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机构

13 篇 华南农业大学
12 篇 中国农业科学院哈...
12 篇 山东农业大学
8 篇 东北农业大学
6 篇 中国农业科学院哈...
6 篇 中国农业科学院哈...
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5 篇 中国农业科学院哈...
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3 篇 中国农业科学院哈...
3 篇 扬州大学
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3 篇 东北林业大学
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作者

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8 篇 刘长明
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5 篇 魏凯
5 篇 沈志强
5 篇 郭龙军
5 篇 王金良
5 篇 陆月华
5 篇 孙恩成
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5 篇 谭燕玲
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4 篇 秦立廷
4 篇 高宏雷
4 篇 王永强

语言

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鸡马立克病毒HC135分离株的致病性研究

鸡马立克病毒HC135分离株的致病性研究

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：张艳萍刘长军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室

辽宁省某鸡场疑似发生鸡马立克病,从发病鸡外周血淋巴细胞中分离到一株马立克病毒(MDV),经蚀斑克隆和细胞传代,成功培育了1株增殖性能稳定的MDV细胞毒株,命名为:HC135株。将HC135株第4代细胞培养物分别人工感染非免疫和不同疫苗免疫的SP... 详细信息

辽宁省某鸡场疑似发生鸡马立克病,从发病鸡外周血淋巴细胞中分离到一株马立克病毒(MDV),经蚀斑克隆和细胞传代,成功培育了1株增殖性能稳定的MDV细胞毒株,命名为:HC135株。将HC135株第4代细胞培养物分别人工感染非免疫和不同疫苗免疫的SPF鸡,分析其对鸡的致病力。分离毒株攻毒对照组鸡只的发病率为100%(10/10),死亡率为30%(3/10);HVT疫苗及HVT/SB1双价疫苗对分离毒株的保护指数分别为22.2%和40%。结果表明该毒株可以突破HVT疫苗和HVT/SB1双价疫苗的免疫保护,具有特超强毒株(vv+MDV)的特点;也证实了我国商业鸡群中存在vv+MDV毒株。同时比较了HC135株与14株参考毒株的Meq基因序列,发现其Meq基因的ORF内没有基因片段的插入或缺失,推导的氨基酸存在点突变,这种突变符合高毒力毒株的变异规律。

关键词：马立克病毒致病性 Meq基因分离毒株

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牛病毒性腹泻病毒Ⅰ型、猪瘟病毒野毒株和猪瘟病毒疫苗株多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光PCR方法的建立

牛病毒性腹泻病毒Ⅰ型、猪瘟病毒野毒株和猪瘟病毒疫苗株多重SYBR...

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：王伟符芳陈欣李雪松郎越坤田华彬张兴娟李曦中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室哈尔滨师范大学生命科学与技术学院东北农业大学

为建立可同时检测牛病毒性腹泻病毒-1型(BVDV-1)、猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒疫苗(C株)与CSFV野毒株的快速检测方法。根据GenBank中登录的上述3种病毒的全基因组序列,设计3对特异性多重引物,建立了同时检测BVDV-1、C株和CSFV野毒株的多重SY... 详细信息

为建立可同时检测牛病毒性腹泻病毒-1型(BVDV-1)、猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒疫苗(C株)与CSFV野毒株的快速检测方法。根据GenBank中登录的上述3种病毒的全基因组序列,设计3对特异性多重引物,建立了同时检测BVDV-1、C株和CSFV野毒株的多重SYBR Green-I实时荧光PCR方法。敏感性试验结果表明,本方法能检测到3种病毒的最低病毒含量均为100拷贝/μL;特异性实验结果表明,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PrV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、乙型脑炎病毒(JEV),均呈阴性;通过批内及批间的重复试验,其变异系数<1%。该方法具有很强的特异性、很高的灵敏度、很好的重复性。

关键词： SYBR Green-I实时荧光PCR 牛病毒性腹泻病毒-1型猪瘟病毒野毒株猪瘟兔化弱毒疫苗株

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猪流行性腹泻病毒的分子流行病学研究

猪流行性腹泻病毒的分子流行病学研究

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：陈建飞王承宝时洪艳陈小金张志榜冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

自2006年初起,猪流行性腹泻病毒(PEDV)开始在免疫猪群中再度出现。开放阅读框3(ORF3)是PEDV基因组中的唯一辅助基因。12株PEDV野毒株和一株疫苗株的全长ORF3基因被测序。PEDV野毒株(除CH/GSJIII/07外)的ORF3基因包含一个672或675个核苷... 详细信息

自2006年初起,猪流行性腹泻病毒(PEDV)开始在免疫猪群中再度出现。开放阅读框3(ORF3)是PEDV基因组中的唯一辅助基因。12株PEDV野毒株和一株疫苗株的全长ORF3基因被测序。PEDV野毒株(除CH/GSJIII/07外)的ORF3基因包含一个672或675个核苷酸开放阅读框,编码一个223或224个氨基酸长的多肽。然而,由于在245位～293位缺失49个核苷酸,CV777疫苗株和CH/GSJIII/07株包含一个由276个核苷酸组成的开放阅读框。根据ORF3基因的系统发育关系,中国PEDV野毒株和PEDV参考株被分为3个群。中国PEDV野毒株(除CH/GSJIII/07外)和韩国毒株有着密切的亲缘关系,而与疫苗株的遗传关系不同。然而,CH/GSJIII/07和两个疫苗株的亲缘关系近,它可能是从疫苗株演化而来。利用套式RT-PCR方法可以将中国PEDV野毒株感染(除CH/GSJIII/07外)与疫苗株区分开。

关键词：猪流行性腹泻病毒系统发育关系 ORF3基因新基因型套式RT-PCR

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蛋鸡J亚群禽白血病病毒株HB09JY03的分离鉴定及全基因组序列分析

蛋鸡J亚群禽白血病病毒株HB09JY03的分离鉴定及全基因组序列分析

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：潘伟高玉龙秦立廷祁小乐高宏雷孙芬芬王永强王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室

利用DF-1细胞系、ELISA抗原检测以及亚群特异性间接免疫荧光法,从湖北某鸡场送检商品代蛋鸡病料中分离并鉴定出一株J亚群禽白血病病毒(命名为HB09JY03),并对其进行了全基因组测序。与GenBank中发表ALV-J序列比较结果表明,HB09JY03分离株... 详细信息

利用DF-1细胞系、ELISA抗原检测以及亚群特异性间接免疫荧光法,从湖北某鸡场送检商品代蛋鸡病料中分离并鉴定出一株J亚群禽白血病病毒(命名为HB09JY03),并对其进行了全基因组测序。与GenBank中发表ALV-J序列比较结果表明,HB09JY03分离株gag和pol基因非常保守,与国内外ALV-J分离株同源性为97.5%～99.0%;env基因表现出一些变异,各毒株间同源性为88.4%～97.5%;而其3′UTR变异较大,出现部分rTM区段缺失现象。遗传进化分析表明,该毒株与英国ALV-J原型株HPRS-103亲缘关系最近。本研究将为该毒株的生物学特性及引起蛋鸡发病机制研究奠定基础。

关键词： J亚群禽白血病病毒蛋鸡分离鉴定全基因组序列分析

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猪瘟病毒(CSFV)NS2蛋白抑制MG132诱导的细胞凋亡作用

猪瘟病毒(CSFV)NS2蛋白抑制MG132诱导的细胞凋亡作用

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：唐青海张彦明郭抗抗何雷范丽仝刚代晨西北农林科技大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

为研究猪瘟病毒(CSFV)NS2蛋白对宿主细胞凋亡的影响,本研分别将CSFV NS2基因和E2基因与GFP在猪血管内皮细胞中进行融合表达,以MG132为细胞凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并采用流式细胞仪和Hoechst33342染色方法检测细胞凋亡率。结果表明,MG13... 详细信息

为研究猪瘟病毒(CSFV)NS2蛋白对宿主细胞凋亡的影响,本研分别将CSFV NS2基因和E2基因与GFP在猪血管内皮细胞中进行融合表达,以MG132为细胞凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并采用流式细胞仪和Hoechst33342染色方法检测细胞凋亡率。结果表明,MG132能够诱导正常猪血管内皮细胞及稳定表达CSFV E2蛋白和GFP蛋白的细胞株的凋亡,而且,凋亡率呈MG132剂量依赖性增加。而稳定表达CSFV NS2蛋白的细胞株能够对抗MG132诱导的细胞凋亡。深入的研究还显示,表达CSFV NS2蛋白的细胞株能够对抗MG132对宿主细胞NF-κB活性的抑制作用,而且,表达NS2蛋白细胞中的抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量比照组细胞增加了48倍～51倍。该研究表明,CSFV NS2蛋白在抑制宿主细胞凋亡中发挥重要作用。

关键词：猪瘟病毒 NS2蛋白 MG132 凋亡 Bcl-2

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J亚群禽白血病病毒gp85基因在杆状病毒中的表达及鉴定

J亚群禽白血病病毒gp85基因在杆状病毒中的表达及鉴定

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：倪伟秦立廷高玉龙潘伟祁小乐高宏雷王永强王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验/禽传染病研究室

为获得J亚群禽白血病病毒的gp85蛋白,将ALV-J的gp85基因克隆至载体pFastBac-HTA中,构建重组转座载体pFgp85,并将其转化DH10大肠杆菌感受态细胞,使gp85基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体Bacgp85。通过脂质体介导将重组穿梭载... 详细信息

为获得J亚群禽白血病病毒的gp85蛋白,将ALV-J的gp85基因克隆至载体pFastBac-HTA中,构建重组转座载体pFgp85,并将其转化DH10大肠杆菌感受态细胞,使gp85基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体Bacgp85。通过脂质体介导将重组穿梭载体转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBac-gp85。通过western blot和IFA,分析结果表明ALV-J gp85蛋白在Sf9昆虫细胞中获得正确表达,所表达的重组gp85蛋白分子量约为38 ku。ALV-J gp85重组蛋白在Sf9细胞中的表达为其功能研究和应用研究提供了良好的基础。

关键词： J亚群禽白血病病毒 gp85基因杆状病毒表达

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日本乙型脑炎病毒感染对小鼠脾脏的病理损伤

日本乙型脑炎病毒感染对小鼠脾脏的病理损伤

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：孙艳芳蒋蓉栗永茂彭克美曹胜波华中农业大学动物医学院

日本乙型脑炎病毒(乙脑病毒)是一种典型的嗜神经病毒。然而,乙脑病毒如何伪装自己,在外周组织繁殖并逃避免疫监视,最终突破血脑屏障的机制仍不清楚。脾脏作为体内最大的免疫器官,乙脑病毒对其到底有无病理损伤,目前尚无定论。本研究,通... 详细信息

日本乙型脑炎病毒(乙脑病毒)是一种典型的嗜神经病毒。然而,乙脑病毒如何伪装自己,在外周组织繁殖并逃避免疫监视,最终突破血脑屏障的机制仍不清楚。脾脏作为体内最大的免疫器官,乙脑病毒对其到底有无病理损伤,目前尚无定论。本研究,通过皮下接种乙脑病毒后,隔日收获小鼠脾脏,进行组织学及免疫组织化学观察。组织学结果发现病毒感染导致小鼠脾脏白髓变小,红髓增大。免疫组织化学结果发现病毒感染导致脾脏中T淋巴细胞在脾脏中的分布变得分散,T淋巴细胞在脾脏的数量先减少后增多继而明显减少,且神经症状出现在脾脏T细胞增多的后期。T淋巴细胞的曲线变化提示乙脑病毒引起脾脏的细胞免疫反应,使得T细胞数量发生改变。神经症状出现在T细胞增多的后期提示神经症状可能出现在脾脏免疫反应活跃期之后的免疫功能衰减期。T淋巴细胞在8 d～10 d的显著减少提示乙脑病毒可能促使趋化因子产生,促进T淋巴细胞进入脑。

关键词：日本乙型脑炎病毒脾脏病理 T细胞

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SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测猪瘟疫苗病毒含量的研究

SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测猪瘟疫苗病毒含量的研究

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：李安沈志强崔言顺谢金文王金良李建亮李峰山东省滨州畜牧兽医研究院山东农业大学动物科技学院

为建立一种能够快速定量检测猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量的实时荧光定量RT-PCR方法。对GenBank中登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析,在其高度保守的5′端非编码区设计一对针对猪瘟兔化弱毒疫苗的特异性引... 详细信息

为建立一种能够快速定量检测猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量的实时荧光定量RT-PCR方法。对GenBank中登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析,在其高度保守的5′端非编码区设计一对针对猪瘟兔化弱毒疫苗的特异性引物,扩增片段为245 bp,且不与牛病毒性腹泻病毒以及其它猪源病毒发生非特异性反应。应用本方法对16份猪瘟脾淋苗和细胞苗进行定量检测,结果表明10～2 copies/L的总RNA即能得到特异性扩增,在10～7 copies/L～10～2 copies/L线性范围内有良好的扩增曲线,并与兔体定型热反应有良好的相关性。该法具有敏感、特异、重复性好等优点,可望取代传统的兔热法用于猪瘟疫苗生产过程中的效价测定及指导疫苗的配制,也为猪瘟病毒分子生物学研究提供一种新的有效工具。

关键词：猪瘟猪瘟病毒荧光定量定量检测

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2009年湖北省鸡J亚群白血病的初步调查分析

2009年湖北省鸡J亚群白血病的初步调查分析

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：罗青平张蓉蓉邵璐璐温国元杨峻杨前平邵华斌湖北省农科院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室

2009年J亚群禽白血病在湖北蛋鸡场流行。为了探索其主要流行特点,对湖北省发病严重的4个县市进行了系统的流行病学调查,从18个商品代发病鸡场采集组织病料211份,从8个父母代种鸡场采集血清样本340份,采用禽J亚群白血病、马立克、鸡传染... 详细信息

2009年J亚群禽白血病在湖北蛋鸡场流行。为了探索其主要流行特点,对湖北省发病严重的4个县市进行了系统的流行病学调查,从18个商品代发病鸡场采集组织病料211份,从8个父母代种鸡场采集血清样本340份,采用禽J亚群白血病、马立克、鸡传染性贫血和网状内皮增生症等特异性引物,进行PCR检测。调查发现:此次疫情主要因从北方某3个祖代场引进父母代种鸡而传入湖北;父母代蛋鸡一般不表现症状,商品代蛋鸡发病率在0.1%～46%;主要是蛋鸡海兰褐和立克粉两个品种发病;存在与鸡传染性贫血病和网状内皮增生症的混合感染现象。由于此病主要发生在100日龄左右的鸡(性成熟时期),因此发病鸡场经济损失严重。

关键词：禽白血病 J亚群白血病流行病学调查

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不同发育时期旋毛虫脂肪酸组成的研究

不同发育时期旋毛虫脂肪酸组成的研究

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：赵风强路义鑫韩彩霞张晓波兰静宋铭忻东北农业大学动物医学学院黑龙江省农业科学院

为探讨旋毛虫生长发育过程中脂肪酸组分的变化及外界环境对其影响,本研究采用贝尔曼氏装置分别收集旋毛虫肌幼虫和成虫,同时,将少量骨骼肌和肠黏膜进行酯化处理,通过气相色谱质谱联用技术(GC-MS)进行分析。结果显示:肌幼虫和成虫的脂肪... 详细信息

为探讨旋毛虫生长发育过程中脂肪酸组分的变化及外界环境对其影响,本研究采用贝尔曼氏装置分别收集旋毛虫肌幼虫和成虫,同时,将少量骨骼肌和肠黏膜进行酯化处理,通过气相色谱质谱联用技术(GC-MS)进行分析。结果显示:肌幼虫和成虫的脂肪酸组分涵盖了C12～C22的22种,主要为16、18和20碳脂肪酸,但旋毛虫肌幼虫与成虫与各脂肪酸相对含量有明显差异(p<0.05)。分别对旋毛虫肌幼虫和成虫与其各自寄生部位骨骼肌和肠黏膜中的脂肪酸组分进行比较分析,结果显示:各脂肪酸组成相似,但在相对含量上却有显著差异(p<0.05)。结果表明,不同发育时期旋毛虫的脂肪酸组成在种类和相对含量上均存在明显差异,这可能与其所处的宿主环境不同和不同发育时期虫体的特殊生理结构有关。

关键词：旋毛虫脂肪酸 GC-MS

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