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主题

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49 篇 肉鸡
46 篇 大肠杆菌
43 篇 肉仔鸡
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38 篇 断奶仔猪
36 篇 克隆
36 篇 pcr
34 篇 免疫功能
34 篇 序列分析
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31 篇 原核表达
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28 篇 免疫
28 篇 基因表达

机构

128 篇 华南农业大学
128 篇 中国农业大学
110 篇 扬州大学
109 篇 南京农业大学
99 篇 四川农业大学
96 篇 解放军军需大学
89 篇 浙江大学
70 篇 东北农业大学
59 篇 河南农业大学
58 篇 华中农业大学
55 篇 山东农业大学
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47 篇 中国农业科学院哈...
45 篇 中国农业科学院哈...
40 篇 西北农林科技大学
38 篇 广西大学
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33 篇 甘肃农业大学
33 篇 广东省农业科学院...
28 篇 黑龙江省兽医卫生...

作者

38 篇 金宁一
37 篇 蒋宗勇
37 篇 林映才
29 篇 刘秀梵
28 篇 程安春
26 篇 汪铭书
26 篇 涂长春
25 篇 王恬
25 篇 童光志
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22 篇 毕英佐
22 篇 单安山
22 篇 余兴龙
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21 篇 周桂莲
21 篇 王永坤
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20 篇 刘镇明
20 篇 席鹏彬
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吕氏泰勒虫主要表面蛋白P32基因的克隆与序列分析

吕氏泰勒虫主要表面蛋白P32基因的克隆与序列分析

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：刘爱红关贵全刘军龙李有全马米玲牛庆丽任巧云殷宏罗建勋中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室

从吕氏泰勒虫宁县株中提取RNA,用RT-PCR方法扩增主要表面蛋白P32基因的cDNA片段。克隆后测定其核苷酸序列,并推导了相应的氨基酸序列。结果表明,扩增的P32基因长度为875个核苷酸,共编码284个氨基酸。核苷酸序列与已发表的牛的4种泰勒虫... 详细信息

从吕氏泰勒虫宁县株中提取RNA,用RT-PCR方法扩增主要表面蛋白P32基因的cDNA片段。克隆后测定其核苷酸序列,并推导了相应的氨基酸序列。结果表明,扩增的P32基因长度为875个核苷酸,共编码284个氨基酸。核苷酸序列与已发表的牛的4种泰勒虫的主要表面蛋白基因相比较,其与瑟氏泰勒虫俄罗斯株、日本株、中国辽阳株的核苷酸和氨基酸序列相似性均在98.9%以上。其推导的氨基酸序列中有3个糖基化位。研究数据已提交至GenBank,并申请到一个登录号GQ281044。研究结果为我国羊泰勒虫病的免疫诊断和防止奠定基础。

关键词：吕氏泰勒虫表面蛋白P32基因克隆序列分析

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巨型艾美耳球虫配子体蛋白GAM56基因的克隆、表达及应用的初步研究

巨型艾美耳球虫配子体蛋白GAM56基因的克隆、表达及应用的初步研究

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：刘巧荣丁隽韩京朋张晓燕刘群中国农业大学动物医学院

GAM56是Eimeria maxima的配子体蛋白,从配子体阶段收集的天然蛋白具有较好的母源免疫保护作用。本研究克隆了Eimeira maxima扬州株的配子体蛋白基因Gam56,将其与pGEX-6p-1表达载体连接,构建原核表达质粒,用BL21受体菌表达GST-GAM56融合... 详细信息

GAM56是Eimeria maxima的配子体蛋白,从配子体阶段收集的天然蛋白具有较好的母源免疫保护作用。本研究克隆了Eimeira maxima扬州株的配子体蛋白基因Gam56,将其与pGEX-6p-1表达载体连接,构建原核表达质粒,用BL21受体菌表达GST-GAM56融合蛋白。经SDS-PAGE及Western Blot检测,成功表达出GSTGAM56融合蛋白。优化表达条件,获得大量GST-GAM56融合蛋白,一部分用GST-3C蛋白酶切除GST标签,分别获得大量纯化的GST-GAM56融合蛋白和GAM56蛋白。Western boltting检测两蛋白均能被***阳性血清识别。分别用纯化的GST-GAM56和GAM56蛋白分别免疫处于产蛋高峰期的白来航母鸡,检测免后母鸡血清抗体和卵黄抗体水平及抗体持续存在时间,同时进行子代雏鸡的抗球虫免疫保护和球虫病的治疗效果评价。以综合评价***的重组Gam56的母源免疫效果。

关键词： Eimeria maxima Gam56 母源抗体母源免疫

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衡水某奶牛场临床型乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏试验

衡水某奶牛场临床型乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏试验

引用

中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第五届全体会议第十次学术研讨会

作者：杨建辉秦建华冯向辉陈松韩旭东张爱民李铁拴河北农业大学动物科技学院保定容城职教中心

无菌采集衡水市某奶牛场临床型乳房炎牛的乳样20份,进行了病原菌的分离培养及生化鉴定及药敏试验。从20份乳样中共分离到9种162株细菌,其中金黄色葡萄球菌58株(35.8%)、大肠杆菌58株(35.8%)、表皮葡萄球菌10株(6.2%)、腐生葡萄球菌6株(3... 详细信息

无菌采集衡水市某奶牛场临床型乳房炎牛的乳样20份,进行了病原菌的分离培养及生化鉴定及药敏试验。从20份乳样中共分离到9种162株细菌,其中金黄色葡萄球菌58株(35.8%)、大肠杆菌58株(35.8%)、表皮葡萄球菌10株(6.2%)、腐生葡萄球菌6株(3.7%)、乳房链球菌10株(6.2%)、无乳链球菌8株(4.9%)、停乳链球菌10株(6.2%)、克雷伯氏菌1株(0.6%)、变形杆菌1株(0.6%)。结果表明:葡萄球菌、大肠杆菌为主要病原菌,其次是链球菌,占总菌数的98.8%(160/162);药敏试验结果表明:主要致病菌对硫酸头孢喹诺注射液(M、G)、中药复方黄连乳腺炎注射液(M)、林可霉素、头孢曲松钠、新霉素等5种药物呈高度敏感。

关键词：奶牛乳房炎病原菌分离鉴定药敏试验

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吉氏巴贝西原虫TRAP分子的功能鉴定

吉氏巴贝西原虫TRAP分子的功能鉴定

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：周金林周勇志张厚双曹杰王欣之中国农业科学院上海兽医研究所

TRAP(Thrombospondin-related anonymous protein)分子是顶复体原虫中高度保守的一种功能蛋白质分子。本研究从吉氏巴贝西原虫分离鉴定了一个新的TRAP分子,命名为BgTRAP(Babesia gibsoni TRAP)。它的cDNA全长2,373 bp,含有一个完整的开... 详细信息

TRAP(Thrombospondin-related anonymous protein)分子是顶复体原虫中高度保守的一种功能蛋白质分子。本研究从吉氏巴贝西原虫分离鉴定了一个新的TRAP分子,命名为BgTRAP(Babesia gibsoni TRAP)。它的cDNA全长2,373 bp,含有一个完整的开放阅读框,预计编码80-kDa的蛋白质。同源性分析表明,BgTRAP与其他顶复体原虫的TRAP高度同源,并含有典型的结构功能域VWA和,TSP1。Southern blot结果显示,BgTRAP是多拷贝基因编码。重组表达BgTRAP的抗血清可以感染红细胞中80-kDa特异蛋白,共聚焦激光显微镜观察表明。该蛋白分子位于虫体的胞浆区域。重组表达BgTRAP可以识别急性或者慢性感染的吉氏巴贝西原虫感染犬血清,证明它是一种具有免疫原性的蛋白抗原。此外,研究还发现,重组BgTRAP有二价阳离子依赖的结合犬红细胞的特点,抗重组BgTRAP的血清可以显著抑制免疫缺陷小鼠体内虫体的生长。这些研究结果提示,吉氏巴贝西原虫TRAP分子在入侵红细胞中具有重要作用,在开发防治疫苗和免疫诊断试剂上具有重要价值。

关键词：重组表达功能鉴定

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三株牛瑟氏泰勒虫P32表面蛋白基因的克隆与序列分析

三株牛瑟氏泰勒虫P32表面蛋白基因的克隆与序列分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：刘爱红关贵全刘军龙李有全马米玲牛庆丽任巧云殷宏罗建勋中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

为分析我国分离的三株牛瑟氏泰勒虫基因序列,根据GenBank上发表的牛瑟氏泰勒虫P32表面蛋白基因序列设计合成一对引物,用PCR方法分别扩增出牛瑟氏泰勒虫辽阳株、宁县株和汶川株的P32基因片段,并成功地将该基因纯化后克隆到pGEM-T Easy载... 详细信息

为分析我国分离的三株牛瑟氏泰勒虫基因序列,根据GenBank上发表的牛瑟氏泰勒虫P32表面蛋白基因序列设计合成一对引物,用PCR方法分别扩增出牛瑟氏泰勒虫辽阳株、宁县株和汶川株的P32基因片段,并成功地将该基因纯化后克隆到pGEM-T Easy载体上,将经PCR鉴定和EcoRⅠ酶切鉴定为阳性的重组质粒进行测序。结果表明克隆的三株牛瑟氏泰勒虫P32基因片段长度均为875 bp,且编码291个氨基酸。核苷酸同源性分析表明,该基因辽阳株与宁县株的同源性最高,为99.4%,汶川株与这两株的同源性分别是92.1%、91.9%,而我国辽阳株与日本株(AB016280)、俄罗斯株(AB016279)的同源性较高,分别为99.8%、99.6%。

关键词：牛瑟氏泰勒虫 P32表面蛋白克隆序列分析

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实时荧光PCR检测旋毛虫方法的建立与初步应用

实时荧光PCR检测旋毛虫方法的建立与初步应用

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：宋铭忻袁金钱路义鑫张子群东北农业大学动物医学学院黑龙江出入境检验检疫局

根据本实验室前期扩增的各旋毛虫隔离种线粒体Ls-rRNA基因序列,设计了一对特异性引物及TaqMan MGB探针。以Ls-rRNA阳性重组质粒为模板,建立了实时荧光PCR检测旋毛虫的方法。该方法只能在各旋毛虫隔离种DNA样本中检测到荧光信号,对小鼠... 详细信息

根据本实验室前期扩增的各旋毛虫隔离种线粒体Ls-rRNA基因序列,设计了一对特异性引物及TaqMan MGB探针。以Ls-rRNA阳性重组质粒为模板,建立了实时荧光PCR检测旋毛虫的方法。该方法只能在各旋毛虫隔离种DNA样本中检测到荧光信号,对小鼠、狗和猪正常肌肉组织、猪鞭虫、猪蛔虫、猪钩虫、犬蛔虫等DNA检测,不出现非特异性荧光信号;最小检出量为1.32×102拷贝数和10-5条旋毛虫,建立的标准曲线拟合良好,扩增方程Y=-3.43X+19.70,相关系数R2=0.9984,扩增效率为95%;对平行复管检测,组内变异系数为1.11%(n=20),同一组不同浓度梯度样本(n=9)间隔30d重复检测,结果无显著性差异;对人工感染不同剂量猪旋毛虫的小鼠肌肉可在攻虫14d后100%检出,对送检狗肉样品可从压片镜检、人工胃液消化、胶体金试纸条检测结果为阴性的63个狗肉样本中敏感地检出8个阳性。

关键词：检测旋毛虫实时荧光PCR

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西氏贝蛔虫Bs-Ag1基因的序列分析及重组蛋白诱导小鼠的免疫保护研究

西氏贝蛔虫Bs-Ag1基因的序列分析及重组蛋白诱导小鼠的免疫保护研...

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：何光志汪涛杨光友张志和王成东四川农业大学动物医学院成都大熊猫繁育研究基地

采用RT-PCR技术从大熊猫西氏贝蛔虫成虫和2期幼虫的RNA中扩增出Bs-Ag1基因,经测序并通过BLAST分析发现,测得扩增片段长度为530 bp,与猪蛔虫的L2R59基因(AB057441)同源性达92%。将构建的pET32a(+)-Bs-Ag1重组质粒转化表达菌株BL21(DE3)... 详细信息

采用RT-PCR技术从大熊猫西氏贝蛔虫成虫和2期幼虫的RNA中扩增出Bs-Ag1基因,经测序并通过BLAST分析发现,测得扩增片段长度为530 bp,与猪蛔虫的L2R59基因(AB057441)同源性达92%。将构建的pET32a(+)-Bs-Ag1重组质粒转化表达菌株BL21(DE3)进行诱导表达,表达的蛋白大小约为34 kDa;将表达产物纯化后经Western-blot分析表明,重组蛋白能被兔抗西氏贝蛔虫阳性血清所识别。重组蛋白(rBs-Ag1)与弗氏完全佐剂(FCA)混合免疫接种小鼠后,每只小鼠用3200个西氏贝蛔虫感染性虫卵攻击,发现rBs-Ag1-FCA组小鼠的肝脏和肺脏中的西氏贝蛔虫幼虫数量比对照组(PBS)减少了69.26%,与对照组和佐剂组(FCA)差异极显著(P<0.01)。本研究表明Bs-Ag1基因可作为西氏蛔虫基因工程疫苗的候选基因。

关键词：重组蛋白序列分析 Bs-Ag1 免疫保护

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实时荧光定量PCR检测旋毛虫不同寄生时期43ku ES抗原基因的表达水平

实时荧光定量PCR检测旋毛虫不同寄生时期43ku ES抗原基因的表达水...

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：王守育韩彩霞路义鑫张子群畅丹宋铭忻东北农业大学动物医学学院黑龙江出入境检验检疫局

本研究旨在利用实时荧光定量PCR技术建立旋毛虫43ku ES抗原基因(Ts43)表达量的测定方法。并用该方法检测旋毛虫不同寄生时期Ts43基因的表达水平,为深入探讨Ts43基因的表达水平与保姆细胞形成的关系奠定基础。根据GenBank中旋毛虫的Ts43... 详细信息

本研究旨在利用实时荧光定量PCR技术建立旋毛虫43ku ES抗原基因(Ts43)表达量的测定方法。并用该方法检测旋毛虫不同寄生时期Ts43基因的表达水平,为深入探讨Ts43基因的表达水平与保姆细胞形成的关系奠定基础。根据GenBank中旋毛虫的Ts43基因序列,设计引物和探针。以管家基因18S rRNA为内参基因,对旋毛虫总RNA进行归一化处理,利用循环阚值(Ct值)的变化计算出TS43基因的表达量。研究结果表明。旋毛虫在各寄生时期均有Ts43基因的表达,然而成虫和新生蚴Ts43基因的表达水平相对于其它寄生时期的虫体很低,该基因表达量在感染后18d开始逐渐上升,于感染后30d达到高峰,而后开始逐渐下降,但至感染后58d的虫体Ts43基因表达水平仍高于成虫和新生蚴。

关键词：旋毛虫不同寄生时期 Ts43基因荧光定量PCR

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长角血蜱卵泡抑素蛋白的初步定性

长角血蜱卵泡抑素蛋白的初步定性

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：田占成刘光远殷宏罗建勋谢俊仁中国农业科学院兰州兽医研究所/畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室

参照GenBank中长角血蜱致病性Okayama株卵泡抑素基因的核苷酸序列设计合成一对引物,从本实验室保藏的单克隆洁净长角血蜱饥饿成蜱中快速提取总RNA,通过RT-PCR扩增出814bp的卵泡抑素基因,序列比对结果显示:与长角血蜱致病性Okayama株的... 详细信息

参照GenBank中长角血蜱致病性Okayama株卵泡抑素基因的核苷酸序列设计合成一对引物,从本实验室保藏的单克隆洁净长角血蜱饥饿成蜱中快速提取总RNA,通过RT-PCR扩增出814bp的卵泡抑素基因,序列比对结果显示:与长角血蜱致病性Okayama株的核苷酸序列及氨基酸序列同源性分别为97.8%和99%,将其亚克隆到表达载体PGEX-4T-1中进行表达,DST融合重组蛋白预期分子量为57KDa。表达重组蛋白经Mag-neGSTTM蛋白纯化系统纯化后作为抗原与抗不同发育阶段长角血蜱(卵、幼蜱、若蜱、成蜱)多克隆抗体作为一抗进行免疫印迹,结果表明:与长角血蜱卵制备的多克隆抗体有很强的免疫反应,而与其他发育阶段(幼蜱、若蜱、成蜱)饥饿长角血蜱制备的多克隆抗体反应性很弱。

关键词：长角血蜱卵泡抑素定性

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延边黄牛新孢子虫NcSAG1基因工程疫苗的免疫试验

延边黄牛新孢子虫NcSAG1基因工程疫苗的免疫试验

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：贾立军栾杨焦石曹世诺张守发延边大学农学院动物医学系

为了解新孢子虫NcSAG1表面蛋白基因工程疫苗对实验动物的免疫效果,本试验提取延边黄牛新孢子虫野毒株基因组DNA,用PCR技术扩增新孢子虫NcSAG1表面蛋白基因,并在大肠杆菌中进行原核表达,将Western-blotting鉴定具有免疫活性的重组蛋白与... 详细信息

为了解新孢子虫NcSAG1表面蛋白基因工程疫苗对实验动物的免疫效果,本试验提取延边黄牛新孢子虫野毒株基因组DNA,用PCR技术扩增新孢子虫NcSAG1表面蛋白基因,并在大肠杆菌中进行原核表达,将Western-blotting鉴定具有免疫活性的重组蛋白与弗氏佐剂混合制备NcSAG1基因工程疫苗,免疫BALB/c小鼠,应用间接ELISA方法测定体液免疫水平,应用流式细胞技术测定细胞免疫水平,以此评价疫苗对实验动物的免疫应答反应。结果显示,制备的NcSAG1基因工程疫苗免疫BALB/c小鼠后,在三免后第3d时,检测抗体的OD450nm值达0.688;CD4+/CD8+值达3.650,均显著高于重组蛋白免疫组和PBS对照组,说明制备的基因工程疫苗能够提高实验动物的体液免疫和细胞免疫水平。本试验为延边黄牛新孢子虫NcSAG1表面蛋白基因工程疫苗的深入研究奠定了基础。

关键词：基因工程疫苗实验动物新孢子虫 NcSAG1 延边黄牛免疫试验

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