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文献类型

384 篇 会议

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384 篇 电子文献
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日期分布

学科分类号

372 篇 农学
- 368 篇 兽医学
- 2 篇 畜牧学
- 1 篇 林学
- 1 篇 水产
17 篇 医学
- 9 篇 基础医学(可授医学...
- 5 篇 医学技术（可授医学...
- 2 篇 临床医学
- 1 篇 公共卫生与预防医...
1 篇 理学
- 1 篇 生物学

主题

19 篇 柔嫩艾美耳球虫
14 篇 elisa
13 篇 原核表达
13 篇 流行病学调查
12 篇 弓形虫病
12 篇 dna
12 篇 隐孢子虫
11 篇 重组蛋白
10 篇 检测方法
9 篇 新孢子虫
9 篇 弓形虫
9 篇 日本血吸虫
8 篇 感染率
8 篇 pcr
8 篇 捻转血矛线虫
8 篇 旋毛虫
7 篇 巴贝斯虫
7 篇 细胞因子
7 篇 分离株
6 篇 寄生虫学

机构

29 篇 中国农业大学
28 篇 华南农业大学
22 篇 中国农业科学院兰...
22 篇 四川农业大学
19 篇 河南农业大学
16 篇 延边大学
12 篇 吉林大学
11 篇 广东省农业科学院...
8 篇 中国农业科学院上...
7 篇 浙江大学
6 篇 college of veter...
6 篇 农业部动物临床诊...
5 篇 南京农业大学
5 篇 中国农业科学院上...
5 篇 扬州大学
4 篇 中国农业科学院兰...
4 篇 新疆农业大学
4 篇 广西大学
4 篇 郑州大学
4 篇 青海省畜牧兽医科...

作者

21 篇 杨光友
21 篇 王淑贤
20 篇 古小彬
18 篇 张龙现
17 篇 汪明
15 篇 殷宏
15 篇 张守发
15 篇 谢跃
14 篇 关贵全
14 篇 罗建勋
14 篇 贾立军
13 篇 齐萌
13 篇 付彦
12 篇 宁长申
11 篇 菅复春
11 篇 吕敏娜
11 篇 朱兴全
11 篇 吴彩艳
11 篇 戚南山
11 篇 孙铭飞

语言

260 篇 中文
124 篇 英文

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柔嫩艾美耳球虫3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆与原核表达

柔嫩艾美耳球虫3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆与原核表达

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：廖申权戚南山吴彩艳吕敏娜孙铭飞广东省农业科学院兽医研究所

鸡球虫病(Coccidiosis)是由艾美耳球虫(Eimeria)引起的一种严重危害养禽业发展的寄生性原虫病。鸡球虫病传统的控制策略依赖于抗球虫药物的应用,但伴随着抗球虫药物的广泛使用,球虫的耐药性也日益显现。而鸡球虫活苗的临床应用也因其具... 详细信息

鸡球虫病(Coccidiosis)是由艾美耳球虫(Eimeria)引起的一种严重危害养禽业发展的寄生性原虫病。鸡球虫病传统的控制策略依赖于抗球虫药物的应用,但伴随着抗球虫药物的广泛使用,球虫的耐药性也日益显现。而鸡球虫活苗的临床应用也因其具有潜在致病力,生产成本高等缺点而受到限制。目前生产实践中迫切需要新的防治手段控制鸡球虫病,寻找新的药物靶标已成为抗寄生虫药物研发的热点。本研究以不同发育阶段*** GD株虫体RNA为模板,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR.)技术,扩增糖酵解途径3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehydes-3-phosphatedehydrogenase,GAPDH)的基因序列,获得EtGAPDH的开放阅读框(ORF)为1020 bp,编码339个氨基酸。该基因序列与GenBank/NCBI(登录号:HQ317455.1)的序列进行比较,结果发现第6、490和576位发生突变,其中第6及576位为无义突变,第490位的突变导致氨基酸由甲硫氨酸(M)变为缬氨酸(V)。两者所编码氨基酸序列同源性为99%。运用分子生物学技术构建原核重组表达载体EtGAPDH-pET-43a(+),转入宿主菌*** Rosetta(DE3),经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE检测,得到分子量为96.0 kDa的融合蛋白。可溶性分析显示,该重组蛋白部分以可溶性蛋白形式存在。本研究为EtGAPDH体外生化特性的分析及功能研究奠定了一定的理论基础。

关键词：柔嫩艾美耳球虫鸡球虫病磷酸甘油醛脱氢酶原核表达

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长角血蜱热休克蛋白HSP70基因的鉴定

长角血蜱热休克蛋白HSP70基因的鉴定

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：田占成刘光远谢俊仁罗金张萍沈辉王芳芳张丽艳中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室

从长角血蜱卵cDNA表达文库中筛选到了一个长角血蜱热休克蛋白类似物—Hsp70基因。Hsp70基因全长为231lbp,完整阅读框长度为1983bp,编码661个氨基酸,预测分子量为72.5 kDa,等电点为5.2。具有Hsp70家族中高保守功能修饰域和内质网定位蛋... 详细信息

从长角血蜱卵cDNA表达文库中筛选到了一个长角血蜱热休克蛋白类似物—Hsp70基因。Hsp70基因全长为231lbp,完整阅读框长度为1983bp,编码661个氨基酸,预测分子量为72.5 kDa,等电点为5.2。具有Hsp70家族中高保守功能修饰域和内质网定位蛋白中普遍存在的内质网延伸信号"KDEL"。Hsp70与肩突硬蜱(Ixodesscapularis)Hsp70的氨基酸序列相似性达90%,与原鸡(Gallusgallus)的78kDa葡萄糖调控蛋白前体(78 kDa glucose-regulated protein precursor)相似性为85%。实时定量RT-PCR分析表明:部分饱血的长角血蜱雌蜱的卵巢和唾液腺中的Hsp70表达水平明显高于其他组织。尽管Hsp70的表达水平在饥饿长角血蜱不同发育阶段表达水平很低,但通过吸血可明显诱导其表达水平的增加。Hsp70的表达水平与温度的变化相一致,表现出了明显的冷热应激典型特征(4℃-37℃)。免疫印迹分析表明:重组长角血蜱Hsp70蛋白免疫兔体制备的抗体与卵粗抗原的100 kDa、72.5 kDa和28.4 kDa的3条天然蛋白条带产生明显反应,但在部分饱血蜱的蛋白抽提物中只检测到一条72.5 kDa的天然蛋白带与之反应。Hsp70重组蛋白的免疫保护性实验表明,该蛋白对长角血蜱雌蜱的饱血程度和产卵率的下降作用影响不明显。综上所述,尽管Hsp70的表达水平可明显通过吸血的生理行为来诱导上调,但定位于内质网的长角血蜱Hsp70作为组成型表达基因可能不适合于用作抗蜱疫苗候选抗原。

关键词：长角血蜱 HSP70 内质网热休克蛋白

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浙江省猪、犬、猫弓形虫病血清流行病学调查

浙江省猪、犬、猫弓形虫病血清流行病学调查

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：禹海杰张德福卓洵辉周前进杜爱芳浙江大学动物科学学院浙江大学动物预防医学研究所

弓形虫是一种重要的机会性致病性原虫,可感染包括人在内的几乎所有的温血动物,严重威胁养殖业的生产及人类健康。为了解该病在浙江省猪、犬、猫的流行情况,本实验采用酶联免疫吸附试验对浙江省10个地市不同养殖场的813份猪血清及杭州市... 详细信息

弓形虫是一种重要的机会性致病性原虫,可感染包括人在内的几乎所有的温血动物,严重威胁养殖业的生产及人类健康。为了解该病在浙江省猪、犬、猫的流行情况,本实验采用酶联免疫吸附试验对浙江省10个地市不同养殖场的813份猪血清及杭州市的203份犬血清、60份猫血清进行了弓形虫感染的血清流行病学调查。结果表明浙江省猪、犬、猫均存在较严重的弓形虫感染,其中以猪的感染最为严重,为53.4%(434/813),其次为犬,17.24%(35/203),猫的感染率最低,为13.33%(8/60)。对试验数据进行统计学分析(x2),结果显示,该病的血清阳性率随动物的年龄增长而显著性升高。流浪猫阳性率(26.3%)显著(P<0.05)高于家养宠物猫(7.3%)。猪的弓形虫血清阳性率与饲养环境相关,散养户(71.4%)较规模化养殖场(42.7%)更容易爆发该病(P<0.05)。浙江省不同地区之间的猪对该病均有不同程度的感染,其血清阳性率从28.1%到66.0%不等,以嘉兴的阳性率最低,为(28.1%),其次为杭州(36.0%)和台州(42.0%)。本试验首次对浙江省猪、犬、猫弓形虫血清阳性率进行较为详细的调查,调查结果显示浙江省动物特别是猪的弓形虫感染较为严重,鉴于目前尚无有效的疫苗用于该病的治疗,因此制定合理的方案控制该病的传播在浙江省动物弓形虫的防控方面具有重要意义。

关键词：弓形虫病弓形虫感染流行病学调查阳性率浙江省

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柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原AMA3基因的克隆及表达

柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原AMA3基因的克隆及表达

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：戚南山吴彩艳廖申权吕敏娜蔡建平孙铭飞广东省农业科学院兽医研究所

目前控制球虫病主要采用化学药物防治和疫苗免疫预防,但其存在诸多缺点,因此研制高效安全的基因工程疫苗和新药物必将成为未来科学发展的方向,首要的是寻找球虫抗原基因和药物作用的靶标。顶膜抗原3(Apical membrane antigen3,AMA3)已... 详细信息

目前控制球虫病主要采用化学药物防治和疫苗免疫预防,但其存在诸多缺点,因此研制高效安全的基因工程疫苗和新药物必将成为未来科学发展的方向,首要的是寻找球虫抗原基因和药物作用的靶标。顶膜抗原3(Apical membrane antigen3,AMA3)已被证实具有良好的免疫保护作用,被认为是研制球虫基因工程疫苗的重要候选分子。但目前尚无有关柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)AMA3基因序列的报道,本研究利用现代生物信息学及比较基因组学在***数据库中(http://***/cgi-bin/blast/submitblast/e tenella/omni)注释获得了AMA3基因部分序列,以预测的序列设计特异性引物,以*** GD株第二代裂殖子总RNA为模板;通过RT-PCR技术克隆获得了开放阅读框(ORF)为1239bp,共编码413个氨基酸的多肽片段,与其它顶复门原虫的AMA的同源性在32-40%之间。将AMA3基因克隆到表达载体pET-32a,构建pET-32a-AMA3重组质粒并在*** Rosetta中表达,表达产物经SDS-PAGE分析,成功表达了分子量为61ku的可溶性蛋白。将表达的蛋白进行纯化,多次免疫兔子,制备兔抗顶膜抗原3的多克隆抗体。为进一步研究AMA3的功能及作用机理提供了条件,为球虫基因工程疫苗的研制奠定了基础。

关键词：柔嫩艾美耳球虫基因工程疫苗

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兔隐孢子虫生物学特性研究

兔隐孢子虫生物学特性研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：吴国泉齐萌王荣军菅复春宁长申张龙现河南农业大学牧医工程学院

为研究兔隐孢子虫的生物学特性,用兔隐孢子虫分别感染日本大耳白仔兔、免疫抑制蒙古沙鼠、BABL/c小鼠、雏鸡,研究其宿主范围及致病性。结果显示,6个不同剂量(10个·只.0×10～6个·只)隐孢子虫卵囊接种仔兔后,其排卵囊规律... 详细信息

为研究兔隐孢子虫的生物学特性,用兔隐孢子虫分别感染日本大耳白仔兔、免疫抑制蒙古沙鼠、BABL/c小鼠、雏鸡,研究其宿主范围及致病性。结果显示,6个不同剂量(10个·只.0×10～6个·只)隐孢子虫卵囊接种仔兔后,其排卵囊规律和致病性存在差异,10个·只卵囊即可感染,潜隐期为3-5d,显露期为8-11d,10个·只和100个·只卵囊接种仔兔后无明显临床症状,1000个·只和1.0×10～4个·只卵囊可引起仔兔粪便不成形、粪便量增多等临床症状,1.0×10～5个·只和1.0×10～6个·只卵囊可引起明显增重缓慢;1.0×10个·只卵囊接种90目龄日本大耳白兔,潜隐期为5d,显露期为6d,感染后第7d为排卵囊高峰;2.0×10～5个·只卵囊接种免疫抑制蒙古沙鼠后,潜隐期为2d,显露期为5-9d,感染后第3-5d达到排卵囊高峰期,而免疫正常蒙古沙鼠则不感染;2.0×10～5个·只卵囊接种免疫抑制BABL/c小鼠、免疫正常BABL/c小鼠和雏鸡,均不感染。病理组织学观察发现,虫体主要寄生于蒙古沙鼠和兔的空肠及回肠绒毛刷状缘,回肠寄生虫体较多,虫体寄生部位肠黏膜表面出现凹陷,肠绒毛脱落或变短。基于18S rRNA基因位点对动物试验前后所获卵囊进行PCR扩增,对其产物分别用SspⅠ酶和VspⅠ酶进行RFLP分析;基于GP60基因PCR产物测序并进行分子生物学分析,结果显示卵囊均为人兽共患的兔隐孢子虫（Cryptosporidium cuniculus）,均属Vb亚型家族。本研究为进一步研究兔隐孢子虫分子遗传特征,人兽共患传播机制及防治方法奠定了基础。

关键词：隐孢子虫潜隐期免疫正常人兽共患生物学特性研究

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羊体内一未知线虫种属关系的初步鉴定

羊体内一未知线虫种属关系的初步鉴定

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：段丽君周前进闫宝龙杨怡张红丽杜爱芳浙江大学动物科学学院农业部动物疫病病原学与免疫控制重点开放实验室

胃肠道线虫是目前影响绵羊等反刍动物健康的主要致病因子之一,也是制约养羊业发展的重要因素。对浙江省绵羊和山羊感染胃肠道线虫的流行病学调查中发现一未知线虫普遍存在于动物皱胃,主要寄生于幽门处黏膜,且常与捻转血矛线虫混合感染... 详细信息

胃肠道线虫是目前影响绵羊等反刍动物健康的主要致病因子之一,也是制约养羊业发展的重要因素。对浙江省绵羊和山羊感染胃肠道线虫的流行病学调查中发现一未知线虫普遍存在于动物皱胃,主要寄生于幽门处黏膜,且常与捻转血矛线虫混合感染。虫体呈褐色,雌雄异体,卵生。取雌雄虫各20条,测量得长度分别为13.97±0.702mm和14.37±0.659mm。激光共聚焦与扫描电镜对线虫形态结构分析,发现虫体口腔小,具有3个唇片和6个环口乳突,食道狭长,无食道球;体表具横纹,纵纹约22条,长短不一,止于虫体中上部或近头端;有明显颈乳突1对。雄虫交合伞发达,由2个大侧叶和1个背叶组成,腹腹肋和侧腹肋起于同一主干,腹腹肋较侧腹肋短;3支侧肋起于同一主干,前侧肋与中、后两侧肋末端弯曲方向相反。外背肋狭长,与背肋起于同一主干;被肋较短,1/2处分为2支,每支末端形成2个芽状突起;等长交合刺1对;具汤匙状引带;雌虫阴门位于虫体中下部,狭长呈楔形,有舌形阴门盖及球形隆起。同时,运用genome-walking技术扩增获得线虫28s rDNA、ITS1、5.8s rDNA及ITS2序列,并与NCBI公布的线虫数据库比对发现,序列与蛇形毛圆线虫、奥氏奥斯特线虫、Ostertagia leptospicularis、马氏马歇尔线虫、肿孔古柏线虫、Nicollinacameroni等具有高同源性(98%)。根据形态学结果及基因序列分析初步鉴定该线虫属于毛圆科奥斯特线虫属,而对线虫的进一步鉴定工作仍在进行之中。

关键词：初步鉴定种属关系

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PZQ诱食剂和透皮剂在犬体内的药代动力学研究

PZQ诱食剂和透皮剂在犬体内的药代动力学研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：吕璐潘保良杨振中曾帅汪明中国农业大学动物医学院

我国包虫病高发流行区主要集中在西部的牧区,牧犬、家犬是棘球绦虫的主要宿主,而吡喹酮能有效驱除犬细粒棘球绦虫。本文对吡喹酮新制剂诱食剂、透皮剂和已上市的爱普锐克吞食片在犬体内的药代动力学进行了比较研究。实验犬分成3组:对照... 详细信息

我国包虫病高发流行区主要集中在西部的牧区,牧犬、家犬是棘球绦虫的主要宿主,而吡喹酮能有效驱除犬细粒棘球绦虫。本文对吡喹酮新制剂诱食剂、透皮剂和已上市的爱普锐克吞食片在犬体内的药代动力学进行了比较研究。实验犬分成3组:对照组犬以5mg/kg剂量口服爱普锐克吞食片;对另一组犬经口投服5mg/kg剂量吡喹酮诱食剂;给剩下的一组犬皮肤涂抹吡喹酮透皮剂10mg/kg。用高效液相色谱仪测定给药后不同时间点采集的犬血浆样品中的吡喹酮含量。对照组在给药后2.0±0.0h血浆中达到最大药物浓度189.03±101.39ng·ml,曲线下面积（AUC）为703.4±247.4ml·h·ml,平均残留时间（MRT）为11.3±5.4h。诱食剂给药组在给药后3.0±1.22h血浆中达到最大药物浓度132.45±83.54 ng·ml,AUC为947.8±412.51ml·h·ml,MRT为16.1±12.87h。透皮剂给药组在给药后4.13±3.52h血浆中达到最大药物浓度57.17±52.93 ng·ml,MRT为76.90±37.86h,AUC为1088.15±256.66m1·h·ml。研究结果表明吡喹酮诱食剂和透皮剂与对照片剂相比,血浆中吡喹酮的峰值浓度较低,但是曲线下面积较大,残留时间也较长。诱食剂给药组和对照组的各药代动力学参数无显著性差异（P>0.005）,却能增大动物诱食性,使犬能自动吞服。透皮剂使得给药更加方便,是吡喹酮新的一种给药方式。因此,对吡喹酮诱食剂和透皮剂的研究在防治我国牧区包虫病中具有重要的意义。

关键词：吡喹酮包虫病 PZQ 曲线下面积动力学研究

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表达牛源犬新孢子虫NcSRS2-NcGRA7融合基因重组腺病毒的构建及动物免疫

表达牛源犬新孢子虫NcSRS2-NcGRA7融合基因重组腺病毒的构建及动...

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：张守发贾立军延边大学农学院动物医学系

本研究提取牛源犬新孢子虫基因组DNA,应用PCR技术扩增犬新孢子虫表面蛋白基因NcSRS2和致密颗粒蛋白基因NcGRA7,SOE-PCR技术拼接NcSRS2和NcGRA7基因,构建重组克隆质粒pMD18-NcSRS2-NcGRA7、重组腺病毒穿梭质粒pCR259-NcSRS2-NcGRA7及重... 详细信息

本研究提取牛源犬新孢子虫基因组DNA,应用PCR技术扩增犬新孢子虫表面蛋白基因NcSRS2和致密颗粒蛋白基因NcGRA7,SOE-PCR技术拼接NcSRS2和NcGRA7基因,构建重组克隆质粒pMD18-NcSRS2-NcGRA7、重组腺病毒穿梭质粒pCR259-NcSRS2-NcGRA7及重组腺病毒表达质粒Transpose-Ad-NcSRS2-NcGRA7,脂质体介导转染QBI-HEK293细胞,包装重组腺病毒Ad5-NcSRS2-NcGRA7,PCR检测重组腺病毒NcSRS2-NcGRA7融合基因,IFAT和Western blotting检测NcSRS2-NcGRA7融合基因在QBI-HEK293细胞中的表达,TCID50法测定病毒滴度后,接种BALB/c小鼠,间接ELISA检测小鼠血清IgG抗体水平,细胞因子ELISA试剂盒检测小鼠血清IFN-γ、IL-4水平。结果,拼接的牛源犬新孢子虫NcSRS2-NcGRA7融合基因大小为1463bp,与GenBank中发表的序列（AF061249、AF176649）同源性为99%;重组腺病毒Ad5-NcSRS2-NcGRA7在QBI-HEK293细胞中包装成功,表达融合蛋白的分子量约为51ku,具有较好的反应原性:测得重组腺病毒Ad5-NcSRS2-NcGRA7滴度为10～9TCID/mL;ELISA检测三免后3周的BALB/c小鼠血清中IgG抗体效价达1:4096,细胞因子IFN-γ、IL-4水平与对照组比较差异极显著（p<0.01）。本研究为牛源犬新孢子虫NcSRS2-NcGRA7融合基因重组腺病毒载体疫苗的研制奠定了基础。

关键词：牛犬新孢子虫 NcSRS2-NcGRA7 重组腺病毒动物免疫

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不同种绵羊的红细胞对巴贝斯虫体外易感性的研究

不同种绵羊的红细胞对巴贝斯虫体外易感性的研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：关贵全 Emmanuelle Moreau Nadine Brisseau 罗建勋殷宏 Alain Chauvin 家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所 Ecole Nationale Veterinaire de Nantes UMR INRA/ENVN 1300 BioEpARAtlanpoleLa ChantrerieBP 40706F-44307 Nantes Cedex 03France Ecole Nationale Veterinaire de Nantes UMR INRA/ENVN 1300 BioEpAR AtlanpoleLa ChantrerieBP 40706F-44307 Nantes Cedex 03France

巴贝斯虫临潭株(Babesia ***1（Lintan）)是一株感染绵羊和山羊的莫氏巴贝斯虫样的梨形虫。该寄生虫是2000年用采自我国甘肃省甘南藏族自治州临潭县草尖的青海血蜱（Haemaphysalisqinghaiensis）饥饿成蜱感染绵羊后,分离到的一株羊的巴... 详细信息

巴贝斯虫临潭株(Babesia ***1（Lintan）)是一株感染绵羊和山羊的莫氏巴贝斯虫样的梨形虫。该寄生虫是2000年用采自我国甘肃省甘南藏族自治州临潭县草尖的青海血蜱（Haemaphysalisqinghaiensis）饥饿成蜱感染绵羊后,分离到的一株羊的巴贝斯虫。本研究建立了一种可持续培养巴贝斯虫临潭株的体外培养系统。在24孔和6孔细胞培养板中,以补充有20%胎牛血清、0.5μg/ml两性霉素B和50μg/ml的庆大霉素的RPMI 1640为培养液,供体绵羊红细胞浓度为7.5%,在37℃和6%的CO条件下,染虫率可达到5%;在75 cm的细胞瓶中,应用相同的培养液,红细胞浓度为2.5%时,染虫率能达到10%。为了为以后的研究提供特性均一的虫株,利用有限稀释的方法,获得一个巴贝斯虫临潭株的单克隆系(Babesia ***（Lintan）G7)。利用计算染虫率和光谱广度测量技术,对单克隆系G7进行体外生长特性的研究,结果显示,其生长周期（繁殖一代的时间）为20.57-26.41小时。此外,G7对羊的感染性的测定结果显示,3只法国羊被该单克隆系成功感染。最后,选用巴贝斯虫临潭株的单克隆系G7和分歧巴贝斯虫单克隆系（*** Rouen）,对中国滩羊（Tan muttonbreed）和法国肉用绵羊（Vendeen breed）的红细胞体外对巴贝斯虫的感染性进行了评价。结果显示,中国滩羊红细胞对巴贝斯虫临潭株和分歧巴贝斯虫的平均相对感染性分别为36.47±27.29%和40.42+34.11%,而法国羊红细胞的只有19.70±19.98%和6.05±6.61%。表明中国滩羊的红细胞对巴贝斯虫临潭株和分歧巴贝斯虫比法国绵羊更敏感（P<0.01）。

关键词：巴贝斯虫红细胞易感性

来源：评论

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微小隐孢子虫病毒衣壳蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

微小隐孢子虫病毒衣壳蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：刁玉梅宫鹏涛李建华苏利波杨举李赫张国才张西臣吉林大学畜牧兽医学院

根据GenBank中CSpV S-dsRNA基因序列(登录号为EU183404),采用Primer 5.0软件设计特异性引物,从***总RNA中扩增出S-dsRNA基因,并进行原核表达及蛋白纯化;然后以纯化的重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,进行脾细胞和骨髓淋巴细胞的融合,筛... 详细信息

根据GenBank中CSpV S-dsRNA基因序列(登录号为EU183404),采用Primer 5.0软件设计特异性引物,从***总RNA中扩增出S-dsRNA基因,并进行原核表达及蛋白纯化;然后以纯化的重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,进行脾细胞和骨髓淋巴细胞的融合,筛选阳性杂交瘤细胞株后进行单克隆抗体的大量制备和纯化;最后将单克隆抗体进行辣根过氧化物酶标记,建立微小隐孢子虫病毒衣壳蛋白双抗夹心ELISA。结果显示:扩增出了960 bp的CSpV衣壳蛋白基因开放阅读框,与GenBank公布的S-dsRNA基因序列(登录号为EU183404)进行比对,同源性为98.75%。重组蛋白在37℃下经1 mmol/L IPTG诱导4 h,表达量最大,主要以包涵体形式表达,相对分子质量约为37 kDa,表达量占蛋白总量的72.6%。Western botting重组蛋白具有反应原性。筛选出2株能稳定分泌抗重组蛋白的杂交瘤细胞株1A9和23A7,单抗亚类分别为IgG1和IgG3。Westernblotting表明1A9和23A7可识别重组病毒衣壳蛋白,间接免疫荧光实验表明1.A9可识别***子孢子顶端部分。双抗夹心ELISA方法的最佳检测条件,抗体最佳工作浓度为1:200,酶标抗体的最佳工作浓度为1:800,最佳封闭剂为1%BSA。最低检测量为每克粪样含25个卵囊,灵敏度较高;与牛安氏隐孢子虫粪样没有交叉反应,特异性较强;与镜检符合率为100%。本研究为隐孢子虫的鉴定与人隐孢子虫病的诊断提供方法基础。

关键词：病毒衣壳蛋白双抗夹心 ELISA 微小隐孢子虫初步应用重组蛋白单克隆抗体

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