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333 篇 会议

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321 篇 农学
- 317 篇 兽医学
- 2 篇 畜牧学
- 1 篇 林学
- 1 篇 水产
17 篇 医学
- 9 篇 基础医学(可授医学...
- 5 篇 医学技术（可授医学...
- 2 篇 临床医学
- 1 篇 公共卫生与预防医...
1 篇 理学
- 1 篇 生物学

主题

19 篇 柔嫩艾美耳球虫
14 篇 elisa
13 篇 原核表达
13 篇 流行病学调查
12 篇 弓形虫病
12 篇 dna
12 篇 隐孢子虫
11 篇 重组蛋白
10 篇 检测方法
9 篇 新孢子虫
9 篇 弓形虫
9 篇 日本血吸虫
8 篇 感染率
8 篇 pcr
8 篇 捻转血矛线虫
8 篇 旋毛虫
7 篇 巴贝斯虫
7 篇 细胞因子
7 篇 分离株
6 篇 寄生虫学

机构

29 篇 中国农业大学
28 篇 华南农业大学
22 篇 中国农业科学院兰...
22 篇 四川农业大学
18 篇 河南农业大学
16 篇 延边大学
12 篇 吉林大学
11 篇 广东省农业科学院...
8 篇 中国农业科学院上...
7 篇 浙江大学
6 篇 college of veter...
6 篇 农业部动物临床诊...
5 篇 南京农业大学
5 篇 中国农业科学院上...
5 篇 扬州大学
4 篇 中国农业科学院兰...
4 篇 新疆农业大学
4 篇 广西大学
4 篇 郑州大学
4 篇 青海省畜牧兽医科...

作者

21 篇 杨光友
21 篇 王淑贤
20 篇 古小彬
17 篇 汪明
17 篇 张龙现
15 篇 殷宏
15 篇 张守发
15 篇 谢跃
14 篇 关贵全
14 篇 罗建勋
14 篇 贾立军
13 篇 齐萌
13 篇 付彦
12 篇 宁长申
11 篇 菅复春
11 篇 吕敏娜
11 篇 吴彩艳
11 篇 戚南山
11 篇 孙铭飞
11 篇 廖申权

语言

259 篇 中文
74 篇 英文

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斯氏艾美耳球虫ITS1-5.8S rRNA-ITS2序列的克隆及PCR检测方法的建立

斯氏艾美耳球虫ITS1-5.8S rRNA-ITS2序列的克隆及PCR检测方法的建...

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：闫文朝张龙现索勋薛帮群王帅河南科技大学动物科技学院河南农业大学牧医工程学院中国农业大学动物医学院

通过对多种鸡球虫和松鼠球虫18S rRNA和28S rRNA进行序列比对分析,在18S rRNA 3'端和28S rRNA 5'端保守区设计艾美耳属通用引物,以斯氏艾美耳球虫洛阳分离株LY卵囊基因组DNA为模板首次成功克隆到斯氏艾美耳球虫完整的ITS1-5.8S ... 详细信息

通过对多种鸡球虫和松鼠球虫18S rRNA和28S rRNA进行序列比对分析,在18S rRNA 3'端和28S rRNA 5'端保守区设计艾美耳属通用引物,以斯氏艾美耳球虫洛阳分离株LY卵囊基因组DNA为模板首次成功克隆到斯氏艾美耳球虫完整的ITS1-5.8S rRNA-ITS2序列,其大小为1178bp,其中ITS1序列长度为423bp,5.8S rRNA为155 bp,ITS2为600 bp,斯氏艾美耳球虫LY株ITS1/2序列高度变异,与鸡球虫、啮齿动物球虫的序列同源性低于60%。然后在斯氏艾美耳球虫ITS1/2序列超变区设计种特异引物,建立了灵敏、特异的PCR.检测方法。本研究结果为兔球虫强致病种的临床诊断和兔球虫早熟弱毒疫苗的纯种筛选提供有效的分子检测工具。

关键词：斯氏艾美耳球虫 ITS1-5.8S rRNA-ITS2 PCR 检测方法

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海兰灰蛋鸡粒细胞巨噬细胞集落素刺激因子的毕赤酵母表达及活性鉴定

海兰灰蛋鸡粒细胞巨噬细胞集落素刺激因子的毕赤酵母表达及活性鉴...

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：王黎霞张鹏安健北京农业职业学院北京农学院动物科学技术系

在控制鸡病的方法中,基因工程疫苗以独特的优势具有广阔的前景,但免疫原性差的缺点极大地限制了其实际应用,免疫学研究认识到细胞因子在免疫反应中发挥着重要的作用。本研究对海兰灰蛋鸡GM-CSF基因序列进行克隆和信号肽预测,PCR技术去... 详细信息

在控制鸡病的方法中,基因工程疫苗以独特的优势具有广阔的前景,但免疫原性差的缺点极大地限制了其实际应用,免疫学研究认识到细胞因子在免疫反应中发挥着重要的作用。本研究对海兰灰蛋鸡GM-CSF基因序列进行克隆和信号肽预测,PCR技术去掉信号肽序列,改造了CDS 3'端的终止密码子,使C末端带有c-myc和6His抗原标签,构建毕赤酵母表达载体pPICZαA,BstXI酶切线性化,电转化感受态GS115酵母细胞,高浓度Zeocin的YPD平板上筛选阳性酵母菌落并PCR鉴定,BMMY培养基中摇瓶培养,甲醇诱导表达,经SDS-PAGE和Western Blot鉴定,鸡GM-CSF表达成功,在3到4天BMMY培养基中分泌表达的浓度达到高峰,对表达鉴定成功的菌株进行大规模诱导表达,离心收集表达上清,经超滤离心浓缩,用His Bind Ni-NTA层析柱进行纯化,获得纯度较高的重组鸡GM-CSF,淋巴细胞增殖实验结果表明,酵母表达的鸡GM-CSF具有较强的促进淋巴细胞增殖的功能。

关键词：海兰灰蛋鸡 CSF 毕赤酵母表达活性鉴定巨噬细胞粒细胞刺激因子

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牛源犬新孢子虫MAG1基因的克隆及原核表达

牛源犬新孢子虫MAG1基因的克隆及原核表达

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：焦石贾立军薛书江刘明明黄国明张守发延边大学农学院动物医学系

为了解牛源犬新孢子虫MAG1基因的生物学特性。本试验应用PCR技术扩增牛源犬新孢子虫MAG1基因,将PCR产物连接到pMD18-T Simple载体,构建pMD18-T-MAG1克隆质粒,PCR鉴定、酶切鉴定及测序分析后,将MAGl基因连接到原核表达载体pGEX-4T-2上,... 详细信息

为了解牛源犬新孢子虫MAG1基因的生物学特性。本试验应用PCR技术扩增牛源犬新孢子虫MAG1基因,将PCR产物连接到pMD18-T Simple载体,构建pMD18-T-MAG1克隆质粒,PCR鉴定、酶切鉴定及测序分析后,将MAGl基因连接到原核表达载体pGEX-4T-2上,构建重组表达质粒pGEX-4T-MAGl,转化大肠杆菌.BL21,筛选阳性克隆,将PCR鉴定和酶切鉴定正确的重组质粒进行诱导表达,SDS-PAGE和Western-blotting分析表达产物。结果表明,扩增的MAG1基因片段大小为1047bp,编码349个氨基酸,具有完整的开放阅读框,与GenBank中发表的MAG1(EF580924.1)核苷酸序列同源性为99%;Western blot分析表达蛋白的分子量为65 ku,具有较好的反应原性。本试验为新孢子虫病疫苗及诊断试剂盒的研究奠定了基础。

关键词：犬新孢子虫原核表达

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猪附红细胞体不同靶基因PCR检测方法的比较

猪附红细胞体不同靶基因PCR检测方法的比较

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：刘明明贾立军薛书江梁晚枫张守发延边大学农学院动物医学系

为筛选出检测猪附红细胞体更为特异、敏感的PCR检测方法,本试验分别以16S rRNA、50SrRNA和膜蛋白OxaA为靶基因进行PCR检测,并从其敏感性、特异性和临床样本检出率等方面进行了比较。结果显示,以膜蛋白OxaA和16S rRNA为靶基因的PCR方法... 详细信息

为筛选出检测猪附红细胞体更为特异、敏感的PCR检测方法,本试验分别以16S rRNA、50SrRNA和膜蛋白OxaA为靶基因进行PCR检测,并从其敏感性、特异性和临床样本检出率等方面进行了比较。结果显示,以膜蛋白OxaA和16S rRNA为靶基因的PCR方法敏感性最高,最小检测DNA量为1.86fg/μL,而以50S rRNA为靶基因的PCR方法最小检测DNA量为18.6fg/μL;3种靶基因引物均扩增不出猪大肠杆菌、猪链球菌、猪肺炎支原体、牛附红细胞体等基因片段,具有较好的特异性;通过对临床60份血液样本的检测结果表明,以膜蛋白OxaA基因设计的引物检出率最高,为25%(15/60),明显高于16S rRNA基因的21.6%(13/60)和50SrRNA基因的18.3%(11/60)。本试验为猪附红细胞体病的诊断及流行病学调查提供了更为敏感、特异的检测技术。

关键词：猪附红细胞体 PCR 靶基因检测方法

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黄鳝胃瘤线虫ITS及5.8S rDNA的克隆及序列分析

黄鳝胃瘤线虫ITS及5.8S rDNA的克隆及序列分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：段柳春刘伟何鑫周小军刘智连郑艳琼刘毅湖南农业大学动物医学院

(目的)研究黄鳝胃瘤线虫湖南分离株的核糖体DNA内转录间隔区(ITS)及5.8S rDNA序列的遗传变异情况,并用ITS序列重构胃瘤线虫与其它线虫的种群遗传关系。(方法)利用聚合酶链反应(PCR)扩增胃瘤线虫rDNA的ITS-1、5.8S及ITS-2片段,将PCR扩增... 详细信息

(目的)研究黄鳝胃瘤线虫湖南分离株的核糖体DNA内转录间隔区(ITS)及5.8S rDNA序列的遗传变异情况,并用ITS序列重构胃瘤线虫与其它线虫的种群遗传关系。(方法)利用聚合酶链反应(PCR)扩增胃瘤线虫rDNA的ITS-1、5.8S及ITS-2片段,将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌落PCR鉴定后,对阳性菌落进行序列测定并进行序列分析。(结果)结果显示所获得的胃瘤线虫ITS及5.8S rDNA序列总长存在一定差异,为922-927bp,包含部分的18S、28S及全部的ITS-1(350-351 bp)、5.8S(102 bp)及ITS-2(340-344 bp)序列。(结论)本研究系国内首次报道胃瘤线虫的ITS序列,其结果为黄鳝胃瘤线虫的分类鉴定以及进一步的分子流行病学调查和群体遗传研究奠定了基础。

关键词：胃瘤线虫克隆及序列分析 ITS

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粪便毛蚴孵化法检测牛血吸虫病的评价

粪便毛蚴孵化法检测牛血吸虫病的评价

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：童来保朱传刚陆珂李浩杨艺刘一平吴月圣曹晋蓉汪彤林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室安徽省望江县县畜牧兽医局安徽省动物疫病预防与控制中心

(目的)探讨现场检测牛血吸虫病的常规孵化法的真实性和可靠性。（方法）将收集的血吸虫病阳性牛粪和阴性牛粪分别用粪便铜丝筛淘洗过滤孵化法做病原学检测,以评价孵化法的真实性,对上述的牛粪采用平行检测以评价孵化法的可靠性。（结果... 详细信息

(目的)探讨现场检测牛血吸虫病的常规孵化法的真实性和可靠性。（方法）将收集的血吸虫病阳性牛粪和阴性牛粪分别用粪便铜丝筛淘洗过滤孵化法做病原学检测,以评价孵化法的真实性,对上述的牛粪采用平行检测以评价孵化法的可靠性。（结果）血吸虫病原检测的粪孵化法灵敏度为73.9%,特异性100%,假阴性率为26.08%,正确诊断指数为0.739;平行检测的符合率是是77.9%,Kappa值为50.23%;平行检测中符合率和粪便中毛蚴数量相关（R=0.9476）,（结论）常规法用于牛血吸虫病的病原学检测存在特异性高,灵敏度低的特点,在感染率小于3%的低感染地区,常规孵化法的检测阴性预测值可达99%以上。采用一粪多检的方法提高粪孵法的检测灵敏度,可避免假阴性家畜因得不到及时治疗而污染滩地。

关键词：日本血吸虫病孵化法病原学检测

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微小隐孢子虫感染HCT-8细胞模型的建立及不同阶段虫体形态观察

微小隐孢子虫感染HCT-8细胞模型的建立及不同阶段虫体形态观察

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：张国恩米荣升周鹏黄燕秦培兰呼高伟曹薇陈兆国中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室中国农业科学院动物源性食品安全研究中心

为建立微小隐孢子虫（Cryptosporidiumparvum）体外感染模型,并对其在细胞内的不同发育阶段虫体形态进行观察,利用人回盲肠癌（HCT-8）细胞作为感染细胞,采用不同的接种细胞浓度和培养血清浓度进行培养,观察细胞的生长情况;在培养细胞... 详细信息

为建立微小隐孢子虫（Cryptosporidiumparvum）体外感染模型,并对其在细胞内的不同发育阶段虫体形态进行观察,利用人回盲肠癌（HCT-8）细胞作为感染细胞,采用不同的接种细胞浓度和培养血清浓度进行培养,观察细胞的生长情况;在培养细胞中加入1×10～5个经活力检测的微小隐孢子虫卵囊,培养72 h后用荧光标记的隐孢子虫卵囊染色试剂盒Crypt-a-Glo和Sporo-Glo进行染色,观察不同发育阶段隐孢子虫形态。结果在6孔培养板中接种1×10～6、5×10～5、1×10～5个细胞后,分别在24 h、48 h、72 h后长成70～80%单细胞层,可以用来接种微小隐孢子虫。在培养基中加入1%浓度血清,细胞在96 h后长满6孔板,适合用来培养微小隐孢子虫。隐孢子虫卵囊在HCT-8细胞中培养72 h后,经荧光染色,成功地观察到了各个阶段虫体的形态。

关键词：细胞模型不同发育阶段微小隐孢子虫 HCT-8 形态观察

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中国发现绵羊泰勒虫

中国发现绵羊泰勒虫

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：李有全刘志杰关贵全马米玲刘爱红任巧云罗建勋殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

目的本研究对我国新疆地区一株羊的泰勒虫进行鉴定。方法将新疆地区采集的饥饿小亚璃眼蜱成蜱叮咬健康的绵羊,逐天血涂片镜检;待观察到虫体之后,采集羊血,提取基因组DNA,使用引物989/990,应用PCR方法扩增泰勒虫分离株的18S rRNA基因,测... 详细信息

目的本研究对我国新疆地区一株羊的泰勒虫进行鉴定。方法将新疆地区采集的饥饿小亚璃眼蜱成蜱叮咬健康的绵羊,逐天血涂片镜检;待观察到虫体之后,采集羊血,提取基因组DNA,使用引物989/990,应用PCR方法扩增泰勒虫分离株的18S rRNA基因,测序并建立系统发生树。使用种特异性引物引物TSsr 170F/670R,对采自我国13个省份的320羊血进行检测,阳性样品进行测序与NCBI中已发表的序列进行比对。结果结果显示:小亚璃眼蜱能够传播该泰勒虫分离株,为该泰勒虫分离株的传播媒介;18S rRNA序列分析结果显示该分离株为绵羊泰勒虫;对采自13个省份的320份羊血检测结果中,25(8%)显示阳性,阳性样品均来自新疆省采集的样品,其他省份的样品均为阴性。结论根据上述结果,绵羊泰勒虫在我国新疆地区广泛分布,其传播媒介为小亚璃眼蜱。

关键词：绵羊泰勒虫分离株阳性样品

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土耳其斯坦东毕吸虫线粒体全基因组的研究

土耳其斯坦东毕吸虫线粒体全基因组的研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：王宇高俊峰王春仁黑龙江八一农垦大学

土耳其斯坦东毕吸虫(Orientobilharzia turkestanicum)隶属于扁形动物门,吸虫纲,复殖目,裂体科,东毕属(Orientobilharzia),是寄生于牛、羊等多种动物门静脉和肠系膜静脉的一种血吸虫。它与其属内其它血吸虫寄生于动物体内导致的疾病称... 详细信息

土耳其斯坦东毕吸虫(Orientobilharzia turkestanicum)隶属于扁形动物门,吸虫纲,复殖目,裂体科,东毕属(Orientobilharzia),是寄生于牛、羊等多种动物门静脉和肠系膜静脉的一种血吸虫。它与其属内其它血吸虫寄生于动物体内导致的疾病称东毕吸虫病(orientobilharziasis),该病分布广泛,常呈地方性流行,给畜牧业生产造成很大的经济损失。过去对土耳其斯坦东毕吸虫的研究主要集中在形态学、生活史以及东毕吸虫病的流行病学调查、疾病的诊断和防治等方面,近年又利用线粒体和核糖体部分基因进行了土耳其斯坦东毕吸虫分子种系发生的研究,但关于土耳其斯坦东毕吸虫线粒体全基因组的研究尚未见报道。线粒体DNA是后生动物胞核外的遗传物质,其具有结构简单、进化速度快、母性遗传等特点,是研究寄生虫分子分类、系统进化、推导进化年限的一种很好的分子标记。本研究以土耳其斯坦东毕吸虫为研究对象,利用分子生物学方法,获得了虫体线粒体全基因组,并分析基因组的组成、各基因顺序、编码使用模型、起始终止密码子、tRNA编码基因的二级结构,探讨了土耳其斯坦东毕吸虫在裂体科中的系统发生位置。

关键词：土耳其斯坦东毕吸虫线粒体全基因组东毕吸虫病

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表达期特异性双荧光蛋白的转基因弓形虫的构建

表达期特异性双荧光蛋白的转基因弓形虫的构建

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：张彦雷张厚双蔺智兵周勇志曹杰周金林中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点实验室

弓形虫速殖子向缓殖子转化的过程中会伴随着期特异性基因的表达,本试验目的是构建速殖子期特异表达绿色荧光和缓殖子期特异表达红色荧光的转基因弓形虫。本试验方法是利用速殖子期特异性表达的SAGl基因启动子启动绿色荧光蛋白(EGFP)基因... 详细信息

弓形虫速殖子向缓殖子转化的过程中会伴随着期特异性基因的表达,本试验目的是构建速殖子期特异表达绿色荧光和缓殖子期特异表达红色荧光的转基因弓形虫。本试验方法是利用速殖子期特异性表达的SAGl基因启动子启动绿色荧光蛋白(EGFP)基因,利用缓殖子期特异性表达的BAGl基因启动子启动红色荧光蛋白(RFP)基因,构建期特异性表达双荧光的质粒,通过电转化将质粒转化进弓形虫体内进行表达。结果经过息疟定抗性筛选得到阳性重组子,经荧光观察可见在速殖子时期表达的绿色荧光虫体和经缓殖子诱导后表达红色荧光的缓殖子虫体;通过PCR检测也检测到了EGFP和RFP基因。结论是本试验成功构建表达了期特异性双荧光蛋白的转基因弓形虫。

关键词：弓形虫双荧光电转筛选

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