检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：张晓净贺骞龙腾飞章海艺刘雅红孙坚华农业大学兽医学院

[引言]炎症性肠病（IBD）是肠道反复发生慢性炎症的自身免疫病,目前无特效药。作为药理活性高副作用低的免疫抑制药物,人类特有的细胞因子IL-37b在低浓度下就能发挥较强抗炎作用。同时益生菌因其菌群调节、肠道靶向等优点也成为肠道疾... 详细信息

[引言]炎症性肠病（IBD）是肠道反复发生慢性炎症的自身免疫病,目前无特效药。作为药理活性高副作用低的免疫抑制药物,人类特有的细胞因子IL-37b在低浓度下就能发挥较强抗炎作用。同时益生菌因其菌群调节、肠道靶向等优点也成为肠道疾病治疗的独特手段。事实上伴随合成生物学的发展,利用细菌及其衍生物作为载体递送蛋白药物至病变部位的方法有望通过基因编辑实现各元件强强联合从而发挥良好效果。因此本研究构建外膜囊泡（OMVs）表达IL-37b的工程菌,结合细菌靶向、囊泡通讯及蛋白免疫调节的优点,开发更精准安全的治疗方法及探究该工程菌对肠道炎症的调节机制。[方法]本研究首先探究人类细胞因子IL-37b能否被大肠杆菌异源表达并保持抗炎活性;其次选择大肠杆菌Nissle 1917（EcN）作为底盘生物,敲除其yrbE基因构建ΔE菌株使其外膜囊泡多泡化,电转带有不同元件的工程质粒pTet-ClyA-IL37b至ΔE中,完成ΔECIL-37b工程菌的开发及蛋白递送;最后灌胃ΔECIL-37b工程菌介导小鼠结肠炎模型评估该工程菌有效性并探究机制。[结果]结果显示,IL-37b能被大肠杆菌成功表达并抑制RAW264.7细胞在LPS刺激下的IL-6、IL-1βmRNA和蛋白水平。其次,利用基因编辑技术构建的工程菌ΔECIL-37b分泌的OMVs平均粒径及透射电镜分析正确,同时携带IL-37b。继而,灌胃AECIL-37b工程菌介导DSS诱导的小鼠结肠炎模型,ΔECIL-37b组对比DSS组能逆转结肠长度缩短和病理损伤;通过抑制中性粒细胞和巨噬细胞的浸润,降低炎症因子TNF-αIL-6、IL-1β、IL-8 mRNA和炎症相关蛋白iNOS,COX-2的表达响应肠道炎症免疫应答;通过增加杯状细胞、肠上皮屏障相关蛋白Cluadin-1、Occludin、MUC-2的表达修复肠道屏障功能:通过重塑肠道微生物丰度和组成恢复肠道菌群稳态。最后,免疫印迹的结果还提示这些治疗作用可能是通过抑制经典炎症通路ERK,STAT3的磷酸化从而发挥作用。[结论]综上,本研究构建了细菌外膜囊泡携带免疫调节蛋白IL-37b的AECIL-37b工程菌递送系统,该系统靶向肠道部位,在时空上控制IL-37b的远程递送和持续分泌,对功能性益生菌的开发和肠道炎症安全高效精准的治疗具有一定意义。

关键词：合成生物学工程菌结肠炎外膜囊泡 IL-37b

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呼吸系统疾病临床兽药研发进展研究

呼吸系统疾病临床兽药研发进展研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：蔡子雯张文静任晓敏刘晓晔北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室北京农学院动物科学技术学院

[背景]动物呼吸系统疾病的病因复杂,通常由非生物因素,包括污染气体、粉尘等,以及非生物因素引起,常是多种原因如细菌、病毒、支原体、寄生虫等感染所致。其临床症状表现为以咳、痰、喘为主。当动物呼吸系统发生疾病时,会使肺泡壁受到... 详细信息

[背景]动物呼吸系统疾病的病因复杂,通常由非生物因素,包括污染气体、粉尘等,以及非生物因素引起,常是多种原因如细菌、病毒、支原体、寄生虫等感染所致。其临床症状表现为以咳、痰、喘为主。当动物呼吸系统发生疾病时,会使肺泡壁受到损害从而导致呼吸机能发生障碍,增加能量消耗的同时造成缺氧,后果严重。目前,针对呼吸系统疾病临床兽药研究未见系统性详细报道,因此,分析归纳和总结呼吸系统疾病临床兽药对于更好的研发动物呼吸系统疾病用药提供指导。[目的]总结归纳动物呼吸系统疾病兽药剂型特点和用药规律,为动物呼吸系统兽药的应用以及新剂型的开发提供一定参考。[方法]应用国家兽药基础数据库筛选兽药典中所有应用于治疗动物呼吸系统的临床兽药,以说明书为参考,从药物性状、药理作用、剂型特点、药物类别、治疗方法等方面进行综合分析;按药效及类型进行归纳总结。[结果]动物呼吸系统疾病临床治疗主要分为针对病因（细菌、支原体、寄生虫）治疗和针对病症（咳、痰、喘）治疗,其中针对病因治疗的兽药主要为西药,在归纳总结的64种对病因治疗兽药中,以抗菌类注射剂为主占35.94%,片剂和粉剂比例平均分别为26.56%和29.69%,少见溶液剂3.13%及散剂4.69%;针对病症治疗的兽药绝大部分为中药,以镇咳、祛痰、平喘的粉剂为主,在归纳总结的48种对病症治疗兽药中58.33%为粉剂,注射剂占16.67%,合剂和膏剂占4.17%,片剂占10.42%,颗粒剂占6.25%。[讨论]在针对动物呼吸系统临床兽药研究中,西药主要通过杀灭动物体中感染的病原微生物治疗绝大部分呼吸系统疾病,根据不同病原微生物如细菌、支原体等选用动物可接受且经济的剂型进行对因治疗;中药通过调节动物机体与微生物的相互关系治疗呼吸系统疾病,根据呼吸系统疾病使动物表现出的不同症状进行对症治疗,临床以应用不同方剂联合使用兼顾扶正固本,使动物的呼吸道症状得到缓解和治疗。本综述还讨论了市面上正在开发的如喷雾、纳米微粒等呼吸系统新型兽药,希望为动物呼吸系统兽药的应用以及新剂型的开发提供一定参考。

关键词：动物呼吸吸系统疾病新兽药研发药物剂型

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丹皮对金黄色葡萄球菌α-溶血素分泌和作用的影响

丹皮对金黄色葡萄球菌α-溶血素分泌和作用的影响

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：薛喜博高毅玖黄筱琳王嘉珺梁雪菲孙英健北京农学院动物科学技术学院/兽医学(中医药)北京市重点实验室

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)是一种常见的革兰氏阳性菌。目前主要使用抗生素对金葡菌感染进行治疗,但是在临床治疗中随着抗生素的使用,金葡菌产生了耐药性。金葡菌能够表达多种毒力因子,这些毒力因子在细菌的致病过程中... 详细信息

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)是一种常见的革兰氏阳性菌。目前主要使用抗生素对金葡菌感染进行治疗,但是在临床治疗中随着抗生素的使用,金葡菌产生了耐药性。金葡菌能够表达多种毒力因子,这些毒力因子在细菌的致病过程中起重要作用。本实验室前期的研究已证实牛角地黄汤可以抑制金葡菌α-溶血素的分泌,同时显著的抑制金葡菌α-溶血素(α-Hemolysin,Hlα)对兔红细胞的裂解作用。本研究聚焦于牛角地黄汤的组分之一:丹皮。本研究以金黄色葡萄球菌ATCC-29213为研究对象,研究丹皮水煎剂对金葡菌增殖,毒素分泌和对红细胞的裂解作用的影响。在对细菌增殖影响的试验中将金葡菌接种于不同浓度丹皮水煎剂的MHB培养基中进行培养,记录细菌24 h内的增殖情况。研究发现含量在4 mg/mL及以下的丹皮水煎剂中各组金葡菌增殖情况相同;当药物含量为8 mg/mL时,细菌的增殖受到抑制,细菌增殖减慢,培养基中最大细菌浓度变小。在后续实验中使用4 mg/mL及以下浓度的丹皮水煎剂作为非抑菌浓度进行实验。在非抑菌浓度下探究不同浓度丹皮水煎剂与金葡菌作用时Hlα的分泌情况,不同浓度丹皮水煎剂中培养金葡菌12 h,离心取上清,进行Western Blot检测。结果显示,在丹皮水煎剂浓度为0.25～4 mg/mL时金葡菌分泌的Hlα含量显著减少且呈现浓度依赖性。说明丹皮水煎剂能够在非抑菌浓度抑制Hlα的分泌。使用不同浓度的丹皮水煎剂与细菌分泌物作用并检测细菌分泌物对兔红细胞的裂解作用。结果显示,丹皮水煎剂能够在浓度为1～4mg/mL时能够抑制细菌分泌物对兔红细胞的裂解作用,并且丹皮水煎剂、细菌分泌物与兔红细胞三者共同作用的效果好于丹皮水煎剂预先作用于另外两者。说明丹皮水煎剂可能在细菌毒素对兔红细胞的伤害中发挥作用。在本研究中丹皮水煎剂8 mg/ml时对金葡菌增殖有抑制作用;丹皮水煎剂在0.25～4mg/mL时不影响细菌的增殖并且能够抑制金葡菌Hlα的分泌,在1～4 mg/mL的浓度时丹皮水煎剂能够保护兔红细胞。本研究为天然药物减针对细菌毒素的抗菌策略提供了一种新思路潜在用途。

关键词：金黄色葡萄球菌 α-溶血素丹皮

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奶牛养殖环境耐药菌/耐药基因流行、分布调查与风险评估的研究

奶牛养殖环境耐药菌/耐药基因流行、分布调查与风险评估的研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：李田李一鸣左扬胡秀花王少林兽医公共卫生安全全国重点实验室中国农业大学动物医学院

奶牛乳房炎是一个全球性问题,通常由细菌等病原体引起,可导致牛奶产量减少、奶牛被淘汰等,造成了奶牛业巨大的经济损失。为降低乳房炎发生率,提高乳房炎诊断和用药的精确性,减少奶牛乳房炎治疗用药种类和用药量,本试验针对内蒙古自治区... 详细信息

奶牛乳房炎是一个全球性问题,通常由细菌等病原体引起,可导致牛奶产量减少、奶牛被淘汰等,造成了奶牛业巨大的经济损失。为降低乳房炎发生率,提高乳房炎诊断和用药的精确性,减少奶牛乳房炎治疗用药种类和用药量,本试验针对内蒙古自治区5个代表牧场的环境样品以及奶牛相关样品,采用细菌分离鉴定、16S rRNA基因扩增子测序以及耐药基因多重扩增子测序技术等方法调查各类耐药菌/耐药基因在牧场的流行和分布情况。分菌结果表明,224份乳房炎奶样样本中分离到细菌263株,对其中187株主要潜在病原菌进行药敏试验,发现分离菌株整体对青霉素、氨苄西林、苯唑西林、头孢氨苄等药物耐药率较高,对头孢噻呋、利奈唑胺、环丙沙星、链霉素、庆大霉素耐药率较低,且77.54%菌株（146/187）对两重以上的抗菌药物耐药;从136份中环境样品,分离到116株细菌,其中产ESBLs菌株为74株（占比63.79%）,主要为埃希菌属、克雷伯菌属、柠檬酸杆菌属、不动杆菌属、假单胞菌属。同时,我们还发现耐药基因在奶牛的养殖环境中普遍流行,主要是氨基糖胺类、β-内酰胺类、氯霉素类、磺胺类、大环内酯-林可霉素-链阳菌素类、喹诺酮类、四环素类等,同时也检测到超广谱β-内酰胺酶基因(bla,bla,bla等)。根据16S rRNA基因的扩增子测序检测分析结果,5个牧场的环境样品均检测到致病菌,主要为不动杆菌属、肠球菌属、黄杆菌属以及大肠埃氏菌属-志贺氏菌属。同时,我们还发现牛场垫料样品及粪污样品中致病菌的数量显著高于其他样品,奶牛乳房炎中的病原种类与牧场奶牛卧床垫料中的微生物种群具有很高的相似性,推测这些乳房炎病原极有可能来自于环境。致病菌在奶牛的养殖环境中普遍环境存在,且携带耐药基因,这些耐药基因通过环境逐渐在奶牛养殖环境中开始流行和传播,尤其携带的β-内酰胺酶耐药基因在牛群中广泛传播,可能造成原料奶内源性β-内酰胺酶持续污染,需引起高度关注。

关键词：奶牛乳房炎养殖环境耐药基因 β-内酰胺酶

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十三次学术研讨会通知

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中国预防兽医学报 2018年第6期 462-462页

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十三次学术研讨会,拟定于2018年8月7日-10日在哈尔滨举行。会议主题为"动物传染病和人类健康"。本次会议时值哈尔滨兽医研究所建所70周年华诞,将与庆祝建... 详细信息

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十三次学术研讨会,拟定于2018年8月7日-10日在哈尔滨举行。会议主题为"动物传染病和人类健康"。本次会议时值哈尔滨兽医研究所建所70周年华诞,将与庆祝建所70周年学术研讨会合并举办。此次研讨会将围绕动物传染病和人兽共患病病原的进化、致病机制、结构和功能、复制调控、免疫反应以及新型疫苗和诊断技术研发等领域的研究进展和成果进行交流和研讨。此次研讨会将汇集国内外杰出的科学家,针对动物传染病和人兽共患病的挑战,交流思想、分享信息、展示最新科研结果,并加强来自不同国家科学家之间的沟通和协作。

关键词：学术研讨会中国免疫学会生物技术学畜牧兽医中国畜牧兽医学会

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脂质组学和宏基因组学揭示AEE缓解ApoE-/-小鼠高脂血症的机制

脂质组学和宏基因组学揭示AEE缓解ApoE-/-小鼠高脂血症的机制

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：路晓荣刘希望李世宏秦哲白莉霞葛文博杨亚军李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所

[目的]脂质代谢异常引起的高脂血症是多种心血管疾病的主要诱因。阿司匹林丁香酚酯（aspirin eugenol ester,AEE）是基于前药阿司匹林和丁香酚,通过酯化作用合成的新型药用化合物。前期研究表明,AEE对高脂血症具有绝对的治疗和预防效果... 详细信息

[目的]脂质代谢异常引起的高脂血症是多种心血管疾病的主要诱因。阿司匹林丁香酚酯（aspirin eugenol ester,AEE）是基于前药阿司匹林和丁香酚,通过酯化作用合成的新型药用化合物。前期研究表明,AEE对高脂血症具有绝对的治疗和预防效果。本研究利用脂质组学和宏基因组学的方法探究AEE改善ApoE小鼠高脂血症的潜在作用机制。材料与方法:本研究采用C57BL/6J小鼠,及基于该小鼠的ApoE小鼠,该敲除小鼠是国际公认的血脂紊乱模型。分组如下:正常组（C57BL/6J小鼠,n=6,饲喂维持饲料）,模型组和AEE给药组(ApoE小鼠,n=6,饲喂高脂饲料)。AEE灌服干预10周后,进行样本采集及检测。结果与讨论:高脂血症主要表现为血脂四项指标的异常,血脂水平可以反映全身脂类的代谢情况。血脂水平检测发现,与正常组相比,模型组的血清TC和LDL-C水平显著上调（P<0.01）,AEE干预后,与模型组相比,给药组的TC和LDL-C水平显著下调（P<0.01）,结果表明AEE改善了小鼠的高脂血症。脂质组学及宏基因组学的应用在高脂血症的相关研究中不断增加。肝脏脂质组的结果显示,与HFD组相比,AEE可显著调节LPC、PEs、SMs和TAGs等脂质的含量;差异脂质的富集结果表明,AEE的作用与其可调控甘油磷脂代谢、脂肪消化吸收、鞘脂信号通路、cAMP信号通路、NF-κB信号通路和Th1/Th2细胞分化等通路有关。盲肠内容物宏基因组的结果表明,与HFD组相比,AEE显著改善了小鼠肠道菌群的紊乱;差异基因的富集结果显示,AEE的作用主要与其调节脂质转运和代谢、心血管疾病、免疫性疾病、能量代谢、不饱和脂肪酸生物合成、鞘糖脂生物合成、胰岛素信号通路和次级胆汁酸生物合成等通路相关。胆汁酸的代谢在高脂血症的研究中扮演着重要的角色。脂质组学和宏基因组学联合分析的结果显示,在AEE组中,Verrucomicrobia、Verrucomicrobiales、Candidatusastranaerophilales和Candidatuselainabacteria的丰度,与SM （d18:1/18:0）和PE （16:0/18:1）的浓度呈显著正相关。综上所述,AEE通过影响肠道菌群和肝脏脂质改善了小鼠高脂血症,且主要通过甘油磷脂代谢途径和胆汁酸代谢等相关途径来发挥作用。

关键词： AEE 高脂血症 ApoE-/-小鼠脂质组学宏基因组学

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四黄止痢散治疗仔猪细菌性痢疾作用机制的网络药理学研究

四黄止痢散治疗仔猪细菌性痢疾作用机制的网络药理学研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：秦千禧金美伶程林丽陈亚南赵军杰中国农业大学动物医学院

[目的]四黄止痢散是以黄连等为主药的中药方剂,用于防治仔猪性腹泻等肠道疾病。然而,其治疗仔猪细菌性痢疾的药理机制仍有待破译。本研究拟通过高效液相色谱法(HPLC)结合网络药理学分析,构建四黄止痢散的"药物-活性成分-疾病靶点&q...

[目的]四黄止痢散是以黄连等为主药的中药方剂,用于防治仔猪性腹泻等肠道疾病。然而,其治疗仔猪细菌性痢疾的药理机制仍有待破译。本研究拟通过高效液相色谱法(HPLC)结合网络药理学分析,构建四黄止痢散的"药物-活性成分-疾病靶点"药理作用网络,筛选并发现四黄止痢散的重要有效成分,预测其作用靶点及信号通路,进而研究四黄止痢散治疗仔猪细菌性痢疾的作用机制。[材料和方法]色谱仪器:Waters 2695-2996;流动相:甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱;色谱柱:SYMMETRYC18 5uM 4.6 mm×250 mm;检测波长:254nm;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL,对三种四黄止痢散样品A、B、C进行检测。通过中药系统药理数据库及分析平台(TCMSP)收集其主药黄连的主要有效成分,合并人类基因综合分析数据库(GeneCards)中仔猪细菌性痢疾疾病作用靶点数据集,绘制药物-疾病靶点交集Venny图用以筛选潜在靶点,再利用Cytoscape(Version 3.9.1)软件构建四黄止痢散-仔猪细菌性痢疾共有靶点蛋白相互作用(PPI)网络图,筛选出四黄止痢散中治疗仔猪细菌性痢疾的候选活性成分并与HPLC结果比对分析,最后寻找其相关通路。[结果]HPLC结果数据显示,四黄止痢散样品A中的主要成分为小檗碱和黄芩苷;样品B中主要为绿原酸;样品C中主要为黄芩苷。TCMSP中经生物利用度(OB> 30%)及类药性(DL> 0.18)筛选得到黄连的14个有效成分,178个作用靶点,GeneCards数据库中仔猪细菌性痢疾的疾病作用靶点为67个;构建药理作用网络,推测出黄连中治疗仔猪细菌性痢疾的主要的候选成分为槲皮素、麻黄苷,潜在治疗靶点包括IL-10、IL-6、CRP、RELA、MAPK13等13个,涉及JAK/STAT、MAPK等免疫、炎症相关信号通路。[结论]对比HPLC与网络药理学分析结果,可得知四黄止痢散的物质基础成分复杂,不同产品的质量差异较大,治疗效果应是多种成分共同作用的结果,四黄止痢散治疗仔猪细菌性腹泻的机制过程具有多靶点、多通路、多选择性的特点。本研究为四黄止痢散治疗仔猪细菌性腹泻有效成分的发现及其药理机制提供了一定的参考依据。

关键词：

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血根碱恢复耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类抗生素敏感性的作用及机制研究

血根碱恢复耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类抗生素敏感性...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：马强陈诗奇王嗣涵王梓乐张帅孙博彦覃麟茜杨柳江海洋中国农业大学动物医学院

[目的]为揭示天然产物血根碱(Sanguinarine,SAN)恢复耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)对β-内酰胺类抗生素敏感性的内在机制。[材料与方法]通过药敏试验了解金葡菌分离株的耐药情况;借助计... 详细信息

[目的]为揭示天然产物血根碱(Sanguinarine,SAN)恢复耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)对β-内酰胺类抗生素敏感性的内在机制。[材料与方法]通过药敏试验了解金葡菌分离株的耐药情况;借助计算化学手段开展基于β-内酰胺酶BlaZ的分子特征分析及天然产物抑制剂的高通量虚拟筛选,并结合协同抗菌试验进行确证;利用分子模拟、荧光淬灭及等温滴定量热技术(ITC)分析相互作用;结合透射电镜(TEM)进行细菌形态学观察;以荧光定量PCR (qRT-PCR)方法明确SAN所影响的基因及调控通路。[结果与讨论]结果显示:金葡菌分离株对青霉素类药物具有最为突出的耐药率,青霉素(100%),氨苄西林(82.61%)。同时,对菌株携带的β-内酰胺酶BlaZ进行克隆表达及分子特征分析,可知SER70、LYS73及ASN132等催化水解腔中的残基具备高度保守性并参与β-内酰胺类药物的水解。此外,浓度为2～4μg/mL的SAN能使标准株MRSA 33591及分离株对氨苄西林的最小抑菌浓度(MIC)降低约16倍。SAN也可与BlaZ的LYS73和TYR105等残基键合而产生互作,在长达1200 ns的全原子动力学模拟中表现出持续的稳定性。等温滴定量热技术测定可知,SAN与β-内酰胺酶BlaZ存在直接的结合活性。值得注意的是,TEM观察发现SAN可显著影响MRSA细胞壁的组织和交联,即在2～4μg/ml的SAN浓度下,存在PBP2a蛋白的MRSA菌株细胞壁出现明显的粗糙和散乱,呈缺乏交联的形貌,而敏感菌株(MSSA)细胞壁并未发生上述显著变化,且在qRT-PCR试验结果中获得一致性发现,表明SAN可通过影响PBP2a依赖及非依赖途径扰动MRSA细胞壁的稳态。综上,本研究中的天然产物血根碱可通过多重生物学效应恢复MRSA菌株的药物敏感性,包括影响β-内酰胺酶BlaZ和PBP2a的水平及功能,破坏细胞壁合成及代谢稳态等方面,可为MRSA菌株的防控和耐药性的缓解提供有效的策略。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌血根碱 β-内酰胺类抗生素 β-内酰胺酶细胞壁

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复合亚氯酸钠泡腾片的消毒效果及其对菌群结构的影响研究

复合亚氯酸钠泡腾片的消毒效果及其对菌群结构的影响研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：吕珍林张旭财曾振灵熊文广广东省兽药研制与安全评价重点实验室/国家兽药安全评价(环境评估)实验室/国家兽医微生物耐药性风险评估实验室/华南农业大学兽医学院

引言集约化水产养殖模式伴随着更频繁的疾病发生,给水产养殖业造成了重大的经济损失。水产消毒是预防和控制水产动物疾病的重要措施,还能去除一定量的抗生素耐药细菌(ARB)和抗生素耐药基因(ARGs)。本试验评价复合亚氯酸钠泡腾片的消毒效... 详细信息

引言集约化水产养殖模式伴随着更频繁的疾病发生,给水产养殖业造成了重大的经济损失。水产消毒是预防和控制水产动物疾病的重要措施,还能去除一定量的抗生素耐药细菌(ARB)和抗生素耐药基因(ARGs)。本试验评价复合亚氯酸钠泡腾片的消毒效果,分析其对ARB和ARGs的去除作用和对养殖水体菌群结构的影响,旨在为实际生产用药提供依据。方法按照《水产养殖用消毒剂药效试验技术指导原则》的要求筛选中和剂,并通过悬液定性、定量杀灭细菌试验,探究不同因素对复合亚氯酸钠泡腾片消毒效果的影响,最后研究其在现场消毒的应用效果。结果实验室试验结果表明得出1%硫代硫酸钠溶液可作为复合亚氯酸钠泡腾片溶液中和剂。复合亚氯酸钠泡腾片溶液的杀菌效果随着有效浓度的升高、作用时间的延长而增强;温度(4～40℃)和pH(2～10)对杀菌效果无明显影响,随着有机物浓度的提高,杀菌率也随之下降。模拟现场消毒试验结果显示当有效浓度为3 mg/L时,作用120 min,对爱德华氏菌ATCC15947的杀灭率达99.99%;作用10min,对嗜水气单胞菌ATCC35654的杀灭率达100%。现场消毒试验结果显示用量为200片/亩时,作用30min对自然菌的杀灭率达100%。以携带抗生素耐药基因sul1和tet(A)的大肠杆菌作为指示菌研究复合亚氯酸钠泡腾片溶液对其的去除效果。综合表明,随着投入浓度的增大,ARB的去除数量增大,细菌膜损伤的比例也随之增大,作用1h时,去除ARB数量可达4.2-logio CFU/mL;而随着浓度的增大,ARGs的去除效果并没有显著的变化。将相同来源的养殖水体分装至养殖水箱,随机分成对照组和试验组,试验组加入3mg/L的复合亚氯酸钠泡腾片,消毒1h和3h后采集样本进宏基因组测序。结果显示,与对照组相比,有益菌属Lactobacillus和Cetobacterium相对丰度升高,但Enterococcus和Pseudomonas等带有条件致病菌的菌属相对丰度也随之升高。结论复合亚氯酸钠泡腾片消毒剂消毒效果良好,能够有效去除ARB和ARGs,对养殖水体菌群结构具有一定的改良作用。

关键词：亚氯酸钠消毒效果抗生素耐药菌抗生素耐药基因菌群结构

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甲霜灵对映体在乌鳢体内的立体选择性药代动力学和残留消除规律研究

甲霜灵对映体在乌鳢体内的立体选择性药代动力学和残留消除规律研...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：周豪张媚玉单奇黄河清郑光明尹怡中国水产科学研究院珠江水产研究所/农业农村部水产品质量安全风险评估实验室

[目的]甲霜灵（metalaxyl）是一种手性酰胺类杀菌剂,广泛用于预防和治疗真菌感染引起的各种淡水鱼类疾病。甲霜灵两个对映体（R-甲霜灵和S-甲霜灵）在毒性和生物活性上具有显著差异,但在水产养殖中仍以外消旋体形式使用。本文基于优化... 详细信息

[目的]甲霜灵（metalaxyl）是一种手性酰胺类杀菌剂,广泛用于预防和治疗真菌感染引起的各种淡水鱼类疾病。甲霜灵两个对映体（R-甲霜灵和S-甲霜灵）在毒性和生物活性上具有显著差异,但在水产养殖中仍以外消旋体形式使用。本文基于优化的甲霜灵对映体分离分析方法,分别研究了外消旋体甲霜灵和高活性对映单体R-甲霜灵给药后,两个对映单体在乌鳢体内的立体选择性药代动力学和残留消除特征,为该手性兽药在临床上的合理使用提供理论依据。[方法]试验乌鳢共150尾（体重300 g左右）,随机分为两组,分别用外消旋体甲霜灵（9 mg/L）和单一对映体R-甲霜灵（4.5 mg/L）药浴2 h。于给药后不同时间点采集血浆和组织（肌肉、肝脏和肾脏）样品。血浆样品用0.1%甲酸乙腈沉淀蛋白、离心,上清液过膜上机分析。组织样品用0.1%甲酸乙酸乙酯萃取,正己烷除脂,氮气吹干后,残渣用流动相复溶,过膜上机分析。采用EnantioPak?Y1R手性色谱柱（150 mm×4.6 mmi.d.,5μm）进行对映体分离,以乙腈-水-甲酸（75/25/0.1,v/v/v）为流动相进行等度洗脱,甲霜灵-D6为内标,在正离子模式下进行多反应监测分析。采用WinNonlin软件的非房室模型进行拟合,分别计算R-甲霜灵和S-甲霜灵的药代动力学参数。[结果]外消旋体甲霜灵给药时,R-甲霜灵和S-甲霜灵的药代动力学参数如下:达峰浓度(C)分别为4.76μg/mL和5.70μg/mL,药时曲线下面积（AUC）分别为25.4μgh/mL和32.1μgh/mL,消除半衰期(t)分别为20.8 h和25.4h。甲霜灵在组织中的浓度依次为肾脏>肝脏>肌肉,并且在三种组织中S-甲霜灵的浓度都高于R-甲霜灵。R-甲霜灵给药时,在血浆和组织中均未检测到S-甲霜灵,表明甲霜灵在乌鳢体内未发生对映体之间的转化;R-甲霜灵的药代动力学参数C、AUC和t分别为4.21μg/mL、22.0μgh/mL和17.1 h。[结论]甲霜灵在乌鳢体内的消除具有立体选择性,R-甲霜灵消除更快;并且甲霜灵在乌鳢体内不会发生对映体之间的转化。鉴于此,临床上使用高效低毒的R-甲霜灵代替外消旋体甲霜灵可能是更好的选择。

关键词：甲霜灵对映体乌鳢立体选择性药代动力学残留消除规律

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