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23 篇 南京农业大学
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8 篇 华中农业大学
7 篇 中国农业科学院上...
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作者

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22 篇 唐兆新
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16 篇 张彩英
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15 篇 鲁会军
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排序：

Differential Expression of Bovine Leucocyte Antigen ClassⅠChain-related Genes 2 In preganant Dairy Cows and Neonatal Calves

Differential Expression of Bovine Leucocyte Antigen ClassⅠC...

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中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会

作者： ~1 Shen Zhang,~1Ganzhen Deng,~1Beibei Li,~1Yue Wu,~1 Mingyue He, ~1 Xiao Wang,~(c1)Chengye Li,~1Changwei Qiu and ~2Kechun Zhang 1 Veterinary Medical College,Huazhong Agricultural University, 430070 Wuhan,China 2 Guangming Milk Product Cooperation Ltd,Shanghai,200436,China

Major histocompatibility complex takes the capital contribution to maternal immune responses to the semiallogenic fetus. As the menber of *** machenism of class I chain-related genes 2(MIC2) on pregnant setup and delivery,till remains to be *** evaluate the possible effect of MIC2 on pregnant establishment and delivery,neonatal ear tissues,fetal placenta, peripheral blood Polymorphonuclear Neutrophils(PMN) of dairy cow in different pregnant stages were collected to analyze MIC2 expression by quantitative ***2 on PMN in dairy cows was downregulated expressed in first and second trimesters and recoveried back to normal level in ***,MIC2 was novel upregulated expressed in neonatal ear tissues and downreguJated expressed in fetal *** results suggested that MIC2 lowly expressed in the first and second trimester of pregnant cows could suppress NKG2D binding MIC2 on PMN and therefore,let embryo escape from maternal immune response. Anabiotic MIC2 expression in peripartum suggested that maternal immune to full grown foetus recover back to normal level which be in favour of *** foetus,novel upregulated expression of MIC2 in tissues was favourible for foetus to escape its ***,downregulated expression in fetal placenta let placenta decoherenced from maternal placentome which was beneficial to delivery.

关键词： MIC2 pregnant dairy cow neonatal calf polymorphonuclear neutrophils fetal placentaxhina

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Oxalate-degrading capacities of lactic acid bacteria in canine feces

Oxalate-degrading capacities of lactic acid bacteria in cani...

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中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会

作者： Zhihua Ren~(a,b),Cuiling Pan~a,Luyan Jiang~c,Cong Wu~a,Yongwang Liu~a,Zhijun Zhong~a, Linwu Ran~a,Fei Ren~a,Xingxiang Chen~a,Yangguang Wang~a,Yongxing Zhu~a,Kehe Huang~(a,*) (a Institute of Nutritional and Metabolic Disorders in Domestic Animals and Fowls,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China b College of Veterinary Medicine,Sichuan Agricultural University,Ya'an 625014,China c Jiangsu Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau of People's Republic of China,Nanjing 210001,China)

In this study,lactic acid bacteria in canine feces were isolated and identified,and their oxalate-degrading capacities were *** oxalate-degrading capacities were determined for 24 of 47 (51.06%) lactic acid bacteria *** these,8 isolates[Leuconostoc mesenteroides(RL75),Lactococcus garvieae(CD2),Lactococcus ***(CS21),Enterococcus faecium(CL71 and CL72),and Enterococcus faecalis(CD14,CS62,and CD12)]degraded more than 5%of the oxalate present,while the others degraded less than 5%of the oxalate in *** that degraded more than 5%of the oxalate present were selected for further *** oxalate-degrading capacities of individual isolates,a mixture of Enterococcus,a mixture of Lactococcus,and a mixture of the eight isolates were evaluated in media containing different concentrations of glucose(sufficient,insufficient,or no glucose).In comparison with the control medium,all of the individual isolates and mixtures of isolates could degrade oxalate in all three groups(P < 0.05).In most cases,the isolates growing in medium with 20 g/L of glucose had higher oxalate-degrading capacities than those growing in medium with 2.5 g/L of glucose or no *** mixture of all isolates showed higher oxalate-degrading capacity than the individual isolates and other *** oxalate-degrading capacities of the isolates were isolate dependent.

关键词： Canine Urolithiasis Lactic acid bacteria Oxalate degradation

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Effect of Selenium-Enriched Probiotics on Laying Performance,Egg Quality,Egg Selenium Content,and Egg Glutathione Peroxidase Activity

Effect of Selenium-Enriched Probiotics on Laying Performance...

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中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会

作者： Shengfa F.Liao Department of Agriculture Alcorn State University

A 35-d experiment was conducted to evaluate the effect of selenium-enriched probiotics(SP) on laying performance,egg quality,egg selenium(Se) content,and egg glutathione peroxidase(GPX) *** hundred 58-wk-old Rohman laying hens were randomly allotted to 5 dietary treatments of 100 *** treatment had 5 replicates and each replicate had 5 cages with 4 hens per *** SP was supplemented to a corn-soybean-meal basal diet at 3 different levels that supplied total Se at 0.2,0.5,and 1.0 mg/*** basal diet served as a blank control, while the basal diet with supplemental probiotics served as a probiotics *** results showed that dietary SP supplementation not only increased(p < 0.05) the rate of egg laying,day egg weight,mean egg weight,egg Se content,and egg GPX activity,but also decreased(p < 0.05) the feed:egg ratio and egg cholesterol *** egg Se content was gradually increased(p < 0.05) along with the increasing level of dietary *** SP supplementation also slowed down(p < 0.05) the drop of Haugh units(HU) of eggs stored at room *** egg GPX activity had a positive correlation(p < 0.01) with egg Se content,and a negative correlation(p < 0.01) with egg HU drop. These results suggested that Se contents,GPX activity,and HU of eggs were affected by the dietary Se level,whereas the egg laying performance and egg cholesterol content were affected by the dietary *** was concluded that this SP is an effective feed additive that combines the organic Se benefit for hen and human health with the probiotics benefit for laying hen production *** was also suggested that the eggs from hens fed this SP can serve as a nutraceutical food with high Se and low cholesterol contents for both healthy people and patients with hyperlipidemia,fatty liver,or cardiovascular disease.

关键词： selenium-enriched probiotics egg Haugh units cholesterol glutathione peroxidase laying hen performance

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Alterations of Fatty Acid β-oxidation Capability in the Liver of Ketotic Cows

Alterations of Fatty Acid β-oxidation Capability in the Liv...

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中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会

作者： LI Peng~(*,+),LI Xiao-bing~*,FU Shi-xin~*,WU Chen-chen~*,WANG Xiao-xu~*,YU Guo-jian~*,LONG Miaof,WANG Zhe~* and LIU Guo-wen~* (* Department of Clinical Veterinary Medicine,College of Animal Science and Veterinary Medicine,Jilin University,Changchun 130062,Jilin,China tCollege of Animal Science and Veterinary Medicine,Shenyang Agricultural University, Shenyang 110161,Liaoning,China)

Dairy cows are highly susceptible to ketosis after parturitioa In the present study,we evaluated the expression of fatty acidβ-oxidation-related enzymes in the liver of ketotic cows(n=6) and non-ketotic cows(n=6). Serum levels of nonesterified fatty acids(NEFA),β-hydroxybutyrate(BHBA),and glucose were determined by using standard biochemical *** mRNA abundance and protein content of acyl-CoA synthetase long-chain(ACSL),carnitine palmitoyltransferaseⅠ(CPTⅠ),carnitine palmitoyltransferaseⅡ(CPTⅡ),acyl-CoA dehydrogenase long chain(ACADL),3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA synthase(HMGCS),and acetyl-CoA carboxylase(ACC) were evaluated by real-time polymerase chain reaction and enzyme-linked immunosorbent *** found that serum glucose levels were lower in ketotic cows than those in non-ketotic cows,but serum BHBA and NEFA concentrations were *** mRNA and protein levels were significantly higher in livers of ketotic cows than those in non-ketotic *** contrast,the mRNA levels of CPT I and both mRNA and protein levels of CPT II,ACADL,HMGCS,and ACC were decreased in the liver of ketotic *** NEFA concentration positively correlated with ACSL protein levels and negatively correlated with protein levels of CPT II,HMGCS,ACADL,and *** addition,serum BHBA concentration negatively correlated with protein levels of CPT II,HMGCS,and ***,fatty acidβ-oxidation capability was altered in the liver of ketotic compared to non-ketonic ***,high serum NEFA or/and BHBA concentrations play key roles in affecting pathways of fatty acid metabolism in the liver.

关键词： cow ketosis liver fatty acid β-oxidation

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猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒转录调控序列TRS鉴定及其功能解析

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒转录调控序列TRS鉴定及其功能解析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：郑海红孙志朱兴全袁世山中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室华南农业大学兽医学院

殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)mRNA的合成采用独特的非连续性转录方式进行,对其发生及调控机制尚不清楚.本文利用RT-PCR技术确定了北美弱毒株PRRSV各个亚基因组mRNA的转录调控因子(TRS-B)的核心序列(CS-B)及其介导的Leader-body结合位... 详细信息

殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)mRNA的合成采用独特的非连续性转录方式进行,对其发生及调控机制尚不清楚.本文利用RT-PCR技术确定了北美弱毒株PRRSV各个亚基因组mRNA的转录调控因子(TRS-B)的核心序列(CS-B)及其介导的Leader-body结合位置,结果发现PRRSV mRNA分子的转录可使用经典(canonical)及非经典(noncanonical)TRS-B进行.通过对PRRSV感染性克隆pAPRRS进行定点基因突变及其所致拯救病毒的鉴定,以此确定TRS-L和TRS-B突变对亚基因组转录及病毒感染性的影响.结果表明:(1)同时突变TRS-L最后两个CC的全长突变体pLeaderD对MARC-145细胞无感染性,且未产生sgmRNA7转录本;而只突变最后一个C的pLeaderR能拯救出突变病毒,但突变位点在突变病毒系列传代中发生回复突变,由此证明TRS-L 3'的一级序列对不连续性转录起着重要作用且PRRSV具有一定修复功能.(2)突变TRS123 3'最后两个碱基的pM7Da或突变TRS9 3'最后两个碱基的pM7Db均能拯救出病毒,而共同含有TRS9和TRS123 3'最后两个碱基突变的pM7DabR不能拯救出病毒,对拯救的突变病毒进行鉴定发现,TRS123突变的拯救病毒在一系列传代中突变碱基回复,而TRS9突变的拯救病毒传代过程中稳定遗传;突变体pM7S3(含有TRS123的三个碱基突变)和pM7Db虽能拯救出活病毒,但突变都使相应的sgmRNA7转录量至零,且vM7S3滴度偏低.由此证明了TRS9和TRS123都可单独承担PRRSV sgmRNA7的转录调控及其3'一级序列对不连续性转录起着重要作用且PRRSV具有修复功能;PRRSV的N蛋白主要来源于sgmRNA7.1的翻译.(3)所有突变病毒的亚基因组中leader-body结合位点碱基均来源于TRS-B,为负链RNA不连续转录模型理论提供直接证据。

关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 TRS PRRSV 感染性克隆弱毒株碱基突变突变体突变位点亚基因组功能解析

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株及其致弱过程中不同代次病毒的遗传变异分析

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株及其致弱过程中不同代次病...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：周艳君田志军于海李国新郝晓芳闫丽萍姜一峰陈瑾张善瑞彭金美安同庆童光志中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

高致病性猪蓝耳病是目前危害我国养猪业的主要传染病,本研究以高致病性PRRSV亲本毒HuN4株及其传代致弱的毒株为研究对象,将高致病性PRRSV亲本毒HuN4株在Marc145细胞上进行连续100次以上传代致弱,并对PRRSV强毒HuN4株及其不同传代致弱的... 详细信息

高致病性猪蓝耳病是目前危害我国养猪业的主要传染病,本研究以高致病性PRRSV亲本毒HuN4株及其传代致弱的毒株为研究对象,将高致病性PRRSV亲本毒HuN4株在Marc145细胞上进行连续100次以上传代致弱,并对PRRSV强毒HuN4株及其不同传代致弱的毒株进行核苷酸及氨基酸遗传变异分析,结果发现亲本毒在连续传代过程中,在非结构蛋白编码区和结构蛋白编码区均有氨基酸的突变,但是发生突变的氨基酸比较分散,其中突变最多的主要集中在ORF1a和ORF1b复制酶基因区域,其中ORF1a基因中发生突变的氨基酸主要在NSP2蛋白,占ORF1a基因突变氨基酸的61.5%,ORF1b基因发生突变的氨基酸主要在NSP9、NSP11和NSP12蛋白.在结构蛋白区域氨基酸突变较少,其中氨基酸稳定遗传的是ORF7编码的核衣壳蛋白,即使传至100代以上,也未发生氨基酸的突变或缺失、插入等现象.亲本毒HuN4株在传至F84代时突变率达到了最高,发生突变的氨基酸达到了35个,从F85代以后基本氨基酸遗传性能趋于稳定,当传至F100代以后,氨基酸遗传性能基本稳定,从F100代到F112代仅发生2个氨基酸的突变,其氨基酸突变率仅为0.03%。分析结果显示高致病性PRRSV亲本毒HuN4株在传代致弱过程中,F84代以前中间代次的各个毒株氨基酸仍然可以继续发生突变,具有遗传性能的不稳定性,F84代以后其氨基酸突变率降低,基本趋于平衡,而经过传代致弱F100代以后的毒株其生物学遗传性能更加趋于稳定,适合于作为候选的弱毒疫苗株.

关键词：亲本毒HuN4株不同代次毒株遗传变异

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猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HuN4株高代次病毒特异性抗原表位的鉴定

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HuN4株高代次病毒特异性抗原表位...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：姜一峰安同庆周艳君田志军肖燕韦天超王瑜彭金美于海李国新闫丽萍张善瑞童光志中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

2006年以来由猪繁殖和呼吸综合征病毒变异株（highly pathogenic porcine reproductive and respiratorysyndrome virus,HP-PRRSV）引起的高致病性蓝耳病（HP-PRRS）对我国养猪业造成了巨大的损失.HP-PRRSV相比经典的PRRSV Nsp2区序列缺失了30个氨基酸,成为HP-PRRSV的分子特征之一.近年来,对Nsp2区功能的研究成为了研究PRRSV致病机理的热点。在PRRSV感染过程中针对Nsp2的抗体出现较早,且能够在长时间内保持较高的抗体滴度,时PRRS的防控具有重要的诊断意义。本实验通过对HP-PRRSV HuN4株亲本毒及其不同代次传代毒株Nsp2蛋白氨基酸序列比较分析,发现不同代次的Nsp2蛋白存在4处氨基酸点突变,针对4处氨基酸突变,每个突变点分别设计了相互重叠的3条短肽,人工合成编码短肽的核苷酸序列,经原核表达后进行Western-Blot分析.结果表明表达的融合蛋白F65-11(KGEPVSDQPAK)能够特异性的与HuN4-F40、HuN4-F65和HuN4-F112感染猪的血清发生反应,而与HuN4株低代次毒株的阳性血清和CH-1a株阳性血清不发生反应,证实第4个氨基酸点突变（S754）处存在一个免疫优势抗原表位.将该表位肽段由N端和C端逐步缩短继续鉴定,当N端缩短到第5个氨基酸(SDQPAK)C端缩短到第3个氨基酸(KGEPVSDQ)时,表达的融合蛋白不能与PRRSV阳性血清反应,最终推测该抗原表位必需氨基酸为VSDQ.选取GenBank中提交的部分高致病性蓝耳病病毒的Nsp2氨基酸序列,对该表位氨基酸所在位置进行序列比较,分析结果显示位于Nsp2蛋白749→759位氨基酸序列高度保守,F65-11变异位点C→S为HuN4株系列传代毒株所特有。本研究结果证实抗原表位F65-11可以作为鉴别HuN4-F112弱毒疫苗所诱导产生的特异性抗体的候选抗原。

关键词： PRRSV HuN4株 Nsp2蛋白抗原表位

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP4的原核表达及其抗体的制备

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP4的原核表达及其抗...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：许傲天周艳君李国新于海闫丽萍陈宗艳张善瑞王礞礞姜一峰王亚欣童光志中国农业科学院上海兽医研究所

猪繁殖与呼吸综合征病毒是不分节段的单股正链RNA病毒,基因组大小约为15kb.通过与马动脉炎病毒氨基酸序列比较分析,认为PRRSV的非结构蛋白NSP4具有3C样丝氨酸蛋白酶活性,是参与病毒多聚蛋白前体加工的主要蛋白酶。本研究根据GeneBank中... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征病毒是不分节段的单股正链RNA病毒,基因组大小约为15kb.通过与马动脉炎病毒氨基酸序列比较分析,认为PRRSV的非结构蛋白NSP4具有3C样丝氨酸蛋白酶活性,是参与病毒多聚蛋白前体加工的主要蛋白酶。本研究根据GeneBank中已发表的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4全基因序列,设计合成一对引物,对PRRSV HuN4 Nsp4基因进行RT-PCR扩增,将回收的目的基因片段克隆到原核表达载体PET-30a,构建了重组表达载体PET-30a-Nsp4,经酶切和测序鉴定证实了重组表达载体为正确的.将PET-30a-Nsp4转化原核表达菌株BL21宿主菌,用终浓度1mmol/L IPTG诱导5小时可以获得最高的表达量。SDS-PAGE结果表明,重组菌诱导可表达分子量约为26Ku的蛋白,与预期分子量相符。利用PRRSV阳性血清作为一抗对重组蛋白进行Western-blot分析,结果显示表达的重组蛋白具有较好的反应原性。经镍离子亲和层析(Ni-NTA)纯化,获得了高纯度的可溶性重组蛋白.将纯化的Nsp4蛋白与完全弗氏佐剂乳化后,以100ug/只的剂量,免疫4～6用龄健康Balb/c小鼠,每隔2周进行加强免疫一次,共免疫三次,三免后7天采血,并用ELISA方法检测抗体效价,结果显示三免后其抗体效价可达1:16000.利用获得的重组蛋白抗体对PRRSV感染细胞裂解产物进行Western-blot分析,结果显示所制备的抗体能够特异性识别病毒自身表达的Nsp4蛋白。同时对PRRSV感染的Marc-145细胞进行间接免疫荧光试验可以检测到特异性荧光。本研究获得了高效表达的PRRSV Nsp4蛋白,成功地制备了Nsp4特异性多克隆抗体,为进一步研究Nsp4蛋白的亚细胞定位以及功能奠定了基础.

关键词： HP-PRRSV NSP4 原核表达多克隆抗体

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猪肺炎支原体黏附因子P97R1、膜蛋白P46单抗制备

猪肺炎支原体黏附因子P97R1、膜蛋白P46单抗制备

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：冯志新刘茂军王海燕甘源吴叙苏邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏省生物兽药筛选服务中心

目的P46蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,且与其它支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的耙蛋白或靶基因.P97蛋白是猪肺炎支原体的黏附因子,与病原的感染与致病机制相关,其中R1区是P97蛋白的主要抗原决定簇.制备针对该两种... 详细信息

目的P46蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,且与其它支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的耙蛋白或靶基因.P97蛋白是猪肺炎支原体的黏附因子,与病原的感染与致病机制相关,其中R1区是P97蛋白的主要抗原决定簇.制备针对该两种蛋白的特异性单抗能为猪肺炎支原体的检测及机理研究提供有效的资源.方法本研究用猪肺炎支原体全菌抗原免疫小鼠,分别利用大肠杆菌表达的P46蛋白和P97R1蛋白作为筛选抗原制备P46与P97R1的单克隆抗体.结果本研究成功制备了两株针时P46的特异性单克隆抗体IA4和3C11以及三株针对P97R1的特异性单克隆抗体2A10,6C4和6C5.两株P46单抗最高ELISA效价可达1:64000,且均能与原核表达的P46蛋白及猪肺炎支原体全菌蛋白中46KD大小的蛋白发生特异性反应.但配对试验表明,该两株P46单抗是针时同一表位的单抗.三株P97R1单抗中,2A10与6C5两株滴度较高,ELISA效价达1:32000.配对试验表明该三株单抗分别针对P97R1蛋白的不同表位.Western-blot结果表明,三株P97R1单抗均能与原核表达的P97R1蛋白及猪肺炎支原体全菌蛋白中80-120KD之间的两蛋白发生特异性反应.本研究制备的五株杂交瘤细胞株经三个月冻存或连续传代三个月均能保持较高的滴度.结论本研究分别成功制备了两株针对猪肺炎支原体P46蛋白以及三株针对P97R1蛋白的特异、稳定且高滴度的单克隆抗体.

关键词：猪肺炎支原体 P46蛋白 P97R1蛋白单克隆抗体

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株M蛋白T细胞表位的初步鉴定

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株M蛋白T细胞表位的初步鉴定

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王亚欣周艳君李国新张善瑞姜一峰许傲天于海王礞礞闫丽萍陈宗艳童光志中国农业科学院上海兽医研究所

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的猪的一种高度传染病,细胞免疫在PRRSV的抗感染免疫中发挥重要的作用,而由PRRSV的ORF6编码的M蛋白不仅可以诱导产生中和抗体,还可诱发强的特异性细胞免疫应答.鉴于此,本研究以... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的猪的一种高度传染病,细胞免疫在PRRSV的抗感染免疫中发挥重要的作用,而由PRRSV的ORF6编码的M蛋白不仅可以诱导产生中和抗体,还可诱发强的特异性细胞免疫应答.鉴于此,本研究以HP-PRRSV HuN4株ORF6基因编码的M蛋白作为研究目标,通过软件分析设计合成了肽段长度为15个氨基酸残基,且每个肽段有11个氨基酸残基相互重叠的一系列短肽.选取5头30日龄PRRSV阴性健康仔猪,用HuN4-F112株弱毒疫苗进行免疫,免疫后28天采血分离猪的外周血淋巴细胞(PBMCs),并将所分离的PBMCs作为效应细胞,把上述合成的一系列重叠短肽作为刺激原,肽池的刺激浓度为100μg/ml,其中每孔效应细胞为1×10～6个.利用猪的商品化IFN-γELISPOT试剂盒对效应细胞进行酶联免疫斑点试验(ELISPOT),预先将所有的短肽分为6个肽池,第一轮筛选实验结果显示第Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ号肽池所引起的每孔IFN-γ反应细胞数较多,平均数分别为52.4个、47.8个,49.13个.第Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ号肽池共有的短肽为M1-M10,继续将这10个肽分为6个肽池,进行第二轮筛选,结果显示第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ号肽池所引起的每孔IFN-γ反应细胞数较多,平均数分别为113个、74.13个、50.27个、78.73个,其中阳性肽池的共有短肽为M2、M3、M5、M6,M7将这5个短肽分别进行单肤刺激,试验表明其中M3、M5、M6引起的每孔细胞反应数较高,平均数分别为172.3个、164.7个、428.5个.分析结果显示由M3、M5、M6单独的短肽就能够诱导较高水平的IFN-γ表达,而内源性IFN-γ表达水平的高低可以反映机体的细胞免疫状态,因此我们推测这三个短肽与PRRSV诱导的特异性细胞免疫具有相关性,可能存在能够诱导细胞免疫的特异性T细胞表位.本研究结果的获得为进一步探讨PRRSV所引起的细胞免疫以及T细胞表位的鉴定奠定了基础。

关键词： HP-PRRSV M蛋白 ELIspot技术 T细胞表位

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