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主题

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10 篇 氧化损伤
10 篇 prrsv
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9 篇 苦马豆素
9 篇 奶牛乳房炎
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机构

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34 篇 江西农业大学
27 篇 湖南农业大学
24 篇 军事医学科学院军...
23 篇 南京农业大学
22 篇 吉林大学
20 篇 西北农林科技大学
18 篇 中国农业大学
16 篇 广西大学
13 篇 广西兽医研究所
12 篇 云南农业大学
11 篇 广东省农科院兽医...
10 篇 四川农业大学
9 篇 四川大学生命科学...
8 篇 北京市农林科学院...
8 篇 山东畜牧兽医职业...
8 篇 华中农业大学
7 篇 中国农业科学院上...
7 篇 东北农业大学
7 篇 山东农业大学

作者

24 篇 曹华斌
22 篇 金宁一
22 篇 唐兆新
20 篇 胡国良
17 篇 袁慧
16 篇 张彩英
16 篇 文利新
15 篇 郭小权
15 篇 赵宝玉
15 篇 鲁会军
13 篇 路浩
12 篇 蒋玉雯
12 篇 李斌
12 篇 黄安国
12 篇 梁家幸
12 篇 赵武
12 篇 黄爱民
12 篇 王红宁
12 篇 姚瑞英
12 篇 苏荣胜

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432 篇 中文
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猪传染性胃肠炎病毒M蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

猪传染性胃肠炎病毒M蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张小波左玉柱刘媛范京惠李潭清李建辉孙彦新河北农业大学动物科技学院

本研究根据GenBank发表的TGEV TS株全基因核苷酸序列,设计了1对用以扩增TGEV主要结构蛋白M基因的特异性引物.利用RT-PCR方法扩增TGEV HB06株M基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,进行EcoRI和XhoI双酶切鉴定,将获得的M基因片段定向亚克隆入... 详细信息

本研究根据GenBank发表的TGEV TS株全基因核苷酸序列,设计了1对用以扩增TGEV主要结构蛋白M基因的特异性引物.利用RT-PCR方法扩增TGEV HB06株M基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,进行EcoRI和XhoI双酶切鉴定,将获得的M基因片段定向亚克隆入原核表达载体pGEX-6P-1中,构建了重组原核表达质粒pGEX-6P-M,转化Rossetta(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导重组菌株表达了融合蛋白.结果表明,从TGEV HB06株扩增得到了M基因片段,该基因全长789 bp,编码262个氨基酸,与TS株、Purdue-115株、TFI株和H16株的M基因同源性分别为97%、99%、96%和97%.SDS-PAGE电泳结果显示,重组表达质粒获得了约56 kDa的目的带,其中M蛋白的分子质量约为30kDa,与预期的结果一致,并且表达产物主要以包涵体的形式存在;Western-blot分析表明,表达的M重组蛋白可以被兔源抗TGEV阳性血清识别;试验结果证明,TGEV的M基因高度保守,在大肠杆菌表达系统内成功表达了TGEV M蛋白.

关键词：猪传染性胃肠炎病毒 M基因克隆原核表达

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PCR检测猪输血传播病毒Ⅰ型方法的建立及其初步应用

PCR检测猪输血传播病毒Ⅰ型方法的建立及其初步应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：娄高明殷华平冯顺胜黄健强韶关学院动物疫病研究所

参照GenBank已公布的猪源输血传播病毒Ⅰ型(Swine Torque Teno Virus genogroupⅠ,TTVⅠ)全基因序列,设计并合成一对特异性引物,建立了快速、特异检测猪TTVⅠ型的PCR方法.用所建立的方法检测猪圆环病毒Ⅱ型(PCVⅡ)、猪细小病毒(PPV)、... 详细信息

参照GenBank已公布的猪源输血传播病毒Ⅰ型(Swine Torque Teno Virus genogroupⅠ,TTVⅠ)全基因序列,设计并合成一对特异性引物,建立了快速、特异检测猪TTVⅠ型的PCR方法.用所建立的方法检测猪圆环病毒Ⅱ型(PCVⅡ)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪多杀性巴氏杆菌(PM)、猪链球菌(S.S)等病原,无特异性条带出现,不存在交叉反应。该法灵敏度高,能检测到11.3 pg的阳性核酸.检测某规模化猪场送检的44份健康母猪血清,结果TTVⅠ型的阳性率为13.6%(6/44);检测2006年7月到2007年3月期间采自广东、江西、湖南、广西、福建等5个省154份疑似"猪高热病"病料组织,结果TTVⅠ型的阳性率为40.9%(63/154),这表明我国规模化猪场TTVⅠ型感染率是非常高的。试验结果证明所建立的PCR方法可用于TTVⅠ型的流行病学调查,将为临床提供一种高效可靠的检测方法。

关键词：猪输血传播病毒Ⅰ型 PCR 建立应用

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Effects of Non-esterified Fatty Acids on the Gluconeogenesis in Bovine Hepatocytes

Effects of Non-esterified Fatty Acids on the Gluconeogenesis...

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中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会

作者： LI Xin-wei,LI Xiao-bing,BAI Ge,CHEN Hui,DENG Qing-hua,LIU Zhao-xi, ZHANG Liang,LIU Guo-wen,WANG Zhe College of Animal Science and Veterinary Medicine,Jilin University,5333 of Xi'an Road, Changchun,Jilin,130062,P.R.China

Dairy cows experience an increased demand for glucose to support milk ***,negative energy balance is a common condition in peripartum *** response,fat mobilization provides non-esterified fatty acids(NEFAs) for oxidation in the liver to generate *** investigate the effects of NEFAs on gluconeogenesis,the expression and enzyme activity of pyruvate carboxylase(PC) and phosphoenolpyruvate carboxylase(PEPCK) in cultured bovine hepatocytes were evaluated by quantitative polymerase chain reaction and spectrophotometry,*** results showed that PC and PEPCK mRNA levels were marked decreased when the NEFAs concentrations exceeded 0.5 mmol/L and 1.5 mmol/L,*** PC and PEPCK enzyme activity showed significantly decreased when the NEFAs concentrations exceeded 1.5 mmol/L and 0.5 mmol/L, *** findings indicate that high circulating levels of NEFAs inhibit hepatocyte gluconeogenesis, thereby promoting negative energy balance.

关键词： non-esterified fatty acids gluconeogenesis bovine hepatocytes

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Towards the development of a portable sensor based on a molecularly imprinted membrane for the rapid determination of salbutamol in pig urine

Towards the development of a portable sensor based on a mole...

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中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会

作者： Chunyan Chai,Guoyan Liu*,Feng Li,Xiaofang Liu,Bing Yao,Li Wang School of Agriculture & Biology,Shanghai Jiaotong University,800# Dongchuan Road,Shanghai 200240,China

A new type of conductometric probe based on a molecularly imprinted membrane(MIM) for the detection of salbutamol has been designed and *** probe consists of two parallel screen-printed electrodes(SPE).One of the SPEs was coated with a molecularly imprinted membrane using salbutamol as the template,and the other was modified with a non-molecularly imprinted membrane(N-MIM). Measurements of salbutamol were conducted after the conductometric probe had been connected to a commercial portable ***-sample or successive detections could be easily accomplished by replacing the one-off SPE coated with the salbutamol molecularly imprinted membrane with a new *** conductometric response of the sensor to the concentration of salbutamol displayed a linear correlation over a range from 50 to 280 nM,with a detection limit of 13.5 *** recoveries reached 92.1 -98.3%based on pig urine *** addition,the sensor based on this new type of probe demonstrated high sensitivity and selectivity for salbutamol.

关键词： Salbutamol Molecularly imprinted membrane Urine Conductometry

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ZEA诱导猪卵巢颗粒细胞凋亡机理的研究

ZEA诱导猪卵巢颗粒细胞凋亡机理的研究

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中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会

作者：朱丽袁莉芸邬静李荣芳文利新袁慧湖南农业大学动物医学院

研究目的:以体外培养的猪卵巢颗粒细胞为模型,通过研究ZEA对其毒性作用,来揭示ZEA对猪生殖系统的毒性作用机理;研究方法:采用机械分离法从1-5mm的卵泡中提取猪卵巢颗粒细胞,Giemsa和结晶紫染色观察细胞形态,免疫细胞化学染色方法检测FSH... 详细信息

研究目的:以体外培养的猪卵巢颗粒细胞为模型,通过研究ZEA对其毒性作用,来揭示ZEA对猪生殖系统的毒性作用机理;研究方法:采用机械分离法从1-5mm的卵泡中提取猪卵巢颗粒细胞,Giemsa和结晶紫染色观察细胞形态,免疫细胞化学染色方法检测FSHR表达来鉴定颗粒细胞,MTT方法测定细胞生长曲线;于细胞对数生长期加入60,90和120μM的ZEA作用24h后,MTT法检测细胞增殖率,氮蓝四唑(NBT)显色法检测SOD活性,硫代巴比妥酸法测定细胞中MDA的含量,间接法检测细胞中GSH-Px活力,TUNEL和Annexin-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,分别用荧光探针DCFH-DA和罗丹明123进行活性氧和线粒体膜电位的检测,western blot检测Caspase-3,9蛋白含量,细胞免疫荧光方法测定Caspase-3蛋白的激活与定位以及Z-VAD-FMK及Ac-LEHD-FMK对细胞凋亡的抑制作用;结果:分离提取的猪卵巢颗粒细胞存活率为65%左右,细胞纯度>97%,且细胞生长状况良好,24h-96h为细胞的对数生长期。高剂量ZEA能抑制猪卵巢颗粒细胞增殖,其IC50为90μM;60μM、90μM和120μM ZEA均极显著降低抗氧化酶SOD、GSH-Px活性,升高MDA的含量而引起细胞氧化损伤,呈剂量效应相关性:并呈剂量依赖性诱导细胞凋亡;研究揭示ZEA通过caspase依赖性的线粒体凋亡途径诱导猪卵巢颗粒细胞凋亡,主要表现在:极显著升高细胞内ROS水平,显著性降低线粒体膜电位,激活Caspase-3,9蛋白并诱导Caspase-3从细胞质进入细胞核执行功能,以及caspase抑制剂Z-VAD-FMK与caspase-9抑制剂Ac-LEHD-FMK显著性抑制ZEA所诱导的猪卵巢颗粒细胞凋亡:结论:ZEA抑制猪卵巢颗粒细胞增殖,引起细胞氧化损伤,并经由caspase依赖性的线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡。

关键词：玉米赤霉烯酮猪卵巢颗粒细胞氧化损伤细胞凋亡线粒体

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哈尔滨市鲜肉中单核细胞增生性李斯特菌的分离鉴定及耐药性分析

哈尔滨市鲜肉中单核细胞增生性李斯特菌的分离鉴定及耐药性分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：尹录杜艳芬赫明雷司微刘慧芳王春来彭玮王聃李继昌邵美丽刘思国东北农业大学哈尔滨中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室延边大学东北农业大学

单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)是一种人畜共患病原菌,主要能引起人与动物的脑炎、菌血症、流产、无败血症性单核细胞增多症等,尤其是免疫力低下者、婴幼儿、老年人、孕妇等易受感染而发病,是引起食物中毒的重要病... 详细信息

单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)是一种人畜共患病原菌,主要能引起人与动物的脑炎、菌血症、流产、无败血症性单核细胞增多症等,尤其是免疫力低下者、婴幼儿、老年人、孕妇等易受感染而发病,是引起食物中毒的重要病原菌。为了解哈尔滨市单核细胞增生性李斯特菌的污染状况及耐药状况,在哈尔滨市市场随机采集158份鲜肉,采用显色培养基分离,API试剂条和PCR鉴定等方法对样品中的单核细胞增生性李斯特菌进行分离鉴定,并通过Kirby-Barer法测定分离菌株对24种抗生素的耐药性。结果从鲜肉中共分离到单核细胞增生性李斯特菌23株,检出率为14.56%,其中鲜猪肉检出率最高,这20.00%(14/70):23株分离菌株中耐药菌株为22株,耐药率高达95.65%.这表明哈尔滨市鲜肉中存在一定程度的单核细胞增生性李斯特菌污染,并且分离菌株存在较严重的耐药现象.应加强控制动物饲料亚治疗抗生素的使用并严格遵守休药期,防止耐药菌株产生进而控制食源性疾病的发生.

关键词：哈尔滨鲜肉单核细胞增生性李斯特菌分离鉴定耐药性

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猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用

猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张朝霞刘长明危艳武袁婧黄立平中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

用纯化的重组杆状病毒表达的猪圆环病毒2型（PCV2）Cap蛋白作为检测抗原,建立了一种间接ELISA用于血清抗体检测。昆虫细胞株（Sf9）接种重组杆状病毒,对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化。制备了5批重组蛋白抗原,表达量占总蛋白的18.7... 详细信息

用纯化的重组杆状病毒表达的猪圆环病毒2型（PCV2）Cap蛋白作为检测抗原,建立了一种间接ELISA用于血清抗体检测。昆虫细胞株（Sf9）接种重组杆状病毒,对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化。制备了5批重组蛋白抗原,表达量占总蛋白的18.7%左右;Ni亲和层析柱纯化获得重组蛋白回收率为1.7～1.9μg/10～8细胞,纯度为90.1%;重组蛋白可被特异性抗体识别,具有良好的免疫活性。建立的ELISA法时30份已知阴性血清样本检测临界OD值为0.343;ELISA与IPMA对150份血清进行平行检测符合率为95.3%（143/150）,特异性为91.2%（31/34）,敏感性为96.5%（112/116）;其他几种常见猪病毒参考血清无交叉.组装的试剂盒批内和批间变异系数分别为4.0%～4.8%和8.9%～9.9%;置-20℃保存12个月稳定。试剂盒对人工感染猪血清检测结果,接种后第5w抗体阳转,第8w～9w抗体水平达到高;对来自黑龙江、吉林、河北、上海等地猪场1085份血清抗体检测,阳性率为73.6%.研制的ELISA试剂盒为临床PCV2血请抗体检测及疫苗免疫效果的评价提供了技术手段.

关键词：猪圆环病毒2型重组蛋白间接ELISA 抗体检测试剂盒

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High copper levels promotes broiler hepatocyte mitochondrial permeability transition in vivo and in vitro

High copper levels promotes broiler hepatocyte mitochondrial...

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中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会

作者： Rongsheng Su~(a1),Rongmei Wang~(b1),Huabin Cao~(c1),Jiaqiang Pan~a,Lijun Chen~a, Chengmei Li~a,Dayou Shi~a,Zhaoxin Tang~(a*) (a College of Veterinary Medicine,South China Agricultural University,Guangzhou 510642, China b College of Ying Dong bio-engineering,Shaoguan University,Shaoguan 510042,China c College of Animal Science and Technology Jiangxi Agricultural University Nanchang 330045, China)

This study was to examine the effects of copper on the mitochondrial non-specific pore.360, one-day-old,healthy Arbor Acres（AA） broilers were fed with different concentrations（11,110,220 and 330 mg/kg） of copper originated from copper sulfate,tribasic copper chloride（TBCC） or copper *** the indicated time point,the mitochondrial permeability transition（MPT） and copper concentration were analyzed. Results showed that,under the same copper concentration,the MPT of broilers fed copper methionine was the greatest,followed by TBCC,then copper *** effects of copper on MPT were time- and dose-dependent. Furthermore,in vitro in the presence of K,5μM Cu could cause permeability transition as compared to 10μM Cu in buffer without *** these results together,we have shown that hepatocellular MPT may be influenced not only by source and concentration of copper or the raising period of broilers,but also by the existence of K.

关键词： Copper Broiler Mitochondria Mitochondrial permeability transition

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High insulin concentrations repress insulin receptor gene expression in calf hepatocytes cultured in vitro

High insulin concentrations repress insulin receptor gene ex...

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中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会

作者： Zhigang Zhang~1,Xiaobing Li~2,Guowen Liu~2,Yanfei Li~1,Li Gao,Hongbin Wang~1, Ruifeng Gao~2,Zhe Wang~2,Xinglin Zhu~2 (1 College of Veterinary Medicine,Northeast Agriculture University,China 2 College of Animal Science and Veterinary Medicine,Jilin University,China)

The major role of insulin and the insulin receptor(InsR) in the liver is to mediate glucose uptake into hepatocytes to synthesize glycogen and to maintain blood glucose *** this study,we investigated the effects of high insulin concentrations on InsR gene expression in calf hepatocytes cultured in *** the cells were cultured for 72 h,insulin was added to the culture solution at final concentrations of 0,1,10,100 or 1000 nM. InsR mRNA expression was determined by semi-quantitative *** results showed that InsR mRNA expression in hepatocytes,adjusted forβ-actin expression,decreased dose dependently with increasing insulin *** mRNA expression was similar at 1 and 10 nM insulin,but was significantly lower than that in the *** expression was similar at 100 and 1000 nM insulin,but was significantly lower than that in the control.1 and 10 nM insulin *** data suggest that high concentrations of insulin significantly repress InsR mRNA expression in calf hepatocytes,and this inhibition occurs in a dose-dependent *** studies are needed to investigate the mechanisms underlying these effects of insulia

关键词： Insulin Insulin receptor Gene expression Calf hepatocytes Dairy cows

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规模化猪场猪繁殖呼吸综合症与细菌混合感染的诊断防治

规模化猪场猪繁殖呼吸综合症与细菌混合感染的诊断防治

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：周英顺王红宁杨鑫曾博邹立扣张安云徐昌文管中斌四川大学生命科学学院四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室”

某规模化猪场养猪5000余头2009年4-5月,爆发急性、高热、呼吸系统疾病导致猪大量死亡,其中发病率为40-50%,死亡率20%.对采集死猪肺脏病料、血清6份用RT-PCR方法进行猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因进行扩增,结果表明3份为NSP2基因阳性,... 详细信息

某规模化猪场养猪5000余头2009年4-5月,爆发急性、高热、呼吸系统疾病导致猪大量死亡,其中发病率为40-50%,死亡率20%.对采集死猪肺脏病料、血清6份用RT-PCR方法进行猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因进行扩增,结果表明3份为NSP2基因阳性,将其编号为SNC01,***03.对SNC01进行测序,结果与genbank中登录得PRRSV毒株进行比较,发现在2930-3020共有90个碱基连续缺失,在3316,3395,3425有分别有6个,3个,6个碱基的缺失.对采集的病死猪肺脏、淋巴、肾脏、心脏等病料分离了2株细菌编号分别为SNC0901和SNC0902时所分离菌进行致病性实验,发现均能够使被攻毒小鼠死亡.应用16SrDNA方法鉴定所分离菌分别为副猪嗜血杆菌和大肠杆菌,对所分离细菌进行17种抗生素的药敏实验,结果表明细菌对头孢噻呋,头孢噻吩,替卡西林/棒酸,头孢氨苄,氨苄西林/舒巴坦敏感,对替卡西林,克林霉素,阿莫西林/棒酸中度敏感,对庆大霉素,林可霉素,丁胺卡那霉素,红霉素,阿莫西林,氨苄西林,土霉素耐药.该猪场为高致病性蓝耳病病毒混合感染副猪嗜血杆菌、大肠杆菌从而导致猪大量死亡。根据诊断结果采取了一系列防治措施,得到了防控经验.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征副猪嗜血杆菌大肠杆菌混合感染

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