以巨型艾美球虫南通株(Eimeria maxima NT strain)纯化的配子体提取的总RNA为模板,设计特异性引物,应用RT-PCR技术扩增出gam82基因的特异性片段。将扩增片段插入pGEM-T Easy载体,转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,经蓝白斑筛选、酶切鉴定为...
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以巨型艾美球虫南通株(Eimeria maxima NT strain)纯化的配子体提取的总RNA为模板,设计特异性引物,应用RT-PCR技术扩增出gam82基因的特异性片段。将扩增片段插入pGEM-T Easy载体,转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,经蓝白斑筛选、酶切鉴定为阳性的克隆进行测序验证。结果显示,克隆的基因全长为1 791个核苷酸,具有一个完整的开放阅读框,编码596个氨基酸,其序列与巨型艾美球虫H株的完全一致。用PredictingAntigenic Peptides预测软件分析gam82基因编码区的抗原性,显示存在19个抗原决定簇,其中酪氨酸富集区所在的第282~503位氨基酸具有抗原位点达8个之多(在本研究中命名为gam82-Y区)。
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