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384 篇 会议

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384 篇 电子文献
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学科分类号

372 篇 农学
- 368 篇 兽医学
- 2 篇 畜牧学
- 1 篇 林学
- 1 篇 水产
17 篇 医学
- 9 篇 基础医学(可授医学...
- 5 篇 医学技术（可授医学...
- 2 篇 临床医学
- 1 篇 公共卫生与预防医...
1 篇 理学
- 1 篇 生物学

主题

19 篇 柔嫩艾美耳球虫
14 篇 elisa
13 篇 原核表达
13 篇 流行病学调查
12 篇 弓形虫病
12 篇 dna
12 篇 隐孢子虫
11 篇 重组蛋白
10 篇 检测方法
9 篇 新孢子虫
9 篇 弓形虫
9 篇 日本血吸虫
8 篇 感染率
8 篇 pcr
8 篇 捻转血矛线虫
8 篇 旋毛虫
7 篇 巴贝斯虫
7 篇 细胞因子
7 篇 分离株
6 篇 寄生虫学

机构

29 篇 中国农业大学
28 篇 华南农业大学
22 篇 中国农业科学院兰...
22 篇 四川农业大学
19 篇 河南农业大学
16 篇 延边大学
12 篇 吉林大学
11 篇 广东省农业科学院...
8 篇 中国农业科学院上...
7 篇 浙江大学
6 篇 college of veter...
6 篇 农业部动物临床诊...
5 篇 南京农业大学
5 篇 中国农业科学院上...
5 篇 扬州大学
4 篇 中国农业科学院兰...
4 篇 新疆农业大学
4 篇 广西大学
4 篇 郑州大学
4 篇 青海省畜牧兽医科...

作者

21 篇 杨光友
21 篇 王淑贤
20 篇 古小彬
18 篇 张龙现
17 篇 汪明
15 篇 殷宏
15 篇 张守发
15 篇 谢跃
14 篇 关贵全
14 篇 罗建勋
14 篇 贾立军
13 篇 齐萌
13 篇 付彦
12 篇 宁长申
11 篇 菅复春
11 篇 吕敏娜
11 篇 朱兴全
11 篇 吴彩艳
11 篇 戚南山
11 篇 孙铭飞

语言

260 篇 中文
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柔嫩艾美耳球虫癸氧喹酯耐药株的实验室诱导

柔嫩艾美耳球虫癸氧喹酯耐药株的实验室诱导

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：潘虹林瑞庆舒丽程田刘国昌翁亚彪华南农业大学兽医学院

目前抗球虫药的应用仍是控制鸡球虫病的主要手段,但由于长期及不合理地使用抗球虫药物,几乎所有使用过的抗球虫药都有耐药虫株的出现,而且球虫对新药产生耐药性的时间缩短,耐药性问题日趋严重,因此,鸡球虫的耐药性是当前养禽业所面临的... 详细信息

目前抗球虫药的应用仍是控制鸡球虫病的主要手段,但由于长期及不合理地使用抗球虫药物,几乎所有使用过的抗球虫药都有耐药虫株的出现,而且球虫对新药产生耐药性的时间缩短,耐药性问题日趋严重,因此,鸡球虫的耐药性是当前养禽业所面临的一个迫切需要解决的理论和实践研究的难题。癸氧喹酯(Decoquinate)是20世纪60年代由英国May-Baker公司研制首先合成,其广谱抗球虫活性,使之成为预防和治疗鸡球虫病效果较好的一种喹啉类药物,可用于防治鸡的柔嫩、毒害、堆型、巨型和布氏艾美耳球虫等引起的球虫病。癸氧喹酯在国内的推广应用时间不长,临床应用显示对各种球虫具有较好的疗效,但其耐药性问题国外已有报道,Williams(2006)首次在英国对艾美耳属7个种对癸氧喹酯耐药性田间试验进行了追踪,试验结果表明,虽然临床球虫病不明显,但这几个种都对喹氧喹酯有不同程度的耐药性,因此球虫对癸氧喹酯的耐药性问题应引起重视。此外,Lee等报道球虫对癸氧喹酯容易产生耐药性,因此本研究选择癸氧喹酯在实验室进行柔嫩艾美耳球虫(Eimeriatenella)耐药株的诱导试验,采用药物浓度递增法,以90mg/kg癸氧喹酯为起始诱导浓度连续传代,以病变记分减少率(RLS)、最适抗球虫指数(POAA)和抗球虫指数(ACI)3项指标综合判定耐药性,经9次传代,成功地诱导出对900mg/kg癸氧喹酯具有完全抵抗力的耐药虫株,为进一步研究球虫耐药的分子机理提供材料。

关键词：癸氧喹酯耐药性球虫病柔嫩艾美耳球虫耐药株

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急性弓形虫感染小鼠血清蛋白质质谱分析的初步研究

急性弓形虫感染小鼠血清蛋白质质谱分析的初步研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：周永华黄玉政陶永辉王玠许永良高琪江苏省寄生虫病防治研究所卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫分子生物学重点实验室

目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术分析急性弓形虫感染小鼠血清的蛋白质组学的变化。方法16只同窝配对的C57BL./6J小鼠,随机分成两组,每组8只,雌、雄各半:急性弓形虫感染组和正常对照组。急性弓形虫感染组小... 详细信息

目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术分析急性弓形虫感染小鼠血清的蛋白质组学的变化。方法16只同窝配对的C57BL./6J小鼠,随机分成两组,每组8只,雌、雄各半:急性弓形虫感染组和正常对照组。急性弓形虫感染组小鼠每鼠腹腔感染经CF-11纤维素纯化的RH株弓形虫速殖子0.2 m11×10～4/ml,正常对照组小鼠每腹腔接种0.2 ml灭菌生理盐水。感染4天后,应用弱阳离子(WCX)纳米磁性微球捕获小鼠血清蛋白,结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,检测比较两组小鼠血清的蛋白质变化,并采用Autoflex analysis与Clin ProTools软件进行分析。结果与正常同窝配对的C57BL/6J小鼠血清蛋白指纹图谱相比较,在Mr 1000-1 6000 Da区段,急性弓形虫感染后第四天的小鼠血清蛋白质谱有13种蛋白有显著性差异,其中10个蛋白质表达上调,3个蛋白质表达下调。表达上调的多肽m/z为1866.40,1932.76,1976.85,2090.53,5004.5,5776.01,5803.05,5847.99,5877.51,7501.58,表达下调的多肽m/z为4063.71,8120.31和8203.83。结论急性弓形虫感染小鼠血清蛋白质组发生显著改变,采用WCX纳米磁性微球联用MAIDI-TOF-MS技术可检出急性弓形虫感染小鼠血清中的特异性蛋白标志物。

关键词：弓形虫感染比较蛋白质组学基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱弱阳离子纳米磁性微球小鼠血清

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利用秀丽隐杆线虫体外检测四种大环内酯类药物的敏感性试验

利用秀丽隐杆线虫体外检测四种大环内酯类药物的敏感性试验

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：李清源李镝锐潘保良汪明中国农业大学动物医学院国家动物原虫实验室

秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)作为一种模式线虫,已广泛应用于当前生命科学研究的各个领域模,它对绝大多数抗寄生虫药物敏感,药物会影响其行为发生变化,并且它可以自由生活,容易培养,发育期短,产卵量大,形态通体透明便于观察,... 详细信息

秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)作为一种模式线虫,已广泛应用于当前生命科学研究的各个领域模,它对绝大多数抗寄生虫药物敏感,药物会影响其行为发生变化,并且它可以自由生活,容易培养,发育期短,产卵量大,形态通体透明便于观察,而且它与很多寄生线虫在形态学及神经学具有相似性,所以秀丽线虫被认为是研究寄生线虫合适的体外模型。因此利用其行为变化试验来研究抗寄生虫药物的敏感性及其作用机制是一种简单、灵敏并且有效的方法。大环内酯类药物是一类目前应用广泛的抗寄生虫药物,通过影响细胞膜对氯离子的通透性引起抑制性神经递质γ-氨基丁酸释放增加,肌肉组织受神经支配导致产卵量、运动速度、摄食量等行为的变化,药效强的可引起死亡。(目的)为了研究不同的大环内酯类药物之间是否存在差异,我们选用伊维菌素、乙酰阿维菌素、莫西克丁、多拉菌素四种大环内酯类药物,(方法)利用秀丽隐杆线虫进行致死性试验、发育时间试验、产卵量试验、身体弯曲试验、运动速度试验五种行为试验,并比较这五种行为试验在检测药效的灵敏性。(结果)结果显示,这四种药均可以抑制秀丽隐杆线虫的行为,并且为浓度依赖性的,莫西克丁药效相对较强,而乙酰阿维菌素药效相对较弱,伊维菌素和多拉菌素药效居中且相似。此外,身体弯曲试验及运动速度试验在检测药物中灵敏性较高(EC50(30)<1 0ng/ml),实验周期短(3h),更适合快速地检测药效。(结论)本研究表明秀丽隐杆线虫是一种很有效的抗寄生虫药物检测模型,四种大环脂类药物间存在着差异,其中的身体弯曲试验及运动速度试验两种方法更适合于快速检测药效。

关键词：大环内酯类药物阿维菌素伊维菌素多拉菌素秀丽隐杆线虫产卵量敏感性试验体外检测

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疥螨原肌球蛋白基因的克隆表达、蛋白定位与免疫保护试验

疥螨原肌球蛋白基因的克隆表达、蛋白定位与免疫保护试验

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：张润慧曲伍郑万鹏古小彬王淑贤杨光友四川农业大学动物医学院

疥螨病是一种具有高度传染性的顽固性皮肤病。药物治疗动物疥螨病存在药物残留和环境污染等问题,目前尚无可用于免疫防治的疥螨疫苗。本研究采用RT-PCR技术从疥螨（Sarcoptes scabiei）总RNA中进行扩增出大小为855bp的疥螨原肌球蛋白基... 详细信息

疥螨病是一种具有高度传染性的顽固性皮肤病。药物治疗动物疥螨病存在药物残留和环境污染等问题,目前尚无可用于免疫防治的疥螨疫苗。本研究采用RT-PCR技术从疥螨（Sarcoptes scabiei）总RNA中进行扩增出大小为855bp的疥螨原肌球蛋白基因（Tropomyosin）的基因片段。该基因与已报道的粉尘螨、屋尘螨和痒螨原肌球蛋白（Tm）基因的序列同源性分别为87.60%,85.26%和85.03%。预测其表达的重组蛋白大小约为50.90kDa,理论等电点值为pI=4.43,具有很强的亲水性。推导的化学式为CHNOS,带负电荷。该蛋白不存在信号肽切割位点,也不存在跨膜结构域,是一种膜外蛋白。构建pET32a（+）表达载体上进行了原核表达,表达出的重组蛋白可与兔疥螨阳性血清反应,产生蛋白免疫印迹带。将纯化的重组蛋白与弗氏佐剂混合制备乳剂苗,用其免疫家兔,获得高免血清,并通过免疫组织化学SP技术,对疥螨原肌球蛋白进行了组织定位,试验结果表明该蛋白主要在疥螨口器,四肢,躯体表皮以及内脏器官表膜中表达。纯化的重组蛋白与皂素佐剂混合制备乳剂苗进行家兔的免疫,每隔一周免1次,免疫4次后每只家兔人工感染约2000只疥螨,攻虫感染后观察家兔感染情况和临床症状并用ELISA方法进行血清IgG和IgE抗体水平检测。试验结果表明该蛋白刺激家兔产生抗体,但对家兔不能产生有效的免疫保护作用。

关键词：疥螨病免疫保护试验肌球蛋白基因重组蛋白

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(犬)新孢子虫牛源北京株的分离与鉴定

(犬)新孢子虫牛源北京株的分离与鉴定

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：杨娜郝攀刘群中国农业大学动物医学院

(犬)新孢子虫是多种动物共患的寄生原虫,新孢子虫病广泛流行于世界各地,引起严重的神经肌肉功能障碍和孕畜流产,对牛的危害作为严重。迄今为止,已在多个国家和地区、不同动物体内分离到新孢子虫虫株,我们前期工作中数次从流产胎盘和胎... 详细信息

(犬)新孢子虫是多种动物共患的寄生原虫,新孢子虫病广泛流行于世界各地,引起严重的神经肌肉功能障碍和孕畜流产,对牛的危害作为严重。迄今为止,已在多个国家和地区、不同动物体内分离到新孢子虫虫株,我们前期工作中数次从流产胎盘和胎牛体内检测、观察到新孢子虫或新孢子虫样虫体,但一直未获得能够连续传代的新孢子虫分离株。本研究在血清学检测基础上,试图从母牛体内分离虫株。具体方法:北京某牛场一头3岁荷斯坦奶牛流产,经检测母牛血清中新孢子虫特异性抗体阳性,遂提取流产胎牛脑组织DNA检测孢子虫特异性基因Nc5,采集母牛血液分离白细胞,接种到Vero细胞,定期观察、传代。当虫体在细胞中稳定传代培养后,收集虫体进行PCR和IFAT鉴定,收集虫体液氮保存备用。检测结果显示,母牛血清中存在高滴度新孢子虫特异性抗体,流产胎牛脑组织新孢子虫特异基因Nc5阳性;接种后第84天在培养细胞中观察到大量新孢子虫样速殖子,之后常规传代培养。对扩增的新孢子虫Nc5基因和ITS-1基因测序显示,Nc5基因与Genbank登录的新孢子虫Nc-1株的Nc5基因序列相似性为99.99%,ITS-1与Nc-1株的登陆序列完全一致;IFAT检测结果为虫体能与新孢子虫阳性血清反应,不与弓形虫阳性血清反应。本研究从母牛体内成功分离获得新孢子虫株,能够在细胞培养中连续稳定传代,命名为新孢子虫北京株(Nc-BJ)。对小鼠致病性显著低于Nc-1株,进一步研究尚在进行之中。

关键词：新孢子虫特异性抗体传代培养分离与鉴定

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青海省德令哈地区牛、羊弓形虫病血清学调查

青海省德令哈地区牛、羊弓形虫病血清学调查

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：马睿麟蔡金山赵全邦胡广卫李静李连芳马占全袁友贞陈辅君潘雪英青海省动物疫病预防控制中心德令哈市动物疫病预防控制中心德令哈市柯鲁柯镇兽医站

为了摸清我省德令哈地区牛羊弓形虫病的感染情况,在2010年2月～8月先后应用间接血凝试验法(IHA)对德令哈市4个不同地区97份牛血清和2个地区的210份羊血清进行了弓形虫血清学调查,以抗体效价≥1:64为阳性判定结果。调查发现:德令哈地区... 详细信息

为了摸清我省德令哈地区牛羊弓形虫病的感染情况,在2010年2月～8月先后应用间接血凝试验法(IHA)对德令哈市4个不同地区97份牛血清和2个地区的210份羊血清进行了弓形虫血清学调查,以抗体效价≥1:64为阳性判定结果。调查发现:德令哈地区牛的平均感染率为13.4%(13/97),四个地区中,阳性率分别为尕海地区5%(1/20)、柯鲁柯地区7.4%(2/27)、蓄集地区12%(3/25)、某牛场28%(7/25);47份黄牛血清、25份牦牛血清和25份杂种牛血清感染率分别为6.38%(3/47)、12%(3/25)和28%(7/25);母牛的阳性率为13.79%(8/58),公牛的阳性率为12.82%(5/39)。德令哈地区羊平均感染率为21.9%(46/210),两个地区中,蓄集地区阳性率为16.92%(22/130),柯鲁柯地区阳性率为30%(24/80);178份改良绒山羊血清、32份青海半细毛羊血清感染率为20.22%(36/178)、31.25%(10/32)。结果表明:所检地区的牛羊都有不同程度的弓形虫感染,不同地区和不同品种的牛、羊对弓形虫的感染率不同且弓形虫感染率与性别无关。建议:根据弓形虫病的流行特点,要定期进行家畜弓形虫血清学检测,检出阳性动物要科学处理,对野生动物和人感染也要进行监测,为动物防疫工作提供科学依据。同时应加强人畜共患病防治知识的宣传教育。

关键词：弓形虫病感染率德令哈地区弓形虫感染青海省

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斯氏副柔线虫线粒体COI基因克隆与序列分析

斯氏副柔线虫线粒体COI基因克隆与序列分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：杨晓野杨连茹李文生刘群赵治国王瑞农业部动物临床诊疗技术重点实验室内蒙古农业大学兽医学院中国农业大学动物医学院内蒙古出入境检验检疫局

骆驼斯氏副柔线虫病是由旋尾目(Spirurata)、柔线科(Habronematidae)、副柔属(Parabronema)的斯氏副柔线虫(Parabronema skrjabini)引起的一种严重危害养驼业的寄生虫病。为研究斯氏副柔线虫种间遗传标记特点,从内蒙古阿拉善盟、巴彦淖... 详细信息

骆驼斯氏副柔线虫病是由旋尾目(Spirurata)、柔线科(Habronematidae)、副柔属(Parabronema)的斯氏副柔线虫(Parabronema skrjabini)引起的一种严重危害养驼业的寄生虫病。为研究斯氏副柔线虫种间遗传标记特点,从内蒙古阿拉善盟、巴彦淖尔市和乌兰察布市的骆驼皱胃中采集斯氏副柔线虫成虫,提取虫体DNA,利用线虫线粒体DNA细胞色素氧化酶1(CO1)基因通用引物,扩增斯氏副柔线虫CO1基因,将其克隆到pMD19-T载体后,用PCR技术鉴定阳性菌落并进行测序,运用MEGA4.0和DNAStar5.0软件将测序结果与GenBank公布的旋尾目中柔线科(Habronematidae)、旋尾科(Spiruridae)、吸吮科(Thelaziidae)以及丝虫目(Filariata)中盘尾科(Onchocercidae)线虫的CO1基因序列进行比对分析。结果显示:三个不同地区的斯氏副柔线虫CO1基因序列片段长度均为689bp,同一地区虫体的不同个体间COI序列无差异,不同地区虫体间的COI序列略有差异,其中有672个保守碱基;同其他相关属线虫CO1基因序列比对,斯氏副柔线虫与蝇柔线虫(Habronemamuscae)的同源性最高,为87.4%,遗传距离是0.145;与加利西亚光丝虫(Litomosoides galizai)的同源性最低,为79.8%,遗传距离是0.232;以COI基因作为遗传标记,采用NJ法和MP法所构建的系统发育树均显示斯氏副柔线虫与柔线属线虫位于同一分支。表明CO1基因不仅可以作为斯氏副柔线虫理想的种间遗传标记,也可为该线虫进一步的分子生物学研究提供重要基础。

关键词：斯氏副柔线虫克隆与序列分析 COI 线粒体

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鸡柔嫩艾美尔球虫感染早期Toll样受体及其相关细胞因子的表达动态

鸡柔嫩艾美尔球虫感染早期Toll样受体及其相关细胞因子的表达动态

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：张蕾刘任强马立平潘保良蔡建平汪明中国农业大学动物医学院国家动物寄生原虫实验室

(目的)本研究的目的是研究鸡柔嫩艾美尔球虫感染早期盲肠上皮中toll样受体及其相关细胞因子的表达动态。(方法)实验设计两个大组:1日龄(n=60)和3周龄(n=60)的SPF鸡,分别设感染组(n=30)和对照组(n=30),感染剂量为10,000个孢子化球虫卵囊... 详细信息

(目的)本研究的目的是研究鸡柔嫩艾美尔球虫感染早期盲肠上皮中toll样受体及其相关细胞因子的表达动态。(方法)实验设计两个大组:1日龄(n=60)和3周龄(n=60)的SPF鸡,分别设感染组(n=30)和对照组(n=30),感染剂量为10,000个孢子化球虫卵囊/只鸡。于感染后3,、6、12、24、48、72小时,不同日龄感染组和对照组各5只进行剖杀取盲肠,分离盲肠上皮间淋巴细胞(IELs)后提取总RNA,反转录成cDNA,用荧光定量PCR.的方法检测盲肠IELs中TLRs及相关细胞因子的表达动态。(结果)结果显示1日龄SPF鸡在感染后3小时所有疫检TLRs都显著上调;3周龄SPF鸡感染组,TLR1LA、TLR4、TLR5、TLR7和TLR21在感染后12小时显著上调,而TLR1LB、TLR5和TLR21在感染后72小时显著上调。细胞因子方面,1日龄SPF鸡的IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL-1β、IL-12和TNF-α在感染后3小时表达水平最高(上调156-1117倍),显著高于3周龄组。(结论)研究结果表明柔嫩艾美尔球虫感染能够通过TLRs对柔嫩艾美尔球虫的识别显著激活先天性免疫系统,先天性免疫应答激活产生的细胞因子对于下游的获得性免疫系统激活起到关键性的调节作用,使得获得性免疫向不同的免疫类型(细胞免疫或体液免疫)发展。适当的先天性免疫系统的激活能够诱导对球虫感染的保护性免疫。

关键词：鸡柔嫩艾美尔球虫细胞因子感染早期样受体

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2010年至2011年北京地区犬猫弓形虫病流行病学研究

2010年至2011年北京地区犬猫弓形虫病流行病学研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：崔丽丽于咏兰刘帅王贝贝汪明中国农业大学动物医学院

(目的)刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)是一种呈世界范围分布的能够感染多种动物的寄生性原虫。近年来已证明此病广泛存在,研究表明它的传染源主要是动物。随着宠物品种和数量的急剧增加,人类与动物接触的日益频繁,对人类健康和正常生活... 详细信息

(目的)刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)是一种呈世界范围分布的能够感染多种动物的寄生性原虫。近年来已证明此病广泛存在,研究表明它的传染源主要是动物。随着宠物品种和数量的急剧增加,人类与动物接触的日益频繁,对人类健康和正常生活带来了威胁。本研究目的是了解北京地区犬猫弓形虫发病及感染情况,为弓形虫防控提供流行病学资料。(材料方法)用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法对2010年至2011年采集的1876份犬、561份家养猫、201份流浪猫血清样品进行血清弓形虫IgG抗体检测。(结果)经检测,家养犬阳性率24.9%;家养猫阳性率21.2%;流浪猫阳性率30.3%。家养犬弓形虫血清抗体阳性率不同季节间差异显著(P<0.05),夏季最高为30.0%,家养猫弓形虫血清抗体阳性率不同季节间无显著差异(P>0.05)。不同性别犬猫弓形虫血清抗体阳性率无显著差异(P>0.05)。随着年龄增长,犬猫弓形虫抗体阳性率均有明显增长。(讨论)本研究发现,弓形虫感染对于家养犬、家养猫、流浪猫都比较普遍。不同季节弓形虫阳性率也有差别,家养犬夏季阳性率最高30.0%,家养猫春季阳性率最高25.8%。不同性别家养犬猫弓形虫血清阳性率没有显著差异。随着年龄增长,家养犬、猫弓形虫阳性率均有明显增高,6岁以上家养犬、猫弓形虫阳性率分别达到了27.2%和26.9%。说明随着年龄的增长,犬猫感染弓形虫的机会增多。

关键词：不同性别弓形虫病阳性率流行病学研究北京地区

来源：评论

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旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆、表达及鉴定

旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆、表达及鉴定

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：姚菊霞李文卉盖文燕曲自刚谢志宙王艳华张德林付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所

旋毛虫是一种细胞内寄生性线虫,其生活史可以在同一宿主内完成,宿主感染谱极广,几乎所有的哺乳动物均可感染。半胱氨酸蛋白酶抑制剂是一类广泛存在于生物体的半胱氨酸蛋白酶高效内源性抑制剂。寄生虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂在寄生虫逃避... 详细信息

旋毛虫是一种细胞内寄生性线虫,其生活史可以在同一宿主内完成,宿主感染谱极广,几乎所有的哺乳动物均可感染。半胱氨酸蛋白酶抑制剂是一类广泛存在于生物体的半胱氨酸蛋白酶高效内源性抑制剂。寄生虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂在寄生虫逃避宿主免疫应答、适应寄生生活中发挥着重要作用。寄生性线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂具有明显的免疫调控作用,在寄生虫入侵宿主时对宿主免疫应答的抑制起重要作用,是诱导宿主免疫抑制的重要因子之一。本研究根据旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因EST序列设计引物进行RT-PCR,克隆获得具有完整开放阅读框(ORF)的cDNA序列TsCystatin1,其开放阅读框为669 bp,编码221个氨基酸,具有典型的半胱氨酸蛋白酶抑制因子保守氨基酸序列。对旋毛虫成虫、新生幼虫以及旋毛虫感染不同时期的肌幼虫分别进行RT-PCR和实时荧光定量PCR,结果表明该基因在旋毛虫各个发育时期均有表达。将TsCystatin1基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,构建了重组表达质粒pGEX-4T-TsCystatin1,重组表达质粒转化大肠杆菌BL21后进行诱导,在原核表达系统中得到了高效表达,表达产物分子量约为48.3 ku,在低温条件下诱导表达产物主要以可溶性形式存在。将重组抗原免疫兔制备高免血清,可以识别旋毛虫肌幼虫抗原约44.0 ku的条带。酶活性研究表明,该重组蛋白可以抑制组织蛋白酶B的活性。本研究为进一步研究TsCystatin1基因的生物学功能奠定了基础。

关键词：旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂重组表达质粒

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