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3,138 篇 会议
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2,923 篇 农学
- 2,509 篇 兽医学
- 390 篇 畜牧学
- 108 篇 作物学
- 15 篇 农业资源与环境
- 13 篇 林学
- 7 篇 水产
- 3 篇 植物保护
236 篇 工学
- 150 篇 生物工程
- 29 篇 公安技术
- 18 篇 化学工程与技术
- 12 篇 农业工程
- 12 篇 食品科学与工程（可...
- 10 篇 轻工技术与工程
- 6 篇 仪器科学与技术
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179 篇 理学
- 163 篇 生物学
- 12 篇 生态学
- 3 篇 化学
106 篇 医学
- 46 篇 药学(可授医学、理...
- 42 篇 基础医学(可授医学...
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- 12 篇 公共卫生与预防医...
- 8 篇 中西医结合
- 6 篇 医学技术（可授医学...
30 篇 法学
- 29 篇 公安学
26 篇 经济学
- 26 篇 应用经济学
8 篇 教育学
- 8 篇 教育学
6 篇 管理学
- 3 篇 农林经济管理

主题

103 篇 序列分析
79 篇 原核表达
74 篇 禽流感病毒
70 篇 基因克隆
68 篇 大肠杆菌
64 篇 禽流感
61 篇 分离鉴定
46 篇 猪
43 篇 鸡
42 篇 流行病学
41 篇 新城疫病毒
41 篇 牛
39 篇 猪繁殖与呼吸综合...
34 篇 临床诊断
33 篇 耐药性
32 篇 奶牛
31 篇 单克隆抗体
30 篇 pcr
30 篇 卵母细胞
29 篇 克隆

机构

254 篇 中国农业大学
199 篇 华南农业大学
104 篇 南京农业大学
100 篇 广西大学
90 篇 四川农业大学
88 篇 河南农业大学
87 篇 吉林大学
83 篇 扬州大学
73 篇 广西兽医研究所
61 篇 山东农业大学
57 篇 军事医学科学院军...
57 篇 东北农业大学
55 篇 河北农业大学
55 篇 华中农业大学
47 篇 湖南农业大学
47 篇 吉林农业大学
43 篇 北京市农林科学院...
40 篇 内蒙古农业大学
36 篇 西北农林科技大学
35 篇 公安部南昌警犬基...

作者

44 篇 金宁一
38 篇 汪洋
35 篇 李斌
35 篇 赵武
35 篇 沈建忠
35 篇 曾振灵
34 篇 刘道新
34 篇 梁家幸
32 篇 蒋玉雯
32 篇 丁壮
32 篇 黄安国
32 篇 张龙现
32 篇 姚瑞英
31 篇 邱立新
30 篇 谢芝勋
30 篇 沈志强
30 篇 梁保忠
29 篇 孙坚
29 篇 王红宁
27 篇 范仲鑫

语言

2,964 篇 中文
192 篇 英文

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猪精液常温保存技术的研究

猪精液常温保存技术的研究

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会

作者：徐振军任康王彦平赵冰路永强朱士恩中国农业大学动物科技学院北京100094 赤峰学院生命科学系内蒙古赤峰024000 中国农业大学动物科技学院北京100094 赤峰学院生命科学系内蒙古赤峰024000 北京市畜牧兽医站北京100107

为研制更为简易、高效的保存稀释液配方及保存操作程序,充分发挥优良种公猪的生产潜力,本实验对种公猪精液的常温保存技术进行了研究.结果表明:在常温(17℃±0.5)条件下,采用Ⅰ液保存猪精子的时间和活率(120h,0.60)极显著优于Ⅲ液(7... 详细信息

为研制更为简易、高效的保存稀释液配方及保存操作程序,充分发挥优良种公猪的生产潜力,本实验对种公猪精液的常温保存技术进行了研究.结果表明:在常温(17℃±0.5)条件下,采用Ⅰ液保存猪精子的时间和活率(120h,0.60)极显著优于Ⅲ液(72h,0.59)、Ⅱ液(60h,0.59)和Ⅳ液(60h,0.57)(P＜0.01),Ⅲ液显著优于Ⅱ液和Ⅳ液(P＜0.05),其中24h内四种稀释液的保存效果无显著差异,72h内Ⅰ液和Ⅲ液差异不显著(P＞0.05).在四种稀释液中稀释保存猪精液,精子顶体完整率在72h内无显著性差异(80.8±0.4％,78.1±1.2％,79.3±0.8％,76.5±1.0％)(P＞0.05),96h以后,Ⅰ液精子顶体完整率(78.7±1.2％)显著高于其它三组(P＜0.01).四种稀释液中,以pH为6.89,渗透压为278mosM的Ⅰ液保存效果最佳.所筛选配方成分简单、成本低廉,操作程序简便、易行.

关键词：猪精液常温保存

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禽流感病毒快速乳胶凝集检测方法的建立及其初步应用

禽流感病毒快速乳胶凝集检测方法的建立及其初步应用

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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

作者：陈剑锋金梅林喻正军但汉并张安定陈焕春邱伯根刘道新邱立新华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖南省兽医总站长沙410000

本研究以水溶性碳化二亚胺(EDAC)为介质,将兔抗禽流感病毒NP蛋白抗体共价偶联到羧化乳胶表面,建立了一种快速的禽流感病毒乳胶凝集检测方法,可以从鸡胚尿囊液、喉头拭子、泄殖腔拭子和内脏组织中快速检测所有亚型的禽流感病毒.该方法对... 详细信息

本研究以水溶性碳化二亚胺(EDAC)为介质,将兔抗禽流感病毒NP蛋白抗体共价偶联到羧化乳胶表面,建立了一种快速的禽流感病毒乳胶凝集检测方法,可以从鸡胚尿囊液、喉头拭子、泄殖腔拭子和内脏组织中快速检测所有亚型的禽流感病毒.该方法对肺脏组织的检出率可达97.9％,对肾脏、脑、肝脏、脾脏等组织的检出率均达到90％以上,对喉头拭子和泄殖腔拭子的检出率也达到60％以上,与鸡新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、传染性支气管炎病毒(52、120株)、鸡减蛋综合征病毒(EDSV-76)、禽副粘病毒2型(PMV-2)均不反应,达到了较好的的特异性和敏感性.该方法与病毒分离鉴定的符合率为94.2％,与胶体金试纸条的符合率为96.7％.结果证明建立的乳胶凝集检测方法具有快速简便,成本低廉,敏感特异的特点,可用于临床大规模的流行病学调查.

关键词：禽流感病毒乳胶凝集检测水溶性碳化二亚胺

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H5亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备

H5亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备

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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

作者：谢青梅陈俊伟王玲玲马静云毕英佐曹永长华南农业大学动物科学学院广东广州510642

本实验用纯化的H5禽流感病毒免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经三次克隆和间接ELISA筛选,获得ⅡB6C3、ⅠE6、ⅡA8H11、ⅢF6G8、ⅢC2D1、ⅡE9G8、ⅡA8F12、D2H11、ⅡG6A11等9株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细... 详细信息

本实验用纯化的H5禽流感病毒免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经三次克隆和间接ELISA筛选,获得ⅡB6C3、ⅠE6、ⅡA8H11、ⅢF6G8、ⅢC2D1、ⅡE9G8、ⅡA8F12、D2H11、ⅡG6A11等9株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过间接ELISA测定,单抗效价范围是:细胞培养上清1 : 50～1:400,腹水为1 : 3200～1:51200;经ELISA法测定,IE6单克隆抗体仅与H5病毒株反应,而不与NDV、H9亚型AIV和产蛋下降综合征病毒不反应,其它8株会与NDV、H9亚型AIV和产蛋下降综合征病毒反应.单抗的亚类鉴定结果表明,ⅡB6C3、ⅠE6、ⅢC2D1的重链为IgG1亚类,轻链为κ型;ⅡA8H11、ⅡA8F12、ⅡG6A11重链类型为IgG2a,轻链为κ型ⅡE9G8、ⅢF6G8重链类型为IgG2b,轻链为κ型;D2H11重链类型为IgM,轻链为κ型.

关键词：禽流感病毒 H5亚型单克隆抗体

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精子介导外源基因在早期山羊胚胎中的表达

精子介导外源基因在早期山羊胚胎中的表达

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会

作者：刘彦叶华虎温叶飞朱贵明周艳荣袁菊芳高强陈红星邓继先北京市农林科学院畜牧兽医研究所北京100097 军事医学科学院生物工程研究所北京100071

本实验以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,比较研究了不同山羊个体精子对外源DNA的结合能力,外源DNA转染对精子活力和受精能力影响以及精子介导基因转移的可行性和效率.结果表明:不同个体的山羊精子对外源DNA结合能力存在显著差异(P＜0.01)... 详细信息

本实验以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,比较研究了不同山羊个体精子对外源DNA的结合能力,外源DNA转染对精子活力和受精能力影响以及精子介导基因转移的可行性和效率.结果表明:不同个体的山羊精子对外源DNA结合能力存在显著差异(P＜0.01),其中1号供体携带外源DNA的比例为(43.8±2.97)％,几乎相当于2号供体的两倍(22.3±1.86)％;精子与外源DNA相互作用后,将导致活力和受精能力下降,其下降幅度与精子结合能力密切相关;精子可将外源基因介导进入卵母细胞并在早期胚胎中获得表达,其中1号供体生产的胚胎有28.1％(49/147)携带GFP基因,10.2％(15/147)表达了GFP,显著高于2号供体的11.4％(10/88)和2.3％(2/88);尽管如此,两供体的胚胎阳性率都明显低于精子转染率(P＜0.01).本研究表明,精子介导基因转移具有可行性,但来源于不同个体的精子对DNA的结合能力和转移能力明显不同.

关键词：精子介导基因转移绿色荧光蛋白胚胎山羊

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番鸭呼肠孤病毒σB编码基因克隆、表达与间接ELISA诊断方法的建立

番鸭呼肠孤病毒σB编码基因克隆、表达与间接ELISA诊断方法的建立

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：郭东春张云耿宏伟胡奇林郝雪欧阳岁东中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽病室东北农业大学生命科技学院福建省农业科学院动物病毒研究室黑龙江八一农垦大学动物科技学院

本文对DRV S12σB编码基因进行克隆,测序和原核表达,序列分析表明S12σB与ARV的核苷酸和氨基酸同源性分别为59.3%-64.0%和60.9%-62.5%;表达的σB蛋白分子量为45kDa,与预期大小一致,Western blots表明σB蛋白能与抗番鸭呼肠孤病毒阳性血... 详细信息

本文对DRV S12σB编码基因进行克隆,测序和原核表达,序列分析表明S12σB与ARV的核苷酸和氨基酸同源性分别为59.3%-64.0%和60.9%-62.5%;表达的σB蛋白分子量为45kDa,与预期大小一致,Western blots表明σB蛋白能与抗番鸭呼肠孤病毒阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫原性;将表达的σB蛋白按5ug/ml包被,血清做1:160倍稀释,经30份鸭阴性血清确定阳性临界点为0.2;对117份濒死期鸭血清进行检测,与中和试验(SN)的符合率为100%,AGID的符合率为79.5%,表明该σB-ELISA诊断方法可用于诊断番鸭胡肠孤病毒的抗体监测。

关键词：番鸭呼肠孤病毒 σB σC 表达 ELISA

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牛分枝杆菌mce4E蛋白对牛肺泡巨噬细胞iNOS、TNF-α、IL-6和IL-12表达的影响

牛分枝杆菌mce4E蛋白对牛肺泡巨噬细胞iNOS、TNF-α、IL-6和IL-12...

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：徐广贤赵德明周向梅尹晓敏杨建民中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室

越来越多的研究证实mce家族蛋白与结核杆菌的毒力有关,为了探讨mce4E蛋白在牛分支杆菌致病机理中的作用,我们用重组表达的mce4E蛋白、MtbPPD、MbPPD、BCG和 ConA刺激肺泡巨噬细胞48小时后,用real-time PCR检测牛肺泡巨噬细胞TNF-α、iNO... 详细信息

越来越多的研究证实mce家族蛋白与结核杆菌的毒力有关,为了探讨mce4E蛋白在牛分支杆菌致病机理中的作用,我们用重组表达的mce4E蛋白、MtbPPD、MbPPD、BCG和 ConA刺激肺泡巨噬细胞48小时后,用real-time PCR检测牛肺泡巨噬细胞TNF-α、iNO、 IL-6、IL-12细胞因子mRNA的表达量的变化,与空白对照组相比,mce4E、MtbPPD、MbPPD、 BCG、ConA均能够使巨噬细胞的TNF-α mRNA表达上调(P<0．05);mce4E蛋白抑制巨噬细胞 iNO的mRNA表达(P<0．05);MtbPPD和ConA对巨噬细胞iNO的mRNA表达没有影响,MbPPD 和BCG促使巨噬细胞iNO的mRNA表达上调(P<0．05);mce4E、MtbPPD、MbPPD、BCG、ConA 能够使IL-6的mRNA表达上调(P<0．05);mce4E蛋白和ConA对巨噬细胞的IL-12表达没有影响,MtbPPD、MbPPD和BCG能够促使巨噬细胞IL-12 mRNA表达上调(P<0．05)。用不同剂量的mce4E蛋白刺激牛肺泡巨噬细胞48小时后,用MTT检测肺泡巨噬细胞的存活率,结果表明,与空白组比较各剂量的mce4E蛋白对巨噬细胞的活性都有显著的抑制作用(P<0．05), 说明mce4E蛋白对巨噬细胞的活性有显著的抑制作用。

关键词：牛分枝杆菌 mce4E蛋白牛肺泡巨噬细胞 real-time PCR

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猪β2-微球蛋白基因在大肠埃希氏菌中的表达与纯化

猪β2-微球蛋白基因在大肠埃希氏菌中的表达与纯化

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术会议

作者：肖一红刘光亮童铁钢王群孟庆文吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150001 中国农业科学院研究生院北京100081

目的:构建猪β2-微球蛋白(Sβ2m)基因的原核表达载体,使其能在大肠杆菌中得到高效表达并能纯化,为构建猪MHC-Ⅰ类分子肽四聚体奠定基础.方法:采用RT-PCR技术从猪外周血单核细胞(PBMC)中扩增出去信号肽的S2m基因,克隆至pET-28a(+)高效表... 详细信息

目的:构建猪β2-微球蛋白(Sβ2m)基因的原核表达载体,使其能在大肠杆菌中得到高效表达并能纯化,为构建猪MHC-Ⅰ类分子肽四聚体奠定基础.方法:采用RT-PCR技术从猪外周血单核细胞(PBMC)中扩增出去信号肽的S2m基因,克隆至pET-28a(+)高效表达载体后进行化学诱导表达,利用Ni2+NTA鏊合物树脂柱对表达产物进行了纯化,用SDS-PAGE和Western blotting法对表达产物进行鉴定.结果:成功构建了pET-Sβ2m表达载体,表达产物以包涵体的形式存在,分别占全菌和不溶性蛋白的40.4％和91.7％,并在变性条件下对包涵体中的重组Sβ2m进行了纯化,获得了高纯度的Sβ2m,结论:成功表达、纯化了Sβ2m,为进一步利用亲和素在体外构建猪MHC-Ⅰ类分子肽四聚体奠定基础.

关键词：猪 β2微球蛋白基因大肠埃希氏菌原核表达载体纯化工艺

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中国境内野生迁徙水禽流感病毒感染的流行病学分析

中国境内野生迁徙水禽流感病毒感染的流行病学分析

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：陈洪勋申会刚郭军庆胡金强周继勇浙江大学动物预防医学研究所浙江大学生命科学学院

本研究对中国境内的迁徙候鸟进行了禽流感流行病学分析,在2004-2005年间,分别从中国境内的7个野生鸟类自然保护区中采集了15种野生水鸟,共493份血清样本和1052份拭子样品,通过血凝抑制试验,结果在遗鸥、白鹭、夜鹭、斑尾塍鹬、中杓鹬几...

本研究对中国境内的迁徙候鸟进行了禽流感流行病学分析,在2004-2005年间,分别从中国境内的7个野生鸟类自然保护区中采集了15种野生水鸟,共493份血清样本和1052份拭子样品,通过血凝抑制试验,结果在遗鸥、白鹭、夜鹭、斑尾塍鹬、中杓鹬几个品种鸟类中检测到有抗H2,H9,H10亚型流感病毒的低水平抗体(3log2),而其它迁徙鸟类中未检测到A型禽流感病毒抗体。来自斑头雁中H5N1亚型禽流感病毒与A/Goose/Guangdong/1/96和A/Goose/Guangdong/3/97亲缘关系较远,对鸡、鸭、鹅、小鼠均有致病力。

关键词：

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肉鸡HSP70基因克隆、原核表达及单克隆抗体制备

肉鸡HSP70基因克隆、原核表达及单克隆抗体制备

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术会议

作者：孙培明吴晓东赵永刚刘雨田王志亮鲍恩东南京农业大学动物医学院南京210095 临沂大学农林学院临沂276005 农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心青岛266032 南京农业大学动物医学院南京210095

利用RT-PCR方法扩增了肉鸡HSP70 mRNA,将其扩增产物克隆到PGEM-T Easy载体和原核表达载体pET-28a (+)上,进一步转化至大肠杆菌BL-21中,用IPTG诱导表达重组肉鸡HSP70.以纯化的重组肉鸡HSP70制备多克隆抗体,免疫印迹分析说明重组肉鸡HSP7... 详细信息

利用RT-PCR方法扩增了肉鸡HSP70 mRNA,将其扩增产物克隆到PGEM-T Easy载体和原核表达载体pET-28a (+)上,进一步转化至大肠杆菌BL-21中,用IPTG诱导表达重组肉鸡HSP70.以纯化的重组肉鸡HSP70制备多克隆抗体,免疫印迹分析说明重组肉鸡HSP70具有很好的免疫原性.以纯化的重组肉鸡HSP70免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,获得2株分泌肉鸡HSP70单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步通过免疫印迹分析筛选出1株高特异性的肉鸡HSP70单克隆抗体,命名为BH70-1.免疫组织化学结果显示,单克隆抗体BH70-1具有很好的组织亲和力,是一种理想的抗体.

关键词：热休克蛋白70 原核表达单克隆抗体肉鸡

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番鸭呼肠孤病毒σB和σNS基因克隆及序列分析

番鸭呼肠孤病毒σB和σNS基因克隆及序列分析

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：林锋强胡奇林欧阳岁东陈仕龙程晓霞魏宏朱小丽福建省农业科学院畜牧兽医研究所

参考Genbank番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,DRV)σB和σNS基因序列设计合成引物,对番鸭呼肠孤病毒MW9710株σB和σNS基因进行RT-PCR扩增,并对PCR产物进行了克隆和测序。结果显示扩增产物分别为1154bp和1113bp,与预期的目的片段... 详细信息

参考Genbank番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,DRV)σB和σNS基因序列设计合成引物,对番鸭呼肠孤病毒MW9710株σB和σNS基因进行RT-PCR扩增,并对PCR产物进行了克隆和测序。结果显示扩增产物分别为1154bp和1113bp,与预期的目的片段大小一致。核苷酸序列经BLAST软件分析表明:番鸭呼肠孤病毒MW9710株σB基因与番鸭呼肠孤病毒法国89026株同源性为88.1%;氨基酸同源性为94.0%;σNS基因与法国89026株和89330株同源性分别为93.8%和93.1%;氨基酸同源性为95.9%和95.1%。而σB和σNS基因与禽呼肠孤病毒的同源性约为60-80%。表明番鸭呼肠孤病毒是不同于禽呼肠孤病毒的独立基因群

关键词：番鸭呼肠孤病毒 σB基因 σNS基因序列分析

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