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28 篇 中国农业科学院哈...
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10 篇 东北农业大学
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5 篇 中国农业科学院兰...
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4 篇 中国农业科学院上...
4 篇 江苏省农业科学院...
4 篇 中国农业科学院哈...
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3 篇 中国农业科学院哈...
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2 篇 广东省农业科学院...
2 篇 福建省农业科学院...

作者

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7 篇 范晴
7 篇 谢芝勋
7 篇 谢丽基
7 篇 邓显文
7 篇 庞耀珊
7 篇 刘加波
7 篇 罗思思
6 篇 郑浩
5 篇 陈化兰
5 篇 单同领
5 篇 童武
5 篇 王永山
5 篇 刘长明
5 篇 仇华吉
5 篇 柳金雄
5 篇 欧阳伟
4 篇 陈洪岩

语言

128 篇 中文
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表达传染性法氏囊病毒VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒的构建与评价

表达传染性法氏囊病毒VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒的构建与评价

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：陈普成李奇蒙姜永萍柳金雄田雨王笑梅胡永浩陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

为构建表达传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(rHVT-VP2),本研究利用RT-PCR扩增IBDV的VP2基因,构建了重组真核表达质粒pCAGG-VP2,并将携带Pec复合启动子的VP2基因表达盒(Pec-VP2-PolyA)进行酶切,连接于Gateway系统入门质... 详细信息

为构建表达传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(rHVT-VP2),本研究利用RT-PCR扩增IBDV的VP2基因,构建了重组真核表达质粒pCAGG-VP2,并将携带Pec复合启动子的VP2基因表达盒(Pec-VP2-PolyA)进行酶切,连接于Gateway系统入门质粒pENTR构建重组质粒pENTR-VP2.采用GatewayLR克隆技术将pENTR-VP2与构建的重组粘粒pFosC-ccdBK+共同参与基因片段进行互换反应,构建重组粘粒pFosC-VP2.通过将pFosC-VP2与其它4个相互重叠并且覆盖HVT全基因组的粘粒酶切线性化后共同转染CEF细胞,拯救重组病毒rHVT-VP2.将重组病毒在CEF细胞中连续传代20次,利用PCR、western blot和间接免疫荧光进行检测,结果表明VP2蛋白均得到稳定地表达.动物试验结果表明通过一次免疫rHVT-VP2即可诱导针对传染性法氏囊的完全保护力.

关键词：火鸡疱疹病毒传染性法氏囊病毒基因重组蛋白表达

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利用TALEN及CRISPR-Cas9系统对于PRRSV受体NMHC Ⅱ-A的基因编辑及功能研究

利用TALEN及CRISPR-Cas9系统对于PRRSV受体NMHC Ⅱ-A的基因编辑及...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：李娜肖书奇张冲张昂克侯高鹏周恩民西北农林科技大学动物医学院兽医免疫研究所农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站陕西杨凌712100

猪繁殖与呼吸障碍综合征是由PRRSV引起的一种高度接触性传染病,是危害全世界生猪养殖业的重要疫病之一.PRRSV侵入宿主细胞,需要与细胞膜表面特异性受体结合,利用细胞内吞作用感染细胞,受体是病毒侵入的首要门户. 本研究利用两种系统... 详细信息

猪繁殖与呼吸障碍综合征是由PRRSV引起的一种高度接触性传染病,是危害全世界生猪养殖业的重要疫病之一.PRRSV侵入宿主细胞,需要与细胞膜表面特异性受体结合,利用细胞内吞作用感染细胞,受体是病毒侵入的首要门户. 本研究利用两种系统分别设计了针对NMHCⅡ-A基因的TALEN载体和在杆状病毒表达系统表达的CRISPR-Cas9载体，测序结果表明工程核酸酶均构建正确。 Western blot结果显示工程核酸酶可以在Sf9细胞系中有效表达。将靶标序列克隆至SSA检测载体上，利用双荧光素酶系统检测工程核酸酶的体外切割活性。通过对PRRSV感染基因编辑细胞系的感染力研究，并结合NMHCⅡ-A的基因功能鉴定NMHCⅡ-A基因编辑细胞系的基本特性，有助于了解PRRSV侵入过程，从而为阐明PRRSV和NMHCⅡ-A之间相互作用的依赖性方式提供依据。利用Golden Gate的方法可以高效组装含有大量重复序列的TALEN的表达载体。AcMuttiBac杆状病毒表达系统能够使工程核酸酶得到高效的表达。双荧光素酶报告载体检测可以有效验证工程核酸酶的切割效率为进一步的基因编辑奠定基础。

关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒非肌肉型肌球蛋白Ⅱ型重链-A 基因编辑核酸酶杆状病毒表达系统

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奶牛口蹄疫、病毒性腹泻粘膜病、传染性鼻气管炎的流行现状及防控技术研究进展

奶牛口蹄疫、病毒性腹泻粘膜病、传染性鼻气管炎的流行现状及防控...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：王洪梅侯佩莉宋玲玲赵贵民何洪彬山东省农业科学院奶牛研究中心山东济南250100

近年来,随着中国奶牛业的迅猛发展,规模化、集约化程度不断提高,传染病防控形势也越来越严峻,特别是口蹄疫、病毒性腹泻粘膜病、传染性鼻气管炎对养牛业危害巨大,在中国广泛流行,但在欧美等国家已经实施这三种病毒病的根除计划.本文就... 详细信息

近年来,随着中国奶牛业的迅猛发展,规模化、集约化程度不断提高,传染病防控形势也越来越严峻,特别是口蹄疫、病毒性腹泻粘膜病、传染性鼻气管炎对养牛业危害巨大,在中国广泛流行,但在欧美等国家已经实施这三种病毒病的根除计划.本文就这三种病毒病的危害、流行现状、诊断技术、疫苗研发、防控技术进行分析和概述. 中国主要采取免疫预防的策略防控FMD，取得了一定成效，但始终存在FMD散发和地方性流行。需要排除免疫失败的干扰因素，优化免疫程序，使疫苗免疫发挥最大的防控效力。同时研发新的防控技术，采取多种手段综合防控FMD的发生和流行。在IBR和BVD防控方面，应参照国外经验，采取疫苗免疫和根除持续感染牛相结合的防控策略，推进BVD,IBR的研究进程，解决中国目前投入的研究经费严重不足、研究队伍薄弱、流行病学调查数据匾乏等诸多问题。加大诊断试剂盒和疫苗的研发力度，争取国产商品化疫苗和诊断试剂的上市，逐步建立IBR ,BVD防控体系，提高犊牛成活率和后备牛发育水平，降低牛群的淘汰率、发病率，综合提高牛群养殖效益，实现中国养牛业的持续健康稳定发展。

关键词：奶牛口蹄疫病毒性腹泻粘膜病传染性鼻气管炎流行病学疾病防控

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猪鼻支原体的分离鉴定及其对巴马猪的致病性试验

猪鼻支原体的分离鉴定及其对巴马猪的致病性试验

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：危艳武夏伟刘长明张志慧黄立平刘建波吴洪丽刘丹李胜斌王一平张辉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

为了探索猪鼻支原体(Mhr)对仔猪的致病性,本试验从临床呼吸道疾病的患猪肺脏分离到一株Mhr,命名为Mhr-DL株.对该菌株16S rRNA序列分析证实,它与GenBank下载的Mhr(AB680688)、猪肺炎支原体(Mhp:NR_074745)和猪滑液支原体(My:KC512403)的... 详细信息

为了探索猪鼻支原体(Mhr)对仔猪的致病性,本试验从临床呼吸道疾病的患猪肺脏分离到一株Mhr,命名为Mhr-DL株.对该菌株16S rRNA序列分析证实,它与GenBank下载的Mhr(AB680688)、猪肺炎支原体(Mhp:NR_074745)和猪滑液支原体(My:KC512403)的同源性分别为99.3％、92.8％和74.0％.电镜负染观察该菌为多形性,大小为500 nm～600 nm.取Mhr-DL株培养物(1.8×109 ccu/mL)经腹腔和气管途径接种SPF小型巴马猪,临床症状表现为精神沉郁、粪便干燥、食欲不振、结膜炎、体温高达41.6℃;剖检病理表现为肺脏、肝脏、脾脏等器官纤维渗出,淋巴结充血肿胀、胸膜炎、腹膜炎、肺脏呈虾内样病变.菌株核酸检测发现,肺脏和扁桃体检出率最高;组织病理表现为间质性肺炎,淋巴细胞增生、坏死、崩解,肾毛细血管淤血,小肠固有层大量嗜酸性粒细胞浸润、肠绒毛结构不完整,心脏小血管淤血,脾白髓内淋巴细胞增生.本研究获得的Mhr-DL菌株对巴马猪具有显著的致病性,为今后深入开展Mhr的致病机理和防控技术的研究奠定了基础.

关键词：巴马猪猪鼻支原体分离鉴定致病性分析

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猪圆环病毒2型Cap蛋白保守序列突变可降低其表达量并阻碍Cap与Rep蛋白共定位抑制病毒复制

猪圆环病毒2型Cap蛋白保守序列突变可降低其表达量并阻碍Cap与Rep...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者： HUANG Li-ping Nicolaas R.C.Van Renne Dipongkor Saha Jan Van Doorsselaere Uladzimir Karniychuk LIU Chang-ming Hans J.Nauwynck Laboratory of Virology Faculty of Veterinary Medicine Ghent University Merelbeke Belgium 中国农业科学院 Laboratory of Virology Faculty of Veterinary Medicine Ghent University Merelbeke Belgium Department of Health Care and Biotechnology KATHO Catholic University College of South-West Flander 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨150001

猪圆环病毒2型(PCV2)是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病给养猪业带来巨大的经济损失.PCV2 Cap蛋白上保守序列97RIRKVKV103可能是该病毒的受体结合位点,然而Cap蛋白的结构显示该序列位于病毒粒子的内部,因此该序列作为受... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病给养猪业带来巨大的经济损失.PCV2 Cap蛋白上保守序列97RIRKVKV103可能是该病毒的受体结合位点,然而Cap蛋白的结构显示该序列位于病毒粒子的内部,因此该序列作为受体结合位点的功能受到质疑.该序列在PCV2毒株之间高度保守,可能具有重要功能.本研究旨在阐明该保守序列在PCV2复制过程中的功能. 首次阐明了PCV2 Cap蛋白保守序列37RIRKVKV103在PCV2复制过程中的功能。该保守序列对PCV2的复制至关重要，该序列突变之后导致:(1)Cap蛋白mRNA及其蛋白量明显降低;(2)阻碍Cap和Rep蛋白共定位;(3)最终产生非活性的病毒。本研究为Cap和Rep蛋白相互作用提供新的信息，而且推测这2种蛋白之间的相互作用是病毒组装所必需的。

关键词：猪圆环病毒2型 Cap蛋白保守序列突变表达量病毒复制抑制

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Garcinol诱导p300/FOXP3溶酶体依赖性的降解及限制Treg的功能和增强抗肿瘤的靶向治疗

Garcinol诱导p300/FOXP3溶酶体依赖性的降解及限制Treg的功能和增...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：杜涛峰 Yasuhiro Nagai 肖琰 Mark I.Greene 张洪周恩民西北农林科技大学动物医学院兽医免疫研究所农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站陕西杨凌712100 Department of Pathology and Lab Medicine Un Department of Pathology and Lab Medicine University of Pennsylvania Perelman School of Medicine Ph 西北农林科技大学动物医学院兽医免疫研究所农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站陕西杨凌712100

P300是调节FOXP3乙酰化和功能的重要乙酰化转移酶之一.最近的研究表明,一系列乙酰化转移酶相互作用的复合物可增强或抑制FOXP3功能.Garcinol,一种分离于印度藤黄果皮的聚异戊二烯二苯甲酮,是组蛋白乙酰化转移酶p300的天然抑制剂.本研究... 详细信息

P300是调节FOXP3乙酰化和功能的重要乙酰化转移酶之一.最近的研究表明,一系列乙酰化转移酶相互作用的复合物可增强或抑制FOXP3功能.Garcinol,一种分离于印度藤黄果皮的聚异戊二烯二苯甲酮,是组蛋白乙酰化转移酶p300的天然抑制剂.本研究用Garcinol作为一种工具,分析了p300调节FOXP3乙酰化的机制.结果表明,Garcinol抑制了p300和FOXP3复合物的形成,并促进p300溶酶体降解途径,从而降低了FOXP3乙酰化的水平和最终的降解,蛋白酶体抑制剂MG132并不能抑制Garcinol诱导的降解.在FOXP3乙酰化方面,相比于其它的乙酰化转移酶,p300对FOXP3的乙酰化影响较为显著,可以通过影响4个赖氨酸残基影响FOXP3总体乙酰化水平和稳定性.Garcinol做为降解工具减弱了Treg的抑制功能,并增强了靶向治疗抗体7.16.4在用neu转化的乳腺癌细胞(H2N113)植入MMTV-neu转基因小鼠皮下所建立的肿瘤模型中的抗肿瘤活性.本研究为在癌症治疗中通过用小分子破坏p300的稳定性限制Treg的功能提供了理论依据.

关键词：动物医学癌症靶向治疗聚异戊二烯二苯甲酮溶酶体调节T细胞

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口蹄疫病毒Asia1型感染BHK-21细胞的定量蛋白组学分析及验证

口蹄疫病毒Asia1型感染BHK-21细胞的定量蛋白组学分析及验证

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：郭慧琛靳野韩世充魏衍全王海明董虎刘湘涛孙世琪中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室口蹄疫OIE参考实验室甘肃兰州730046

口蹄疫病毒感染宿主细胞将引起细胞多个基因表达水平的改变.为了揭示口蹄疫病毒的致病机制及病毒宿主之间的相互作用关系,本研究以稳定标记的单型氨基酸定量蛋白组学方法(SILAC)结合LC-MS/MS及生物信息学分析,检测了口蹄疫病毒亚洲Ⅰ型... 详细信息

口蹄疫病毒感染宿主细胞将引起细胞多个基因表达水平的改变.为了揭示口蹄疫病毒的致病机制及病毒宿主之间的相互作用关系,本研究以稳定标记的单型氨基酸定量蛋白组学方法(SILAC)结合LC-MS/MS及生物信息学分析,检测了口蹄疫病毒亚洲Ⅰ型感染BHK-21细胞后的蛋白表达情况,结果确定了2 141个蛋白,其中153个蛋白在病毒感染8小时之后其表达水平有显著改变(57个蛋白表达水平上调,96个蛋白表达水平下调).应用IngenuityPathways分析,确定这些表达水平有差异的蛋白分别涉及细胞的生物过程、细胞成份及细胞分子生物功能等方面,并涉及14个调控网络(network).为了进一步验证这些表达水平有差异的蛋白可能与病毒的复制有关系,分别选择六个蛋白的干扰性RNA,并将其转染细胞后确定了各个蛋白对FMDV滴度的影响.这些结果显示,FMDV感染后,细胞中蛋白表达水平的改变是细胞与病毒间相互作用的适应性调节.本研究也进一步证实了定量蛋白组学SILAC方法结合LC-MS/MS,在病毒与宿主相互作用研究中的可行性及优势.

关键词：口蹄疫病毒定量蛋白组学致病机制宿主细胞基因表达

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猪IFN-γ、IL-2及GM-CSF对猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白亚单位疫苗免疫增强作用的研究

猪IFN-γ、IL-2及GM-CSF对猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白亚单位疫苗...

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：王一平刘丹郭龙军危艳武吴红丽刘建波李胜斌黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病原现已在世界各地广泛流行,给养猪业造成巨大经济损失.PCV2 Cap蛋白是病毒的主要免疫原性蛋白,能诱导产生PCV2特异性中和抗体和保护性免疫力,是研制PCV2基因工... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病原现已在世界各地广泛流行,给养猪业造成巨大经济损失.PCV2 Cap蛋白是病毒的主要免疫原性蛋白,能诱导产生PCV2特异性中和抗体和保护性免疫力,是研制PCV2基因工程疫苗的理想靶抗原.研究表明,IFN-γ、IL-2和GM-CSF等细胞因子佐剂对疫苗具有免疫增强作用,可显著增强疫苗的免疫保护效力.本研究采用细胞因子佐剂与PCV2-Cap蛋白组合的策略来研制预防PCV2感染的新型基因工程亚单位疫苗,目的是验证猪源WN-γ(PoIFN-γ)、IL-2 (PoIL-2)和GM-CSF(PoGM-CSF)这3种细胞因子能否增强PCV2-Cap蛋白亚单位疫苗的免疫效力. 研究表明，用PoIFN-与PCV2-Cap蛋白混合免疫时，PoIFN-能显著增强PCV2-Cap蛋白亚单位疫苗的免疫保护效力，但以Cap-PoIFN-γ融合蛋白免疫时，PoIFN-对PCV2-Cap蛋白无免疫增强作用;用PoIL-2或PoGM-CSF与PCV2-Cap蛋白混合免疫或以Cap-PoGM-CSF融合蛋白免疫时，PoIL-2和PoGM-CSF对PCV2-Cap蛋白亚单位疫苗的抗体应答均无增强作用，但可促进免疫应答向Th1型免疫应答转变，从而增强疫苗的免疫保护效力，然而以Cap-PoIL-2融合蛋白免疫时，PoIL-2对PCV2-Cap蛋白无免疫增强作用。

关键词：对猪圆环病毒2型 Cap蛋白亚单位疫苗免疫增强作用

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用RED重组技术构建表面展示GapC1-150aa的***及其免疫原性

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：杨汐静于永忠崔玉东汤炜张建新代建周雪张丽萌吴志军于立权孙虎男黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 黑龙江八一农垦大学生命科技学院黑龙江大庆163319 黑龙江八一农垦大学生命科技学院黑龙江大庆163319 黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

奶牛乳房炎是引起全世界奶业重大经济损失的最常见的疾病之一.临床上,病原体鉴定以链球菌(Streptococcus)、大肠杆菌(***)和金黄色葡萄球菌(***)等主要致病茵检出率居高.抗生素治疗和控制奶牛乳房炎,往往致使耐药菌株不断出现,同时药物... 详细信息

奶牛乳房炎是引起全世界奶业重大经济损失的最常见的疾病之一.临床上,病原体鉴定以链球菌(Streptococcus)、大肠杆菌(***)和金黄色葡萄球菌(***)等主要致病茵检出率居高.抗生素治疗和控制奶牛乳房炎,往往致使耐药菌株不断出现,同时药物残留会威胁食品安全.因此,建立疫苗防制已成为热点.研究表明,链球菌表面的主要因子毒力GapC蛋白具有较强的抗原性,该蛋白也是引起奶牛乳房炎的3种链球菌的共同抗原,同时发现GapC1-150蛋白与全长具有相同的免疫保护作用.本研究拟利用大肠杆菌Lpp'OmpA来表面展示GapC1-150蛋白,并研究其免疫原性,为探索新型奶牛乳房炎疫苗提供参考.结果表明，本实验构建的活菌苗XLI-Blue/LO-GapC1-150aa能将链球菌GapC1-150aa展示在***表面，且能为实验小鼠提供一定的抗链球菌感染的能力。

关键词：奶牛乳房炎链球菌活菌苗免疫原性重组技术

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猪用新型分子免疫佐剂的创制与应用

猪用新型分子免疫佐剂的创制与应用

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：景志忠王佩雅才学鹏房永祥陈国华曾爽蒙学莲窦永喜何小兵贾怀杰高世杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046

为了克服传统免疫佐剂的安全性隐患以及所诱导免疫反应的不全面、不持久等技术关键问题,在机体病原模式识别与天然免疫机制研究的基础上,系统设计、创制和生产猪疫病疫苗用分子免疫佐剂.(1)以Toll样受体家族(TLRs)信号途径为关键靶点,... 详细信息

为了克服传统免疫佐剂的安全性隐患以及所诱导免疫反应的不全面、不持久等技术关键问题,在机体病原模式识别与天然免疫机制研究的基础上,系统设计、创制和生产猪疫病疫苗用分子免疫佐剂.(1)以Toll样受体家族(TLRs)信号途径为关键靶点,研究了CpG ODNs、ORNs以及猪IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-18等免疫激活、效应和调节分子的结构与生物学功能;(2)创制了CpG DNA、CpG-IFN和CpG-IL4重组质粒以及重组IL-2纳米粒等多种单、双因子的基因工程免疫佐剂,免疫效力普遍提高2倍以上,其中CpG DNA、CpG-IFN重组质粒是以促进Th1型免疫反应的免疫佐剂;(3)针对细胞因子和CpG DNA重组质粒可能存在的转基因生物安全风险,开展了6种基因工程新制剂转基因生物安全评价,其中CpG DNA重组质粒免疫佐剂获得了安全证书;(4)在GMP条件下建立了2条规模化生产重组质粒的工艺技术平台和生产线,其中自动化生物反应器生产线年设计能力达8亿头份,已规模化生产CpG DNA免疫佐剂500万头份以上;(5)配制猪口蹄疫、猪瘟和猪囊虫病高效疫苗300万头份,在甘肃等全国十多个省区临床试验和示范推广应用,取得了显著的社会和经济效益.新型分子免疫佐剂的创制和生产,为安全、高效疫苗的研制和应用开辟广阔前景.

关键词：猪疫病疫苗分子免疫佐剂产品研发性能评价

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