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作者

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37 篇 林映才
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排序：

Survey of Spirometra erinaceieuropaei in frogs in Hunan province and species identification by PCR method

Survey of Spirometra erinaceieuropaei in frogs in Hunan prov...

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者： W.Liu~1,F.Li~1,M.Y.Tan~2,T.Hu~1,D.L.Zeng~1,F.F.Yang~1,Y.Liu1* (1.College of Veterinary Medicine,Hunan Agricultural University,Changsha 410128,Hunan province,PR China 2. Center for Quality Quarantine and Examination of Livestock,Poultry and Aquaculture Products,Changsha 410006, Hunan province,PR China)

Spirometra erinaceieuropaei is a diphyllobothriid cestode whose adult stage occurs mainly in cat-like carnivores,but occasionally in canids and *** conducted the survey on from Rana nigromaculata and Rana rugulosa in Hunan *** is the first report of *** infections in frogs in Hunan province,with the plerocercoids being recovered from infection of different parts in *** infection of frogs in different districts is *** average infection rate in different frogs is 24.2%(35/153).The infection rate of different parts in frog showed 6.5%(anterior limb),20.3%(hind limb),5.9%(trunk)and 6.5%(internal organs),*** species of Sparganum have been identified by the method of *** study determined partial sequences of the cox1 gene and compared them to sequence data from the CenBank/EMBL/DDBJ nucleotide sequence *** facts indicate that all isolates of *** used in this study,which were collected from Hunan province,belong to the same *** on cox1 gene sequences,genus Spirometra is clearly separate from the genus Diphyllobothrium. It seems that the genus Spirometra is not a synonym of the genus Diphyllobothrium.

关键词： Spirometra erinaceieuropaei Diphyllobothrium frogs cox1 gene

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Functional Replacement of the FabD Protein of Escherichia coli Fatty Acid Synthesis by Eimeria tenella MCAT Homologue

Functional Replacement of the FabD Protein of Escherichia co...

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者： Sun Ming-fei~(1,2),Zhu Guan~3,Qin Zong-hua~(1,2),Yuan Jian-feng~(1,2),Yu Jin-shu~(1,2),Lv Min-na~(1,2), Wu Cai-yan~(1,2),Xie Ming-quan~(1,2),Cai Jian-ping~(1,2) (1.Institute of Veterinary Medicine,Guangdong Academy of Agricultural Sciences,Guangzhou,510640 2.Guangdong Common Lab of Veterinary Public Health,Guangzhou,510640 3.Lab of Molecular Parasitology,School of Veterinary and Biomedicine Science,Texas A&M University,USA)

TypeⅡfatty acid biosynthetic system is an essential process for bacteria,apicomplexans and some plants ***,Escherichia coli provides the paradigm for the ***,little was known about the fatty acid metabolism in Eimeria spp(apicomplexans).Here,we report a *** homologous gene(EtMCAT) to *** fabD,the protein shows 37%homology to *** FabD amino acid sequence in the coding region for the mature ***,the predicted structure of EtMCAT is similar to *** FabD crystal structure except for a few differences in secondary structure *** replacement of fabD gene with amber mutation of *** temperature-sensitive LA2-89 strain by *** MCAT homologue using homologous recombination with suicide plasmid pDS132,the transgenic *** strain which fabD gene with an amber mutation was replaced by cDNA encoding mature *** MCAT could restore growth at non-permissive temperature(39℃).The results demonstrated the functional complementation and direct function of *** our knowledge,this is the first functional evidence supporting the identification of *** cDNA for MCAT.

关键词： Eimeria tenella Escherichia coli TypeⅡfatty acid biosynthetic Homologous gene Functional replacement Malonyl-CoA:ACP transacylase

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以轮状病毒感染的猪小肠上皮细胞为模型研究轮状病毒和益生菌对肠上皮细胞屏障功能的影响

以轮状病毒感染的猪小肠上皮细胞为模型研究轮状病毒和益生菌对肠...

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：刘芳宁 Tammy Bui 杨增岐西北农林科技大学动物医学院

本研究中嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus,LA)或者鼠李糖乳酸杆菌(Lactobacillusrhamnosus GG,LGG)在猪轮状病毒(Porcine rotavirus,pRV)OSU或人轮状病毒(Human rotavirus,hRV)Wa接种IPEC-J2细胞前24 h和接种细胞后1 h被用来处理细胞。结果表明pRV感染可使IPEC-J2细胞单层跨膜电阻(Trans-epithelial electrical resistance,TEER)在感染后6-18 h显著下降,但在接种后24 h恢复到正常水平,这和RV感染在体内引起的病程相似,进一步说明了IPEC-J2细胞功能接近正常猪小肠上皮细胞。LA可以有效阻止pRV感染造成的细胞单层TEER下降,但LGG对pRV感染造成的细胞单层TEER变化没有明显影响。在病毒接种后24 h,LA或LGG处理或/和pRV感染细胞对细胞的通透性和紧密连接(Tight junction,TJ)蛋白(occludin、ZO-1、claudin-1、claudin-3和claudin-4)及粘合连接(Aherents junction,AJ)蛋白(a-catenin和β-catenin)在细胞上的分布没有明显影响,这可能与pRV感染后采样时间过晚有关。LGG明显提高正常肠上皮细胞的TEER及AJ蛋白a-catenin和β-catenin的表达量,说明LGG对肠屏障功能有维持和增强作用。但在LA或LGG处理和/或pRV感染期间(病毒接种后6～18 h),随着TEER的变化,细胞单层通透性和细胞中TJ和AJ蛋白数量和分布是否随时间而改变,还需进一步的研究检测。pRV感染的IPEC-J2细胞模型是一个完全同源模型,这个模型对研究益生菌对RV感染肠上皮细胞屏障功能的影响非常有用。

关键词：轮转病毒益生菌肠上皮细胞屏障功能

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鸭瘟病毒UL46基因的转录时相和表达时相分析

鸭瘟病毒UL46基因的转录时相和表达时相分析

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：路立婷程安春汪铭书蒋金凤朱德康贾仁勇罗启慧陈孝跃四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川农业大学动物微生态工程研究中心

本实验根据DPV UL46基因和鸭β-actin内参基因序列分别设计了目标基因引物U3/U4(扩增产物为121bp)和内参基因引物U1/U2(扩增产物为178bp)。在测定完UL46基因的标准曲线和熔解曲线后,利用总RNA抽提试剂盒分别提取感染DPV后的2h、4h、6h... 详细信息

本实验根据DPV UL46基因和鸭β-actin内参基因序列分别设计了目标基因引物U3/U4(扩增产物为121bp)和内参基因引物U1/U2(扩增产物为178bp)。在测定完UL46基因的标准曲线和熔解曲线后,利用总RNA抽提试剂盒分别提取感染DPV后的2h、4h、6h、8h、12h、18h、24h、30h、36h、42h、48h、54h、60h、66h、72h和80h不同时间段的DEF mRNA并进行反转录,然后以cDNA为模板,SYBR GreenⅠ染料法进行荧光定量PCR扩增。结果表明,UL46基因的转录在12h左右时开始增加,随着时间的延长,转录量逐渐增加,在24h左右显著增加并在54h左右达到峰值,此后表达量逐渐降低。收集感染DPV不同时间段的DEF,反复冻融3次裂解细胞并提取病毒蛋白,使用纯化后的兔抗UL46M IgG通过Western blot对DPV感染的DEF中的UL46蛋白的表达时相进行分析,结果显示DPV UL46蛋白感染宿主细胞后12h可见约81.8kD的特异性条带,随时间推移表达量逐渐增多,在60h左右达到最大值,符合晚期基因的表达谱特征,同时与UL46基因的转录时相相符。转录时相和表达时相结果说明UL46基因的转录表达规律符合基因由转录到翻译的生命周期规律,且具有先转录后表达的模式,也表明了DPV UL46基因是一个晚期基因。

关键词： DPV UL46基因转录表达时相分析

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IBDV抗原表位与HBcAg嵌合基因的分子设计及其表达产物分析

IBDV抗原表位与HBcAg嵌合基因的分子设计及其表达产物分析

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：刘小娟王永山欧阳伟张海彬王晓丽王忠灿唐雨德江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院南京军区军事医学研究所

为了提高模拟IBDV多表位基因5epis的免疫效力,运用重叠延伸PCR技术,在乙型肝炎病毒核心抗原(Hepatitis B core antigen,HBcAg)基因的231位～232位核苷酸(77位～78位氨基酸残基)之间插入BamH I和EcoR I酶切位点,构建HBcAg修饰基因(Modifi... 详细信息

为了提高模拟IBDV多表位基因5epis的免疫效力,运用重叠延伸PCR技术,在乙型肝炎病毒核心抗原(Hepatitis B core antigen,HBcAg)基因的231位～232位核苷酸(77位～78位氨基酸残基)之间插入BamH I和EcoR I酶切位点,构建HBcAg修饰基因(Modified HBc,mHBc)表达质粒pET-mHBc。然后,将5epis基因定向插入到该表达质粒mHBc基因中,获得嵌合基因mHBc-5epis表达质粒pET-mHBc-5epis,并在大肠杆菌中表达。用SDS-PAGE分析,重组嵌合蛋白的分子量约为29kDa,表达量约占菌体总蛋白的47.6%;在Western-blotting试验中,重组嵌合蛋白与IBDV抗体反应形成1条特异性蛋白带。将重组菌超声破碎后,用电镜观察,可见重组嵌合蛋白呈病毒样颗粒(VLP),直径约60 nm～80 nm;用IBDV抗体夹心ELISA检测,抗原效价达到2.0×10～2。本研究成功构建了5epis与HBcAg嵌合基因,在大肠杆菌中高效表达了具有IBDV抗原反应性的重组嵌合蛋白并形成了VLP,具有成为颗粒化表位型IBD基因工程疫苗的应用前景。

关键词：传染性法氏囊病病毒(IBDV) 乙肝病毒核心抗原(HBcAg) 抗原表位嵌合基因

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微生态制剂对文蛤非特异性免疫因子影响的研究

微生态制剂对文蛤非特异性免疫因子影响的研究

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：常维山山东农业大学动物科技学院

在实验生态条件下,观察芽胞杆菌浓度分别为10～5cfu/L、10～6cfu/L和10～7cfu/L的微生态制剂对文蛤暴露后第1d,3d,7d,21d,28d和恢复原生态14d后对文蛤消化腺中的抗菌活力、溶菌活力、超氧化物歧化酶活力(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力的影... 详细信息

在实验生态条件下,观察芽胞杆菌浓度分别为10～5cfu/L、10～6cfu/L和10～7cfu/L的微生态制剂对文蛤暴露后第1d,3d,7d,21d,28d和恢复原生态14d后对文蛤消化腺中的抗菌活力、溶菌活力、超氧化物歧化酶活力(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力的影响,确定微生态制剂对文蛤非特异性免疫力的影响;用副溶血弧菌对诱导28 d后的文蛤进行攻毒实验,测定免疫保护率,以确定微生态制剂对文蛤抗病力的影响。结果表明,各浓度组的微生态制剂均能显著提高文蛤非特异性免疫因子的活力,对消化腺抗菌活力和SOD活性的促进作用尤为显著,且不同浓度试验组之间的免疫因子活力也有显著差异。与对照组相比,溶菌活力和CAT活力在第7d就出现显著性增高(P<0.05),抗菌活力和SOD活力在第14d与对照组出现显著性差异(P<0.05);恢复试验14d后,溶菌活力和SOD活力恢复到对照组的水平;抗菌活力和CAT活力仍明显高于对照组(P<0.05)。攻毒试验结果显示,试验组的免疫保护率分别达到22.2%、27.8%和44.4%,对照组文蛤死亡率达到90%,表明所用微生态制剂可以促进文蛤的非特异性免疫功能。

关键词：微生态制剂芽孢杆菌文蛤非特异性免疫因子免疫保护率

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枯草芽孢杆菌B1对高脂日粮诱导小鼠氧化应激的保护作用

枯草芽孢杆菌B1对高脂日粮诱导小鼠氧化应激的保护作用

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：周绪霞吴红照李卫芬文静崔志文浙江大学动物科学学院饲料科学研究所浙江大学动物分子营养学教育部重点实验室

将45只ICR雄性小鼠,随机均分为三组,每组3个重复,每个重复5只:A组为空白对照组,饲喂小鼠基础日粮;B组为氧化应激组,饲喂高脂日粮;C组为益生菌组,在高脂日粮中添加10～8CFU/g枯草芽孢杆菌B1制剂,试验期为30d。试验结束后测定了各处理组... 详细信息

将45只ICR雄性小鼠,随机均分为三组,每组3个重复,每个重复5只:A组为空白对照组,饲喂小鼠基础日粮;B组为氧化应激组,饲喂高脂日粮;C组为益生菌组,在高脂日粮中添加10～8CFU/g枯草芽孢杆菌B1制剂,试验期为30d。试验结束后测定了各处理组小鼠增重、血脂等血清生化指标及血清抗氧化功能。结果表明:高脂日粮显著增加了小鼠的末期体重（8.57%,P<0.01）和日增重（58.33%,P<0.05）,而芽孢杆菌B1则显著降低了高脂日粮引起的小鼠的增重（P<0.01）。血清生化指标测定表明,高脂日粮显著升高了小鼠血清中的总胆固醇（Total cholesterol,TC）含量、葡萄糖浓度和谷丙转氨酶（Glutamic-pyruvic transaminase,GPT）活性,并显著降低了血清抗O活力、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GSH-Px）活性及还原型谷胱甘肽（Reducedglutathione,GSH,P<0.01）含量,而添加芽孢杆菌B1则使小鼠血清中葡萄糖浓度、尿素氮含量、谷草转氨酶（Glutamic-oxalacetic transaminase,GOT）和GPT活性均显著降低（P<0.05）,并显著提高了小鼠血清总抗氧化能力（P<0.05）。以上结果提示枯草芽孢杆菌B1能够有效地提高小鼠血清抗氧化活性、保护小鼠机体免受高脂日粮对小鼠的损伤,并减轻高脂日粮引起的小鼠肥胖。

关键词：枯草芽孢杆菌高脂日粮抗氧化小鼠

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猪瘟病毒E2蛋白乳酸菌表达系统的构建

猪瘟病毒E2蛋白乳酸菌表达系统的构建

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：童亮肖晶刘旭川王生奎孙绍美徐佳柴俊张以芳云南农业大学动物科学技术学院

猪瘟(Swine fever)是由猪瘟病毒(Classic Swine FeverVirus,CSFV)引起的一种高度接触性传染病,猪是该病毒唯一的自然宿主。E2即gp55,是CSFV的囊膜糖蛋白之一,是猪瘟病毒最重要的中和性抗原,也是病毒所有糖蛋白中保守性最低、最易变异的... 详细信息

猪瘟(Swine fever)是由猪瘟病毒(Classic Swine FeverVirus,CSFV)引起的一种高度接触性传染病,猪是该病毒唯一的自然宿主。E2即gp55,是CSFV的囊膜糖蛋白之一,是猪瘟病毒最重要的中和性抗原,也是病毒所有糖蛋白中保守性最低、最易变异的蛋白,因此常选择CSFV的E2蛋白作为检测猪瘟和制备亚单位疫苗的候选抗原。本试验在诱变猪瘟E2稀有密码子,以适以原核表达,构建原核表达质粒pET28aE2的基础上,使用重组原核表达菌株BL21(DE3)/pET28aE2,经重组PCR技术,对猪瘟病毒E2基因进行PCR扩增,将PCR扩增的E2基因克隆至乳酸菌表达质粒pNZ44中,构建了猪瘟病毒E2基因的乳酸菌重组表达质粒pNZ44-E2。将pNZ44-E2转入受体菌乳杆菌中,通过优化生长条件,有效表达了猪瘟病毒主要保护性抗原E2基因,免疫印迹试验表明所表达的蛋白是CSFV特异性的。研究为猪瘟E2蛋白在猪瘟的口服免疫及粘膜免疫防制方面的应用奠定了基础,也为乳酸菌的性能改进提供了新的思路。

关键词：猪瘟病毒 E2基因乳酸菌表达系统乳酸菌

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间接免疫荧光检测DPV gC基因疫苗在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律

间接免疫荧光检测DPV gC基因疫苗在雏鸭体内的抗原表达时相和分布...

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：沈福晓程安春汪铭书贾仁勇朱德康陈孝跃蒋金凤四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川农业大学动物微生态工程研究中心

本研究利用已建立的间接免疫荧光检测DPV gC基因疫苗(pcDNA-DPV-gC)在雏鸭体内的表达时相和分布规律,为DPV gC基因疫苗的进一步的研究和临床应用提供基础数据。将鸭瘟病毒gC基因疫苗(pcDNA-DPV-gC)分别以不同剂量(6、3和1μg)基因枪免... 详细信息

本研究利用已建立的间接免疫荧光检测DPV gC基因疫苗(pcDNA-DPV-gC)在雏鸭体内的表达时相和分布规律,为DPV gC基因疫苗的进一步的研究和临床应用提供基础数据。将鸭瘟病毒gC基因疫苗(pcDNA-DPV-gC)分别以不同剂量(6、3和1μg)基因枪免疫20日龄雏鸭,以空白质粒和生理盐水为对照;于免疫后4 h、12 h、1 d、3 d、5 d、7 d、2 w、4 w、6 w和10 w随机宰杀2只雏鸭,采集心、肝、脾、肺、肾、胰、脑、胸腺、哈氏腺、法氏囊、食道、十二指肠、盲肠、直肠以及注射部位皮肤等组织器官,应用间接免疫荧光检测pcDNA-DPV-gC在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律。结果显示免疫后1 d,各剂量组可在肝、十二指肠、盲肠、直肠和注射部位皮肤发现阳性信号,其中注射部位皮肤的阳性信号最强;免疫后2w,各组织中的抗原表达量达到高峰,其中肝、胸腺、法氏囊、十二指肠、盲肠和直肠是DPV gC蛋白主要的分布器官;免疫后10w,各剂量组仍在肝、脑、十二指肠、盲肠和直肠发现持续表达DPV gC蛋白;而对照组中各组织均未检出阳性信号。不同免疫剂量的pcDNA-DPV-gC与其在雏鸭体内的抗原表达和分布呈现一定的正相关,表现出一定的剂量依赖性。研究表明不同剂量pcDNA-DPV-gC可以顺利进入雏鸭体内,能在雏鸭各组织中广泛分布并能持续表达DPV gC蛋白。

关键词：鸭瘟病毒gC基因疫苗间接免疫荧光表达时相分布规律

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Pharmacokinetics under the effect of self-licking behavior in eprinomectin topically-treated rabbits and its influence on clinical efficacy

Pharmacokinetics under the effect of self-licking behavior i...

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者： Huiqiang Wen~1 Fangfei Wang~1 Zhenzhong Yang~1 Lu Lv~1 Baoliang Pan~1 Yuwan Wang~2 Ming Wang~(1,*) (1.China Agricultral University,College of Veterinary Medicine,Beijing 100193 2.Beijing C.A.U Bio-technology Co., Ltd.,Beijing 100091)

Eprinomectin is a worldwide-used endectocide compound largely administered to beef and dairy cattle as a topical formulation(pour-on).The present work herein aimed to evaluate the plasma disposition of topically administered eprinomectin in rabbits,as well as that under the effect of animal self-licking *** New Zealand rabbits were given one single topical(1000 ug kg-1) administration of *** were allocated into two groups(n=5):licking group where self-licking was free and non-licking *** comprison,significant differences were observed between self-licking and non-licking groups in plasma disposition of *** contributed to in a shorter half-life of absorption(29.44±7.81 and 14.85±2.79 h in licking) and a higher Cmax value for eprinomectin (21.95±5.36 and 6.98±0.72 ng ml-1 in licking),together with a markedly shorter mean residence time (106.66±7.39 and 50.72±3.45 h in licking).More importantly,the area under the plasma curve is similar(758.56±60.97 and 733.43±80.32 ng h ml-1,respectively) for both groups,in contrast to that for ivermectin in cattle reported. Altogether,the present experiment demonstrates that pharmacokinetic profiles for eprinomectin following pour-on administration in rabbits,the effect of animal natural self-licking behavior on plasma disposition,and the relationship between drug disposition and clinical ***,it suggests that a double cattle-based dose rate can be administered for pour-on eprinomectin formulation to provide an effective and rational approach to control of ear mite in rabbits.

关键词： Pharmacokinetics under the effect of self-licking behavior in eprinomectin topically-treated rabbits and its influence on clinical efficacy

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