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文献类型

246 篇 会议

馆藏范围

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日期分布

学科分类号

235 篇 农学
- 234 篇 兽医学
- 1 篇 畜牧学
11 篇 医学
- 9 篇 基础医学(可授医学...
- 2 篇 公共卫生与预防医...
1 篇 经济学
- 1 篇 应用经济学

主题

14 篇 克隆
14 篇 日本血吸虫
13 篇 弓形虫
12 篇 序列分析
9 篇 pcr
9 篇 柔嫩艾美耳球虫
8 篇 重组蛋白
7 篇 原核表达
7 篇 调查
6 篇 新孢子虫
6 篇 犬
6 篇 寄生虫
6 篇 青海血蜱
6 篇 隐孢子虫
5 篇 免疫保护
5 篇 核酸疫苗
5 篇 斯氏副柔线虫
5 篇 长角血蜱
5 篇 重组抗原
5 篇 刚地弓形虫

机构

17 篇 中国农业大学
15 篇 华南农业大学
11 篇 南京农业大学
10 篇 延边大学
10 篇 四川农业大学
10 篇 中国农业科学院上...
9 篇 内蒙古农业大学
9 篇 河南农业大学
8 篇 中国农业科学院兰...
8 篇 中国农业科学院上...
7 篇 新疆农业大学
7 篇 中国农业科学院兰...
7 篇 吉林大学
6 篇 东北农业大学
6 篇 扬州大学
5 篇 中国农业科学院兰...
5 篇 甘肃农业大学
5 篇 家畜疫病病原生物...
5 篇 中国农业科学院兰...
5 篇 中国农业科学院上...

作者

18 篇 殷宏
17 篇 罗建勋
17 篇 林矫矫
14 篇 关贵全
12 篇 马米玲
12 篇 李有全
11 篇 刘军龙
11 篇 王艳华
11 篇 朱兴全
11 篇 刘爱红
11 篇 付宝权
11 篇 张德林
11 篇 任巧云
10 篇 杨光友
9 篇 石耀军
9 篇 张守发
9 篇 张龙现
9 篇 贾立军
8 篇 李文卉
8 篇 王欣之

语言

228 篇 中文
18 篇 英文

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隐孢子虫鼠基因型卵囊壁蛋白CP41基因的克隆及原核表达

隐孢子虫鼠基因型卵囊壁蛋白CP41基因的克隆及原核表达

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：于慧珠陈兆国岳城米荣升夏延富中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海动物生物技术研究中心新疆农业大学动物医学学院湖南农业大学动物医学学院

为克隆和表达编码隐孢子虫鼠基因型(Cryptosporidium mouse genotype)卵囊壁蛋白CP41基因,以隐孢子虫鼠基因型卵囊总RNA为模板,RT-PCR扩增CP41基因,克隆到pMD 18-T载体并进行序列测定,以GenBank登录的微小隐孢子虫CP41基因序列为参照,... 详细信息

为克隆和表达编码隐孢子虫鼠基因型(Cryptosporidium mouse genotype)卵囊壁蛋白CP41基因,以隐孢子虫鼠基因型卵囊总RNA为模板,RT-PCR扩增CP41基因,克隆到pMD 18-T载体并进行序列测定,以GenBank登录的微小隐孢子虫CP41基因序列为参照,进行同源性比对。将鉴定正确的序列亚克隆到pGEX-5x-3原核表达载体,构建重组质粒pGEX-5x-3-CP41,转化BL21(DE3)感受态细胞,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IFTG)诱导表达并复性纯化包涵体蛋白。用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测目的蛋白,Western blot分析该重组蛋白的免疫活性。结果显示,克隆的目的基因核苷酸序列与GenBank登录的序列比较,同源性为90.50%,氨基酸序列同源性为87.57%。重组质粒转化菌在IPTG诱导下以包涵体形式高效表达,表达的融合蛋白大小约为46 ku,Western blot分析显示,纯化复性后的重组蛋白可被辣根过氧化物酶标记的抗谷胱甘肽巯基转移酶(GST)单克隆抗体、隐孢子虫兔基因型(Cryptosporidium rabbit genotype)感染兔血清特异性识别。ELISA检测结果表明,该蛋白3次免疫SPF兔后,血清特异性抗体达到较高水平,表明表达的重组蛋白具有较好的免疫原性和免疫反应性。

关键词：隐孢子虫鼠基因型卵囊壁蛋白 CP41 克隆原核表达

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弓形虫代谢分泌抗原疫苗免疫猪T细胞亚群的影响

弓形虫代谢分泌抗原疫苗免疫猪T细胞亚群的影响

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：蔡志杰王艳华付宝权李文卉芦赟曹丽艳张燕丽张德林中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃业大学动物医学院

为了研究弓形虫代谢分泌抗原疫苗对仔猪T细胞亚群及抗体的影响,将仔猪随机分为6组,每组5只,分别为E/SA组、E/SA+CPG(未乳化)组、E/SA+CPG组、E/SA+IL-2组、E/SA+IL-2+CPG组及对照组。分别于免疫前、免疫后2周、免疫后4周、感染后1周及... 详细信息

为了研究弓形虫代谢分泌抗原疫苗对仔猪T细胞亚群及抗体的影响,将仔猪随机分为6组,每组5只,分别为E/SA组、E/SA+CPG(未乳化)组、E/SA+CPG组、E/SA+IL-2组、E/SA+IL-2+CPG组及对照组。分别于免疫前、免疫后2周、免疫后4周、感染后1周及感染后2周采取仔猪外周血,用流式细胞仪对各试验组外周血中CD4+及CD8+T淋巴细胞亚群的动态变化规律进行检测,用IHA对抗弓形虫抗体水平做检测。结果表明,弓形虫代谢分泌抗原疫苗免疫仔猪后,免疫组外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞水平与特异性抗体效价与对照组相比均有大幅度升高;感染后1周,免疫组CD4+T细胞水平及CD4+/CD8+比值较感染前不同程度降低,感染后2周,免疫组CD4+T细胞水平及CD4+/CD8+比值上升至免疫后水平,CD8+水平下降,感染后特异性抗体效价进一步升高。因此,弓形虫代谢分泌抗原疫苗能够提高仔猪外周血CD3+、CD4+及CD8+T淋巴细胞的百分数和特异性抗体滴度。

关键词：弓形虫代谢分泌抗原 T细胞亚群抗体水平

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日本血吸虫蛋白酶体α2亚基基因的克隆、表达及功能分析

日本血吸虫蛋白酶体α2亚基基因的克隆、表达及功能分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：洪炀韩宏晓彭金彪王欣之石耀军傅志强刘金明林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室南京农业大学动物医学院

目的克隆和表达日本血吸虫蛋白酶体α2亚基(SjPSMA2)编码基因的cDNA,分析其在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况,评估该重组抗原在BALB/c小鼠体内诱导的抗血吸虫免疫保护效果。方法从本实验室构建的7天童虫消减cDNA文库中,获得一个... 详细信息

目的克隆和表达日本血吸虫蛋白酶体α2亚基(SjPSMA2)编码基因的cDNA,分析其在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况,评估该重组抗原在BALB/c小鼠体内诱导的抗血吸虫免疫保护效果。方法从本实验室构建的7天童虫消减cDNA文库中,获得一个EST序列,经生物信息学分析命名为SjPSMA2,以日本血吸虫42天童虫cDNA为模板,获得其全长cDNA。实时定量PCR分析该基因在童虫和成虫中的表达情况,以pET28a(+)为载体成功构建了该基因的原核表达质粒,并在大肠杆菌系统中进行表达,对重组蛋白进行纯化后,Western blotting检测重组蛋白的抗原性与免疫原性,利用重组抗原免疫BALB/c小鼠评估其免疫保护效果。结果成功获得了SjPSMA2编码基因的全长cDNA,开放阅读框为708bp,编码235个氨基酸,理论分子量25.84kD。实时定量PCR分析显示该基因在7d、13d、18d、23d、32d和42d虫体中都有表达,13d和42d表达量高于其它时期。获得了纯化的SjPSMA2重组蛋白,以包涵体形式存在,具有良好的抗原性和免疫原性。在小鼠免疫保护试验中,与空白对照组比较,免疫组小鼠产生了较高的特异性抗体水平,获得了12.1%的减虫率和35.24%的肝脏减卵率。结论获得了SjPSMA2基因的全长cDNA,成功构建了pET28a(+)-SjPSMA2重组质粒,该重组抗原在小鼠体内诱导产生了部分免疫保护效果。

关键词：免疫保护效果编码基因免疫原性抗原性重组抗原日本血吸虫功能分析

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青海血蜱“隐藏”抗原肌球蛋白碱性轻链分子的克隆与分析

青海血蜱“隐藏”抗原肌球蛋白碱性轻链分子的克隆与分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：高金亮罗建勋樊瑞泉关贵全任巧云马米玲殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

蜱叮咬动物和利用蜱研磨物免疫动物所产生的抗体之间有很大的差异。利用青海血蜱唾液腺蛋白免疫绵羊产生的抗体能与该蜱唾液腺蛋白中分子量为22kDa(P22)和37kDa(P37)的两个天然蛋白发生免疫反应,而蜱自然吸血刺激绵羊产生的抗体却不能... 详细信息

蜱叮咬动物和利用蜱研磨物免疫动物所产生的抗体之间有很大的差异。利用青海血蜱唾液腺蛋白免疫绵羊产生的抗体能与该蜱唾液腺蛋白中分子量为22kDa(P22)和37kDa(P37)的两个天然蛋白发生免疫反应,而蜱自然吸血刺激绵羊产生的抗体却不能与这两个蛋白发生反应。利用这两个天然蛋白免疫家兔产生的抗血清对青海血蜱cDNA表达文库进行免疫学筛选获得了一个长度为1085bp的cDNA阳性克隆(Hq02)。Hq02含有483bp的开放阅读框,编码一个分子量约为18kDa的蛋白。RT-PCR分析表明此基因在青海血蜱的唾液腺、中肠、一些其它器官和该蜱的不同发育阶段表达。所预测的Hq02基因的氨基酸序列与一些已知的肌球蛋白碱性轻链蛋白有很高的同源性。该蛋白在大肠杆菌中与,17基因10蛋白得到了融合表达。Western blot分析表明此重组蛋白只能与利用P22和P37免疫家兔产生的阳性血清反应,而不能与蜱叮咬家兔产生的阳性血清发生反应,说明此阳性克隆所编码的蛋白是青海血蜱的"隐藏"抗原。利用该重组蛋白免疫绵羊产生的抗体能使青海血蜱雌蜱的饱血体重下降21.8%。这是关于蜱的肌球蛋白碱性轻链蛋白的首次报道。

关键词：青海血蜱 Hq02基因肌球蛋白碱性轻链 "隐藏"抗原

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青海血蜱和长角血蜱对我国两种羊泰勒虫的传播试验

青海血蜱和长角血蜱对我国两种羊泰勒虫的传播试验

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：李有全关贵全马米玲刘军龙刘爱红任巧云罗建勋殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室

殷宏和Schnittger等羊泰勒虫18S rRNA基因序列分析结果证实我国北方地区分布的羊泰勒虫明显不同于国外报道的4个种,属于2个新种,其一与温和型可感染牛的泰勒虫关系较近,如水牛泰勒虫和东方泰勒虫等;另一虫种与突变泰勒虫关系较近。近来... 详细信息

殷宏和Schnittger等羊泰勒虫18S rRNA基因序列分析结果证实我国北方地区分布的羊泰勒虫明显不同于国外报道的4个种,属于2个新种,其一与温和型可感染牛的泰勒虫关系较近,如水牛泰勒虫和东方泰勒虫等;另一虫种与突变泰勒虫关系较近。近来,将这两个新种分别命名为吕氏泰勒虫(Theileria luwenshuni)和尤氏泰勒虫(Theileria uilenbergi)。利用青海血蜱和长角血蜱对我国发现的这两个新种的传播试验确定青海血蜱和长角血蜱为吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫的共同传播媒介。从感染吕氏泰勒虫的羊体饱血的幼蜱和若蜱发育而来的青海血蜱若蜱和成蜱,能分别传播这种泰勒虫给绵羊;同时,从感染吕氏泰勒虫的羊体饱血的长角血蜱幼蜱和若蜱发育而来的长角血蜱若蜱和成蜱,也能分别传播这种泰勒虫给绵羊。从感染尤氏泰勒虫的羊体饱血的青海血蜱幼蜱和若蜱发育而来的青海血蜱若蜱和成蜱,能分别传播这种泰勒虫给绵羊;同时,从感染尤氏泰勒虫的羊体饱血的长角血蜱若蜱发育而来的长角血蜱成蜱,能传播这种泰勒虫给绵羊;但是,从感染尤氏泰勒虫的羊体饱血的长角血蜱幼蜱发育而来的长角血蜱若蜱,不能传播尤氏泰勒虫给除脾和未除脾绵羊。实验结果表明,我国的两种羊泰勒虫(吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫)至少能被2种硬蜱—青海血蜱和长角血蜱传播,传播方式为阶段性传播;此外,这两种羊泰勒虫在媒介蜱传播上也存在明显差异,吕氏泰勒虫能被长角血蜱若蜱传播,而尤氏泰勒虫不能被长角血蜱若蜱传播。

关键词：长角血蜱吕氏泰勒虫青海血蜱羊泰勒虫

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巨型艾美球虫gam56基因的分段原核表达及其产物的免疫保护效果

巨型艾美球虫gam56基因的分段原核表达及其产物的免疫保护效果

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：许金俊姜慧婕陶建平彭昊张艳孙文瑶扬州大学兽医学院

已报道的7种鸡球虫中,巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)具有较强的致病性和免疫原性,对其他种类球虫也能产生交叉保护力。配子体是鸡球虫体内生活史中的一个重要发育阶段,利用三种从配子体提取纯化的56、82和250 ku抗原组成的亚单位苗Cox... 详细信息

已报道的7种鸡球虫中,巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)具有较强的致病性和免疫原性,对其他种类球虫也能产生交叉保护力。配子体是鸡球虫体内生活史中的一个重要发育阶段,利用三种从配子体提取纯化的56、82和250 ku抗原组成的亚单位苗CoxAbic现已商品,临床应用效果良好。本研究以*** NT株纯化的配子体提取的总RNA为模板,设计特异性引物,应用两步法RT-PCR技术扩增出gam56基因全编码区cDNA片段,并克隆到pGEM-Teasy载体和测序。根据测序结果设计引物,扩增gam56基因两段含丰富抗原表位的编码区片段,克隆到原核表达质粒pGEx-6P-1谷胱甘肽-S-转移酶基因的下游,构建重组表达质粒pGEX-6P-1-gam56-1和pGEX-6P-1-gam56-2。经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE电泳鉴定证实,gam56基因的2个片段在大肠杆菌中得到了融合表达,融合蛋白分子量分别约为44 Ku和38 Ku。以可溶性的GST-gam56-2融合蛋白为免疫原,设立高、中、低(1.0、0.5、0.25 mg)3个剂量,单独或使用弗氏完全佐剂,于5日龄、12日龄和19日龄对雏鸡进行3次免疫,同时设立未免疫未攻毒组和未免疫攻毒组作对照,在26日龄时用5×10～4个***孢子化卵囊进行攻毒,8 d后扑杀,对各组的存活率、相对增重率、卵囊减少率等指标进行统计分析,比较免疫保护效果。结果显示:就相对增重率而言各免疫组较未免疫攻毒组的要高27.6%以上,各免疫组之间稍有差异但不显著(P>0.05);就卵囊减少率指标而言,各免疫组较未免疫攻毒组均有不同程度减少,但是均小于75%。GST-gam56-2融合蛋白对于***感染具有一定的免疫保护效力,可用于亚单位疫苗的研制。

关键词：巨型艾美球虫 gam56基因重组蛋白保护效果

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猪囊尾蚴TS-CC18蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

猪囊尾蚴TS-CC18蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：张少华骆学农贾万忠郭爱疆景志忠才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

囊尾蚴病(Cysticercosis)是危害严重的食源性人兽共患病之一。利用重组蛋白和合成肽作为替代抗原,是解决该病诊断抗原来源问题的一条理想途径。目的制备猪带绦虫囊尾蚴TS-CC18重组抗原并鉴定其抗原特性,建立猪囊尾蚴间接ELISA检测方法... 详细信息

囊尾蚴病(Cysticercosis)是危害严重的食源性人兽共患病之一。利用重组蛋白和合成肽作为替代抗原,是解决该病诊断抗原来源问题的一条理想途径。目的制备猪带绦虫囊尾蚴TS-CC18重组抗原并鉴定其抗原特性,建立猪囊尾蚴间接ELISA检测方法。方法通过RT-PCR从猪带绦虫囊尾蚴mRNA中扩增出TS-CC18ORF,将TS-CC18 ORF亚克隆到表达载体pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导筛选高表达量菌株,采用Ni-FF亲和层析柱提纯表达蛋白。Tricine-SDS—PAGE及Western blotting分析抗原特性。以TS-CC18作为包被抗原,优化各种ELISA反应条件,并与全囊虫层析抗原ELISA进行诊断效果比较。结果测序确证TS-CC18ORF大小约为261bp,与GenBank上发表的AF356330核苷酸相似性为85.1%,氨基酸相似性为73.6%。Tricine-SDS-PAGE表明,重组菌经0.4 mmol/L IPTG诱导6 h,可稳定表达可溶性TS-CC18重组蛋白,其相对分子质量约16 kD。Western blotting检测诱导的蛋白能与猪囊尾蚴阳性血清发生特异性反应,与细颈囊尾蚴、旋毛虫、弓形虫病猪血清无交叉反应。确定的TS-CC18抗原最佳包被量为10μg/mL,待检血清最佳稀释度为1:50,兔抗猪IgG-HRP的工作浓度为1:6000,作用时间为60 min。结果判定以P/N≥12.0为阳性,P/N<2.0为阴性。以全囊虫层析抗原ELISA检测结果为参照标准,该方法的相对敏感性达88%,相对特异性为100%,总符合率为97.4%。将该方法按试剂盒要求标准化,4℃至少可放置6个月。结论成功建立了猪囊尾蚴TS-CC18间接ELISA抗体检测方法,其特异性、敏感性及稳定性良好,对于快速诊断猪囊尾蚴病及血清流行病学调查具有应用价值。

关键词：猪囊尾蚴 TS-CC18抗原原核表达间接ELISA

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上海地区不同动物源隐孢子虫感染调查及种型鉴定

上海地区不同动物源隐孢子虫感染调查及种型鉴定

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：陈兆国米荣升于慧珠夏延富胡义彬郝言明李艳李正锋林矫矫陈永军石耀军王赞江袁耀明张连军沈莉萍刘佩红沈辉中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海光明荷斯坦牧业有限公司上海市动物疫病预防控制中心上海市闵行区动物疾病预防控制中心

为了解上海地区不同动物隐孢子虫感染情况及感染虫种,建立小鼠、兔隐孢子虫实验动物模型。从上每市不同区县采集宠物犬、鸽子、黄牛、山羊、鹌鹑、梅花鹿、黑天鹅及实验动物新西兰白兔、东方田鼠、昆明系小鼠、大鼠粪便,采用Sheather... 详细信息

为了解上海地区不同动物隐孢子虫感染情况及感染虫种,建立小鼠、兔隐孢子虫实验动物模型。从上每市不同区县采集宠物犬、鸽子、黄牛、山羊、鹌鹑、梅花鹿、黑天鹅及实验动物新西兰白兔、东方田鼠、昆明系小鼠、大鼠粪便,采用Sheather's蔗糖飘浮法和改良抗酸染色法进行检查。利用PCR-RFLP对部分动物粪便中分离的隐孢子虫核糖体小亚基(SSU)RNA基因进行扩增,对扩增产物进行序列测定和系统发育进化分析。结果发现,鸽子、黑天鹅、大鼠粪便中未发现隐孢子虫;其它被调查动物均发现存在隐孢子虫感染,其中宠物犬、山羊、鹌鹑、梅花鹿、兔子、东方田鼠、实验小鼠的阳性率分别为1.5%、26.3%、63.3%、36.6%、8.5%、54.5%、2.9%;此外,检查的1头黄牛也为阳性。对小鼠、兔子、山羊、鹌鹑源隐孢子虫进行分子鉴定和序列进化树分析,发现上海地区实验小鼠感染的是隐孢子虫鼠基因型(Cryptosporidium mouse genotype);兔源隐孢子虫虫种为隐孢子虫兔基因型(Cryptosporidium rabbit genotype);山羊感染的是隐孢子虫鹿基因型(Cryptosporidium cervine genotype);鹌鹑感染的是火鸡隐孢子虫(Cryptosporidium meleagridis)。鼠、兔源隐孢子虫成功感染本种动物,昆明系小鼠接种鼠源隐孢子虫后,最短潜伏期为3d,最长转阴时间为8周;新西兰白兔感染兔源隐孢子虫后15d左右就不再排卵囊。

关键词：上海动物隐孢子虫感染 18S rRNA基因 PCR-RFLP,种,基因型

来源：评论

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边缘无浆体MSP5重组抗原间接ELISA检测方法的建立

边缘无浆体MSP5重组抗原间接ELISA检测方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：马米玲罗建勋殷宏关贵全李有全高金亮刘志杰刘爱红刘军龙任巧云中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

边缘无浆体病是由蜱或其他吸血昆虫传播的立克次体病,给养牛业带来了极大的危害。本病主要分布在热带和亚热带地区,在温带地区也有报道。在我国广东、贵州、湖南、四川、河南、新疆等省区均有本病流行的报道。急性边缘无浆体病可导致动... 详细信息

边缘无浆体病是由蜱或其他吸血昆虫传播的立克次体病,给养牛业带来了极大的危害。本病主要分布在热带和亚热带地区,在温带地区也有报道。在我国广东、贵州、湖南、四川、河南、新疆等省区均有本病流行的报道。急性边缘无浆体病可导致动物贫血、流产、产乳量下降,甚至死亡,耐过动物终生带菌,立克次体的血球感染率在0.1%左右,由于血球感染率太低,用血涂片染色观察方法检测常常发生漏检。尽管PCR技术和分子杂交技术已广泛应用于隐性感染动物的检测,但它们均不适于大规模流行病学调查。在血清学测试方法中,卡片凝集试验和补体结合试验已被用于本病的检测,这些方法也被列入国际贸易中本病的口岸检疫的标准方法。此外,免疫荧光技术和酶联免疫吸附试验(ELISA)得到了一定规模的应用。但是,当前诊断本病大多数使用的抗原都是粗提的虫体抗原,其敏感性和特异性较低,所以人们逐渐将目光集中在重组抗原上。MSP5是分子质量为19ku的膜蛋白,在边缘无浆体、羊无浆体和中央无浆体之间相当保守,适合作为诊断抗原。笔者在边缘无浆体MSP5蛋白基因克隆、表达的基础上口,建立了一种重组抗原的间接ELISA诊断方法。首先将边缘无浆体MSP5基因在大肠杆菌DH5a中表达,获得45 ku的融合蛋白。Western-blot检测证实该表达蛋白具有良好的生物学活性。以纯化的融合蛋白为抗原,建立了边缘无浆体MSP5的间接ELISA检测方法。该方法对边缘无浆体阴性、阳性血清(各100份)的阳性检出率和阴性符合率分别为100%和98%,与双芽巴贝虫、大巴贝虫、环形泰勒虫、瑟氏泰勒虫、衣原体、血吸虫和羊肝片吸虫的阳性血清无交叉反应,与羊无浆体阳性血清有交叉反应。结果表明,建立的间接EI ISA方法具有良好的特异性和敏感性。

关键词：边缘无浆体 MSP5基因间接ELISA

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山东省50家肉鸡场球虫流行率调查

山东省50家肉鸡场球虫流行率调查

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：孙希萌吕艳丽索勋中国农业大学动物医学院国家动物原虫实验室

肉鸡球虫病是由细胞内寄生的艾美耳属球虫引起的原虫病,其引起的死亡率占肉鸡死亡率的6%-10%,每年造成的直接损失在20亿美元以上。我国肉鸡饲养以农户地面群养为主,软硬件配备相对落后,农户又经常盲目使用抗球虫药物,致使耐药虫株普遍出... 详细信息

肉鸡球虫病是由细胞内寄生的艾美耳属球虫引起的原虫病,其引起的死亡率占肉鸡死亡率的6%-10%,每年造成的直接损失在20亿美元以上。我国肉鸡饲养以农户地面群养为主,软硬件配备相对落后,农户又经常盲目使用抗球虫药物,致使耐药虫株普遍出现,亚临床球虫病继而成为影响肉鸡健康养殖的主要问题,给球虫病的有效控制带来了很大困难。疫苗接种被认为是一种有效替代化学药物治疗的方法,然而,疫苗免疫虫株的合理组分的确定是以肉鸡饲养中球虫流行病学的调研结果为基础的,大多数国家的球虫流行病学的调查研究主要集中在那些因为病变明显而容易鉴别的几个球虫品种或者认为致病性高的几种球虫,因而病变不明显但可负面影响鸡群生产性能的早熟艾美耳球虫常被忽略。因此,要开发更加有效的疫苗,就必须对各种艾美耳球虫在不同肉鸡场的分布和流行情况进行全面的调查研究。本研究在肉鸡饲养量大的山东省进行了采样,采用卵囊形态学和PCR扩增技术,对山东省50家肉鸡场的球虫病流行情况进行了研究。针对艾美耳球虫小RNA亚单位序列或者内转录间隔片段Ⅰ(ITSⅠ)设计了七对特异性引物来鉴别球虫的种类。结果表明,50家肉鸡场都存在至少一种以上艾美耳球虫感染,其中,柔嫩艾美耳球虫90%(45/50)、早熟艾美耳球虫88%(44/50)、堆型艾美耳球虫72%(36/50)、巨型艾美耳球虫68%(34/50)、和缓艾美耳球虫60%(30/50)、毒害艾美耳球虫26%(13/50)以及布氏艾美耳球虫8%(4/50)。因此,针对于山东省内肉鸡场的高效球虫病疫苗应当至少包含早熟艾美耳球虫在内的前六种主要球虫。本研究利用球虫形态鉴定与PCR技术相结合,建立了一套适用于我国内鸡球虫诊断的方法,初步摸清了艾美耳球虫特别是早熟艾美耳球虫在小规模的肉鸡场的流行状况,为鸡球虫病有效疫苗的研制提供了数据支持。

关键词：球虫病流行情况肉鸡场流行率山东省

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