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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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文献类型

120 篇 会议
2 篇 期刊文献

馆藏范围

122 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

110 篇 农学
- 98 篇 兽医学
- 7 篇 作物学
- 5 篇 畜牧学
10 篇 理学
- 10 篇 生物学
6 篇 工学
- 6 篇 生物工程
6 篇 医学
- 4 篇 基础医学(可授医学...
- 1 篇 临床医学
- 1 篇 药学(可授医学、理...
- 1 篇 医学技术（可授医学...
1 篇 管理学
- 1 篇 图书情报与档案管...

主题

11 篇 禽流感病毒
10 篇 表达
8 篇 新城疫病毒
8 篇 序列分析
7 篇 克隆
7 篇 猪瘟病毒
6 篇 禽流感
6 篇 单克隆抗体
5 篇 免疫
5 篇 核酸疫苗
4 篇 f基因
4 篇 重组鸡痘病毒
4 篇 原核表达
4 篇 纯化
4 篇 伪狂犬病病毒
4 篇 rt-pcr
4 篇 dna疫苗
4 篇 猪繁殖与呼吸综合...
3 篇 免疫原性
3 篇 猪圆环病毒2型

机构

13 篇 中国农业科学院哈...
12 篇 南京农业大学
11 篇 中国农业科学院哈...
9 篇 东北农业大学
6 篇 农业部动物检疫所...
6 篇 中国农业科学院哈...
6 篇 解放军军事医学科...
5 篇 军事医学科学院军...
5 篇 江西农业大学
5 篇 沈阳农业大学
5 篇 成都军区联勤部军...
4 篇 上海市农业科学院...
4 篇 中国农业大学
4 篇 扬州大学
4 篇 农业部动物检疫所
3 篇 韶关学院
3 篇 农业部动物检疫所...
3 篇 解放军军事医学科...
3 篇 华中农业大学
3 篇 云南省热带亚热带...

作者

18 篇 王志亮
10 篇 陈化兰
8 篇 王秀荣
7 篇 于康震
7 篇 孔宪刚
7 篇 童光志
6 篇 刘雨田
6 篇 鲍恩东
6 篇 金宁一
6 篇 刘思国
6 篇 王春来
6 篇 吴晓东
6 篇 夏咸柱
5 篇 郑颖
5 篇 杨美峰
5 篇 邱薇
5 篇 刘胜旺
5 篇 李作生
5 篇 李江
5 篇 张秀华

语言

119 篇 中文
3 篇 英文

检索条件"任意字段=中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会"

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多重RT-PCR快速检测鉴别H5、H7和H9亚型AIV方法的建立

多重RT-PCR快速检测鉴别H5、H7和H9亚型AIV方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：谢芝勋庞耀珊刘加波邓显文唐小飞广西兽医研究所广西兽医研究所广西兽医研究所广西兽医研究所广西兽医研究所

参考AIV M基因和HA基因序列,设计了四对引物,其中一对为针对不同HA亚型AIV的通用引物,另外为三对分别针对H5、H7和H9亚型AIV的特异性引物。这些引物所扩增的cDNA片段大小分别为244 bp、860 bp、634 bp和488 bp。利用这些引物,通过对多重... 详细信息

参考AIV M基因和HA基因序列,设计了四对引物,其中一对为针对不同HA亚型AIV的通用引物,另外为三对分别针对H5、H7和H9亚型AIV的特异性引物。这些引物所扩增的cDNA片段大小分别为244 bp、860 bp、634 bp和488 bp。利用这些引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,成功建立了快速检测鉴别H5、H7和H9亚型AIV的多重RT-PCR技术。特异性和敏感性试验结果表明,该技术可以同时对AIV M基因和H5、H7、H9亚型AIV HA基因进行扩增,分别得到244 bp、860 bp、634 bp和488 bp四条cDNA扩增片断,对其它常见禽病病原无特异性扩增,结果为阴性;该多重RT-PCR对AIV RNA的最低检出量为10 pg,对H5、H7和H9亚型AIV RNA的最低检出量均为100 pg。

关键词：多重反转录聚合酶链反应禽流感病毒 H5亚型 H7亚型 H9亚型

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PRRSV GP5蛋白的高效表达、纯化与结构分析

PRRSV GP5蛋白的高效表达、纯化与结构分析

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：黄金海杨汉春郭鑫陈艳红韩军中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室

应用不同引物将PRRS BJ-4毒株ORF5缺失信号肽的dE基因及其缺失突变体dEM分别克隆至原核高效表达载体pGEX-6P-1中,获得重组质粒pGEX-6P-dE、pGEX-6P-dEM,转化大肠杆菌BL21细胞,经诱导获得重组融合蛋白(GsT-dE,GST-dEM),表达量分别为16%,... 详细信息

应用不同引物将PRRS BJ-4毒株ORF5缺失信号肽的dE基因及其缺失突变体dEM分别克隆至原核高效表达载体pGEX-6P-1中,获得重组质粒pGEX-6P-dE、pGEX-6P-dEM,转化大肠杆菌BL21细胞,经诱导获得重组融合蛋白(GsT-dE,GST-dEM),表达量分别为16%,32%。分别经包涵体变性、复性,GST亲和层析、凝胶层析等获得纯化的重组蛋白GST-dEM、GST-dE。应用圆二色谱(CD)测定纯化的GST-dE,GST-dEM蛋白,计算相应的二级结构组成,结合生物信息学分析,绘制出GP5蛋白的二级结构图。分析结果表明,PRRSVGP5重组蛋白α螺旋、β折叠、转角、无规则卷曲分别为58 aa,56 aa,14 aa和72 aa,进一步从结构的角度分析了PRRSV GP5蛋白结构与其功能的关系。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 纯化圆二色谱(CD) 二级结构

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胶体金试纸条检测禽流感含毒尿囊液的研究

胶体金试纸条检测禽流感含毒尿囊液的研究

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

1株针对禽流感病毒的单克隆抗体标记胶体金颗粒,另一株包被于硝酸纤维素膜上,建立检测禽流感病毒的胶体金免疫层析法检测试纸条(ICS)。同时应用ICS和HA试验检测尿囊液,结果当HA效价为3时ICS检测为阴性,HA效价为4时ICS检测为阳性,ICS试验... 详细信息

1株针对禽流感病毒的单克隆抗体标记胶体金颗粒,另一株包被于硝酸纤维素膜上,建立检测禽流感病毒的胶体金免疫层析法检测试纸条(ICS)。同时应用ICS和HA试验检测尿囊液,结果当HA效价为3时ICS检测为阴性,HA效价为4时ICS检测为阳性,ICS试验与HA试验的结果一致。

关键词：胶体金免疫层析法禽流感血凝试验

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胸膜肺炎放线杆菌4型菌毛亚单位基因apfA特异性片段的克隆和表达

胸膜肺炎放线杆菌4型菌毛亚单位基因apfA特异性片段的克隆和表达

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：郭洋刘思国王春来张秀华彭永刚宫强杜绍范沈阳农业大学畜牧兽医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

以猪胸膜肺炎放线杆菌血清型7型国内分离株25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增apfA特异性基因片段,PCR产物经纯化后与载体PMD18-T进行连接、转化,经过酶切及序列分析鉴定后,亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,构建重组表达质粒pGEX-apfA... 详细信息

以猪胸膜肺炎放线杆菌血清型7型国内分离株25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增apfA特异性基因片段,PCR产物经纯化后与载体PMD18-T进行连接、转化,经过酶切及序列分析鉴定后,亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,构建重组表达质粒pGEX-apfA,转化到大肠杆菌感受态DE3中,以IPTG进行诱导,进行SDS-PAGE电泳。结果表明,25-4株apfA基因与基因库中标准7型apfA基因同源性达到98%,所表达的融合蛋白相对分子量约为42KDa,与预测相符。apfA特异性基因片段的成功克隆和表达为猪胸膜肺炎放线杆菌病的致病机理的研究及新型疫苗的研制工作打下了基础。

关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌菌毛 apfA 克隆表达

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一步法复合RT-PCR鉴别新城疫强毒与禽流感病毒的研究

一步法复合RT-PCR鉴别新城疫强毒与禽流感病毒的研究

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：黄兵马秀丽宋敏训王莉莉李峰陈溥言山东省农业科学院家禽研究所山东省农业科学院家禽研究所山东省农业科学院家禽研究所山东省农业科学院家禽研究所山东省农业科学院家禽研究所南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

根据新城疫病毒(NDV)融合蛋白和禽流感病毒(AIV)核蛋白的核酸序列设计两对引物,对NDV和AIV的特异扩增片段分别为156 bp和219 bp,建立了同时检测强毒力NDV和AIV核酸的一步法复合RT-PCR方法。试验中未能检出弱毒力NDV、IBV、IBDV、REV、R... 详细信息

根据新城疫病毒(NDV)融合蛋白和禽流感病毒(AIV)核蛋白的核酸序列设计两对引物,对NDV和AIV的特异扩增片段分别为156 bp和219 bp,建立了同时检测强毒力NDV和AIV核酸的一步法复合RT-PCR方法。试验中未能检出弱毒力NDV、IBV、IBDV、REV、REOV及SPF鸡肌肉组织的RNA,从不同年代分离的16个NDV强毒株全为阳性而NDV弱毒株全为阴性。经验证,复合引物与单一引物的扩增效率一致,将病毒尿囊液稀释至10-5亦能检测到目的RNA。这些试验结果表明,此次建立的一步法复合RT-PCR特异、敏感,适用于强毒力NDV和AIV感染的快速鉴别。

关键词：新城疫病毒禽流感病毒复合RT-PCR 分子鉴别

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抗SARS病毒卵黄及血清抗体检测方法的建立

抗SARS病毒卵黄及血清抗体检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：黄鹤付朝阳王志国崔尚金高宏雷王笑梅李赞李景鹏孔宪刚东北农业大学生命科学学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室东北农业大学生命科学学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

通过改变“冠状病毒(变异株)IgG抗体检测试剂盒”相关实验条件,并进行系统优化,建立了抗SARS病毒卵黄抗体的EIJSA检测方法,确定了样品最适稀释度为1:200,作用时间为60 min,酶标抗体最适作用时间为60 min,P/N≥2.58为阳性,<2.06为阴性... 详细信息

通过改变“冠状病毒(变异株)IgG抗体检测试剂盒”相关实验条件,并进行系统优化,建立了抗SARS病毒卵黄抗体的EIJSA检测方法,确定了样品最适稀释度为1:200,作用时间为60 min,酶标抗体最适作用时间为60 min,P/N≥2.58为阳性,<2.06为阴性;介于二者之间为可疑的判定标准。该抗原不与鸡其他疾病的11种阳性血清反应,证明本方法有很好的特异性;批内重复试验,变异系数小于10%,批间重复试验,变异系数小于15%,结果显示有很好的重复性。本实验所建立的检测方法将为卵黄抗体制备、提纯、产品后加工的质量控制提供了有效的技术手段。

关键词： SARS 间接ELISA 检测

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修饰的ORF5基因增强猪繁殖与呼吸综合征DNA疫苗的免疫反应

修饰的ORF5基因增强猪繁殖与呼吸综合征DNA疫苗的免疫反应

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：江云波方六荣肖少波牛传双张辉陈焕春华中农业大学动物医学院动物病毒室华中农业大学动物医学院动物病毒室华中农业大学动物医学院动物病毒室华中农业大学动物医学院动物病毒室华中农业大学动物医学院动物病毒室华中农业大学动物医学院动物病毒室

为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因DNA疫苗的免疫效力,将通用型辅助性T淋巴细胞表位(PADRE)插入ORF5的中和表位和覆盖表位间,获得修饰后的ORF5基因ORF5M。在此基础上,进一步构建修饰型ORF5M基因的真核表达质粒pCI-52M。Wes... 详细信息

为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因DNA疫苗的免疫效力,将通用型辅助性T淋巴细胞表位(PADRE)插入ORF5的中和表位和覆盖表位间,获得修饰后的ORF5基因ORF5M。在此基础上,进一步构建修饰型ORF5M基因的真核表达质粒pCI-52M。Western blot证实体外表达后,免疫BALB/c小鼠,检测免疫后小鼠体液免疫(中和抗体和特异性针对GP5蛋白的ELISA抗体)和细胞免疫水平,并与未经修饰的ORF5基因真核表达质粒pCI-52进行比较。结果表明,修饰后的DNA疫苗pCI-52M诱导的体液免疫和细胞免疫应答均明显优于未经修饰的DNA疫苗pCI-52,是一种具有良好开发前景的猪繁殖与呼吸综合征新型疫苗。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因 PADRE表位 DNA疫苗

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猪霍乱沙门氏菌载体介导猪瘟病毒DNA免疫研究

猪霍乱沙门氏菌载体介导猪瘟病毒DNA免疫研究

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：乔红伟孙金福韩文瑜涂长春吉林大学农学部军事医学科学院军事兽医研究所吉林大学农学部军事医学科学院军事兽医研究所

将编码猪瘟病毒(CSFV)主要保护性抗原的E2基因克隆至真核表达载体pVAX1,构建了含CSFV E2基因的真核表达质粒pVAXE2。将其电转化猪霍乱沙门氏菌C500疫苗株,构建了携带pVAXE2质粒的重组菌S.C500/pVAXE2,并对重组菌形态特征、培养特性和生... 详细信息

将编码猪瘟病毒(CSFV)主要保护性抗原的E2基因克隆至真核表达载体pVAX1,构建了含CSFV E2基因的真核表达质粒pVAXE2。将其电转化猪霍乱沙门氏菌C500疫苗株,构建了携带pVAXE2质粒的重组菌S.C500/pVAXE2,并对重组菌形态特征、培养特性和生化特性进行了鉴定。分别用1×108CFU、2×109CFU S.C500/pVAXE2经口服或肌肉注射免疫小鼠及家兔,用间接ELISA检测免疫动物的抗猪瘟E2和抗猪霍乱沙门氏菌的特异性抗体,并在三免后两周用20ID50猪瘟兔化弱毒和致死量猪霍乱沙门氏菌强毒株对免疫兔进行攻击,观察其免疫保护效果。结果表明,重组菌保持了猪霍乱沙门氏菌原有形态特征、培养特性和生化特性,经口服或肌注免疫的鼠和兔都产生了抗CSFV和猪霍乱沙门菌的ELISA抗体。攻毒试验显示,免疫家兔能抵抗猪瘟兔化弱毒株和猪霍乱沙门氏菌强毒株的攻击。

关键词： DNA疫苗猪瘟病毒猪霍乱沙门菌猪瘟病毒 E2蛋白

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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因在重组伪狂犬病毒中表达特性的研究

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因在重组伪狂犬病毒中表达特性的研究

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：田志军仇华吉童光志周艳君蔡雪辉王云峰李一经中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室东北农业大学动物医学院

经生长动力学、表达动力学和间接免疫荧光证实,表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-la株GP5基因的重组伪狂犬病病毒(rPRV-GP5)感染细胞15hGP5蛋白即可被Western blotting方法检测到,表达的蛋白主要存在于感染细胞的胞浆中和细胞膜上,... 详细信息

经生长动力学、表达动力学和间接免疫荧光证实,表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-la株GP5基因的重组伪狂犬病病毒(rPRV-GP5)感染细胞15hGP5蛋白即可被Western blotting方法检测到,表达的蛋白主要存在于感染细胞的胞浆中和细胞膜上,而不存在病毒粒子表面,表达蛋白的抗原性与亲本病毒相似,rPRV-GP5在Vero、MARC-145、IBRS-2和CEF细胞上毒价和细胞病变与Bartha-K61比较无显著差异。对第30代rPRV-GP5的GP5基因进行序列分析,表明rPRV-GP5在传代过程中遗传性状稳定。rPRV-GP5以105.0 PFU剂量接种Blab/C小鼠试验表明,rPRV-GP5可以在小鼠体内很好的复制和表达外源基因,间接免疫荧光法在接种后14d仍可以在肺中检测到GP5。以上结果表明,PRRSV GP5可以被PRV真实、有效地在体内、外表达。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒伪狂犬病病毒重组伪狂犬病病毒 GP5

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二温式多重RT-PCR同时检测鉴别对虾TSV、WSSV和IHHNV的研究与应用

二温式多重RT-PCR同时检测鉴别对虾TSV、WSSV和IHHNV的研究与应用

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会

作者：谢芝勋庞耀珊邓显文唐小飞刘加波广西壮族自治区兽医研究所广西壮族自治区兽医研究所广西壮族自治区兽医研究所广西壮族自治区兽医研究所广西壮族自治区兽医研究所

本文研究建立了一种同时检测对虾桃拉病毒(TSV)、白斑综合征病毒(WSSV)及传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)的二温式多重RT—PCR技术。根据基因库中TSV、WSSV和IHHNV的基因序列,分别设计了三对特异性引物,对同一样品中的TSV RNA、WSS... 详细信息

本文研究建立了一种同时检测对虾桃拉病毒(TSV)、白斑综合征病毒(WSSV)及传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)的二温式多重RT—PCR技术。根据基因库中TSV、WSSV和IHHNV的基因序列,分别设计了三对特异性引物,对同一样品中的TSV RNA、WSSV和IHHNV DNA模板进行二温式多重RT-PCR扩增,结果均同时得到了三条大小与实验设计相符的231 bp(TSV)、593 bp(WSSV)和356 bp(IHHNV)特异性多重RT—PCR扩增带,而对其他对虾疾病病原核酸的PCR扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该多重RT-PCR技术最低能检测到TSV RNA 10 pg、WSSV和IHHNV DNA各100 pg。用该多重RT—PCR对临床病料进行检测,结果显示了TSV、WSSV和IHHNV在我国南方的养殖对虾中广泛存在,本文建立的多重RT—PCR技术适用于TSV、WSSV和IHHNV这三种病毒的临床快速检测和鉴别诊断。

关键词：多重聚合酶链式反应对虾桃拉病毒白斑综合征病毒传染性皮下和造血器官坏死病毒检测

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