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文献类型

272 篇 会议

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学科分类号

244 篇 农学
- 241 篇 兽医学
- 3 篇 畜牧学
- 1 篇 作物学
- 1 篇 水产
15 篇 医学
- 9 篇 基础医学(可授医学...
- 6 篇 临床医学
2 篇 工学
- 1 篇 计算机科学与技术...
- 1 篇 化学工程与技术
- 1 篇 食品科学与工程（可...
1 篇 理学
- 1 篇 生物学
1 篇 管理学
- 1 篇 工商管理

主题

105 篇 兽医学
35 篇 流行病学
21 篇 感染状况
18 篇 基因克隆
16 篇 基因序列
14 篇 序列分析
12 篇 弓形虫
12 篇 原核表达
12 篇 免疫保护
11 篇 旋毛虫
10 篇 柔嫩艾美耳球虫
9 篇 生物学特性
9 篇 分离鉴定
8 篇 分子鉴定
8 篇 系统进化
7 篇 基因表达
7 篇 日本血吸虫
7 篇 检测技术
7 篇 弓形虫感染
7 篇 血清抗体

机构

24 篇 中国农业大学
21 篇 中国农业科学院兰...
18 篇 家畜疫病病原生物...
16 篇 四川农业大学
14 篇 新疆农业大学
14 篇 中国农业科学院兰...
12 篇 中国农业科学院上...
11 篇 吉林大学
10 篇 延边大学
10 篇 吉林农业大学
9 篇 山东省畜禽疫病防...
9 篇 山东省动物生物工...
9 篇 山东农业大学
8 篇 湖南农业大学
8 篇 中国农业科学院上...
8 篇 浙江大学
7 篇 广东省农业科学院...
7 篇 华南农业大学
7 篇 青海省畜牧兽医科...
7 篇 东北农业大学

作者

27 篇 殷宏
26 篇 罗建勋
21 篇 关贵全
20 篇 刘志杰
20 篇 李有全
17 篇 杨光友
17 篇 古小彬
16 篇 朱兴全
16 篇 任巧云
15 篇 杨吉飞
14 篇 刘爱红
12 篇 刘群
12 篇 陈泽
10 篇 赵其平
10 篇 韩红玉
10 篇 姜连连
10 篇 马米玲
10 篇 朱顺海
10 篇 黄兵
10 篇 董辉

语言

258 篇 中文
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血吸虫单性带虫免疫对继发血吸虫病的影响

血吸虫单性带虫免疫对继发血吸虫病的影响

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：乔洪宾曹宇凡石耀军刘金明林矫矫金亚美中国农业科学院上海兽医研究所

为了检验单性感染血吸虫能否起到类似于致弱尾蚴对宿主再感染血吸虫病的保护作用,特进行了如下实验.实验一:实验组小鼠进行血吸虫单性带虫免疫(100条/只),感染对照组不经处理.与单性血吸虫预免疫后第五、七周,所有小鼠进行吡喹酮注射(30... 详细信息

为了检验单性感染血吸虫能否起到类似于致弱尾蚴对宿主再感染血吸虫病的保护作用,特进行了如下实验.实验一:实验组小鼠进行血吸虫单性带虫免疫(100条/只),感染对照组不经处理.与单性血吸虫预免疫后第五、七周,所有小鼠进行吡喹酮注射(300mg/kg),单性血吸虫预免疫后第九周进行血吸虫混合感染(40条/只),于混合感染后7周解杀小鼠,观察各组肝脏病变情况,采集数据并计算减虫率、减卵率、虫卵孵化率.实验二:实验组小鼠进行血吸虫单性带虫免疫(40条/只),感染对照组不经处理.单性血吸虫预免疫后第11周进行血吸虫混合感染(40条/只),于混合感染后7周解杀小鼠,观察各组肝脏病变情况,采集数据并计算减虫率、减卵率、虫卵孵化率.在混合感染之前每组各取三只小鼠,进行脾细胞培养,检测脾细胞细胞因子产生情况.试验结果显示,经吡喹酮处理的单性感染对继发血吸虫病有明显地保护作用,带虫免疫组小鼠肝脏无明显病理性改变,肝脏减卵率47.8％,带单雄、单雌虫免疫组虫卵的孵化都减少85％以上.未经吡喹酮处理的单性带虫免疫组小鼠的肝脏有病理性变化;虫卵孵化率降低明显;细胞因子检测发现,带虫免疫组小鼠脾细胞上清中促炎症因子IL17A含量显著低于感染对照组、抗炎性因子IL10含量显著高于感染对照组.研究表明,单性血吸虫带虫免疫对继发血吸虫病有较好的保护作用.

关键词：兽医学血吸虫病带虫免疫病理机制细胞因子

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不同接种途径对贝氏隐孢子虫寄生部位的影响研究

不同接种途径对贝氏隐孢子虫寄生部位的影响研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：袁林闫文朝王天奇张龙现钱伟锋王文龙王帅范頔河南科技大学动物科技学院动物检疫实验室洛阳471003 河南科技大学动物科技学院动物检疫实验室洛阳471003 河南省动物疫病防控与公共安全院士工作站洛阳471003 河南农业大学牧医工程学院郑州450002

为了探究贝氏隐孢子虫在禽类体内感染移行方式与寄生部位的关系,本课题组先后通过4次独立的7-12日龄雏鸡感染试验表明,直接嗉囊接种贝氏隐孢子虫卵囊的雏鸡随粪便排出大量卵囊,黏膜改良抗酸染色和组织切片结果显示,只能在法氏囊黏膜表... 详细信息

为了探究贝氏隐孢子虫在禽类体内感染移行方式与寄生部位的关系,本课题组先后通过4次独立的7-12日龄雏鸡感染试验表明,直接嗉囊接种贝氏隐孢子虫卵囊的雏鸡随粪便排出大量卵囊,黏膜改良抗酸染色和组织切片结果显示,只能在法氏囊黏膜表面发现隐孢子虫特征性虫体;扫描电镜观察发现在法氏囊黏膜上寄生有大量隐孢子虫虫体,在气管和支气管黏膜上仅发现零星少量虫体;滴口或饮水感染卵囊的雏鸡组也得到相同结果.经直肠接种子孢子的雏鸡,只在法氏囊黏膜表面发现大量虫体,气管黏膜上没有隐孢子虫虫体寄生.另外,对不同试验组的雏鸡在感染后12h,24h,48h,72h,96h不同时间点翅静脉采血,通过基于18SrRNA的PCR检测,不同时间点的血样中均没有检测到隐孢子虫.该研究结果说明贝氏隐孢子虫经口感染雏鸡后,入侵阶段的虫体不能通过血液循环达到气管寄生,而是通过口腔-咽喉-气管和口腔-胃肠道-法氏囊途径分别感染气管和法氏囊.经直肠接种子孢子后,由于子孢子不能通过胃肠道上行进入气管,但是可以移行进入直肠附近的法氏囊,所以只能感染法氏囊,而不能感染气管.本研究揭示了贝氏隐孢子虫在禽类体内的感染移行机制.另外,本研究证明贝氏隐孢子虫子孢子和卵囊均可经雏鸡直肠感染成功,嗉囊接种只有卵囊能感染成功.为雏鸡体内贝氏隐孢子虫转染研究提供了可靠的方法.

关键词：雏鸡贝氏隐孢子虫寄生部位扫描电镜血液检测

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利用银染mRNA差异显示技术筛选分析捻转血矛线虫L3期幼虫抗干燥基因

利用银染mRNA差异显示技术筛选分析捻转血矛线虫L3期幼虫抗干燥基...

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：马羽洁陈学秋闫宝龙杨怡郭筱璐张红丽杜爱芳浙江大学动物科学学院动物医学系杭州310058

为研究干燥作用对捻转血矛线虫L3期幼虫mRNA表达的影响,筛选并分析与干燥相关表达的基因.分别提取干燥培养和正常培养的虫体mRNA,反转录成cDNA,采用银染mRNA差异基因显示技术在干燥和正常培养的银染聚丙烯酰胺凝胶中回收了差异显示条带... 详细信息

为研究干燥作用对捻转血矛线虫L3期幼虫mRNA表达的影响,筛选并分析与干燥相关表达的基因.分别提取干燥培养和正常培养的虫体mRNA,反转录成cDNA,采用银染mRNA差异基因显示技术在干燥和正常培养的银染聚丙烯酰胺凝胶中回收了差异显示条带,并通过RT-PCR和在秀丽线虫内RNAi验证相关抗干燥基因.筛选获得58个差异表达的EST序列,生物信息学分析显示其中49个(84.48％)序列与现有的捻转血矛线虫基因组数据库有高度相似性,20个(34.48％)与已知线虫的cDNA或基因组序列有较高相似性,8个(13.79％)与其它线虫已知蛋白质氨基酸序列相似性较高.差异表达序列BF-U01A包含泛素(UBQ)家族结构域,与秀丽线虫泛素家族氨基酸相似性高达95％.差异表达序列GH-U02A与已知捻转血矛线虫谷胱甘肽-S-转移酶(GST)氨基酸相似性为87％.RT-PCR显示UBQ和GST在干燥虫体中均上调,在秀丽线虫中对UBQ,GST进行RNAi后,干燥虫体生存率下降,证明筛选的GST,UBQ基因在线虫中确有抗干燥作用.UBQ主要标记需要分解的蛋白质,使其水解,在虫体干燥应激时,可能与蛋白酶体β亚基(PBS)共同作用,降解应激变性蛋白,维持虫体稳定性.GST在虫体干燥时与抗外环境毒素及抗氧化作用相关.其他差异表达序列分别与其他线虫的虾红素金属酶蛋白,转座酶和未知假定蛋白有关,在虫体抗干燥中可能都发挥一定作用.

关键词：兽医学捻转血矛线虫差异显示技术抗干燥基因

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牛环形泰勒虫诊断性靶基因片段的筛选及分子诊断

牛环形泰勒虫诊断性靶基因片段的筛选及分子诊断

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：曹雯丽王冰洁郭庆勇沙它尔·卡哈尔巴音查汗新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052 新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052 吐鲁番市畜牧兽医站新疆吐鲁番838000

本研究首先对新疆吐鲁番及和静地区该病的流行情况进行调查,筛选了阳性病料.采用PCR方法,利用设计的三对特异性引物分别扩增牛环形泰勒虫新疆株Tams1基因的三段区域(全长基因,扩增片段缺乏N端及C端疏水区、仅缺乏N端疏水区区域),构建三... 详细信息

本研究首先对新疆吐鲁番及和静地区该病的流行情况进行调查,筛选了阳性病料.采用PCR方法,利用设计的三对特异性引物分别扩增牛环形泰勒虫新疆株Tams1基因的三段区域(全长基因,扩增片段缺乏N端及C端疏水区、仅缺乏N端疏水区区域),构建三种重组表达载体,通过SDS-PAGE电泳分析比较三种重组质粒蛋白表达量及表达形式,最终筛选获得高可溶性表达重组质粒.优化其表达条件,并对纯化的蛋白进行Western blot分析.结果:新疆吐鲁番及和静地区牛环形泰勒虫病阳性率为52.3％(219/419).在37℃条件下,经终浓度为1mmol/L的IPTG诱导表达4h后,缺乏N端及C端疏水区的靶重组质粒表达出大小为53KDa的可溶性蛋白;而含全长基因或仅缺乏N端疏水区的质粒表达产物分别为55KDa、56kDa大小的包涵体蛋白,最终筛选得到了能够高表达可溶性蛋白的质粒.蛋白诱导条件优化结果表明,在37℃、0.5mmol/L IPTG诱导4h的表达条件下,可溶性蛋白表达量最高,达1.39mg/ml.纯化后的蛋白能与相应抗体特异性结合.本次结果表明环形泰勒虫病在新疆吐鲁番地区流行严重,表达的可溶性蛋白可作为诊断性抗原,以此建立环形泰勒虫病免疫学检测方法.本研究为开展环形泰勒虫病的早期检测和疫苗研究提供了技术支持.

关键词：牛环形泰勒虫病重组质粒可溶性蛋白分子诊断

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旋毛虫ES抗原43Ku基因核酸疫苗的构建及免疫效果评价

旋毛虫ES抗原43Ku基因核酸疫苗的构建及免疫效果评价

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：杨桂连吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心吉林长春130118

本试验采用旋毛虫肌幼虫43ku ES抗原基因构建核酸疫苗,检测其免疫效果.首先根据Genbank登陆的旋毛虫肌幼虫43ku ES抗原基因序列设计引物,在上下游分别引入KpnⅠ和BamHⅠ的酶切位点.用PCR技术扩增肌幼虫43ku ES抗原基因,选择阳性克隆菌... 详细信息

本试验采用旋毛虫肌幼虫43ku ES抗原基因构建核酸疫苗,检测其免疫效果.首先根据Genbank登陆的旋毛虫肌幼虫43ku ES抗原基因序列设计引物,在上下游分别引入KpnⅠ和BamHⅠ的酶切位点.用PCR技术扩增肌幼虫43ku ES抗原基因,选择阳性克隆菌提取质粒及真核表达载体pVAX1进行相同酶切,将产物回收后连接并转化入DH5α中.转染后诱导表达.将4-6周龄BALB/C小鼠随机分组,肌注100μL质粒DNA.每组免疫三次,每次间隔1周.末次免疫后一周,每只小鼠攻旋毛虫肌幼虫,30天后,处死.从脾脏和淋巴结中分离T细胞和B细胞用流式细胞仪测定各细胞因子的表达水平.结果显示,重组真核表达质粒组的抗体水平明显高于其他两组,差异显著,各细胞因子表达水平也明显增高.重组真核表达质粒pVAX1:Ts 43组旋毛虫肌幼虫减虫率最高可达52.1％;重组真核表达质粒pVAX1-Ts45组旋毛虫肌幼虫减虫率最高可达39.5％;重组真核表达质粒pVAX1-Ts43与重组真核表达质粒pVAX1-Ts45混合使用组旋毛虫肌幼虫减虫率最佳,达到了75.9％.以上结果表明,旋毛虫肌幼虫43ku Es抗原基因在小鼠体内得到表达,诱导小鼠产生免疫反应对抗旋毛虫感染,与pVAX1-Ts45联合效果更佳,为研制预防旋毛虫病核酸疫苗奠定了试验基础.

关键词：兽医学旋毛虫排泄分泌抗原 43Ku基因核酸疫苗免疫反应

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体外连续培养一种近来在我国鉴定的羊巴贝斯虫

体外连续培养一种近来在我国鉴定的羊巴贝斯虫

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：关贵全罗建勋马米玲刘爱红杜鹏飞任巧云李有全王锦明刘志杰殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046

2001年用采自新疆牛羊体的血红扇头蜱和小亚璃眼蜱感染除脾绵羊时,分离获得一株巴贝斯虫,通过对其形态特征、致病性、传播媒介和18S rRNA与ITS基因序列比对分析等研究,初步确定其为一种新发现的羊巴贝斯虫,并将其暂命名为羊巴贝斯虫未... 详细信息

2001年用采自新疆牛羊体的血红扇头蜱和小亚璃眼蜱感染除脾绵羊时,分离获得一株巴贝斯虫,通过对其形态特征、致病性、传播媒介和18S rRNA与ITS基因序列比对分析等研究,初步确定其为一种新发现的羊巴贝斯虫,并将其暂命名为羊巴贝斯虫未定种新疆株.为了对该寄生虫进行深入研究,本研究应用感染的羊血,建立了该寄生虫持续体外培养系统.在24和6孔板中,以RPMI 1640培养液,添加20％的胎牛血清和7.5％的绵羊红细胞,在37℃、5％CO2条件下静置,隔天换液,培养4天后红细胞染虫率可达到10％.在75cm2的细胞培养瓶中,绵羊红细胞浓度减少到2.5％,其它条件不变的情况下,红细胞染虫率可达到20:50％.此外,应用该培养系统,以有限稀释的方法,筛选获得两株该寄生虫的单克隆虫株G2和G5.然后应用微量分光光度和染虫率计算的方法,测定其体外生长周期,结果显示其在绵羊红细胞中的生长周期在15.20-16.27小时之间.同时应用该培养系统,在体外测定了该寄生虫是否入侵绵羊、山羊、黄牛、梅花鹿和人的红细胞,结果显示,该寄生虫的两个单克隆虫株在体外能够入侵绵羊、黄牛、梅花鹿、和人的红细胞,但是在人的红细胞中不能传代增殖,而不能入侵山羊的红细胞.体内实验研究显示,该寄生虫不能感染黄牛.最后,应用该培养系统,自甘肃省西部地区采集的19份绵羊血中,分离到一株巴贝斯虫,其ITS基因序列与羊巴贝斯虫未定的相似性达99.5％.

关键词：羊巴贝斯虫体外培养生长特性分离鉴定

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旋毛虫ES抗原及Hsp70对巨噬细胞RAW264.7免疫调节的研究

旋毛虫ES抗原及Hsp70对巨噬细胞RAW264.7免疫调节的研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：韩彩霞路义鑫李巍李晓云禹洋唐颖刘畅宋铭忻东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

本研究用小鼠巨噬细胞RAW264.7作为模型,分析旋毛虫ES抗原和Hsp70对巨噬细胞的活化能力,并观察LPS/Pam3CSK4对已活化的巨噬细胞免疫调节作用.应用半定量PCR方法检测发现,不同浓度的旋毛虫ES抗原,其对RAW264.7细胞上的TLR2/4 mRNA诱导表... 详细信息

本研究用小鼠巨噬细胞RAW264.7作为模型,分析旋毛虫ES抗原和Hsp70对巨噬细胞的活化能力,并观察LPS/Pam3CSK4对已活化的巨噬细胞免疫调节作用.应用半定量PCR方法检测发现,不同浓度的旋毛虫ES抗原,其对RAW264.7细胞上的TLR2/4 mRNA诱导表达存在着明显变化,在ES抗原浓度为15μg/mL时,TLR2/4 mRNA表达量较其他组高,与对照组相比差异显著(P＜0.05);确定浓度的ES抗原对RAW264.7细胞上TLR2/4基因表达存在时间依赖性,在ES抗原(15μg/mL)作用18h时,TLR2/4 mRNA有较高水平的表达,且与空白组之间存在显著性差异(P＜0.05).用同样方法检测旋毛虫Hsp70对RAW264.7细胞的作用,研究表明,RAW264.7细胞对Hsp70存在剂量依赖性,Hsp70作用浓度为5μg/mL时有相似的结论.15μg/mL的ES抗原作用RAW264.7细胞18h后,再经LPS(10ng/mL)刺激12 h.结果表明,经ES抗原预刺激后的巨噬细胞对LPS再次刺激的反应性明显降低,其表现为巨噬细胞上的TLR2/4 mRNA表达量下降.研究结果证明,适当作用时间和浓度的旋毛虫ES抗原和Hsp70能够活化静息状态下的巨噬细胞;在旋毛虫ES抗原和HspT0持续作用下,巨噬细胞对LPS再刺激的反应性明显降低,表现为TLR2、TLR4和胞内信号分子的表达下调,说明旋毛虫ES抗原可诱导巨噬细胞处于类似于内毒素诱导的免疫抑制.

关键词：兽医学旋毛虫巨噬细胞免疫调节

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弓形虫致密颗粒蛋白GRA7基因原核表达及应用研究

弓形虫致密颗粒蛋白GRA7基因原核表达及应用研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：葛巍王泽东魏峰刘全吉林农业大学生命科学学院吉林长春130118 军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人畜共患病预防与控制重点实验室吉林长春130122 军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人畜共患病预防与控制重点实验室吉林长春130122 吉林农业大学生命科学学院吉林长春130118

目前弓形虫颊骨弓形虫速殖子已确定的有10个致密颗粒蛋白,其中GRA7是一种潜在的诊断、疫苗抗原.本研究通过RT-PCR技术扩增弓形虫GRA7全长cDNA基因,克隆至原核表达载体pET-28a,转入大肠杆菌DH5α感受态细胞,经抗性筛选、酶切及DNA测序鉴... 详细信息

目前弓形虫颊骨弓形虫速殖子已确定的有10个致密颗粒蛋白,其中GRA7是一种潜在的诊断、疫苗抗原.本研究通过RT-PCR技术扩增弓形虫GRA7全长cDNA基因,克隆至原核表达载体pET-28a,转入大肠杆菌DH5α感受态细胞,经抗性筛选、酶切及DNA测序鉴定,获得重组表达载体.阳性重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,重组蛋白经SDS-PAGE及Western blotting分析,且对表达产物进行纯化,结果表明,GRA7抗原蛋白可以在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,表达量可达菌体的30％,可与弓形虫阳性血清发生特异反应,具有反应原性.用重组GRA7及弓形虫裂解抗原(TLA)作为检测抗原,用标准阳性、阴性血清建立ELISA方法,结果表明,GRA7具有包被所需最低蛋白浓度低(GRA7 0.5μg/μL;TLA 40μg/μL),ELISA结果OD值高(GRA7平均OD=0.77;TLA平均OD=0.31)的特点.用ELISA方法对1040份牛血清进行检测,结果表明GRA7的检出阳性率为12.8％,TLA的检测阳性率12.2％,两者之间无显著差异.因此,重组弓形虫GRA7可以作为诊断抗原用于弓形虫流行病学调查.

关键词：弓形虫致密颗粒蛋白基因重组酶联免疫吸附试验原核表达

来源：评论

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紫茎泽兰石油醚萃取物对牛足螨的杀灭效果及杀虫活性成分初步分析

紫茎泽兰石油醚萃取物对牛足螨的杀灭效果及杀虫活性成分初步分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：农向何冉王家海古小彬王淑贤杨光友四川农业大学动物医学院四川雅安625014

为了评估紫茎泽兰石油醚萃取物对牛足螨病的治疗效果,本研究采用三种不同浓度的紫茎泽兰乙醇提取物以及石油醚萃取物对牛德州足螨进行离体杀灭试验,评估不同浓度提取物的离体杀灭足螨效果.同时,从三个奶牛场选取24头患足螨病的奶牛,随... 详细信息

为了评估紫茎泽兰石油醚萃取物对牛足螨病的治疗效果,本研究采用三种不同浓度的紫茎泽兰乙醇提取物以及石油醚萃取物对牛德州足螨进行离体杀灭试验,评估不同浓度提取物的离体杀灭足螨效果.同时,从三个奶牛场选取24头患足螨病的奶牛,随机分成4组(每组6只),命名为A、B、C和D组,A和B组用石油醚萃取物涂擦治疗,C和D组分别用氰戊菊酯、丙三醇加水涂擦治疗作为阳性和空白对照组.结果表明,在离体杀灭试验中,4h内,1.0、0.5、0.25 g/ml(w/v)浓度的提取物杀灭效果分别达到100％、100％和96.7％,三种不同浓度的石油醚萃取物杀灭效果也分别达到100％、93.3％和80.0％.离体杀灭试验结果表明,紫茎泽兰石油醚萃取物具有良好的杀灭足螨的效果.在临床试验中,两次用药治疗后,A、B两个不同浓度试验组的12头奶牛感染部位足螨均被完全消除.用药2次后,直到60d的治疗期结束,治疗组奶牛感染部位无螨虫复发现象,临床治疗效果显示石油醚萃取物与氰戊菊酯的治疗效果相当.研究结果表明,体外杀螨试验与临床治疗结果均预示紫茎泽兰具有杀灭牛足螨的活性成分,可以作为植物源性中草药加以开发利用.为了追踪紫茎泽兰石油醚萃取物中具有杀虫活性的成分,利用薄层层析TLC和高效液相色谱HPLC等方法对紫茎泽兰石油醚萃取物的主成分进行了初步分析,结果显示,紫茎泽兰石油醚萃取物含有5-6种成分,本试验为深入分离和鉴定紫茎泽兰提取物中具有杀虫活性的成分奠定了基础.

关键词：牛足螨紫茎泽兰石油醚萃取物杀虫活性

来源：评论

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弓形虫ROP2蛋白在纳虫泡膜定位研究

弓形虫ROP2蛋白在纳虫泡膜定位研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：张丽廖启彬胡琳彭鸿娟南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系广州510515

本研究通过将重组质粒pET-32α-ROP2转化到表达菌*** BL-21中,接种到氨苄抗性的LB液体培养基中,37℃摇床培养至OD600值为0.6～0.8.加入诱导剂IPTG至终浓度为0.5mM,20℃摇床中诱导过夜.离心收集菌体,Tris-HCl缓冲液重悬细菌.超声裂菌,离... 详细信息

本研究通过将重组质粒pET-32α-ROP2转化到表达菌*** BL-21中,接种到氨苄抗性的LB液体培养基中,37℃摇床培养至OD600值为0.6～0.8.加入诱导剂IPTG至终浓度为0.5mM,20℃摇床中诱导过夜.离心收集菌体,Tris-HCl缓冲液重悬细菌.超声裂菌,离心,沉淀用含有8M尿素的Tris HCI(pH8.0)缓冲液溶解其中的包涵体蛋白.用纯化的ROP2重组蛋白免疫新西兰大白兔.第一次免疫后加强免疫两次,每次间隔15天.免疫后45天,对兔实施安乐死,并采集动脉血.离心分离兔血清,亲和纯化法分离纯化IgG抗体.用ELASA的方法检测该多克隆抗体的效价,用蛋白免疫印迹法检测其特异性.利用人胶质瘤细胞(U251)制备细胞爬片,弓形虫速殖子侵染3小时后,用PBS缓冲液洗去未侵染的速殖子.用4％多聚甲醛固定细胞.透化后的细胞用10％BSA封闭1小时.加入封闭液稀释后的一抗(抗ROP2多克隆抗体1:500),37℃轻缓摇动孵育2小时.一抗结合后用PBS缓冲液洗3次,每次5分钟.加入二抗(辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔1:100),37℃条件下避光孵育lh.用PBS缓冲液洗涤3次,每次5分钟.100ng/ml DAPI37℃染色***缓冲液洗涤3次,每次5分钟.风干后封片.在荧光显微镜下观察ROP2抗体在细胞内的定位,拍摄照片.细胞内免疫荧光显示ROP2蛋白定位在弓形虫纳虫泡膜上.

关键词：弓形虫棒状体蛋白2 重组质粒纳虫泡膜免疫印迹

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