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120 篇 会议
2 篇 期刊文献

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110 篇 农学
- 98 篇 兽医学
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10 篇 理学
- 10 篇 生物学
6 篇 工学
- 6 篇 生物工程
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- 1 篇 临床医学
- 1 篇 药学(可授医学、理...
- 1 篇 医学技术（可授医学...
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主题

11 篇 禽流感病毒
10 篇 表达
8 篇 新城疫病毒
8 篇 序列分析
7 篇 克隆
7 篇 猪瘟病毒
6 篇 禽流感
6 篇 单克隆抗体
5 篇 免疫
5 篇 核酸疫苗
4 篇 f基因
4 篇 重组鸡痘病毒
4 篇 原核表达
4 篇 纯化
4 篇 伪狂犬病病毒
4 篇 rt-pcr
4 篇 dna疫苗
4 篇 猪繁殖与呼吸综合...
3 篇 免疫原性
3 篇 猪圆环病毒2型

机构

13 篇 中国农业科学院哈...
12 篇 南京农业大学
11 篇 中国农业科学院哈...
9 篇 东北农业大学
6 篇 农业部动物检疫所...
6 篇 中国农业科学院哈...
6 篇 解放军军事医学科...
5 篇 军事医学科学院军...
5 篇 江西农业大学
5 篇 沈阳农业大学
5 篇 成都军区联勤部军...
4 篇 上海市农业科学院...
4 篇 中国农业大学
4 篇 扬州大学
4 篇 农业部动物检疫所
3 篇 韶关学院
3 篇 农业部动物检疫所...
3 篇 解放军军事医学科...
3 篇 华中农业大学
3 篇 云南省热带亚热带...

作者

18 篇 王志亮
10 篇 陈化兰
8 篇 王秀荣
7 篇 于康震
7 篇 孔宪刚
7 篇 童光志
6 篇 刘雨田
6 篇 鲍恩东
6 篇 金宁一
6 篇 刘思国
6 篇 王春来
6 篇 吴晓东
6 篇 夏咸柱
5 篇 郑颖
5 篇 杨美峰
5 篇 邱薇
5 篇 刘胜旺
5 篇 李作生
5 篇 李江
5 篇 张秀华

语言

119 篇 中文
3 篇 英文

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伪狂犬病病毒闽A株糖蛋白gC基因全序列的克隆与分析

伪狂犬病病毒闽A株糖蛋白gC基因全序列的克隆与分析

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：娄高明敖敬群廖筱萍王殉章韶关学院英东生物工程学院中山大学生物防治国家重点实验室韶关学院英东生物工程学院中山大学生物防治国家重点实验室

根据伪狂犬病病毒Becker株的gC基因序列,设计并合成了1对特异性引物,通过PCR方法从我国伪狂犬病病毒代表毒株Fa株的基因组DNA中扩增到了1条约1.6 kb的片段。将PCR扩增产物纯化后克隆到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌,筛选阳性重组质粒。通... 详细信息

根据伪狂犬病病毒Becker株的gC基因序列,设计并合成了1对特异性引物,通过PCR方法从我国伪狂犬病病毒代表毒株Fa株的基因组DNA中扩增到了1条约1.6 kb的片段。将PCR扩增产物纯化后克隆到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌,筛选阳性重组质粒。通过酶切鉴定,初步证明重组质粒pMD18-T-FC包含PCR扩增产物。将此重组质粒进行测序并与报道的gC基因序列比较,确证重组质粒pMD18-T-FC含有PRV Fa株gC基因。此区段与PRVBecker株gC基因的DNA序列同源性为94.7%,推导的氨基酸序列同源性为92.2%。蛋白结构域分析显示PRV Fa株gC糖蛋白具有典型的膜蛋白结构特征。

关键词：伪狂犬病病毒 gC基因 PCR扩增基因克隆序列分析

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基于actA基因的产单核细胞李斯特菌遗传谱系研究

基于actA基因的产单核细胞李斯特菌遗传谱系研究

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：周晓辉焦新安扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院

目的探讨产单核细胞李斯特菌(Lm)的actA基因3’末端核苷酸序列作为其遗传谱系分析的可能性,及中国与美国的Lm分离株遗传进化的关系。方法采用特异性引物扩增40株食品、污水及临床分离株actA基因3’末端597bp的核苷酸序列,所获得的DNA序... 详细信息

目的探讨产单核细胞李斯特菌(Lm)的actA基因3’末端核苷酸序列作为其遗传谱系分析的可能性,及中国与美国的Lm分离株遗传进化的关系。方法采用特异性引物扩增40株食品、污水及临床分离株actA基因3’末端597bp的核苷酸序列,所获得的DNA序列用于(1)Lm遗传谱系的建立并将其分为不同的actA基因型;(2)比较中国Lm分离株与美国分离株Lm的actA基因型与遗传谱系的差异。结果40株Lm中国分离株可分为两个遗传谱系(谱系Ⅰ和谱系Ⅱ),其中谱系Ⅰ包括14株,谱系Ⅱ包括26株。26株谱系Ⅱ的菌株又可被分为两个亚群(ⅡA和ⅡB)。与15株已发表的美国分离株序列比较发现中国分离株与美国分离株的谱系相一致,在40株中国分离株中有14个actA基因型,其中有两个与美国分离株的actA基因型相同。结论actA基因3’末端核苷酸序列适合于Lm的谱系分析,且中国分离株与美国分离株具有较大的相似性,Lm的克隆组群可能在全球范围内存在。

关键词： actA基因遗传谱系产单核细胞李斯特菌

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检测H1-15禽流感病毒亚型的DNA芯片初步研究

检测H1-15禽流感病毒亚型的DNA芯片初步研究

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

本文对流感病毒14个血凝素亚型的基因芯片检测技术进行了初步研究。通过RT-PCR克隆禽流感病毒血凝素基因片段,获得重组质粒。从重组质粒扩增大约500 bp的DNA片段,浓缩后点到氨基化玻璃载体上,制成芯片。待检病毒样品用Trozol LS提取RNA... 详细信息

本文对流感病毒14个血凝素亚型的基因芯片检测技术进行了初步研究。通过RT-PCR克隆禽流感病毒血凝素基因片段,获得重组质粒。从重组质粒扩增大约500 bp的DNA片段,浓缩后点到氨基化玻璃载体上,制成芯片。待检病毒样品用Trozol LS提取RNA,反转录过程中用Cy5标记样品cDNAs。将标记样品与芯片杂交,扫描芯片上待检样品与芯片上捕捉探针的结合位点,杂交信号与预期设想一致。结果显示,DNA芯片技术可以提供一种有效的AIV血凝素亚型鉴别诊断方法。

关键词：禽流感病毒基因芯片血凝素亚型鉴定

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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白的表达及其单克隆抗体的制备

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白的表达及其单克隆抗体的制备

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

将猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)CH-1a株GP5蛋白编码基因的信号肽序列删除后,克隆于pGEX-6p-1载体中,转化大肠杆菌,并进行诱导表达。经SDS-PAGA分析发现,表达的重组融合蛋白rtGP5大小约42 kDa,Westernblot分析证实,重组蛋白能被PRRSV... 详细信息

将猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)CH-1a株GP5蛋白编码基因的信号肽序列删除后,克隆于pGEX-6p-1载体中,转化大肠杆菌,并进行诱导表达。经SDS-PAGA分析发现,表达的重组融合蛋白rtGP5大小约42 kDa,Westernblot分析证实,重组蛋白能被PRRSV抗血清所识别。收获融合表达的rtGP5,按50μg/只的剂量与等量弗氏佐剂乳化后,经腹腔接种BALB/c小鼠,免疫3次后,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用rtGP5作为包被抗原,通过间接ELISA方法筛选阳性克隆,结果获得了15株能稳定分泌抗rtGP5蛋白抗体的杂交瘤细胞株。间接免疫荧光检测结果发现,所获得的15株单克隆抗体都能与PRRSV感染细胞产生特异性免疫荧光。亚型鉴定结果显示,15株单克隆抗体均为IgG1型,其轻链均为κ链。本研究获得的单克隆抗体将为今后深入研究PRRSV病毒结构和功能,分析GP5蛋白的抗原表位,设计有效的新型疫苗等提供有益帮助。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5蛋白单克隆抗体

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不同致病力禽流感病毒的细胞生长特性

不同致病力禽流感病毒的细胞生长特性

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：刘丽玲王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室

本研究用2个不同亚型的AIV感染Madin-Darby canine kidney(MDCK)细胞,通过观察细胞病变、红细胞凝集实验、间接免疫荧光等探讨不同致病力禽流感病毒(AIV)在MDCK细胞上的生长特性;同时取这2株不同浓度(10-2-10-7)AIV在MDCK上培养72 h的... 详细信息

本研究用2个不同亚型的AIV感染Madin-Darby canine kidney(MDCK)细胞,通过观察细胞病变、红细胞凝集实验、间接免疫荧光等探讨不同致病力禽流感病毒(AIV)在MDCK细胞上的生长特性;同时取这2株不同浓度(10-2-10-7)AIV在MDCK上培养72 h的细胞培养上清0.1 mL接种于9-11日龄鸡胚尿囊腔,37℃孵育48h-72h,无菌收获尿囊液,再做红细胞凝集实验。结果显示:这2个亚型AIV感染MDCK细胞后,血凝价(HA)最高为27,表现为较低的红细胞凝集活性,高致病力禽流感病毒(HPAIV)红细胞凝集活性较低致病力禽流感病毒(LPAIV)出现的要早一些;上述2个亚型AIV的MDCK培养上清接种鸡胚48-72h后,HA较高,在25.5-210之间,而且HPAIV-A/Goose/Guang-dong/1/96高于LPAIV-A/Turkey/England/N28/73 。这2株AIV均可致MDCK细胞发生病变,但病变程度和病变出现的时间不同,A/Goose/Guangdong1/96[H5N1]憾染MDCK细胞后3d可见明显病变,A/Turkey/England/N28/73[H5N2]感染MDCK细胞后4-5d可见明显病变;2个亚型不同浓度(10-2-10-7)AIV的间接免疫荧光结果均为阳性。以上结果表明HPAIV和LPAIV可致MDCK细胞病变,但红细胞凝集活性较低,接种鸡胚后红细胞凝集活性显著提高。

关键词：禽流感病毒 MDCK细胞红细胞凝集活性间接免疫荧光

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广西禽白血病病毒流行毒株的分子鉴定和分型研究

广西禽白血病病毒流行毒株的分子鉴定和分型研究

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：张爱玲韦平李斌李康然广西大学养禽与禽病研究所广西大学养禽与禽病研究所广西大学养禽与禽病研究所广西大学养禽与禽病研究所

从鸡分离的禽白血病病毒(ALV)包括外源性的A、B、C、D、J亚群和内源性的E亚群共6个亚群。自然感染中A、B亚群最常见,J亚群则发现较晚,E亚群是普遍存在的内源性病毒。本研究应用自己建立的禽肿瘤病快速鉴别诊断技术,对临床送检的苍白消... 详细信息

从鸡分离的禽白血病病毒(ALV)包括外源性的A、B、C、D、J亚群和内源性的E亚群共6个亚群。自然感染中A、B亚群最常见,J亚群则发现较晚,E亚群是普遍存在的内源性病毒。本研究应用自己建立的禽肿瘤病快速鉴别诊断技术,对临床送检的苍白消瘦、有肿瘤病变或肝脾肿大的患鸡病料或本实验室保存的可疑肿瘤DNA样品共250份进行ALV的检测。结果共鉴定出32份有外源性白血病病毒感染的样品,阳性率达到12.8%;同时对这32份样品进行马立克氏病病毒(MDV)的检测,结果阳性率高达93.75%。表明MDV与ALV之间在感染与发病方面存在着密切的关系。应用内、外源性禽白血病病毒共用的一对扩增囊膜蛋白gp85基因的引物,分别对外源性ALV阳性的DNA样品以及普通鸡胚CEF抽提的。DNA进行PCR扩增,并运用不同的限制性内切酶BglII,BamHI和SspI对扩增的产物进行分型。结果发现,32份外源性ALV阳性的样品及普通鸡胚样品均可扩增到大小为1.26 kb的目的产物,而且外源性ALV的产物可用对A亚群特

关键词：禽白血病病毒亚群囊膜蛋白gp85基因 PCR/RFLP技术分型

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新城疫病毒融合蛋白在转基因水稻叶片中的表达及其免疫原性

新城疫病毒融合蛋白在转基因水稻叶片中的表达及其免疫原性

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：杨振泉刘巧泉于恒秀潘志明焦新安扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院扬州大学江苏省植物功能基因组学重点实验室扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院

利用转基因植物作为生物反应器表达抗原蛋白具有广阔的应用前景。本研究以新城疫病毒融合蛋白(NDVF)基因1.7 kb全长编码区序列为外源基因与组成型表达的玉米泛素蛋白基因(Ubi)启动子和农杆菌胭脂碱合成酶基因(nos)终止子组成嵌合基因,... 详细信息

利用转基因植物作为生物反应器表达抗原蛋白具有广阔的应用前景。本研究以新城疫病毒融合蛋白(NDVF)基因1.7 kb全长编码区序列为外源基因与组成型表达的玉米泛素蛋白基因(Ubi)启动子和农杆菌胭脂碱合成酶基因(nos)终止子组成嵌合基因,构建了适宜于农杆菌介导转化水稻的转化载体pUNDV,经根癌农杆菌介导的遗传转化方法将由Ubi启动子驱动的NDV F嵌合基因导入水稻细胞中,经潮霉素抗性筛选,共再生获得了6个独立的转基因株系。PCR分析结果表明NDV F基因已整合到水稻基因组中。ELISA和Western blot分析结果证实NDV F蛋白在部分转基因水稻叶片组织中获得表达,其中植株F5叶片组织中具有较高的表达水平。将F5叶片可溶性总蛋白皮下注射免疫BALB/c小鼠,结果表明能够诱导小鼠产生一定水平的NDV F蛋白特异抗体。

关键词：新城疫病毒 F基因转基因水稻免疫

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鸡传染性支气管炎病毒S1基因和鸡Ⅱ型干扰素基因在重组鸡痘病毒中的共表达

鸡传染性支气管炎病毒S1基因和鸡Ⅱ型干扰素基因在重组鸡痘病毒中...

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：孙永科田占成王云峰童光志智海东刘胜旺王玫杨增岐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室西北农林科技大学动物科技学院

将鸡Ⅱ型干扰素(ChIFN γ)基因和鸡传染性支气管炎病毒S1基因同时插入到鸡痘病毒转移载体中,构建含有这两个基因的鸡痘病毒转移载体pSY—ChIFN γS1。采用脂质体法将该质粒转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF),经过8轮蓝斑筛选,得到... 详细信息

将鸡Ⅱ型干扰素(ChIFN γ)基因和鸡传染性支气管炎病毒S1基因同时插入到鸡痘病毒转移载体中,构建含有这两个基因的鸡痘病毒转移载体pSY—ChIFN γS1。采用脂质体法将该质粒转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF),经过8轮蓝斑筛选,得到纯化的能够同时表达鸡Ⅱ型干扰素和鸡传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒rFPV—ChIFN γS1。rFPV—ChIFNγS1接种28日龄的SPF鸡1 w后,可以检测到针对传染性支气管炎病毒S1基因的ELISA抗体,重组病毒接种鸡的CD4+、CD8+和γδTCR阳性T淋巴细胞的百分比含量显著高于非免疫对照鸡(P<0.05);免疫4 w后用传染性支气管炎LX4强毒株攻击,rFPV—ChIFN γS1免疫组仅有1只出现轻微的呼吸道症状(1/16),而非免疫对照组则有15只发病(15/16),并有2只出现死亡(2/16)。从动物实验的结果可以看出,rF—PV—ChIFN γS1对接种鸡可以产生良好的保护效果。

关键词：传染性支气管炎病毒鸡Ⅱ型干扰素重组鸡痘病毒

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尼帕病毒核蛋白基因(N)的表达及其抗原性研究

尼帕病毒核蛋白基因(N)的表达及其抗原性研究

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：肖昌徐兴然涂长春解放军军事医学科学院军事兽医研究所解放军军事医学科学院军事兽医研究所解放军军事医学科学院军事兽医研究所

亨得拉病毒(Hendra virus,HeV)和尼帕病毒(Nipah virus,NiV)分别是1994年和1998年在澳大利亚和马来西亚发现的两种新的副粘病毒,对人畜具有很高的致病性和病死率。为防范这两种新发传染病在我国的发生,我们从引进的带有尼帕病毒N基因的... 详细信息

亨得拉病毒(Hendra virus,HeV)和尼帕病毒(Nipah virus,NiV)分别是1994年和1998年在澳大利亚和马来西亚发现的两种新的副粘病毒,对人畜具有很高的致病性和病死率。为防范这两种新发传染病在我国的发生,我们从引进的带有尼帕病毒N基因的质粒上扩增得到目的基因,将其克隆到原核表达载体pET28a上,成功地构建了原核表达质粒,将构建好的含NiVN基因的表达质粒和本实验室先前构建的含HeVN基因的表达质粒分别转化到B121(DE3)、BL21(DE3)pLysS、JM109(DE3)表达菌感受态细胞,结果两种目的基因在JM109(DE3)大肠杆菌中能得到很好的表达,且在63KD处能观察到特异性的目的蛋白条带,两种重组蛋白均以包含体的形式存在。在变性条件下,通过His-Tag亲和层析柱可将两种蛋白纯化。通过间接ELISA和Western—Blotting检测表明,重组尼帕病毒N蛋白和亨得拉病毒N蛋白均可以同时被兔抗尼帕全病毒血清和兔抗亨得拉全病毒血清所识别,表明这两种病毒的N蛋白具有交叉反应性,这与两种蛋白具有高度的氨基酸同源性相一致。本实验所表达的重组NiV N蛋白可进一步应用于对病毒的流行病学调查和制备相关的检测试剂。

关键词：尼帕病毒核蛋白基因抗原性

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口蹄疫病毒三价核酸疫苗分子设计与免疫原性研究

口蹄疫病毒三价核酸疫苗分子设计与免疫原性研究

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：马鸣潇金宁一霍晓伟金明兰沈国顺解放军军事医学科学院全军基因工程重点实验室解放军军事医学科学院全军基因工程重点实验室解放军军事医学科学院全军基因工程重点实验室解放军军事医学科学院全军基因工程重点实验室解放军军事医学科学院全军基因工程重点实验室

随着对抗原分子的一级结构、空间构象的深入研究及分子免疫学的快速发展,人们逐渐认识到并不是蛋白质的所有成份都能刺激机体产生有效的免疫反应,全蛋白基因中包含有多种不同抗原表位、调控序列、免疫抑制序列和免疫病理序列。为增强疫... 详细信息

随着对抗原分子的一级结构、空间构象的深入研究及分子免疫学的快速发展,人们逐渐认识到并不是蛋白质的所有成份都能刺激机体产生有效的免疫反应,全蛋白基因中包含有多种不同抗原表位、调控序列、免疫抑制序列和免疫病理序列。为增强疫苗的免疫效果同时减少免疫抑制序列及免疫病理序列的负面作用。在详尽了解FMDV分子结构及其生物功能,分析病毒抑制宿主免疫应答的分子成分,及激活宿主免疫细胞产生保护性免疫应答(中和抗体和CTL)的基础上。通过PCR方法获得O型FMDV主要结构蛋白VP1基因,以基因合成的方式获得A型FMDV VP1基因、含有Asia Ⅰ型FMDV VP1上的主要抗原表位基因和Th2细胞表位的非结构蛋白3ABC部分基因,将以上四个基因串联,组装FMDV主要流行毒株O型、A型和AsiaI三价复合多表位基因OAAT,以真核表达质粒pVAX1为载体,构建了以O型、A型FMDV主要结构蛋白VP1基因和AsiaI型FMDV主要结构蛋白VP1上的主要抗原表位基因为基础,以非结构蛋白3ABC及结构蛋白VP4上的抗原提呈表位为辅助基因,以真核表达载体pVAX1为载体分子,对抗原基因进行人工分子设计并辅以计算机模拟来研制新型FMDV基因工程疫苗,以期获得针对不同血清型和不同流行株的安全高效复合多表位DNA疫苗。

关键词：口蹄疫病毒免疫病理免疫抑制核酸疫苗免疫原性分子设计

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