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47 篇 吉林农业大学
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作者

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35 篇 沈建忠
35 篇 曾振灵
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30 篇 沈志强
30 篇 梁保忠
29 篇 孙坚
29 篇 王红宁
27 篇 范仲鑫

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禽流感H5亚型血凝抑制试验抗原的研究

禽流感H5亚型血凝抑制试验抗原的研究

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：刘月焕步卫东孟颜妮姜北宇徐菁宋维平林健韩春华北京市农林科学院畜牧兽医研究所

以野外分离的禽流感H5N1亚型病毒AIV-GBL株为种毒,接种SPF鸡胚和免疫SPF鸡分别制成禽流感H5亚型血凝抑制试验抗原与阴、阳性血清。抗原用于血凝抑制试验检测禽流感H5亚型抗体,阴、阳性血清用于禽流感H5亚型血凝抑制试验参照血清。对产... 详细信息

以野外分离的禽流感H5N1亚型病毒AIV-GBL株为种毒,接种SPF鸡胚和免疫SPF鸡分别制成禽流感H5亚型血凝抑制试验抗原与阴、阳性血清。抗原用于血凝抑制试验检测禽流感H5亚型抗体,阴、阳性血清用于禽流感H5亚型血凝抑制试验参照血清。对产品的多项技术指标进行了测定,结果表明(1)抗原为无色半透明液体,血清为淡黄色透明液体,无细菌生长;(2)抗原对9～11日龄鸡胚和6～8周龄的SPF鸡没有致病性,接种鸡无局部和全身不良反应;(3)抗原2～8℃条件下放置2年,效价稳定为≥1:128,物理性状不变;37℃条件下存放30天,效价稳定为≥1:128,物理性状不变;-20℃的冷冻条件下,冷冻30天,效价稳定为≥1:128,物理性状不变。4个HA工作单位配制好的4单位血凝抗原,放置1个小时效价不会降低。血凝板放置12小时仍能保持原结果;(4)抗原与ND、EDS76、IB、H1～H4、H5～H15亚型阳性血清和SPF阴性血清没有交叉反应;(5)抗原具有很高的批间及批内可重复性;(6)研制的抗原与国家参考实验室生产的抗原对相同的血清及参考阳性血清的检测结果无明显差异,与WHO抗原对相同血清的检测结果有4～8倍的差异。

关键词：禽流感 H5亚型抗原

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碱裂解法大量提取纯化质粒DNA的研究

碱裂解法大量提取纯化质粒DNA的研究

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会

作者：覃绮丽杨素芳崔奎青张新明谢体三石德解广西大学动物繁殖研究所广西南宁530005

研究目的和意义:质粒DNA是基因工程的主要载体，可以携带外源基因进入细菌、动物细胞或植物体内进行扩增与表达。质拉DNA的分离提取是基因工程中经常性的最基本的工作.本次实验的目的是在实验室条件下建立质粒大量提取的优化方案。 ... 详细信息

研究目的和意义:质粒DNA是基因工程的主要载体，可以携带外源基因进入细菌、动物细胞或植物体内进行扩增与表达。质拉DNA的分离提取是基因工程中经常性的最基本的工作.本次实验的目的是在实验室条件下建立质粒大量提取的优化方案。结果和结论:(1)在本实验室条件下，用碱裂解法提取质粒是最理想的方法，在粗提前期加入RNaseA能够充分消化RNA,缩短操作时间，简化操作步骤，在纯化时加入LiCI能够有效去除大分子RNA和蛋白质，达到进一步纯化目的。(2)在对质粒纯化时，采用了酚/仿抽提，反复离心纯化，PEG8000沉淀纯化凝层析纯化四个方案，凝胶层析以其高得率(浓度达到543}g/ml)，无RNA与蛋白质污染(OD260/280值达到1.79)，低内毒素污染的显著优势，成为最优方案.(3)在质拉粗提中，加入氛霉素的效果不显著，加入溶菌酶效果明显，能够有效提高质粒的浓度与纯度(其中纯度提高了3.5，浓度提高了2.8).(4)溶于TE缓冲液的质粒DNA可在40C短时间保沪存，并可在-20℃或-80℃长时间保存，至于ddH20，除非提取出的质粒马上使用，否则不建议用ddH20保存质粒。综上所述，在本实验室条件下，使用碱裂解法粗提质粒，提取时加入溶菌酶处理菌液，然后采用凝胶层析纯化质粒，将得到令人满意的质粒DNA。以TE( PH8.0)保存质粒于－20℃或－800℃，一个月内，质粒损失不超过8％。

关键词：碱裂解法质粒DNA 分离提取

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我国部分省区鸡传染性法氏囊病病毒的分子流行病学研究

我国部分省区鸡传染性法氏囊病病毒的分子流行病学研究

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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

作者：阳秀英韦平黄志永磨美兰韦天超李康然赖家宏韦住奉朱学勤广西大学广西南宁530005 右江民族医学院广西百色533000 广西大学广西南宁530005

本研究应用逆转录酶-聚合酶链式反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)技术,对2000～2005期间收集于广西、江苏、浙江、安徽各地的临床疑似传染性法氏囊病(infectious bursal disease,IBD)病鸡的法氏囊组织、脾脏和骨髓进行检测,对检测呈阳性的病料采用9～11天龄的鸡胚通过绒毛尿囊膜(chorio-allantoic membrane,CAM)或鸡胚成纤维细胞(chicken embryo fibroblast,CEF)接种的方法进行鸡传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)的分离和传代,结果成功分离到22株IBDV对这些分离株及5株常用的中等偏强毒力商品疫苗株的VP2基因高变区(用vVP2表示)进行RT-PCR扩增并对其进行酶切分析和核苷酸序列测定,分析比较22个分离株与参考毒株的vVP2的序列并绘制遗传系谱树.结果表明BH09、BH11、JS1、JS7、YY1、YY6、YL051、050222、TSC-2(9)、TZ(3)共10个分离株属于超强毒株(very virulent IBDV,vvIBDV),与vvIBDV的其它中国分离株、日本分离株OKYM、欧洲分离株DV86和UK661的亲源关系均较近;040124、YL052、020180、YLZF2、040131、BH15、YY2、050045、050057、050258、TSC-1(3)、A038共12株属于经典毒株(cIBDV),其中040124、YL052两株属于中等偏强毒力疫苗株,其余10株则属于弱毒疫苗株.本研究的结果表明,近5年来在我国4个省区养鸡业中流行的IBDV主要为vvIBDV毒株,而且所有分离株VP2基因高变区均缺乏时间和地域的遗传特征.

关键词： RT-PCR技术限制性内切酶分析技术超强毒株经典毒株变异株VP2基因高变区分子流行病学

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广西巴马小型猪母猪发情周期和产仔特性研究

广西巴马小型猪母猪发情周期和产仔特性研究

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会

作者：卢晟盛王爱德卢克焕罗龙兴杨颖胡翠娥郭亚芬兰干球蒋如明陆阳清张明动物科技学院 530004 广西亚热带生物资源保护利用重点实验室广西南宁市大学路100号广西大学东校园530004 动物科技学院 530004 广西亚热带生物资源保护利用重点实验室广西南宁市大学路100号广西大学东校园530004 广西医科大学第一附属医院广西南宁市滨湖路530021

本文对广西大学的广西巴马小型猪场青年和断奶母猪与哺乳母猪的发情、配种和产仔情况进行跟踪调查研究,以了解其发情和产仔特性.研究表明:(1)巴马小型猪母猪初情期在120日龄(即4月龄)左右;(2)69％巴马小型猪哺乳母猪在哺乳仔猪期间可以... 详细信息

本文对广西大学的广西巴马小型猪场青年和断奶母猪与哺乳母猪的发情、配种和产仔情况进行跟踪调查研究,以了解其发情和产仔特性.研究表明:(1)巴马小型猪母猪初情期在120日龄(即4月龄)左右;(2)69％巴马小型猪哺乳母猪在哺乳仔猪期间可以表现正常发情、排卵,配种后也可以正常受胎产仔;(3)巴马小型猪哺乳母猪发情周期(21.1±2.2天)比青年和断奶母猪的(19.0±1.5天)长,差异极显著(p＜0.01);(4)巴马小型猪哺乳母猪在哺乳仔猪期间(n=5)发情配种的窝产仔数(9.4±1.1头)与青年和断奶母猪(n=46)的(7.9±2.2头)一样,但其仔猪出生重比青年和断奶母猪的重(0.61±0.15公斤比0.53±0.13公斤),差异极显著(p＜0.01);(5)初步确定哺乳母猪在哺乳仔猪期间发情配种后所产公母仔猪比例(68％:32％)高于青年和断奶母猪的(47％:53％),差异极显著(p＜0.01);(6)拟出巴马小型猪母猪发情周期阴道上皮细胞核固缩指数变化曲线,根据该曲线可以判断巴马小型猪处于发情周期的具体阶段.

关键词：巴马小型猪家畜繁殖发情周期产仔特性

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抗鸡传染性贫血VP3蛋白单克隆抗体的制备

抗鸡传染性贫血VP3蛋白单克隆抗体的制备

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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

作者：陆桂丽高玉龙高宏雷冉多良王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150001 新疆农业大学动物医学院乌鲁木齐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150001 新疆农业大学动物医学院乌鲁木齐

鸡传染性贫血(Chicken infectious anemia,CIA)是由鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)引起,以再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩为主要特征的一种免疫抑制疾病.CIAV属圆环病毒科,圆环病毒属,基因组全长2.3kb左右,... 详细信息

鸡传染性贫血(Chicken infectious anemia,CIA)是由鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)引起,以再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩为主要特征的一种免疫抑制疾病.CIAV属圆环病毒科,圆环病毒属,基因组全长2.3kb左右,有3个部分或完全重叠的开放阅读框,分别编码VP1(51.6 kDa)、VP2(24 kDa)和VP3(13.6 kDa)三种蛋.VP1为病毒的唯一衣壳蛋白,也是主要的免疫原蛋白,与VP2蛋白共同作用可诱导产生较高的中和抗体;VP2为CIAV的非结构蛋白,可能作为一个分子伴侣参与病毒VP1空间构象的形成,最近发现VP2具有蛋白磷酸酶活性,但其在病毒感染中具体生物学功能尚不清楚;VP3是功能蛋白,和VP2的开放阅读框互相重叠,其编码基因全长366bp,在各毒株之间同源性较高(＞95％).VP3是CIAV的致病因子,是病毒复制必需蛋白.VP3又称为细胞凋亡素(apoptin),它是一种很强的凋亡诱导剂,能诱导鸡胸腺细胞、成淋巴样细胞系、多种人恶性成淋巴样细胞系和人骨髓瘤细胞的凋亡,所以VP3作为一种潜在的抗肿瘤侯选药物,在恶性肿瘤细胞的控制治疗中也具有研究价值. 本试验在获得CIAV VP3蛋白的基础上,通过淋巴细胞杂交瘤技术制备了三株高效价的单克隆抗体,均具有良好的特异性,为进一步研究VP3的生物学特性及CIAV监测、诊断方法打下了基础.

关键词：鸡传染性贫血 VP3蛋白单克隆抗体

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Bovine Transtonal Cell Carcinoma Ⅱ

Bovine Transtonal Cell Carcinoma Ⅱ

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者： PENG Jie , LI Yin Lu, Han Dian Gang , GAO Hong (Department of Animal Technology and Science, Yannan Agricultural University , Kunming, 650201)

1．临床资料患畜:荷斯坦种公牛,4岁。2005年3月出现血尿,临床诊断为泌尿系统炎症,用消炎利尿药治疗,治疗后血尿消失,眼周围皮下水肿。2005年7月6日死亡,7月7日送检。 2．剖检变化据该场兽医陈述:剖检该牛见腹水13千克,混浊,有蛋花样物... 详细信息

1．临床资料患畜:荷斯坦种公牛,4岁。2005年3月出现血尿,临床诊断为泌尿系统炎症,用消炎利尿药治疗,治疗后血尿消失,眼周围皮下水肿。2005年7月6日死亡,7月7日送检。 2．剖检变化据该场兽医陈述:剖检该牛见腹水13千克,混浊,有蛋花样物。膀胱靠颈部处破裂, 裂口约5厘米,周围有凝血块。粘膜表面呈凹凸不平的丘状如葡萄,色红,质软,局部有桔黄色突起,切面致密、细腻。膀胱腔内及尿道、肾盂有黄白色泥沙样结石,龟头被结石阻塞,

关键词：剖检变化放大图弥漫性瘤细胞细胞核皮下水肿细胞大小 Bovine Transtonal Cell Carcinoma 泥沙样结石移行细胞癌固有层

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三株H9N2亚型禽流感病毒广西分离株全基因组序列的测定与分析

三株H9N2亚型禽流感病毒广西分离株全基因组序列的测定与分析

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：谢芝勋董建宝唐小飞刘加波庞耀珊邓显文谢志勤广西兽医研究所广西大学动物科学技术学院

根据GenBank公布的H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的全基因序列,设计了8对引物,运用RT—PCR方法获取了三株H9N2亚型AIV广西地方分离株A/Chicken/Guangxi/1/00、A/Chicken/Guangxi/14/00和A/Chicken/Guangxi/17/00的全基因序列,并对所得序列进行了比较分析。同源性分析及遗传进化分析发现,所分离的三个毒株的各基因与A/Chicken/Guangdong/4/00和A/Chicken/Jiangsu/1/00的相应基因的核苷酸序列有着较高的同源性和较近的亲缘关系,可能起源于同一种系。所分离毒株中每个毒株的8个基因,在遗传进化树上的分支不具有统一性,说明此三个毒株可能为不同基因亚系间发生自然重排的产物。氨基酸序列比较发现,A/Chicken/Guangxi/1/00、A/Chicken/Guangxi/14/00和A/Chicken/Guangxi/17/00三株AIV的na基因核苷酸序列在开放性阅读框架的187～195位均缺失了ACAGAGATA共9个核苷酸,它们所编码的氨基酸为T、E、I。三个分离株的HA蛋白第226位氨基酸均为Gln,证明它们为非人类易感性的H9N2亚型AIV。

关键词：禽流感 H9N2亚型全基因组测定与分析

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复方延胡索对蛋鸭禽流感免疫抗减蛋应激初试

复方延胡索对蛋鸭禽流感免疫抗减蛋应激初试

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：姜柏芳朱梦代刘鸿陆新浩任祖伊吴国栋浙江余姚市畜牧兽医局浙江省余姚市禽畜病防治研究所

蛋鸭在产蛋期实施强行免疫预防禽流感是势在必行技术措施,但实践证明,大多蛋鸭群经禽流感免疫后引起的减蛋应激时间长,减蛋幅度大,经济损失严重等难点,曾有人对3000只蛋鸭群作禽流感免疫与非免疫应激影响对比试验结果,免疫组不加任何措...

蛋鸭在产蛋期实施强行免疫预防禽流感是势在必行技术措施,但实践证明,大多蛋鸭群经禽流感免疫后引起的减蛋应激时间长,减蛋幅度大,经济损失严重等难点,曾有人对3000只蛋鸭群作禽流感免疫与非免疫应激影响对比试验结果,免疫组不加任何措施,免疫后5天内出现采食量大减,产蛋率比非免疫组下降35%,并连经30天检蛋数汇总结果,平均日减蛋率达12.8%,经济损失较严重。使畜主及兽医难以接受和实施。我们为试探解决上述难题为目的,曾用自行配方的延胡索散(含延胡索30%,蜂花粉70%,Vc适量),对90.1%产蛋率的蛋鸭群作了禽流感免疫预防抗减蛋应激对比试验,即将全群600只蛋鸭均分免疫与非免疫二组,在完全分隔条件下,免疫组在免疫前后6天内,每天按饲料量添加1%的复方延胡索散,非免疫组不添加任何药物作对照,经连续观察结果,二组蛋鸭群的精神,采食量均无异常,而免疫组的减蛋应激期仅表现在免疫后4天内,日产蛋率依次为第一天74.3%,第二天79.6%,第三天84.1%,第四天89.3%,平均日产蛋率为84.1%。而非免疫群四天的平均日产蛋率为90.6%,二者相比,免疫组减蛋应激率为6.5%。然而表明,禽流感免疫后确有不同程度减蛋应激影响,而在免疫前后6天内添加复方延胡索后,确具明显强补、镇静,抗减蛋应激药效,值得进一步试验与选用。

关键词：

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禽Ⅰ型副粘病毒各种禽源分离株免疫原性的研究

禽Ⅰ型副粘病毒各种禽源分离株免疫原性的研究

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：王林果韦平韦天超李康然黄淼章黄钰缤文艳玲杨宗维广西大学养禽与禽病研究所

研究分别制备了源于鸡、鹅、鸽、鹌鹑、孔雀、画眉鸟、珍珠鸡的禽Ⅰ型副粘病毒(APMV-1)7个强毒分离毒株和商品弱毒疫苗株克隆30(C30)的灭活油乳剂苗,并用这8种灭活油乳剂苗和C30株的活疫苗分别在鸡、鹌鹑、鹅和鸽进行了免疫及交叉攻毒... 详细信息

研究分别制备了源于鸡、鹅、鸽、鹌鹑、孔雀、画眉鸟、珍珠鸡的禽Ⅰ型副粘病毒(APMV-1)7个强毒分离毒株和商品弱毒疫苗株克隆30(C30)的灭活油乳剂苗,并用这8种灭活油乳剂苗和C30株的活疫苗分别在鸡、鹌鹑、鹅和鸽进行了免疫及交叉攻毒保护试验。免疫后(PI)分别测定试验禽血清的新城疫病毒(NDV)血凝抑制(HI)抗体的滴度,并于PI 5w用强毒株进行攻毒。结果表明,鸽的HI抗体几何平均滴度(MAT)为9.00～10.0 log2,鸡的为7.13～7.63 log2,鹌鹑的为5.00～5.13 log2,鹅对灭活油乳剂苗的为5.63～6.38 log2、而对C30株活疫苗的仅为3.38 log2;除了C30株活疫苗免疫鹅提供的保护率比较低(20%)外,8种油乳剂苗都能对同源或者异源强毒株的攻毒提供比较高的保护率(66.75%～100%)。研究的结果表明,经典疫苗株C30与近年来从各种不同禽类分离的致病性APMV-1野毒株之间、不同禽源分离株之间的抗原性,以及各种不同禽源分离株的之间的免疫原性差异均不大。

关键词：禽Ⅰ型副粘病毒免疫原性抗原性血凝抑制抗体滴度免疫交叉保护试验

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H5N1亚型禽流感疫苗免疫种鸽后其抗体消长规律及免疫程序的研究

H5N1亚型禽流感疫苗免疫种鸽后其抗体消长规律及免疫程序的研究

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：周锦萍刘佩红刘康明许光明陈关明薛霞李凯航齐新永金笑敏上海市畜牧兽医站上海市嘉定区畜牧兽医站

为了探讨鸽子对新型H5高致病性禽流感灭活疫苗的免疫原性,做好鸽子禽流感的防控,本研究采用哈尔滨兽医研究所研制的新型H5N1亚型高致病性禽流感疫苗,以不同剂量免疫鸽子后,跟踪其抗体消长规律。检测结果显示:0.3mL/羽、0.4mL/羽、0.5mL... 详细信息

为了探讨鸽子对新型H5高致病性禽流感灭活疫苗的免疫原性,做好鸽子禽流感的防控,本研究采用哈尔滨兽医研究所研制的新型H5N1亚型高致病性禽流感疫苗,以不同剂量免疫鸽子后,跟踪其抗体消长规律。检测结果显示:0.3mL/羽、0.4mL/羽、0.5mL/羽三个剂量颈部皮下注射进行首免,0.5 mL/羽组效果优于另两组,有效抗体能维持4周左右;三组相同剂量肌肉注射进行二免,免疫抗体迅速上升,抗体峰值出现在二免后2-4周,三个组有效抗体的维持时间相差很大,鸽一组只维持了12周左右,鸽二组维持了34周,而鸽三组维持了近48周;三免三个组有效抗体的维持时间相差很大,鸽一组只维持了14周左右,而鸽二组和鸽三组的有效抗体均能维持近1年。无基础免疫的6月龄成年孔雀0.3mL/羽颈部皮下注射首免,有效保护抗体能维持5周多;0.3mL/羽、0.4mL/羽分组肌肉注射进行二免,二组产生的抗体差异不明显,有效保护抗体均能维持10周多;相同剂量、相同方法进行三免,二组产生的抗体差异没有明显的规律性,有效保护抗体能维持30-34周。总体上鸽子产生的抗体有忽高忽低的现象,均一性较差。根据抗体消长规律,初步推荐了鸽子H5N1亚型禽流感疫苗的免疫程序。

关键词：鸽子高致病性禽流感灭活疫苗抗体消长免疫程序

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