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125 篇 会议
4 篇 期刊文献

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122 篇 农学
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- 1 篇 公共卫生与预防医...

主题

9 篇 猪繁殖与呼吸综合...
7 篇 单克隆抗体
7 篇 分离鉴定
7 篇 鸡传染病
6 篇 免疫原性
5 篇 生物学特性
5 篇 动物医学
4 篇 猪流行性腹泻病毒
4 篇 效果评估
4 篇 原核表达
4 篇 基因检测
4 篇 抗体检测
4 篇 学术研讨会
4 篇 基因表达
4 篇 中国畜牧兽医学会
4 篇 免疫学
4 篇 猪
4 篇 法氏囊病病毒
4 篇 流行病学
3 篇 猪圆环病毒2型

机构

28 篇 中国农业科学院哈...
13 篇 西北农林科技大学
10 篇 东北农业大学
8 篇 南京农业大学
7 篇 黑龙江八一农垦大...
5 篇 中国农业科学院兰...
5 篇 扬州大学
5 篇 广西壮族自治区兽...
4 篇 江苏省农业科学院...
4 篇 中国农业科学院上...
4 篇 江苏省农业科学院...
4 篇 中国农业科学院哈...
4 篇 华中农业大学
3 篇 青岛农业大学
3 篇 中国农业科学院哈...
3 篇 北京市农林科学院...
3 篇 广东海大畜牧兽医...
2 篇 广东省兽医公共卫...
2 篇 广东省农业科学院...
2 篇 福建省农业科学院...

作者

12 篇 周恩民
10 篇 童光志
7 篇 谢志勤
7 篇 范晴
7 篇 谢芝勋
7 篇 谢丽基
7 篇 邓显文
7 篇 庞耀珊
7 篇 刘加波
7 篇 罗思思
6 篇 郑浩
5 篇 陈化兰
5 篇 单同领
5 篇 童武
5 篇 王永山
5 篇 刘长明
5 篇 仇华吉
5 篇 柳金雄
5 篇 欧阳伟
4 篇 陈洪岩

语言

128 篇 中文
1 篇 英文

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排序：

乙型脑炎病毒NS1'蛋白编码框的扩展对病毒毒力的影响

乙型脑炎病毒NS1'蛋白编码框的扩展对病毒毒力的影响

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：郭亦非郑浩郑旭晨童武刘飞梁超单同领于海童光志中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

通过分析乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)基因组中核糖体移码序列,在对NS2A基因实施同义突变基础上,设计2组引物,通过PCR突变方法,依次删除移码后NS1'基因开放阅读框的终止密码子,并将突变片段替换JEV感染性克隆pJE... 详细信息

通过分析乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)基因组中核糖体移码序列,在对NS2A基因实施同义突变基础上,设计2组引物,通过PCR突变方法,依次删除移码后NS1'基因开放阅读框的终止密码子,并将突变片段替换JEV感染性克隆pJEHEN中相应片段,获得了2株突变全长克隆.经体外转录合成RNA,再以RNA转染细胞,拯救出两株突变病毒vJET1和vJET2.通过RT-PCR扩增突变病毒中含突变位点的基因组片段,测序证实了vJET1基因组3690位核苷酸存在由T向A的突变,vJET2基因组3690位和3819位核苷酸均存在由T向A的突变.将vJET1和vJET2感染Vero细胞后,western blot检测显示,两株突变病毒表达的NS1'蛋白均出现延长现象.生长曲线显示,与亲本病毒vTHen相比,突变病毒增殖速度均出现下降.动物实验显示,与vTHen相比,vJET1和vJET2对小鼠的神经毒力与神经侵袭力也出现下降.上述结果表明,NS1'编码框的延伸降低病毒在体外培养细胞上的增值速度,也减弱了病毒对小鼠的毒力.

关键词：乙型脑炎病毒 NS1'蛋白编码框扩展毒力评价

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基于单核细胞增生李斯特菌prfA基因新型原核温控表达载体的构建

基于单核细胞增生李斯特菌prfA基因新型原核温控表达载体的构建

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：田秋丰于申业衣菲吕雪莲倪宏波刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

单核细胞增生李斯特茵的prfA基因编码一个温度控制启动蛋白,具有在37℃条件下启动下游基因表达的功能.为构建新型原核温控诱导表达载体,本研究利用PCR方法扩增prfA基因,并将其与EGFP或DsRed基因分别插入到pET28a和pUC19载体中,构建pET-p... 详细信息

单核细胞增生李斯特茵的prfA基因编码一个温度控制启动蛋白,具有在37℃条件下启动下游基因表达的功能.为构建新型原核温控诱导表达载体,本研究利用PCR方法扩增prfA基因,并将其与EGFP或DsRed基因分别插入到pET28a和pUC19载体中,构建pET-prfA-EGFP和pUC-prfA-DsRed重组质粒.将重组质粒转化大肠杆菌DH5α,在37℃条件下培养,利用激光共聚焦显微镜观测细菌中荧光蛋白的表达情况.结果表明,构建的两种重组质粒的荧光蛋白基因于37℃条件下,在受体茵中均获得有效表达,而30℃时则仅有微弱的本底荧光蛋白表达.本研究成功构建了以最适生理温度为单一诱导条件的温控表达的新型表达载体,为蛋白的表达与功能研究提供了新的平台.

关键词：单核细胞增生李斯特茵调控基因温控表达荧光蛋白载体构建

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口蹄疫分子标记疫苗研究报告

口蹄疫分子标记疫苗研究报告

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：刘在新陈应理谢宝霞曹轶梅王永录罗建勋刘湘涛张永光谢庆阁卢曾军李平花白兴文殷宏李冬孙普包慧芳付元芳中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

口蹄疫是严重危害中国畜牧业发展的重大动物疫病,疫苗免疫和精准区分免疫和自然感染动物,筛查并淘汰染毒家畜,是预防和控制口蹄疫的关键措施,也是中国口蹄疫防控的主要策略.针对目前广泛使用的传统口蹄疫灭活疫苗,因纯化不完全,免疫后,... 详细信息

口蹄疫是严重危害中国畜牧业发展的重大动物疫病,疫苗免疫和精准区分免疫和自然感染动物,筛查并淘汰染毒家畜,是预防和控制口蹄疫的关键措施,也是中国口蹄疫防控的主要策略.针对目前广泛使用的传统口蹄疫灭活疫苗,因纯化不完全,免疫后,以检测病毒非结构蛋白抗体为金标准的鉴别技术,难以精准区别免疫和感染动物,既使使用先进的纯化技术,也不能完全清除与灭活病毒大小相同的非结构蛋白复合物,多次免疫后,仍能检测到病毒非结构蛋白抗体,给精准区别免疫动物和感染动物带来了困难,严重阻碍口蹄疫流行病学监测和疫源净化,已成为全球口蹄疫控制计划实施的技术障碍,引起了世界动物卫生组织和口蹄疫控制机构的关注.鉴于此,能精准区别免疫动物和感染动物的标记疫苗成为了研究热点.采用反向遗传学技术,构建带有口蹄疫病毒非结构蛋白优势表位缺失的标记病毒,是研制口蹄疫标记疫苗的最优途径.

关键词：口蹄疫疫苗研制分子标记表位缺失反向遗传学

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重组表达GM-CSF/IL-4的PRRSV感染性克隆的构建

重组表达GM-CSF/IL-4的PRRSV感染性克隆的构建

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：李治军王承宝黄柏成李琼毅陈怡阳丁培阳周恩民西北农林科技大学动物医学院兽医免疫研究所农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站陕西杨凌712100

在高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)SD16感染性克隆的基础上,在SD16基因组N基因和3'UTR之间插入PRRSV ORF6的转录调控序列(TRS6)和猪源GM-CSF或者IL-4,以及用甘氨酸和FMDV 2ALinker串联的猪源GM-CSF和IL-4,通过转染Marc-14... 详细信息

在高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)SD16感染性克隆的基础上,在SD16基因组N基因和3'UTR之间插入PRRSV ORF6的转录调控序列(TRS6)和猪源GM-CSF或者IL-4,以及用甘氨酸和FMDV 2ALinker串联的猪源GM-CSF和IL-4,通过转染Marc-145细胞进行病毒拯救,将拯救的重组病毒在Marc-145细胞上连续代分析其生物学特性和遗传稳定性.结果显示,将不同重组全长质粒分别转染Marc-145细胞后可以观察到典型的细胞病变,IFA和western blot检测结果显示,引入的猪源GM-CSF和IL-4成功得到了表达,且拯救的重组病毒可以被PRRSV N蛋白特异性单抗识别,初步表明4株重组病毒被成功拯救,且重组病毒与亲本毒株具有基本一致复制动力学曲线,外源猪GM-CSF以及IL-4的插入并未影响病毒复制.遗传稳定性分析结果证明,重组病毒传代至第6代时,仍旧可以检测到猪源GM-CSF以及IL-4的表达.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆重组表达免疫学

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多杀性巴氏杆菌△purF突变株的构建及其生物学特性的研究

多杀性巴氏杆菌△purF突变株的构建及其生物学特性的研究

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：郭东春张爱芹王淑亚刘培欣刘家森姜骞李影曲连东中国农业科学院哈尔滨兽医研究所自然疫源性人兽共患病团队黑龙江哈尔滨150001

多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,***)作为巴氏杆菌属最主要的代表菌,能够引起多种动物和人感染的人兽共患细菌传染病,其毒力因子主要有荚膜、脂多糖、鞭毛和粘附素、毒素、铁调蛋白、唾液酸代谢、透明质酸酶和外膜蛋白等.利用信... 详细信息

多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,***)作为巴氏杆菌属最主要的代表菌,能够引起多种动物和人感染的人兽共患细菌传染病,其毒力因子主要有荚膜、脂多糖、鞭毛和粘附素、毒素、铁调蛋白、唾液酸代谢、透明质酸酶和外膜蛋白等.利用信号标签突变技术筛选到ApurF对小鼠的致病性减弱,本研究组利用选择性捕获转录序列技术对多杀性巴氏杆菌感染兔肝脏组织筛选鉴定到purF基因.本研究为了验证PurF蛋白在细菌中的致病作用和免疫作用,利用正向筛选同源重组技术构建了ApurF突变株,并研究了突变株对小鼠的致病性和免疫原性等生物学特性. 多杀性巴氏杆菌的毒力因子众多，purF基因编码嘌呤合成代谢，缺失purF基因细菌的毒力降低，但其免疫原性的研究未见报道;Pm的正向筛选突变技术多利用KanR和TetR,KanR表达盒在Pm突变株中发挥正常功能。本研究利用KanR表达盒的正向筛选突变体技术构建了△purF突变株，突变株对小鼠的致病性降低，免疫小鼠可抵抗致死剂量的同源细菌的感染，具有完全的免疫保护力。本研究为下一步△purF突变株作为潜在疫苗的可能性奠定基础。

关键词：动物医学人兽共患细菌传染病多杀性巴氏杆菌突变株构建生物学特性

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Marc-145细胞内表达GP5蛋白对PRRSV感染的影响

Marc-145细胞内表达GP5蛋白对PRRSV感染的影响

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：高继明姬鹏超张茂东倪怀宝周恩民西北农林科技大学动物医学院兽医免疫研究所农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站陕西杨凌712100

为了在体外研究GPS表达对猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV易感细胞Mac-145的影响，本研究通过慢病毒介导成功构建稳定表达GP5蛋白的Marc-145细胞系;首先对该细胞系的细胞活性，细胞凋亡检进行了检测，结果显示GP5在Marc-145内表达并未影响... 详细信息

为了在体外研究GPS表达对猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV易感细胞Mac-145的影响，本研究通过慢病毒介导成功构建稳定表达GP5蛋白的Marc-145细胞系;首先对该细胞系的细胞活性，细胞凋亡检进行了检测，结果显示GP5在Marc-145内表达并未影响细胞活性和诱导细胞凋亡;然后为了分析GP5蛋白表达对PRRSV感染的影响，利用不同致病性PRRSV毒株VR-2332,HP-PRRSV/JXA1,HP-PRRSV/SD 16分别感染高效表达GP5的Marc-145细胞，结果显示，GP5蛋白在Marc-145细胞内的预表达显著抑制了PRRSV的后续感染;为了明确对PRRSV感染的抑制作用是阻断了病毒的吸附还是抑制了病毒的复制，通过荧光定量PCR对病毒的吸附和病毒吸附后在细胞的复制进行了测定，结果显示GPS蛋白表达没有影响病毒对细胞的吸附，而是抑制了病毒在细胞内的复制，通过对1型干扰素基因转录水平和启动子活性进行分析，GP5的表达导致细胞内INF-β的mRNA水平显著升高，启动子活性明显增强。由此，GPS蛋白体外细胞内表达对PRRSV感染具有明显的抑制作用，这种抑制作用极可能是由GP5的表达诱导了细胞内INF-β的产生导致的。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒易感细胞结构蛋白感染机制

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双抗体夹心ELISA检测坦布苏病毒方法的建立及初步应用

双抗体夹心ELISA检测坦布苏病毒方法的建立及初步应用

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：谢星星李银李祥瑞赵冬敏黄欣梅韩凯凯刘玉卓南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室江苏南京210014 江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

以鹅坦布苏病毒JS804毒株制备的多克隆抗体为捕获抗体,抗鹅坦布苏病毒NS1蛋白的单克隆抗体4A9作为检测抗体,建立了检测坦布苏病毒的双抗体夹心ELISA方法.该方法的最佳反应条件为:兔抗鹅坦布苏病毒多克隆抗体的最适稀释度为1∶1600,单克... 详细信息

以鹅坦布苏病毒JS804毒株制备的多克隆抗体为捕获抗体,抗鹅坦布苏病毒NS1蛋白的单克隆抗体4A9作为检测抗体,建立了检测坦布苏病毒的双抗体夹心ELISA方法.该方法的最佳反应条件为:兔抗鹅坦布苏病毒多克隆抗体的最适稀释度为1∶1600,单克隆抗体的最适稀释度为1∶160,样品反应时间为1h,酶标羊抗鼠二抗工作浓度为1∶5000,以OD450nm≥0.245作为阳性判定标准.该方法的板间、板内重复性变异系数小于10％,病毒最低检测量为386.25 TCID50/0.1 mL,与NDV、AIV、IBV、DHV和GPV无交叉反应.应用该方法与RT-PCR方法同时检测22份临床样品,符合率达到86.36％.结果表明,建立的双抗体夹心ELISA方法具有特异性好、灵敏性高和重复性好等优点,可用于坦布苏病毒的快速检测.

关键词：鹅坦布苏病毒单克隆抗体双抗体夹心酶免疫吸附测定效果评估

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猪流行性腹泻病毒S、N和ORF3基因的遗传变异分析

猪流行性腹泻病毒S、N和ORF3基因的遗传变异分析

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：王隆柏林裕胜车勇良吴学敏陈如敬邵良平周伦江福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 福建农林大学动物科学院福建福州350002 福建农林大学动物科学院福建福州350002

为探明2012年～2013年在福建省流行PEDV结构蛋白的遗传变异情况,本研究对7株PEDV流行病毒株的S、N及ORF3基因进行克隆、测序及分析.结果表明:7株PEDV的S基因之间的核苷酸同源性为98.6％～99.4％,与attenuated DR13弱毒株和CV777标准株... 详细信息

为探明2012年～2013年在福建省流行PEDV结构蛋白的遗传变异情况,本研究对7株PEDV流行病毒株的S、N及ORF3基因进行克隆、测序及分析.结果表明:7株PEDV的S基因之间的核苷酸同源性为98.6％～99.4％,与attenuated DR13弱毒株和CV777标准株的同源性分别为93.7％～94.1％和93.8％～94.1％;同CV777标准株比较,存在多个氨基酸突变,其中有8个变异氨基酸较以往流行毒株不同,为新变异氨基酸,氨基酸的插入和缺失与2008年泰国NPPED2008 2株相似;7株PEDV毒株的N基因和ORF3基因之间核苷酸的同源性分别为96.5％～99.7％和99.7％～100％,与CV777标准株的同源性分别为96.6％～98.0％和96.6％～96.9％.遗传进化树表明:7株PEDV毒株的S基因和ORF3基因与泰国流行毒株的亲缘关系较近,N基因与CV777标准株亲缘关系较近.7株PEDV毒株的S基因和ORF3基因变异程度较大,可能源于泰国及韩国的变异株.

关键词：猪流行性腹泻病毒基因检测序列分析遗传变异

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产气荚膜梭菌α-β2-ε毒素在大肠杆菌中的表达及免疫原性研究

产气荚膜梭菌α-β2-ε毒素在大肠杆菌中的表达及免疫原性研究

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：宫旭颖葛俊伟乔薪瑗刘敏唐丽杰姜艳平崔文李一经东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030

本研究通过PCR分别扩增α-β2,ε毒素基因,以pProHTa作为表达载体,构建了重组表达质粒pProHTa-α-β2-ε,并转入大肠杆菌中,经IPTG诱导表达α-β2-ε毒素蛋白.SDS-PAGE分析显示,表达的毒素蛋白大小约92.4 ku,主要以包涵体形式存在.免疫6... 详细信息

本研究通过PCR分别扩增α-β2,ε毒素基因,以pProHTa作为表达载体,构建了重组表达质粒pProHTa-α-β2-ε,并转入大肠杆菌中,经IPTG诱导表达α-β2-ε毒素蛋白.SDS-PAGE分析显示,表达的毒素蛋白大小约92.4 ku,主要以包涵体形式存在.免疫6～8周龄BALB/c小鼠,分别用A型和B型产气荚膜梭菌强毒株对免疫鼠进行攻毒,测定免疫鼠血清中抗体的中和活性,结果表明,免疫鼠对A型产气荚膜梭菌强毒株1 LD100和2LD1m的攻毒保护率分别为100％和60％,对B型产气荚膜梭菌强毒株1 LD100和2 LD100的攻毒保护率分别为100％和80％.免疫鼠血清可体外中和A、B型产气荚膜梭菌强毒株产生的毒素.血清稀释为1∶20时(血清效价为218),对1 LD100A型和B型产气荚膜梭菌毒素的中和效率均可达到100％.以上结果表明,本研究构建的重组大肠杆菌表达的α-β2-ε融合蛋白具有良好的免疫原性,能有效刺激机体产生中和抗体,可作为基因工程疫苗的有效组分,为产气荚膜梭菌多价候选亚单位疫苗的研究奠定了基础.

关键词：动物医学大肠杆菌产气荚膜梭菌毒素表达免疫原性

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基于纳米材料电化学免疫传感器检测禽呼肠孤病毒研究

基于纳米材料电化学免疫传感器检测禽呼肠孤病毒研究

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：黄娇玲范晴罗思思谢芝勋谢丽基滕丽琼黄莉刘加波庞耀珊邓显文谢志勤广西壮族自治区兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西南宁530001

构建一种用于检测禽呼肠孤病毒(ARV)的新型电化学免疫传感器.制备石墨烯-甲壳胺-金纳米粒子(G-Chi-Au)纳米复合物用于修饰金电极作为传感器平台用于固定待测样品,同时制备石墨烯-甲壳胺-银纳米粒子-禽呼肠孤单克隆抗体(G-Chi-Ag-MAb-ARV... 详细信息

构建一种用于检测禽呼肠孤病毒(ARV)的新型电化学免疫传感器.制备石墨烯-甲壳胺-金纳米粒子(G-Chi-Au)纳米复合物用于修饰金电极作为传感器平台用于固定待测样品,同时制备石墨烯-甲壳胺-银纳米粒子-禽呼肠孤单克隆抗体(G-Chi-Ag-MAb-ARV)纳米复合物作为传感器的信号放大材料,构建电化学免疫传感器.所建立的电化学免疫传感器ARV的检测敏感度为1015 TCID50/mL,对非目标禽病原体,如H5N1、H3N6和H9N2亚型禽流感病毒、新城疫病毒(NDV)、鸡白痢沙门氏菌(SP)、喉气管炎病毒(LTV)、传染性支气管炎病毒(IBV)和传染性法氏囊病毒(IBDV)等检测没有出现G-Chi-Ag-MAb/ARV的特征吸收峰,表明该传感器具有很高的敏感性和特异性.本研究所建立的传感器特异性高,敏感性好,为禽呼肠孤病毒提供一种新的快速检测诊断技术.

关键词：禽呼肠孤病毒石墨烯电化学免疫传感器纳米材料

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