建立一种快速、特异、敏感的SYBR Green Ⅰ实时RT-PCR方法检测牛病毒性腹泻-粘膜病病毒。方法 对SYBR Green Ⅰ实时RT-PCR检测牛病毒性腹泻-粘膜病病毒方法的反应条件、反应体系进行优化,同时与传统RT-PCR方法进行检测灵敏度比较,提...
建立一种快速、特异、敏感的SYBR Green Ⅰ实时RT-PCR方法检测牛病毒性腹泻-粘膜病病毒。方法 对SYBR Green Ⅰ实时RT-PCR检测牛病毒性腹泻-粘膜病病毒方法的反应条件、反应体系进行优化,同时与传统RT-PCR方法进行检测灵敏度比较,提高该方法的特异性和敏感性。并用该方法对BVDV细胞毒、10份牛血清样本和犊牛粪便进行检测。结果 SYBR Green Ⅰ实时RT-PCR检测方法的灵敏度比传统RT-PCR方法的灵敏度高100倍,前者可达21个拷贝/μL,后者为2.10×10 3个拷贝/μL,且检测时间比传统RT-PCR方法缩短1/2。该方法可检测出BVDV,但不能检出BDV、CSFV、JEV。其中细胞毒全为阳性,3份犊牛粪便为阳性,牛血清样本均为阴性。结论 建立的SYBR Green Ⅰ实时RT-PCR方法用于BVDV检测具有特异、灵敏、快速等优点,可用于BVDV的病原学监测、流行病学调查及定量研究。
暂无评论