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文献类型

301 篇 会议

馆藏范围

301 篇 电子文献
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日期分布

学科分类号

112 篇 农学
- 105 篇 兽医学
- 4 篇 作物学
- 3 篇 畜牧学
- 1 篇 农业资源与环境
7 篇 工学
- 6 篇 生物工程
- 1 篇 机械工程
- 1 篇 土木工程
7 篇 医学
- 5 篇 基础医学(可授医学...
- 2 篇 医学技术（可授医学...
- 1 篇 临床医学
2 篇 理学
- 2 篇 生物学
1 篇 经济学
- 1 篇 应用经济学
1 篇 管理学
- 1 篇 农林经济管理

主题

7 篇 疫苗
4 篇 免疫
4 篇 灭活疫苗
4 篇 胶体金
4 篇 分离鉴定
4 篇 胸膜肺炎放线杆菌
4 篇 鉴定
3 篇 基因分型
3 篇 佐剂
3 篇 应用
3 篇 副猪嗜血杆菌
3 篇 鸭肝炎病毒
3 篇 悬浮培养
3 篇 bhk-21细胞
3 篇 序列分析
3 篇 诊断
3 篇 猪链球菌2型
2 篇 耐药性
2 篇 狂犬病
2 篇 培养基

机构

41 篇 吉林大学
35 篇 中农威特生物科技...
19 篇 华南农业大学
14 篇 瑞普生物药业有限...
13 篇 军事医学科学院军...
12 篇 中国兽医药品监察...
11 篇 山东省滨州畜牧兽...
10 篇 金宇保灵生物药品...
9 篇 中国农业大学
8 篇 广东大华农动物保...
8 篇 甘肃省动物卫生监...
7 篇 中国农业科学院兰...
7 篇 北京市兽药监察所
6 篇 广州市华南农大生...
6 篇 中国农业科学院兰...
6 篇 甘肃省兽药饲料监...
6 篇 山东滨州华宏生物...
6 篇 扬州大学
6 篇 河南省兽药监察所
5 篇 山东绿都生物科技...

作者

34 篇 牟克斌
34 篇 刘学荣
32 篇 雷连成
26 篇 黄银君
14 篇 刘萍
14 篇 冯书章
14 篇 王彪
12 篇 马全英
12 篇 沈志强
12 篇 朱万光
12 篇 李士成
12 篇 祁光宇
12 篇 陈苗苗
12 篇 韩文瑜
10 篇 王永明
10 篇 刘军
10 篇 祝令伟
10 篇 杨保收
10 篇 智晓莹
9 篇 安芳兰

语言

297 篇 中文
4 篇 英文

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狂犬病病毒ERA株P蛋白的可溶性表达、纯化及多克隆抗体的制备

狂犬病病毒ERA株P蛋白的可溶性表达、纯化及多克隆抗体的制备

引用

中国畜牧兽医学会生物制品学分会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会暨第三届中国兽药大会

作者：孟先明潘艳蔡新斌陆专灵梁湘唐海波杨剑张红普罗廷荣广西大学动物科学技术学院广西亚热带生物资源保护利用重点实验室

扩增狂犬病病毒ERA株的P基因并定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中，获得阳性P基因重组质粒pET-P，转化原核表达宿主菌BL21(DE3)，用IPTG诱导并优化诱导条件，使其在大肠杆菌中以可溶性表达为主。SDS-PAGE电泳分析发现，重组质粒pET-P...

扩增狂犬病病毒ERA株的P基因并定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中，获得阳性P基因重组质粒pET-P，转化原核表达宿主菌BL21(DE3)，用IPTG诱导并优化诱导条件，使其在大肠杆菌中以可溶性表达为主。SDS-PAGE电泳分析发现，重组质粒pET-P成功的表达出大小约50 KD的融合蛋白，用Ni-NTA亲和层析在非变性条件下纯化P蛋白，获得纯度较高的蛋白，Western blot鉴定纯化后的P蛋白，结果表明纯化后的P蛋白均可被RV阳性血清和抗His的单克隆抗体识别，证实其免疫原性良好且成功融合表达了His标签蛋白，高纯度P蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体，本研究制备的抗体经westernblot和间接免疫荧光鉴定，都能特异性的识别狂犬病病毒感染细胞中表达的P蛋白，具有较好的特异性，制备的抗P蛋白的抗血清将为进一步研究P蛋白的潜在功能打下良好的基础。

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胸膜肺炎放线杆菌血清3型与5型菌株基因组特征序列筛选与分析

胸膜肺炎放线杆菌血清3型与5型菌株基因组特征序列筛选与分析

引用

中国畜牧兽医学会生物制品学分会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会暨第三届中国兽药大会

作者：杨峰雷连成吉林大学畜牧兽医学院吉林 130062

染性胸膜肺炎(porcine infectious pleuropneumonia)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae，APP)引起的猪的高度致死性呼吸道传染病。APP血清型多达15个，由于缺乏对主要血清型特征基因的了解，使猪传染性胸膜肺炎的诊...

染性胸膜肺炎(porcine infectious pleuropneumonia)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae，APP)引起的猪的高度致死性呼吸道传染病。APP血清型多达15个，由于缺乏对主要血清型特征基因的了解，使猪传染性胸膜肺炎的诊断分型、发病机理研究、多价疫苗研究受到阻碍，目前已完成APP3型、5型菌株的基因组测序，利用信息学技术比较基因组序列已成为可能。本论文应用基因组序列比对软件GenomeComp对APP毒力较弱的3型(NC 010278)和APP毒力最强的5型(NC 009053)的全基因组进行了序列比较，共筛选出长度大于50bp的差异基因片段APP3型71处，APP5型75处，其中L20特有的基因84条共编码43个已知蛋白，其中包括与Apx毒素、荚膜多糖、脂多糖等毒力因子相关的基因，41条基因片段功能未知。其中JL03特有的基因57条，共编码32种已知蛋白，其中包括与APX毒素、溶血素、脂多糖、荚膜多糖、转铁结合蛋白等毒力因子相关的基因，25条基因片段功能未知。结果表明利用生物信患学软件对不同的基因组进行比较，是了解不同血清型菌株的特征差异序列的有效方法，这些差异基因的获得为APP分型诊断、致病机理和免疫应答研究奠定了基础。

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新型鸭肝炎病毒基因组序列分析

新型鸭肝炎病毒基因组序列分析

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中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会（第三届中国兽药大会学术论坛）

作者：袁率珍范书才李虹李明义范根成姜畔张兵中国兽医药品监察所青岛易邦生物技术有限公司

为了解新型鸭肝炎病毒（DHV）基因组变异情况,本研究对我们1999年从我国广东地区分离到的1株、2008年和2009年从山东地区分离到的2株与1型DHV（DHV-1）无抗原交叉性的新型DHV（N-DHV）全基因组序列测定的结果进行了分析。结果表明,N-DH... 详细信息

为了解新型鸭肝炎病毒（DHV）基因组变异情况,本研究对我们1999年从我国广东地区分离到的1株、2008年和2009年从山东地区分离到的2株与1型DHV（DHV-1）无抗原交叉性的新型DHV（N-DHV）全基因组序列测定的结果进行了分析。结果表明,N-DHV基因组全长7786～7788nt,仅有一个开放阅读框,其特征具有典型的微RNA病毒科病毒基因组结构。ORF编码一个2251aa的聚合蛋白,该蛋白经3C切割产生3个结构蛋白（VP0、VP3、VP1）和8个非结构蛋白（2A1、2A2、2B、2C、3A、3B、3C、3D）。与其他N-DHV毒株及DHV-1的抗原性相关VP1蛋白氨基酸序列比对表明,3株病毒之间及与G株的同源性均在98%以上,与韩国N-DHV同源性均大于92%,与台湾N-DHV同源性为80.1～80.9%,与DHV-1的同源性为76.9～77.3%。3株病毒与韩国N-DHV VP1氨基酸差异位点主要集中在C-端的高变异区。依据微RNA病毒科人肠病毒属血清型分型标准,GD株、SD01株、SD02株与韩国N-DHV和G株属于同一血清型,而与DHV-1和台湾新型DHV属于不同的血清型。

关键词：鸭肝炎病毒新型序列分析

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两种来源的IBDV抗原制备单克隆抗体的比较

两种来源的IBDV抗原制备单克隆抗体的比较

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中国畜牧兽医学会生物制品学分会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会暨第三届中国兽药大会

作者：黄成斌潘玲余为一安徽省人兽共患病重点实验室，安徽农业大学，安徽合肥 230036

比较了用两种来源的抗原制备IBDV单克隆抗体。一是通过自行设计的引物扩增VP2保守区部分基因片段，将其插入原核表达载体中，通过诱导表达获得目的蛋白，并经亲和层析对重组蛋白纯化作为抗原。二是经尿囊液扩增并超高获得IBDV抗原。分...

比较了用两种来源的抗原制备IBDV单克隆抗体。一是通过自行设计的引物扩增VP2保守区部分基因片段，将其插入原核表达载体中，通过诱导表达获得目的蛋白，并经亲和层析对重组蛋白纯化作为抗原。二是经尿囊液扩增并超高获得IBDV抗原。分别这两种抗原免疫Balb/c小鼠后，取脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合，经ELISA法筛选，获得2株VP2蛋白和4株分泌病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞。在ELISA中，它们的腹水效价分别为1：2*10 4，1：2*10 4，1：2*10 6，1：6*10 4，1：1*10 5和1：4*10 3。它们与相应抗原有特异性反应，不与空载体或其他病毒抗原反应。经10～20次传代，仍保持稳定的效价。上述结果表明，两种抗原均能诱导小鼠产生免疫应答，制备单克隆抗体，用原核表达的目的蛋白可以得到针对预期抗原片段的抗体。

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出血性大肠杆菌0157菌壳的研究

出血性大肠杆菌0157菌壳的研究

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中国畜牧兽医学会生物制品学分会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会暨第三届中国兽药大会

作者：刘爽刘军周博王文东李鹏祝令伟纪雪冯书章吉林大学畜牧兽医学院，吉林长春 130062 军事医学科学院军事兽医研究所，吉林长春 130062 军事医学科学院军事兽医研究所，吉林长春 130062 吉林大学畜牧兽医学院，吉林长春 130062 吉林大学畜牧兽医学院，吉林长春 130062 军事医学科学院军事兽医研究所，吉林长春 130062

究利用PCR技术扩增得到噬菌体PhiX174裂解基因E并克隆到质粒pBV220中，将重组质粒pBV220：：E转入出血性大肠杆菌0157：H7，并利用温度变化诱导裂解基因E的表达。重组菌株0157：H7(pBV220：：E)培养温度从28℃突升至42℃，每20min检测菌...

究利用PCR技术扩增得到噬菌体PhiX174裂解基因E并克隆到质粒pBV220中，将重组质粒pBV220：：E转入出血性大肠杆菌0157：H7，并利用温度变化诱导裂解基因E的表达。重组菌株0157：H7(pBV220：：E)培养温度从28℃突升至42℃，每20min检测菌液OD600值，测定其溶菌动力学，绘制生长曲线。体外菌落计数计算裂解效率，电镜观察0157菌壳形态，并研究其对小鼠模型的免疫保护效果。结果显示，通过升高温度诱导，菌液OD600值在升温后40min开始显著下降，80min后OD600值趋于平稳。细菌溶菌裂解效率为98.4％。电子显微镜观察显示，经诱导后，0157：H7细菌内容物可以通过细菌表面的孔道流出，从而形成菌壳。动物免疫攻毒实验表明0157茵壳对小鼠具有良好的免疫保护效果，一次免疫后保护率为17/20。本研究结果表明0157菌壳可作为预防0157感染的候选疫苗。

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Asia 1型口蹄疫病毒免疫胶体金快速检测方法的建立

Asia 1型口蹄疫病毒免疫胶体金快速检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会生物制品学分会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会暨第三届中国兽药大会

作者：智晓莹祁光宇任维维刘学荣牟克斌黄银君蒋韬中农威特生物科技股份有限公司，甘肃兰州 730046 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室，甘肃兰州 730046

一种灵敏度高、特异性好的能够快速检测猪、牛等偶蹄动物Asia 1型口蹄疫病毒的免疫胶体金侧向层析方法(GICA)。制备胶体金，标记纯化的Asia 1型口蹄疫抗体，喷于玻璃纤维膜上制备成金标垫；将纯化的Asia 1型口蹄疫抗体和纯化的兔抗豚鼠...

一种灵敏度高、特异性好的能够快速检测猪、牛等偶蹄动物Asia 1型口蹄疫病毒的免疫胶体金侧向层析方法(GICA)。制备胶体金，标记纯化的Asia 1型口蹄疫抗体，喷于玻璃纤维膜上制备成金标垫；将纯化的Asia 1型口蹄疫抗体和纯化的兔抗豚鼠抗体分别按照工作浓度，作为检测带和质控带喷于硝酸纤维膜上。将玻璃纤维膜和硝酸纤维膜组装成Asia1型口蹄疫病毒金标检测试纸条。通过敏感性试验、特异性试验、保存期试验和重复性试验对口蹄疫阴性样品、猪瘟阳性样品、猪水泡病阳性样品、Asia Ⅰ型口蹄疫病毒阳性样品和O、A型口蹄疫阳性样品的进行检测，确定了本方法敏感性好、特异性好，保存期长、重复性好。本方法是一种快速、灵敏、特异的口蹄疫抗体检测方法，适用于基层的现场诊断。

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广东与四川地区发病猪副猪嗜血杆菌分离株omp5基因的克隆及序列分析

广东与四川地区发病猪副猪嗜血杆菌分离株omp5基因的克隆及序列分...

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中国畜牧兽医学会生物制品学分会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会暨第三届中国兽药大会

作者：陈善真李春玲贾爱卿王贵平广东现代农业集团研究院，广东，广州 510630 华南农业大学兽医学院，广东广州 510642 广东省农业科学院兽医研究所，广东，广州 510640 广东现代农业集团研究院，广东，广州 510630

比较副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis，HPS)外膜蛋白P5(omp5)基因的同源性及抗原性，设计合成1对特异性引物，试验通过PCR方法扩增出30株从广东和四川发病猪中分离到的HPS omp5基因，然后将PCR产物克隆至pMD18-T载体，转化入大肠杆菌...

比较副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis，HPS)外膜蛋白P5(omp5)基因的同源性及抗原性，设计合成1对特异性引物，试验通过PCR方法扩增出30株从广东和四川发病猪中分离到的HPS omp5基因，然后将PCR产物克隆至pMD18-T载体，转化入大肠杆菌DH5α，并进行序列测定分析。结果发现，30株HPS omp5基因的完整序列有3种长度，分别为1116bp、1104bp、1098bp。与已发表的血清5型HPS SH0165的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列比较，广东分离株核苷酸同源性在90.5％～100％，氨基酸同源性在88.8％～100％；而四川菌株的核苷酸序列同源性，在90.8％～94.1％之间，氨基酸的同源性在89.9％～93.0％之间。进化树分析结果也表明，HPS omp5基因无论在不同血清型之间，还是不同地区之间都具有较高的同源性，说明OMP5蛋白比较保守，有望作为型间共用性抗原。

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新型可视化LAMP检测结核分枝杆菌与牛分枝杆菌方法的建立及初步应用

新型可视化LAMP检测结核分枝杆菌与牛分枝杆菌方法的建立及初步应...

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中国畜牧兽医学会生物制品学分会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会暨第三届中国兽药大会

作者：朱汝仪潘文王佳莹赵明秋琚春梅陈金顶华南农业大学兽医学院，广东广州 510642

究基于rimM(编码16S rRNA-加工蛋白)基因建立了一种新型的可视化环等温扩增(loop-mediatedisothermal amplification，LAMP)方法，用于快速检测结核分枝杆菌及牛分枝杆菌。这种新型可视化LAMP方法在反应体系中加入了钙黄绿素指示剂与氯...

究基于rimM(编码16S rRNA-加工蛋白)基因建立了一种新型的可视化环等温扩增(loop-mediatedisothermal amplification，LAMP)方法，用于快速检测结核分枝杆菌及牛分枝杆菌。这种新型可视化LAMP方法在反应体系中加入了钙黄绿素指示剂与氯化锰，64°C反应1h即可通过目测产物颜色而判断结果。反应模板中不含靶DNA的LAMP产物仍旧保持橙色，而具有靶DNA的LAMP产物则变为绿色。使用该方法对84株结核分枝杆菌及3株牛分枝杆菌进行检测均显示阳性结果，而在51株非结核分枝杆菌及9种其它常见菌株中均显示阴性结果，准确率和特异性均为100％。敏感性试验显示，该方法扩增基因组DNA的极限为1pg。扩增产物电泳图谱及HhaⅠ酶切分析验证了LAMP产物的特异性。这种新型可视化LAMP不但可以对细菌培养物进行检测，而且还能对痰液、血液、胸水等临床样品进行检测。研究表明，可视化LAMP具有快速、特异、敏感、无需昂贵仪器及结果可视化等优点，在临床检测结核分枝杆菌及牛分枝杆菌中的具有巨大的潜力。

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鸭肝炎病毒分子流行病学分析

鸭肝炎病毒分子流行病学分析

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中国畜牧兽医学会生物制品学分会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会暨第三届中国兽药大会

作者：袁率珍范书才李虹姜畔张兵中国兽医药品监察所，北京 100081

究用标准DHV-1抗血清和N-DHV抗血清对国内分离的7株DHV进行了血清中和试验。结果表明，PLK株和YB3株为DHV-1，YB1，YB2，YB5、HY2和HY3株为N-DHV。同时对国内分离的9株病毒的抗原相关VP1基因进行RT-PCR和测序。对VP1基因的核苷酸与推导...

究用标准DHV-1抗血清和N-DHV抗血清对国内分离的7株DHV进行了血清中和试验。结果表明，PLK株和YB3株为DHV-1，YB1，YB2，YB5、HY2和HY3株为N-DHV。同时对国内分离的9株病毒的抗原相关VP1基因进行RT-PCR和测序。对VP1基因的核苷酸与推导的氨基酸序列分析表明，3株DHV-1的氨基酸序列同源性为95％左右，6株N-DHV的氨基酸同源性为98％左右；DHV-1毒株与N-DHV毒株间氨基酸同源性为72～77％。参照同属微RNA病毒的人肠病毒的血清型分型标准，通过对DHV VP1基因序列同源性比较，判定9株病毒的血清型。依据VP1基因序列同源性进行的血清型分型结果与根据抗原性鉴定进行的血清型分型结果一致。同血清型病毒株间的VP1基因变异很小，说明DHV的抗原性稳定。同型不同毒株间VP1基因的差异，可以导致病毒在致病力、细胞感染能力等方面的差异。目前我国有两种独立的血清型DHV流行，且N-DHV更广泛。尚未见血清型亚型的流行。

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发酵罐培养中种子液最佳培养时间的确定

发酵罐培养中种子液最佳培养时间的确定

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中国畜牧兽医学会生物制品学分会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会暨第三届中国兽药大会

作者：杨国良张洪梁爽北京市兽医生物药品厂，北京 102600 百泰生物药业有限公司，北京 100176

：发酵罐培养中确定种子液的最佳培养时间。方法：本实验通过对C-Hpg-8菌株的种子液(37℃，200转/分)各个时间段活菌数、OD值以及接种后延滞期长短的参考，找到种子液的最佳培养时间以及OD值与活菌数的对应关系。结果：种子液在经过15...

：发酵罐培养中确定种子液的最佳培养时间。方法：本实验通过对C-Hpg-8菌株的种子液(37℃，200转/分)各个时间段活菌数、OD值以及接种后延滞期长短的参考，找到种子液的最佳培养时间以及OD值与活菌数的对应关系。结果：种子液在经过15～17小时的培养后，菌龄处于对数生长期，活菌数维持在较高水平，此时接种发酵罐后延滞期较短为最佳。同时，连续10罐分批培养和统计学分析结果表明，种子液在经过15～17小时的培养后，活菌数对数值和种子液延滞期长短标准偏差较小，实验结果较稳定。结论：①通过活菌数与延滞期的对应关系，找到该细菌对数期末为最佳(此时活菌数为最大值，且菌龄仍处于对数生长期)。从而确定种子液的最佳培养时间，优化整个发酵流程，使产物质量均一。同时有条件的企业也可通过连续培养的方法使生产发酵更加的快捷、方便。②通过OD值与活菌数的对应关系来快速的判定活菌数，找到相应的培养时间，优化生产工艺流程，对于一直困扰着各个企业成为生物制品行业发展瓶颈的批间差问题，对于现在各兽医生物药品企业的吨位级别上的发酵罐生产问题都有着重要参考意义。

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