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55 篇 华中农业大学
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作者

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29 篇 王红宁
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共轭亚油酸和α-亚麻酸对HepG2细胞Nrf2及GSTA1表达的影响

共轭亚油酸和α-亚麻酸对HepG2细胞Nrf2及GSTA1表达的影响

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：李广亮张秀英齐悦郝丽红张金铭东北农业大学动物医学学院

(目的)本试验旨在研究共轭亚油酸(CLA)和α-亚麻酸(ALA)对于HepG2细胞核转录因子Nrf2及其调控的下游靶基因GSTA1 mRNA和蛋白质表达的影响。(方法)试验以不同浓度的CLA和ALA作用HepG2细胞24 h,采用荧光定量PCR法测定mRNA的表达量,蛋白免... 详细信息

(目的)本试验旨在研究共轭亚油酸(CLA)和α-亚麻酸(ALA)对于HepG2细胞核转录因子Nrf2及其调控的下游靶基因GSTA1 mRNA和蛋白质表达的影响。(方法)试验以不同浓度的CLA和ALA作用HepG2细胞24 h,采用荧光定量PCR法测定mRNA的表达量,蛋白免疫印迹法测定蛋白质的表达量。(结果)结果表明,采用浓度为0.2、0.5和1 mmol/L的CLA和ALA作用细胞,CLA浓度分别为0.2和0.5 mmol/L时,Nrf2和GSTA1 mRNA和蛋白质表达量与对照组相比增加最多(P<0.01),并随CLA浓度增加呈下降趋势;采用ALA作用的细胞,Nrf2和GSTA1 mRNA和蛋白质表达量,与对照组相比,随ALA浓度的增加呈现上升趋势(P<0.01)。(结论)由此可见,不同剂量的CLA和ALA对Nrf2和GSTA1表达的影响明显不同:CLA在相对较低浓度时,诱导Nrf2和GSTA1 mRNA和蛋白质表达量作用较强,而ALA提高Nrf2和GSTA1 mRNA和蛋白质的表达量,是随浓度增加而逐渐增多。

关键词：共轭亚油酸 α-亚麻酸 HepG2细胞核转录因子Nrf2 谷胱甘肽硫转移酶A1

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禽用蜂胶口服液的急性毒性试验研究

禽用蜂胶口服液的急性毒性试验研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：李娇娇李东季辉彭麟江善祥南京农业大学动物医学院

【目的】急性毒性试验是最基础的毒性试验,处在毒理学研究的早期阶段,主要是了解外源化学物急性毒性的强度,并进行分级,初步揭示外源化学物毒作用的性质、毒效应特征及可能的靶器官,探求外源化学物的剂量-反应关系和对人体产生损害的危... 详细信息

【目的】急性毒性试验是最基础的毒性试验,处在毒理学研究的早期阶段,主要是了解外源化学物急性毒性的强度,并进行分级,初步揭示外源化学物毒作用的性质、毒效应特征及可能的靶器官,探求外源化学物的剂量-反应关系和对人体产生损害的危险性,为亚慢性毒性、慢性毒性试验研究以及其他毒理试验提供接触剂量和观察指标选择的依据。本研究旨在探讨蜂胶口服液对小鼠及大鼠口服的急性毒性。【方法】分别以昆明种小鼠及SD大鼠为试验动物,采用改良寇氏法,经口灌胃给药。测定禽用蜂胶口服液的半数致死量(LD)及其95%可信限。【结果】受试蜂胶口服液给小鼠灌胃后,表现为腹部抽搐起伏明显,个别小鼠偶尔会动,但是行动缓慢,走路摇晃,四肢无力,行动迟缓。小鼠经口LD为1589 mg·kg·bw,95%可信限为1425.5～1770.3 mg·kg·bw;大鼠灌胃后表现为,静卧不动,四肢无力,腹部抽搐起伏明显,四肢末端及尾巴呈青紫色;剖检可见胃出血明显,膨大胀气,胃壁变薄变透;十二指肠前段肠管出血明显,后段肠管膨大胀气肠壁变薄。大鼠的经口LD为1633 mg·kg·bw,95%可信限为1467.4～1817.4 mg·kg·bw。【结论】根据化学物急性毒性剂量分级表,该蜂胶口服液为低毒。

关键词：蜂胶口服液急性毒性半数致死量(LD50)

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多头蚴核糖体DNA及线粒体DNA多态性研究

多头蚴核糖体DNA及线粒体DNA多态性研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：谭磊孙悦周湘刘伟湖南农业大学动物医学院

目的为了分析不同地区多头蚴的的遗传变异情况,并用核糖体DNA ITS、小亚基(prms)序列和线粒体pcoxl序列重构多头蚴与其他绦虫的种群遗传关系。方法选用多头蚴核糖体DNA ITS、prrns和线粒体pcoxl基因作为分子标记,从四川山羊脑分离出脑... 详细信息

目的为了分析不同地区多头蚴的的遗传变异情况,并用核糖体DNA ITS、小亚基(prms)序列和线粒体pcoxl序列重构多头蚴与其他绦虫的种群遗传关系。方法选用多头蚴核糖体DNA ITS、prrns和线粒体pcoxl基因作为分子标记,从四川山羊脑分离出脑多头蚴、湘西和长沙山羊皮下组织分离出斯氏多头蚴及长沙犬小肠内获得多头绦虫,利用聚合酶链式反应(PCR)扩增rDNA ITS、prrns和mtDNApcox1片段,将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGEM-IEasy载体,重组质粒通过菌落PCR鉴定后,对阳性菌落进行序列测定及序列分析。结果序列分析结果显示所获得的ITS、pcox1和prms序列总长度存在一定差异,其中pcox1序列长度为410-430bp;ITS序列长度为660bp;prrns序列长度为592-620bp。结论本研究的三段基因序列种内差异较小,种间差异较明显。由此可以得出结论:rDNA ITS、mtDNA pcox1和prrns基因的序列可以作为多头蚴及其它绦虫的遗传标记。从而为多头蚴及其它绦虫的分子鉴定以及进一步的分子流行病学调查研究奠定了扎实的基础。

关键词：多头蚴多头绦虫 ITS pcox1 prrns 克隆序列分析

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疥螨3-磷酸甘油醛脱氢酶的原核表达与诊断价值评价

疥螨3-磷酸甘油醛脱氢酶的原核表达与诊断价值评价

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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：何冉何曼莉郑宇古小彬汪涛赖为民彭雪蓉杨光友四川农业大学动物医学院动物寄生虫病研究中心四川农业大学理学院

(目的)3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)广泛存在于原核和真核生物,参与能量代谢、DNA修复、调节RNA的核输出以及调节组蛋白基因表达等生命活动进程。作为糖酵解途径中的关键酶,3-磷酸甘油醛脱氢酶在抗寄生虫方面具有广泛的应用价值,尤其在作... 详细信息

(目的)3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)广泛存在于原核和真核生物,参与能量代谢、DNA修复、调节RNA的核输出以及调节组蛋白基因表达等生命活动进程。作为糖酵解途径中的关键酶,3-磷酸甘油醛脱氢酶在抗寄生虫方面具有广泛的应用价值,尤其在作为疫苗候选分子和药物靶标方面。本研究旨在探讨疥螨(Sarcoptes scabiei)GAPDH的应用价值。(方法)从疥螨总RNA中扩增钙调蛋白基因,构建原核表达载体进行诱导表达,并对表达的重组蛋白进行Western blotting分析和ELISA检测分析。(结果)本研究从疥螨总RNA中扩增出了3-磷酸甘油醛脱氢酶基因,其ORF框有990bp,共编码330个氨基酸。Western-blot显示原核表达的重组SsGAPDH能与人工感染疥螨的兔阳性血清发生特异性结合,以重组SsGAPDH为诊断抗原对45份阳性疥螨兔血清ELISA检出率为100%,SsGAPDH具有较强的免疫原性。(结论)本研究成功完成疥螨GAPDH基因的原核表达,为疥螨ELISA诊断方法的建立奠定了基础。

关键词： GAPDH RNA 磷酸甘油醛脱氢酶原核表达价值评价

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替米考星树脂复合物缓释微球的制备及其在大鼠体内的药动学研究

替米考星树脂复合物缓释微球的制备及其在大鼠体内的药动学研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：邹凯丽李逐波西南大学药学院

目的:基于Pennwalt的Pennkinetic系统,将磷酸替米考星用树脂搭载以后包合成微囊以达到掩苦味的作用。方法:选用tulsion 339树脂,以静态制备法搭载磷酸替米考星,形成替米考星树脂复合物,并用FTIR,DSC和XRD进行结构表征分析。采用o/o乳化... 详细信息

目的:基于Pennwalt的Pennkinetic系统,将磷酸替米考星用树脂搭载以后包合成微囊以达到掩苦味的作用。方法:选用tulsion 339树脂,以静态制备法搭载磷酸替米考星,形成替米考星树脂复合物,并用FTIR,DSC和XRD进行结构表征分析。采用o/o乳化溶剂挥发法将树脂复合服包裹在尤特奇RS/RL 100中制备替米考星树脂复合物微囊,用电镜并观察其形态学特征。将复合物分散在卡波姆974P中制备成混悬剂,分别给予大鼠口服相同剂量（10mg/Kg）磷酸替米考星和混悬剂,在5min、15min、30min、1h、2h、4h、6h、10h、12h和24h取血测其血药浓度。结果:磷酸替米考星与药物搭载的最佳质量比为1:1,去离子水在40℃复合5h达到药物平衡状态,药物含量为52.41%±1.353%。FTIR,DSC,XRD谱图分析,药物与树脂是以离子键结合的,所得的微囊中位粒径在125μm-150μm之间,药物含量为36.687%±1.236%。磷酸替米考星药动学参数为T=1h,C=1.26mg/ml,AUC=5.55 h*μg/ml,混悬液药动学参数为T=6h,C=1.06mg/ml,AUC=10.15 h*μg/ml。结论:磷酸替米考星树脂复合物微球混悬剂具有良好的掩味和缓释效果。

关键词：替米考星复合物混悬剂缓释微球

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牛源大肠杆菌耐药表型与Ⅰ型整合子-基因盒关系的研究

牛源大肠杆菌耐药表型与Ⅰ型整合子-基因盒关系的研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：李晓娜余婷张金宝王桂琴宁夏大学农学院

(目的)通过调查宁夏地区牛源大肠杆菌中Ⅰ型整合子及携带耐药基因盒的流行情况,研究整合子与细菌多重耐药性之间的相关性。(方法)在获得245株大肠杆菌对16种抗菌药耐药情况的基础上,采用PCR技术扩增Ⅰ型整合子的整合酶基因IntI;对整合... 详细信息

(目的)通过调查宁夏地区牛源大肠杆菌中Ⅰ型整合子及携带耐药基因盒的流行情况,研究整合子与细菌多重耐药性之间的相关性。(方法)在获得245株大肠杆菌对16种抗菌药耐药情况的基础上,采用PCR技术扩增Ⅰ型整合子的整合酶基因IntI;对整合酶基因阳性菌株进行基因盒扩增;对不同长度的基因盒插入区基因进行测序,分析其携带的耐药基因盒。(结果)结果显示,245株大肠杆菌中35株菌IntI基因阳性,Ⅰ型整合子检出率为14.29%;35株Ⅰ型整合子阳性菌株中有3株未检测到基因盒,32株菌扩增出7种类型的基因盒插入区片段,分别为dfrA7(25%),aadA23b(12.5%),dfrA17-aadA5(25%),dfrA12-orfF-aadA2(6.25%),sat-psp-aadA2(18.75%),aaeA4-catB-dfrA1(9.38%),aac(6')-Ib-crblaOXA-1-catB3-arr30(3.13%),其中插入的基因盒以介导甲氧苄啶和氨基糖苷类耐药的dfrA和aadA为主,基因盒排列dfrA17-aadA5和dfrA7较为流行,并且dfrA7为国内首次从牛源性大肠杆菌中发现。(结论)宁夏地区牛源大肠杆菌中Ⅰ型整合子目前还不是很流行,菌株的多重耐药表型与Ⅰ型整合子高度正相关。

关键词：大肠杆菌耐药表型整合子基因盒

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ML-7通过Akt和MAPK通路放大了喹烯酮引起的人肝癌细胞系HepG2的细胞凋亡

ML-7通过Akt和MAPK通路放大了喹烯酮引起的人肝癌细胞系HepG2的细...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：周延张燊代重山杨夏云李道稳赵科娜中国农业大学

【目的】本实验以人肝癌细胞系HepG2细胞为模型,评价ML-7和喹烯酮对人肝癌的影响。【方法】测量ML-7和喹烯酮在HepG2细胞上引起的凋亡水平、内源性和外源性凋亡通路激活情况、Akt和MAPK信号通路的激活情况。【结果】ML-7在无毒的浓度下,... 详细信息

【目的】本实验以人肝癌细胞系HepG2细胞为模型,评价ML-7和喹烯酮对人肝癌的影响。【方法】测量ML-7和喹烯酮在HepG2细胞上引起的凋亡水平、内源性和外源性凋亡通路激活情况、Akt和MAPK信号通路的激活情况。【结果】ML-7在无毒的浓度下,使HepG2对喹烯酮引起的细胞毒性更加敏感;使喹烯酮引起的HepG2细胞凋亡增多。进一步的机制研究证明,ML-7和喹烯酮发挥协同作用,使caspase-8,Bid,caspase-9,caspase-3的剪切率以及Bax/Bcl-2比率升高。更重要的,ML-7减弱了喹烯酮激活的Akt通路,但是加强了喹烯酮引起的p38,ERK和JNK的磷酸化。更进一步的实验发现,使用Akt激动剂和p38抑制剂使ML-7和喹烯酮引起的凋亡消失。相反,ERK和JNK抑制剂的使用加强了ML-7和喹烯酮引起的凋亡。这说明ML-7和喹烯酮的协同作用依赖于p38的磷酸化,同时,HepG2细胞在压力下激活了Akt,ERK和JNK信号通路来抵抗凋亡。【结论】ML-7和喹烯酮的组合有潜力通过细胞凋亡的方式杀死肝癌细胞,进而治疗肝癌。

关键词： ML-7 喹烯酮 Akt MAPK HepG2 凋亡肝癌

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黄芩苷对副猪嗜血杆菌诱导仔猪单核细胞炎症反应的影响

黄芩苷对副猪嗜血杆菌诱导仔猪单核细胞炎症反应的影响

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：李洒丽徐磊余晓琳刘宇邱银生武汉轻工大学动物科学与营养工程学院

【目的】通过观察黄芩苷对副猪嗜血杆菌（SH0165）感染猪外周血单核细胞的炎症反应的影响,探讨其抗副猪嗜血杆菌病炎症的作用。【方法】试验设空白组、副猪嗜血杆菌感染模型组和3个药物处理组（25、50、100μg/mL）,ELISA定细胞培养上... 详细信息

【目的】通过观察黄芩苷对副猪嗜血杆菌（SH0165）感染猪外周血单核细胞的炎症反应的影响,探讨其抗副猪嗜血杆菌病炎症的作用。【方法】试验设空白组、副猪嗜血杆菌感染模型组和3个药物处理组（25、50、100μg/mL）,ELISA定细胞培养上清液中炎性因子PGE、IL-1β、IL-8、IL-18、TNF-α的释放量,免疫荧光标记检测细胞中活性氧（ROS）的产生及细胞凋亡的情况。【结果】副猪嗜血杆菌感染猪外周血单核细胞6h后,造模组的炎性因子释放量极显著增加（P<0.01）,药物处理组在50～100μg/mL范围内能极显著地降低PGE、IL-1β、IL-8、IL-18、TNF-α炎性因子的释放量（P<0.01）,在25μg/mL时,PGE、IL-8的炎性因子释放量极显著降低（P<0.01）,TNF-α的释放量显著降低（P<0.05）;黄芩苷（25～100μg/mL）对副猪嗜血杆菌感染引起的细胞活性氧的产生有极显著的抑制作用（P<0.01）,同时对副猪嗜血杆菌诱导的细胞凋亡也有极显著的作用（P<0.01）,且与药物浓度呈正相关。【结论】黄芩苷对副猪嗜血杆菌感染诱导的猪外周血单核细胞炎症反应有良好的抗炎效果,为黄芩苷用于控制副猪嗜血杆菌病提供了初步的依据。

关键词：黄芩苷副猪嗜血杆菌仔猪外周血单核细胞炎症反应

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家蝇乙醇脱氢酶基因MADH基因的克隆、表达与活性分析

家蝇乙醇脱氢酶基因MADH基因的克隆、表达与活性分析

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：裴志花孙小宁唐艳高云航马红霞吉林农业大学动物科学技术学院

乙醇脱氢酶在昆虫代谢、蜕皮及变态发育中起着重要作用。以鸡沙门氏菌诱导家蝇幼虫构建的抑制性消减文库中筛选到的未知功能基因为研究对象,应用RACE技术(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)获得MADH基因的全长序列;测序分析后应... 详细信息

乙醇脱氢酶在昆虫代谢、蜕皮及变态发育中起着重要作用。以鸡沙门氏菌诱导家蝇幼虫构建的抑制性消减文库中筛选到的未知功能基因为研究对象,应用RACE技术(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)获得MADH基因的全长序列;测序分析后应用生物信息学软件对MADH的ORF(open reading frame)序列进行分析并预测其蛋白质功能,并进一步将克隆获得的MADH全长基因与原核表达载体pET-28a连接,构建重组表达质粒MADH-pET-32a;将重组表达质粒MADH-pET-28a转化至*** BL21(DE3)感受态细胞中,进行诱导表达和SDS-PAGE电泳分析;利用亲和层析法对表达的融合蛋白进行纯化,然后对纯化后的乙醇脱氢酶MADH进行体内、体外的解乙醇活性进行检测。结果显示,克隆到了一个807bp的乙醇脱氢酶基因,与昆虫25KDa蛋白具有很高的同源性为72.01%;该基因的原核表达产物具有较高的乙醇脱氢酶活性,比活力为0.203 U/mg;采用静脉注射的方法对小鼠进行给药后,给小鼠灌服55度白酒,可有效预防小鼠醉酒,与对照组相比,MADH融合蛋白延长了醉酒时间,缩短了醒酒时间。本研究不仅丰富了昆虫ADH家族,更为新的解酒药和解酒食品开发提供了新的思路和方法。

关键词：乙醇脱氢酶基因重组表达质粒活性分析

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多拉菌素和莫西菌素治疗鸡体内犬蛔虫幼虫试验

多拉菌素和莫西菌素治疗鸡体内犬蛔虫幼虫试验

引用

中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：韦冬妹王先坤唐得淋彭丹莉刘毅刘伟湖南农业大学动物医学院

目的为了筛选出对犬蛔虫幼虫效果好的药物剂量,为临床用药提供相关数据。方法现建立犬蛔虫幼虫感染7日龄的小鸡动物模型,将多拉菌素和莫西菌素分别按高(300ug/kg)中(200ug/kg)低(100ug/kg)剂量作用于受感染的小鸡,并设置对照组。用生化... 详细信息

目的为了筛选出对犬蛔虫幼虫效果好的药物剂量,为临床用药提供相关数据。方法现建立犬蛔虫幼虫感染7日龄的小鸡动物模型,将多拉菌素和莫西菌素分别按高(300ug/kg)中(200ug/kg)低(100ug/kg)剂量作用于受感染的小鸡,并设置对照组。用生化分析仪测定正常小鸡、感染小鸡以及用药后小鸡血清内的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)盼含量,以及通过感染后7天内每天以及第21天剖检、分离小鸡肝、肺、肌肉、肾、心、脑等组织,用胃蛋白酶消化其组织并镜检计算减虫率,用统计学的方法分析结果,对比疗效。结果试验结果表明,高剂量(300ug/kg)的多拉菌素和莫西菌素疗效最好,减虫率高达99.7%,中剂量组的减虫率为92%,低剂量组的减虫率为88.7%,感染小鼠与正常小鼠相比血清中的ALT和CK明显增高,AST和ALP无显著差异,用药小组血清中的ALT和CK含量较正常鼠的明显偏低。结论高剂量(300ug/kg)的多拉菌素和莫西菌素减虫效果显著,且能明显抑制感染小鸡的体内ALT和CK含量的增高,临床用药推荐以高剂量300ug/kg效果好。

关键词：多拉菌素莫西菌素犬蛔虫幼虫药效

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