感染的疫苗候选株,为最终研制出APP的基因工程菌苗奠定基础。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失突变弱毒疫苗

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H9N2亚型河南分离毒株HA基因的扩增及序列分析比较

H9N2亚型河南分离毒株HA基因的扩增及序列分析比较

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王泽霖柴丽娜李和平王新卫河南农业大学禽病研究所

从不同致病力的25株H9N2亚型毒株中选出6株(3#、18#,17#、20#、6#、10#)有代表性的毒株,利用RT-PCR技术扩增其HA基因,并对其序列进行分析比较。结果表明:(1)所扩增的HA基因全长1683bp,编码560个氨基酸.在HA1和HA2的氨基酸裂解位点上有... 详细信息

从不同致病力的25株H9N2亚型毒株中选出6株(3#、18#,17#、20#、6#、10#)有代表性的毒株,利用RT-PCR技术扩增其HA基因,并对其序列进行分析比较。结果表明:(1)所扩增的HA基因全长1683bp,编码560个氨基酸.在HA1和HA2的氨基酸裂解位点上有三种模式:RSSR↓GLF、RLSR↓GLF和VSSR↓GLF三种模式,均无出现高致病性禽流感R-X-R/K-R模式,因此均为典型的低致病性毒株。7个受体结合位点3#、6#、、17#、18#为YWTNVLY,20#为YWTHELY,10#为YWTSELY.潜在糖基化位点除了3#和18#多出一个之外,其余均为8个。(2)6个毒株核苷酸同源性为82.9%～100%,氨基酸同源性为85.6%～99.8%。除了20#之外,其余5个毒株之间核苷酸与氨基酸的同源性都在93%以上。与国内代表株DK/HK/G9/97核苷酸的同源性分别为:96.6%、95.7%、93.3%、95.7%、94.7%、82.5%;氨基酸同派性分别为:96.4%、95.9%、94.9%、95.9%、95.1%、88.0%,表明亲源关系比较近.HA基因系统进化树表明:3#、6#、10#、17#、18#毒株属于欧亚分支,而20#属于北荚分支.(3)个别毒株受体结合位点,潜在糖基化位点、裂解位点也发生了变化。其中3#和18#毒株在145aa-147aa多了一个糖基化位点NGT,20#毒株在141aa-143aa和305aa-307aa两处糖基化位点分别为NVT和NIS,在191aa和198aa处受体结合位点为H和E,裂解位点VSSRGLF,与其它毒株不同。3#和18#所表现出较强的致病性可能与其在HA的头部(HA1)的A抗原位点上多了一个糖基化位点(145aa-147aa),改变了HA基因空间构型有关,空间构型的改变导致2A4、F6、H、B4单抗作用位点的变异或缺失并影响其较近的受体结合位点,从而改变该毒株的抗原性。3#和18#致病力性的增强是否与除HA以外的其它基因的改变有关尚需进一步探讨。该研究结果不仅在分子流行病学上丰富了H9N2基础理论,而且为我国政府制定禽流感扑灭政策有效地防制H9N2流行提供了科学的指导.

关键词：氨基酸糖基化位点序列分析

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