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333 篇 会议

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321 篇 农学
- 317 篇 兽医学
- 2 篇 畜牧学
- 1 篇 林学
- 1 篇 水产
17 篇 医学
- 9 篇 基础医学(可授医学...
- 5 篇 医学技术（可授医学...
- 2 篇 临床医学
- 1 篇 公共卫生与预防医...
1 篇 理学
- 1 篇 生物学

主题

19 篇 柔嫩艾美耳球虫
14 篇 elisa
13 篇 原核表达
13 篇 流行病学调查
12 篇 弓形虫病
12 篇 dna
12 篇 隐孢子虫
11 篇 重组蛋白
10 篇 检测方法
9 篇 新孢子虫
9 篇 弓形虫
9 篇 日本血吸虫
8 篇 感染率
8 篇 pcr
8 篇 捻转血矛线虫
8 篇 旋毛虫
7 篇 巴贝斯虫
7 篇 细胞因子
7 篇 分离株
6 篇 寄生虫学

机构

29 篇 中国农业大学
28 篇 华南农业大学
22 篇 中国农业科学院兰...
22 篇 四川农业大学
18 篇 河南农业大学
16 篇 延边大学
12 篇 吉林大学
11 篇 广东省农业科学院...
8 篇 中国农业科学院上...
7 篇 浙江大学
6 篇 college of veter...
6 篇 农业部动物临床诊...
5 篇 南京农业大学
5 篇 中国农业科学院上...
5 篇 扬州大学
4 篇 中国农业科学院兰...
4 篇 新疆农业大学
4 篇 广西大学
4 篇 郑州大学
4 篇 青海省畜牧兽医科...

作者

21 篇 杨光友
21 篇 王淑贤
20 篇 古小彬
17 篇 汪明
17 篇 张龙现
15 篇 殷宏
15 篇 张守发
15 篇 谢跃
14 篇 关贵全
14 篇 罗建勋
14 篇 贾立军
13 篇 齐萌
13 篇 付彦
12 篇 宁长申
11 篇 菅复春
11 篇 吕敏娜
11 篇 吴彩艳
11 篇 戚南山
11 篇 孙铭飞
11 篇 廖申权

语言

259 篇 中文
74 篇 英文

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弓形虫real-time PCR检测方法的建立和初步应用

弓形虫real-time PCR检测方法的建立和初步应用

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：蔺智兵张厚双曹杰周勇志李国清周金林中国农业科学院上海兽医研究所华南农业大学兽医学院

弓形虫病是一种广泛存在的人兽共患病,人和动物大多呈隐性感染,因此建立高效灵敏的检测方法是弓形虫防治工作的迫切需要。根据弓形虫基因组上529bp的重复序列,设计特异性引物和探针,建立了一种TaqMan探针法的荧光定量PCR检测弓形虫技术... 详细信息

弓形虫病是一种广泛存在的人兽共患病,人和动物大多呈隐性感染,因此建立高效灵敏的检测方法是弓形虫防治工作的迫切需要。根据弓形虫基因组上529bp的重复序列,设计特异性引物和探针,建立了一种TaqMan探针法的荧光定量PCR检测弓形虫技术。该方法最低可检测到十分之一量的单个弓形虫基因组DNA,是常规分子检测方法灵敏度的100倍以上;该方法对常见动物宿主基因组和常见病原体基因组无特异扩增,显示了高特异性。对临床采集的猪、牛、羊和犬等动物样本750份,通过与常规PCR和LAMP方法的平行检测,进一步证实本检测技术的高效灵敏特征,同时,本方法还具备定量检测功能,因此,在流行病学调查和临床诊断,以及药物疗效评估和弓形虫感染机理研究上均可发挥重要作用。

关键词：弓形虫基因组初步应用 real-time PCR 检测方法

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HCT-8细胞培养安氏隐孢子虫繁殖动态研究

HCT-8细胞培养安氏隐孢子虫繁殖动态研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：黄磊菅复春赵青玉宁长申张龙现河南农业大学牧医工程学院

为建立安氏隐孢子虫（Cryptosporidium andersoni）细胞培养模型,以进行抗隐孢子虫病药物筛选和隐孢子虫MicroRNA研究,本研究将5×10～4个***卵囊脱囊后接种于HCT-8单层细胞,在37℃,5%CO条件下进行培养。接种后6 h洗去未寄生的虫体... 详细信息

为建立安氏隐孢子虫（Cryptosporidium andersoni）细胞培养模型,以进行抗隐孢子虫病药物筛选和隐孢子虫MicroRNA研究,本研究将5×10～4个***卵囊脱囊后接种于HCT-8单层细胞,在37℃,5%CO条件下进行培养。接种后6 h洗去未寄生的虫体,培养至24 h,48 h,72 h,96 h,120 h,144 h,168 h和192 h,经改良抗酸染色法和吉姆萨染色法观察***在HCT-8细胞上的发育形态,并采用Real-time qPCR方法对虫体DNA量进行监测。结果显示,***能在HCT-8细胞完成整个发育史,并实现虫体微量扩增。Real-time qPCR结果证实,虫体DNA量在接种后72 h达到高峰,约为接种量的2.3倍,随后持续下降,但维持在0.8～1.2倍之间。表明***在HCT-8细胞上培养成功,同时也揭示了虫体繁殖高峰期为接种后48～96 h,采用该培养模型进行抗隐孢子虫药物筛选时采样时间点选择在该范围内数据更为有效。但由于虫体繁殖量低等因素的影响无法证实***在完成一次发育史后是否继续脱囊形成新的感染。

关键词：安氏隐孢子虫 HCT-8 动态研究细胞培养

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中国部分地区马属动物肠道寄生虫流行情况调查及隐孢子虫流行种类初步鉴定

中国部分地区马属动物肠道寄生虫流行情况调查及隐孢子虫流行种类...

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：菅复春齐萌史亚东宁长申张龙现河南农业大学牧医工程学院

2008年7月-2010年11月期间,从山东、四川、内蒙古、甘肃,河南的驻马店泌阳、焦作沁阳、新乡长垣等地采集马属动物(驴、马、骡)粪便样品1302份,用饱和蔗糖溶液漂浮法检查粪样中肠道寄生虫卵囊和虫卵情况,发现球虫卵囊的总阳性率为7.14%(0... 详细信息

2008年7月-2010年11月期间,从山东、四川、内蒙古、甘肃,河南的驻马店泌阳、焦作沁阳、新乡长垣等地采集马属动物(驴、马、骡)粪便样品1302份,用饱和蔗糖溶液漂浮法检查粪样中肠道寄生虫卵囊和虫卵情况,发现球虫卵囊的总阳性率为7.14%(0-29.03%),线虫卵总阳性率为55.99%(27.4%-97.92%),有12.6%和3.53%的马属动物感染了蛔虫和绦虫,而疑似有隐孢子虫卵囊的占17.05%。其他寄生虫阳性率为4.53%。对部分粪便样品中线虫卵测定了EPG值,发现多数处于200-2200之间。粪便样品出现寄生虫虫卵或卵囊份数共921份,占70.74%,而其中混合感染为307份,占23.58%。各场中以内蒙古呼市马场的肠道寄生虫感染率最低为31.94%,其次为新乡长垣农村散养马属动物的阳性率为46.92%,而焦作沁阳驴马交易市场的感染率最高,数次采样全部都是阳性。在山东某养殖场小于7月龄的驴粪样中发现疑似隐孢子虫阳性率为29.77%,明显高于成年马属动物。

关键词：马属动物阳性率隐孢子虫流行情况初步鉴定肠道寄生虫

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柔嫩艾美耳球虫入侵和宿主细胞凋亡关系的研究

柔嫩艾美耳球虫入侵和宿主细胞凋亡关系的研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：王黎霞邓家俭安健北京农业职业学院北京农学院动物科学技术系

为了研究柔嫩艾美耳球虫球虫入侵与宿主细胞凋亡之间的相互关系,采用DEAE-52纯化的柔嫩艾美耳球虫子孢子,与MDBK(Madin-Darby bovine kidney)细胞共培1.5小时,使球虫子孢子入侵MDBK细胞,移去培养液和为入侵的嫩艾美耳球虫子孢子,用终浓... 详细信息

为了研究柔嫩艾美耳球虫球虫入侵与宿主细胞凋亡之间的相互关系,采用DEAE-52纯化的柔嫩艾美耳球虫子孢子,与MDBK(Madin-Darby bovine kidney)细胞共培1.5小时,使球虫子孢子入侵MDBK细胞,移去培养液和为入侵的嫩艾美耳球虫子孢子,用终浓度6%乙醇对MDBK细胞进行凋亡诱导3小时,采用Annexin V/PI双荧光染色法、流式细胞术(FCM)对MDBK细胞凋亡水平进行检测。试验结果表明,柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵细胞后,入侵有子孢子的细胞凋亡诱导显著被抑制(p<0.05),而未有子孢子入侵的细胞相继被凋亡诱导剂诱导凋亡(p<0.05)。寄生虫感染是一个长期进化的过程,该进化过程十分漫长,在该过程中,寄生虫与宿主长期发生相互依存和相互影响的关系,从而形成了寄生虫对宿主细胞造成影响越来越小,这样既保证了宿主的生存,更保证了寄生虫的生存,而柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵,阻止了凋亡诱导剂对宿主细胞凋亡诱导,保证了寄生虫在宿主细胞内完成发育,对寄生虫的繁衍起到了至关重要的作用。

关键词：柔嫩艾美耳球虫宿主细胞细胞凋亡

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脑多头蚴HSP基因的原核表达及胶体金渗滤法(DIGFA)的建立

脑多头蚴HSP基因的原核表达及胶体金渗滤法(DIGFA)的建立

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：聂华明谢跃付彦陈林农向古小彬王淑贤杨光友四川农业大学动物医学院

目的:以热休克(HSP)重组蛋白为抗原,建立动物多头蚴病免疫金标渗滤检测法(DIGFA)。方法:本研究从羊脑多头蚴原头节提取总RNA,采用RT-PCR技术首次扩增出HSP基因序列,该基因的开放阅读框为408bp,编码136个氨基酸。将此基因克隆到pET-32a(+... 详细信息

目的:以热休克(HSP)重组蛋白为抗原,建立动物多头蚴病免疫金标渗滤检测法(DIGFA)。方法:本研究从羊脑多头蚴原头节提取总RNA,采用RT-PCR技术首次扩增出HSP基因序列,该基因的开放阅读框为408bp,编码136个氨基酸。将此基因克隆到pET-32a(+)载体,构建重组表达质粒pET-32a-HSP,经转化大肠杆菌BL21(DE3)后IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western-blot检测表达产物。以纯化后的表达蛋白作为抗原,建立检测羊脑多头蚴病抗体的重组蛋白胶体金渗滤法(DIGFA)。结果:HSP基因能在大肠杆菌中成功表达,表达产物为约36ku的融合表达蛋白,该蛋白能被羊脑多头蚴病阳性血清所识别。建立的胶体金渗滤法(DIGFA),检测敏感性可达83.3%,特异性达70%。结论:HSP重组蛋白可作为脑多头蚴的诊断抗原,以其建立的金标渗滤法(DIGFA)可应用于家畜多头蚴病的诊断与检疫。

关键词：多头蚴重组蛋白 HSP 胶体金渗滤法 DIGFA 原核表达

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基于16S rRNA基因序列的白腹巨鼠Mycoplasma haemomuris的分子鉴定

基于16S rRNA基因序列的白腹巨鼠Mycoplasma haemomuris的分子鉴定

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：张浩吉白挨泉李高强李金平郭建超蒲文珺李国清陈志伟佛山科学技术学院华南农业大学香港大学李嘉诚医学院

无菌采集来源于湖南(23份)和广西(9份)的32份白腹巨鼠血样,抽提全血基因组DNA,采用真细菌的通用引物进行16S rRNA基因扩增,对扩增产物进行克隆和测序。结果从来源于2个不同地区的21只白腹巨鼠血样中均成功地扩增出目的大小的核苷酸序列... 详细信息

无菌采集来源于湖南(23份)和广西(9份)的32份白腹巨鼠血样,抽提全血基因组DNA,采用真细菌的通用引物进行16S rRNA基因扩增,对扩增产物进行克隆和测序。结果从来源于2个不同地区的21只白腹巨鼠血样中均成功地扩增出目的大小的核苷酸序列。对其中4份PCR产物进行克隆测序,获得序列的Blast结果显示,实验获得序列与GenBank中收录的鼠Haemobartonella muris(新的学名为Mycoplasma haemomuris)16S rRNA基因(序列号HMU92963)相似性最高,为96%,来自湖南和广西的白腹巨鼠获得序列相似性达99.5%以上,具有相同的基因型。上述研究证明,白腹巨鼠具有较普遍的血原体感染,其所流行的血原体与啮齿动物流行的Mycoplasma haemomuris有一定的差别,是一种新基因型的血原体,暂称为Mycoplasma haemomuris白腹巨鼠株。两份样品的递呈序列已被GenBank收录,登录号为分别为HQ183731和HQ183732。

关键词：白腹巨鼠基因序列 Mycoplasma haemomuris 分子鉴定

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斯氏艾美耳球虫ITS1-5.8S rRNA-ITS2序列的克隆及PCR检测方法的建立

斯氏艾美耳球虫ITS1-5.8S rRNA-ITS2序列的克隆及PCR检测方法的建...

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：闫文朝张龙现索勋薛帮群王帅河南科技大学动物科技学院河南农业大学牧医工程学院中国农业大学动物医学院

通过对多种鸡球虫和松鼠球虫18S rRNA和28S rRNA进行序列比对分析,在18S rRNA 3'端和28S rRNA 5'端保守区设计艾美耳属通用引物,以斯氏艾美耳球虫洛阳分离株LY卵囊基因组DNA为模板首次成功克隆到斯氏艾美耳球虫完整的ITS1-5.8S ... 详细信息

通过对多种鸡球虫和松鼠球虫18S rRNA和28S rRNA进行序列比对分析,在18S rRNA 3'端和28S rRNA 5'端保守区设计艾美耳属通用引物,以斯氏艾美耳球虫洛阳分离株LY卵囊基因组DNA为模板首次成功克隆到斯氏艾美耳球虫完整的ITS1-5.8S rRNA-ITS2序列,其大小为1178bp,其中ITS1序列长度为423bp,5.8S rRNA为155 bp,ITS2为600 bp,斯氏艾美耳球虫LY株ITS1/2序列高度变异,与鸡球虫、啮齿动物球虫的序列同源性低于60%。然后在斯氏艾美耳球虫ITS1/2序列超变区设计种特异引物,建立了灵敏、特异的PCR.检测方法。本研究结果为兔球虫强致病种的临床诊断和兔球虫早熟弱毒疫苗的纯种筛选提供有效的分子检测工具。

关键词：斯氏艾美耳球虫 ITS1-5.8S rRNA-ITS2 PCR 检测方法

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海兰灰蛋鸡粒细胞巨噬细胞集落素刺激因子的毕赤酵母表达及活性鉴定

海兰灰蛋鸡粒细胞巨噬细胞集落素刺激因子的毕赤酵母表达及活性鉴...

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：王黎霞张鹏安健北京农业职业学院北京农学院动物科学技术系

在控制鸡病的方法中,基因工程疫苗以独特的优势具有广阔的前景,但免疫原性差的缺点极大地限制了其实际应用,免疫学研究认识到细胞因子在免疫反应中发挥着重要的作用。本研究对海兰灰蛋鸡GM-CSF基因序列进行克隆和信号肽预测,PCR技术去... 详细信息

在控制鸡病的方法中,基因工程疫苗以独特的优势具有广阔的前景,但免疫原性差的缺点极大地限制了其实际应用,免疫学研究认识到细胞因子在免疫反应中发挥着重要的作用。本研究对海兰灰蛋鸡GM-CSF基因序列进行克隆和信号肽预测,PCR技术去掉信号肽序列,改造了CDS 3'端的终止密码子,使C末端带有c-myc和6His抗原标签,构建毕赤酵母表达载体pPICZαA,BstXI酶切线性化,电转化感受态GS115酵母细胞,高浓度Zeocin的YPD平板上筛选阳性酵母菌落并PCR鉴定,BMMY培养基中摇瓶培养,甲醇诱导表达,经SDS-PAGE和Western Blot鉴定,鸡GM-CSF表达成功,在3到4天BMMY培养基中分泌表达的浓度达到高峰,对表达鉴定成功的菌株进行大规模诱导表达,离心收集表达上清,经超滤离心浓缩,用His Bind Ni-NTA层析柱进行纯化,获得纯度较高的重组鸡GM-CSF,淋巴细胞增殖实验结果表明,酵母表达的鸡GM-CSF具有较强的促进淋巴细胞增殖的功能。

关键词：海兰灰蛋鸡 CSF 毕赤酵母表达活性鉴定巨噬细胞粒细胞刺激因子

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豆状带绦虫脂肪酸结合蛋白基因的原核表达及免疫原性研究

豆状带绦虫脂肪酸结合蛋白基因的原核表达及免疫原性研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：杨德英付彦聂华明谢跃陈林农向古小彬王淑贤杨光友四川农业大学动物医学院

目的:将豆状带绦虫(Taenia pisiformis)脂肪酸结合蛋白(fatty acidbindingprotein,FABP)基因克隆到原核表达载体PET-32a(+),在BL-21(DE3)型大肠杆菌中表达,并对表达产物进行免疫原性分析。方法:采用RT-PCR技术从中绦期幼虫豆状囊尾蚴eDN... 详细信息

目的:将豆状带绦虫(Taenia pisiformis)脂肪酸结合蛋白(fatty acidbindingprotein,FABP)基因克隆到原核表达载体PET-32a(+),在BL-21(DE3)型大肠杆菌中表达,并对表达产物进行免疫原性分析。方法:采用RT-PCR技术从中绦期幼虫豆状囊尾蚴eDNA扩增FABP并克隆到PMD19T载体中,在BL-21(DE3)型大肠杆菌中用IPTG进行诱导表达。表达的his-FABP融合蛋白以包涵体存在,使用尿素洗涤杂蛋白,并用8M尿素溶解纯化后的蛋白。通过Western Blotting技术,用感染豆状带绦虫的犬血清作为天然抗体来研究FABP的免疫原性。结果:PET-32a(+)-FABP重组质粒在BL-21(DE3)型大肠杆菌中成功表达,使用SDS-PAGE分析FABP的分子量大约为15kD,经尿素洗涤过后的蛋白经过Western Blotting方法检测显示FABP融合蛋白能够与感染豆状带绦虫的犬血清有较强的免疫原性。结论:FABP能够在BL-21(DE3)型大肠杆菌中高效表达,抗原免疫原性强,为该蛋白作为疫苗抗原的研究打下基础。

关键词：结合蛋白大肠杆菌带绦虫原核表达免疫原性

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水牛伊氏锥虫病免疫胶体金试纸条的研制及初步应用

水牛伊氏锥虫病免疫胶体金试纸条的研制及初步应用

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：孟盟曹池陈汉忠刘明如王华俊奉彬陈国宝广西大学动物科学技术学院

为建立一种快速、简便、灵敏、适应现场应用的水牛伊氏锥虫病检测方法,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的OB6单克隆抗体,在硝酸纤维素膜上涂加纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的TB7单克隆抗体和兔抗小鼠IgG,... 详细信息

为建立一种快速、简便、灵敏、适应现场应用的水牛伊氏锥虫病检测方法,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的OB6单克隆抗体,在硝酸纤维素膜上涂加纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的TB7单克隆抗体和兔抗小鼠IgG,作为检测带和质控带,然后优化条件,研制成检测伊氏锥虫病的免疫胶体金试纸条。通过交叉试验表明该试纸条与衣原体、弓形虫、旋毛虫、巴贝斯焦虫和大片吸虫无交叉反应。该试纸条最低可以检出1:3200倍稀释的伊氏锥虫VSG抗原(浓度为3.11mg·mL)。应用该试纸条对230份水牛血清样本进行初步检测,同时用ELISA做平行实验,阳性符合率为88.2%。结果证明该试纸条是一种快速、灵敏、特异的水牛伊氏锥虫病的检测方法,为水牛伊氏锥虫病的现场检测诊断和预控提供了有效的方法。

关键词：伊氏锥虫病单克隆抗体胶体金试纸条

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