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猪瘟病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

猪瘟病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：王淑娟刘梅芬吴志明闫若潜赵雪丽谢彩华马震原河南省动物疫病预防控制中心

引言猪瘟（CSF）是由猪瘟病毒（CSFV）引起的一种高致死性、烈性传染病,以稽留高热、出血、母猪流产为主要特征。该病主要通过呼吸道和消化道传染,传播速度快,发病率和死亡率都很高,给全球养猪业带来巨大的经济损失。近年来中国CSF发病... 详细信息

引言猪瘟（CSF）是由猪瘟病毒（CSFV）引起的一种高致死性、烈性传染病,以稽留高热、出血、母猪流产为主要特征。该病主要通过呼吸道和消化道传染,传播速度快,发病率和死亡率都很高,给全球养猪业带来巨大的经济损失。近年来中国CSF发病呈非典型、温和型增加态势,仅凭借临床症状和病理变化诊断该病存在一定的困难。而现有的CSF检测方法如ELISA、病毒分离鉴定、RT-PCR等存在操作繁琐,检测周期长,敏感性和特异性低等缺点很难在基层推广应用。因此,建立一种快速、特异、敏感地检测CSFV的检测方法势在必行。实时荧光定量PCR（FQ-PCR）是在PCR技术的基础上发展起来的一种核酸定量检测技术,其具有灵敏度高、特异性强、重复性好、速度快等优点,为动物疫病早期诊断和分子流行病学调查提供了一条新途径。材料与方法根据GenBank上登陆的CSFV E2基因序列,采用Primer 6.0软件分别设计CSFV特异性引物对和raqMan探针。以本实验室保存的pGEM-T/CSFV重组质粒作为模板,采用矩阵法筛选引物、探针的最佳浓度和最佳FQ-PCR反应条件,建立CSFV FQ-PCR方法。并对其进行了特异性、敏感性、重复性试验,利用所建立的方法对临床疑似CSF感染样品进行了检测。结果与讨论本研完成功建立的CSFV FQ-PCR检测方法在10～10～6 copies/μL模板范围内有很好的线性关系,所得相关系数为0.999;对CSFV细胞培养物出现阳性扩增信号,但ST细胞和其他8种病原对照未出现扩增曲线,表明特异性良好;该方法重复性好、敏感性高,能检出模板最低浓度为10 copies/μI,并且能检出1 TCID50的CSFV细胞毒;自35份疑似CSFV感染样品中检出23份阳性,阳性率为65.7%,普通RT-PCR检出21份,较普通RT-PCR检出率更高。本研究成功建立了CSFV FQ-PCR检测方法,为CSFV的早期和快速检测提供了特异、灵敏的方法。

关键词：猪瘟病毒建立与应用检测方法 RT-PCR

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牛流行热病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

牛流行热病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：侯佩莉王洪梅何洪彬山东省农业科学院奶牛研究中心

引言/目的牛流行热是由牛流行热病毒（BEFV）引起的牛的急性、热性传染病,在我国多个省市爆发流行,给养牛业造成巨大的经济损失,被农业部2014年印发的《牛羊常见疫病防控技术指导意见》列为牛重点防控的疫病。目前对该病的防治尚无特效... 详细信息

引言/目的牛流行热是由牛流行热病毒（BEFV）引起的牛的急性、热性传染病,在我国多个省市爆发流行,给养牛业造成巨大的经济损失,被农业部2014年印发的《牛羊常见疫病防控技术指导意见》列为牛重点防控的疫病。目前对该病的防治尚无特效药,只能对病牛采取对症治疗以缓解症状。因此,建立准确、灵敏、特异的检测方法是防治本病的前提条件。材料与方法根据GeneBank中牛流行热病毒G基因（GenBank:JX234571.1,）保守序列,应用PrimerPremier5.0软件设计并合成引物对RT1和RT1-R。应用病毒RNA提取试剂盒提取BEFV的RNA,并进行RT-PCR反应合成cDNA。以合成的BEFVcDNA为模板,优化反应条件,建立SYBR-GreenⅠ荧光定量RT-PCR标准曲线和溶解曲线,并进行灵敏性、特异性和重复性试验。应用该方法对临床采集的10份疑似牛流行热病毒感染的牛全血进行检测。结果与讨论以合成的BEFV cDNA(10TCID/mL)为模板,优化反应条件,确定最佳引物终浓度均为0.25μmol/L,最佳退火温度为65℃,扩增片段大小为163bp。标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线特异。以建立的该方法对BVDV等病毒进行特异性试验,均未见其他病毒的扩增,具有较好的特异性。取不同稀释度病毒的cDNA为模板进行荧光定量RT-PCR扩增,可检测到1TCID。同时进行3次批内重复试验和批间重复试验,同一浓度的S型曲线相似,Ct值基本相同,重复性好。应用该方法对临床采集的10份疑似BEFV感染的牛全血进行检测,检测阳性4份,高于普通RT-PCR方法的检出率（检出阳性3份）。实时荧光定量RT-PCR技术巧妙地利用了PCR技术的DNA高效扩增、荧光技术高特异性和光谱技术的敏感性及实时定量分析的优点,极大地提高了检测的敏感性和特异性。在BEFV所有基因组中,G基因高度保守,故选用G基因保守区为参考。本实验分离获得了BEFV流行毒株,通过测定病毒的TCID,对病毒直接定量,用于对临床上牛感染流行热病毒早期病毒含量较低时的诊断。结论本研究成功建立了BEFV SYBR-GreenI荧光定量RT-PCR检测方法。具有较好的灵敏度、特异性和重复性,可用于牛流行热病毒临床血液、组织等样本的检测,对牛流行热病毒的流行与传播进行实时监测,为相关的基础研究提供技术支持。

关键词：牛流行热病毒特异性初步应用溶解曲线检测方法 RT-PCR

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猪丹毒杆菌SpaA基因原核表达及间接ELISA方法的建立

猪丹毒杆菌SpaA基因原核表达及间接ELISA方法的建立

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：陆萍魏文涛李郁魏建忠孙裴安徽农业大学动物科技学院

引言猪丹毒(Swine erysipelas)是由猪丹毒杆菌(Erysipelothrix rhusiopathiae)引起的一种人畜共患传染病。目前,该病在世界上大多数国家都有分布,呈散发或流行性发生,给养猪业造成了巨大的经济损失,也给人体健康带来威胁。研究表明SpaA... 详细信息

引言猪丹毒(Swine erysipelas)是由猪丹毒杆菌(Erysipelothrix rhusiopathiae)引起的一种人畜共患传染病。目前,该病在世界上大多数国家都有分布,呈散发或流行性发生,给养猪业造成了巨大的经济损失,也给人体健康带来威胁。研究表明SpaA蛋白具有良好的免疫原性,是猪丹毒杆菌的主要的免疫保护性抗原,而且该抗原几乎存在于所有毒力较强的猪丹毒杆菌中。本实验利用原核表达获得猪丹毒杆菌SpaA蛋白,并以此蛋白作为包被抗原建立间接ELISA检测方法,旨在为猪丹毒疫苗免疫抗体水平监测和流行病学调查提供一种简便的血清学方法,为进一步预防和控制猪丹毒、开发高品质猪丹毒商品化诊断试剂盒奠定基础。材料与方法利用PCR扩增猪丹毒杆菌SpaA基因,将其克隆至pGEX-6P-1载体,构建pGEX-6P-1-SpaA原核表达质粒,通过双酶切鉴定和测序确认,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中,并进行IPTG诱导表达和纯化目的蛋白,采用SDS-PAGE和Western-blot对重组蛋白进行鉴定及抗原性分析。用纯化的重组蛋白作为包被抗原,通过对抗原包被浓度、血清稀释度、封闭液种类、血清作用时间、二抗浓度及作用时间、显色时间等条件进行优化,并确定ELISA检测方法的临界值,在确定的最佳反应条件下进行特异性和重复性试验,建立一种检测血清中猪丹毒杆菌抗体的间接ELISA检测方法。结果与讨论从猪丹毒杆菌SpaA基因中扩增出与预期设计的1266 bp大小相符的片段,扩增产物连接载体得到重组质粒,在大肠杆菌中实现表达,获得77 kD的目的蛋白,能够与猪丹毒杆菌阳性血清发生特异性反应。以此蛋白作为包被抗原成功建立了一种间接ELISA检测方法,批内及批间变异系数均小于10%,具有较好的重复性及特异性。建立的间接ELISA检测方法与商品化猪丹毒杆菌抗体检测试剂盒相比,两者符合率为92.2%。结果表明,利用成功表达的SpaA蛋白建立的间接ELISA方法可以用于猪丹毒杆菌抗体的检测,从而为猪丹毒疫苗免疫抗体水平监测和流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法,为进一步预防和控制猪丹毒提供条件。

关键词：猪丹毒杆菌 ELISA 原核表达

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表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白重组新城疫病毒的构建

表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白重组新城疫病毒的构建

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：薛聪丛彦龙王珂钱晶袁乾亮张平仄丁壮吉林大学动物医学学院

引言禽流感、新城疫是严重危害我国养禽业的重要疫病,目前对这两种疾病的防制主要依赖疫苗。本研究在分子流行病学调查及高效反向遗传操作平台基础上,拯救表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组新城疫病毒,以期获得与目前优势流行株匹配的... 详细信息

引言禽流感、新城疫是严重危害我国养禽业的重要疫病,目前对这两种疾病的防制主要依赖疫苗。本研究在分子流行病学调查及高效反向遗传操作平台基础上,拯救表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组新城疫病毒,以期获得与目前优势流行株匹配的基因Ⅷ型疫苗候选株。材料与方法 BHK-21细胞由本实验室保存;SPF鸡胚购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司。重组病毒感染性克隆的构建:常规方法提取H9亚型禽流感病毒RNA,RT-PCR扩增HA基因胞外区,经PmeⅠ酶切插入rNA1致弱株感染性克隆。重组病毒的拯救:将转录质粒pCI-rNA-1及辅助质粒pcDNA-NP、pcDNA-P、pcDNA-L按4:2:1:1充分混合,共转染BHK-21细胞,救获重组病毒。重组病毒的鉴定:经电镜观察、RT-PCR及测序对救获毒株进行鉴定。通过Westernblot及间接免疫荧光检测流感病毒HA蛋白表达情况。结果与讨论电镜观察可见圆形、直径200-500nm,具有明显纤突的典型新城疫病毒粒子。通过ET-PCR和测序鉴定,表明已将H9亚型禽流感病毒HA基因整合到NDV基因组,经鸡胚连续传代10次,HA基因仍可稳定遗传。经Westernblot检测,可以观察到55KD左右的目的条带,与预期结果相一致,表明H9亚型AIV HA蛋白在重组新城疫病毒中得到正确表达。通过间接免疫荧光实验,进一步证明HA蛋白得到正确表达。众多流行病学调查数据表明当前正处于基因Ⅶ型NDV毒株引起的第四次大流行之中。常用疫苗株Lasota与基因Ⅶ型NDV遗传距离较远,存在流行株与疫苗株不匹配的问题。因此,本研究构建表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白的基因Ⅶ型NDV重组病毒,以期获得优良疫苗候选株。结论成功构建并拯救了表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组新城疫病毒,电镜观察为典型的NDV病毒粒子。Westernblot及间接免疫荧光检测表明流感病毒HA蛋白得到正确表达,为新型疫苗的研究提供参考。

关键词：禽流感病毒重组新城疫病毒

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猪肉生产供应链中人兽共患猪链球菌的感染风险与传播机制

猪肉生产供应链中人兽共患猪链球菌的感染风险与传播机制

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：周锐华中农业大学

引言近十年来,人兽共患猪链球菌病危害日益严重。为了评估猪和猪肉源性猪链球菌对食品安全和人类健康的潜在风险,我们与英国剑桥大学合作,比较研究了中国和英国不同饲养、屠宰和零售模式下,猪链球菌在临床健康猪群及猪肉生产供应链中的... 详细信息

引言近十年来,人兽共患猪链球菌病危害日益严重。为了评估猪和猪肉源性猪链球菌对食品安全和人类健康的潜在风险,我们与英国剑桥大学合作,比较研究了中国和英国不同饲养、屠宰和零售模式下,猪链球菌在临床健康猪群及猪肉生产供应链中的感染和污染状况以及存活和传播机制。材料与方法中方从湖北和广西选取5个规模化猪场(500-3000头母猪)、5个小型猪场(70-300头母猪),英国选取5个规模化猪场,分别采集25头5周龄的临床健康断奶仔猪和25头同群的20周龄临床健康肥猪的扁桃体拭子共750个,分离鉴定猪链球菌,进行耐药性、血清型、序列型和全基因组序列分析,同时收集猪场背景资料、免疫和用药情况。分别在夏季和冬季从屠宰场、农贸市场和大型超市采集样品包括猪肉、肝、肾、小肠等可食组织各600份,进行猪链球菌的分离鉴定和基于PCR的细菌计数分析,结合屠宰、储存、运输和零售模式,综合分析猪肉生产供应链中猪链球菌的污染状况。将含5000个突变体的猪链球菌2型转座子突变体库,分别暴露于冻肉、冷鲜肉、鲜肉、完整和划伤的猪皮肤、猪粪便等环境,回收突变菌株,进行TraDIS分析,鉴定环境适应性基因和信号通路。结果和结论(1)中英猪肉生产供应链均普遍携带猪链球菌,其多样性远高于发病猪来源的菌株,可感染人的16型在中英猪群的携带率最高,提示巨大的公共卫生风险。(2)影响猪群猪链球菌携带率的主要因素有季节、日龄和饲养模式。环境温度越高携带率越高,断奶仔猪携带率显著高于待宰肥猪,大型规模化猪场携带率高于小型猪场。(3)中英临床健康猪群携带的猪链球菌普遍存在耐药问题,发现耐药基因可以在临床健康猪群携带的猪链球菌中快速丢失和获得。(4)发现一大批猪链球菌适应猪肉生产供应链环境的基因和信号通路,揭示了部分基因调控其环境适应性的分子机制,为新的防控策略和技术研究奠定了基础。

关键词：猪链球菌分离鉴定人兽共患供应链传播机制感染风险

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坦布苏病毒在樱桃谷雏鸭体内的排毒规律及病毒在血液、组织中载量变化的研究

坦布苏病毒在樱桃谷雏鸭体内的排毒规律及病毒在血液、组织中载量...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：赵立媛李秀丽刁有祥路云建窦砚国冯柳柳山东农业大学动物科技学院

目的掌握坦布苏病毒的发病特点,对控制该病的发生具有重要意义。本试验对坦布苏病毒感染樱桃谷雏鸭后的潜伏期、排毒规律及病毒在血液、组织中载量的变化进行了研究,为坦布苏病毒感染的预防和控制提供了理论依据。材料与方法将樱桃谷雏... 详细信息

目的掌握坦布苏病毒的发病特点,对控制该病的发生具有重要意义。本试验对坦布苏病毒感染樱桃谷雏鸭后的潜伏期、排毒规律及病毒在血液、组织中载量的变化进行了研究,为坦布苏病毒感染的预防和控制提供了理论依据。材料与方法将樱桃谷雏鸭110只随机分为三组。静脉组70只、点眼滴鼻组20只,于10日龄每只接种3.5 mL病毒尿囊液(3.11×10-3EID50/只);自然感染组20只,不接毒,与静脉组的雏鸭混养。每组于感染后1-23 d每隔1天采集泄殖腔棉拭子及血液,静脉组于感染后3-17 d每隔1天随机剖杀3只,取组织器官。抽提样本RNA并逆转录,进行荧光定量PCR检测。取采集的样品接种鸭胚,利用RT-PCR方法对尿囊液进行坦布苏病毒的检测。结果与讨论3个组樱桃谷雏鸭感染坦布苏病毒后的潜伏期均一致,平均为24h。3个组雏鸭感染坦布苏病毒后1-25 d都存在排毒现象。静脉组与点眼滴鼻组峰值出现在感染后5 d、11 d、17 d,自然感染组峰值出现在感染后7 d、13 d、19 d。第一次排毒高峰是因为病毒进入血液循环尚未进入组织出现的;之后的排毒高峰是由于病毒侵入组织器官,并从细胞中释放出来导致的。静脉组与点眼滴鼻组均为感染后1 d、7d、19d血液中病毒载量较高,15d最低;自然感染组在感染后9d达到最高值,5 d最低。有两次明显的病毒血症,与同属的登革病毒类似。静脉组雏鸭各组织中病毒载量高峰出现在5d及13d,其中,胰腺、法氏囊、胸腺、肝脏、脑、肾脏、脾脏、心脏中载量较高,脑中含量最高;腺胃、气管、肺脏、肠道中载量相对较低。3个组雏鸭的泄殖腔棉拭子、血液及组织样品,再次接种鸭胚,仍然可以在尿囊液中检测到坦布苏病毒。结论樱桃谷雏鸭感染坦布苏病毒后的平均潜伏期为24h;感染后1-25 d均有排毒,5-19 d排毒量较多;病毒可随血液循环进入各组织,其中,对脑、胸腺、法氏囊、心脏、脾脏、胰脏的侵蚀较强。

关键词：坦布苏病毒尿囊液樱桃谷雏鸭排毒规律

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云南省部分猪场戊型肝炎流行情况调查

云南省部分猪场戊型肝炎流行情况调查

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：严红亚张佳高利波尹革芬舒相华杨贵树李文贵云南农业大学动物科学技术学院

戊型肝炎由戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus,HEV）引起,主要通过粪-口传播,是一种人兽共患传染病。已从猪、鸡、犬、鼠、鹿和灵长类等多种动物中检测到HEV抗体或核酸。为了解云南省猪场戊型肝炎的流行情况及常见基因型,本研究从部分规... 详细信息

戊型肝炎由戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus,HEV）引起,主要通过粪-口传播,是一种人兽共患传染病。已从猪、鸡、犬、鼠、鹿和灵长类等多种动物中检测到HEV抗体或核酸。为了解云南省猪场戊型肝炎的流行情况及常见基因型,本研究从部分规模猪场和散养户采集166份6～8月龄猪的粪便样品进行病毒核酸检测。先从粪样中提取总RNA,进行RT-nPCR扩增。PCR产物用1%琼脂糖凝胶电泳检测,将纯化产物链接到pMD18-T载体上,制备单克隆质粒,送公司测序。结果发现,粪便样品中戊型肝炎病毒阳性率为12.7%。应用MEG4软件对所得基因序列进行遗传进化树分析,检测到的11株流行株与基因1型、2型、3型和4型参考序列的核苷酸同源性分别为85.6%7.8%,85.6%7.8%,85.6%5.6%,92.8%8.9%。表明这些流行株均属于基因4型。Lu在HEV 4个主要基因型的基础上,进一步将其分为24个基因亚型（1a,1b,1c,1e;2a,2b;3a,3b,3c,3d,3e,3f,3g,3h,3i;4a,4b,4c,4d,4e,4f,4R）。我们此前的调查表明,云南省流行的基因亚型包括4c,4d,4b及一些未知的基因型,与Lu的基因型分类相符。由于戊型肝炎病毒基因组具有广泛的遗传异质性和高度的灵敏性,需要从HEV保守基因组区域设计扩增引物和目标探针。王晶晶等经序列分析鉴定的猪HEV至少有基因型3型和4型,同一地区分离所得的人与猪的HEV同源性高度相似,甚至同一亚型间同源性可达95%-100%。表明基因3型及基因4型HEV感染导致的戊型肝炎是人畜共患病。本次调查结果发现HEV在云南省的阳性率为12.7%,和其它省份报道的流行率接近,所分离的11个毒株均为基因型4型。

关键词：戊型肝炎病毒流行情况 HEV 云南省

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鸡传染性贫血病毒凋亡素基因的克隆与原核表达

鸡传染性贫血病毒凋亡素基因的克隆与原核表达

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：陈桂华程相朝郁川张春杰余祖华何雷贾艳艳廖成水翟崇凯田文静河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室

引言鸡贫血病毒(chicken anemia virus,CAV)是鸡传染性贫血(chicken infectious anemia,CIA)的病原,该病毒于1979年由Yuasa等在日本首次分离得到,是一种较小的无囊膜的禽DNA病毒,直径约23 nm,属圆环病毒科。CAV基因组由环状单股负链DNA... 详细信息

引言鸡贫血病毒(chicken anemia virus,CAV)是鸡传染性贫血(chicken infectious anemia,CIA)的病原,该病毒于1979年由Yuasa等在日本首次分离得到,是一种较小的无囊膜的禽DNA病毒,直径约23 nm,属圆环病毒科。CAV基因组由环状单股负链DNA组成,能编码3个蛋白质,即VP1、VP2和VP3,其中VP3蛋白是CAV的凋亡功能蛋白,且VP3能诱导雏鸡造血母细胞和T淋巴细胞前体细胞凋亡,导致雏鸡出现严重的贫血及免疫机能低下,因此VP3被命名为(凋亡素)。被认为是第一个真正意义上可选择性诱导肿瘤细胞凋亡而不损伤正常细胞的凋亡蛋白。本实验成功构建了原核表达载体pET-32a-Apoptin,并进行了蛋白表达条件的优化。为下一步制备Apoptin抗体奠定了基础,并为进一步探索Apoptin的抗肿瘤机制研究提供了一定材料。材料与方法 CAV基因组、大肠杆菌Rosetta、原核表达载体PET-32a由本实验室保存。本实验以CAV的全基因组为模板,PCR扩增出Apoptin全长片段,并将其连接到pET-32a,经PCR、酶切及测序进行鉴定,利用IPTG对含Apoptin原核表达载体的宿主菌Rosetta进行诱导表达,SDS-PAGE初步观察Apoptin在Rosetta中的表达情况,并采用不同温度、IPTG浓度、诱导时间等对Apoptin的原核表达条件进行优化,确立最佳表达条件。结果与讨论运用PCR技术成功扩增出全长366bp的Apoptin基因,并将其克隆到原核表达载体PET-32a,用1 mmolIPTG诱导PET-32a-Apoptin(Rosetta)后表达出约34KD的Apoptin融合蛋白,且该蛋白大量存在于上清中呈可溶性表达,最佳表达条件为IPTG终浓度为1 mM,28℃诱导8h。以上结果表明,本研究成功克隆并构建了能高效表达Apoptin蛋白的原核表达载体PET-32a-Apoptin,可为进一步探索Apoptin的抗肿瘤机制提供一定材料。

关键词：鸡传染性贫血病毒 CAV 基因组 PET 凋亡素基因 Rosetta 原核表达

来源：评论

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不同毒力PRRSV毒株感染猪体后的病毒抗原分布的比较

不同毒力PRRSV毒株感染猪体后的病毒抗原分布的比较

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

作者：张卓蔡雪辉田志军刘永刚安同庆吴东来胡守萍兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

54头40-42日龄周龄左右的仔猪,分别接种HuN4-F80弱毒和HuN4强毒株,检测并比较病毒抗原的数量及分布。免疫荧光及免疫组化结果显示HuN4组各脏器的病理抗原阳性检出率均明显高于HuN4-F80组和对照组。阳性细胞散在分布于红、白髓交界处的... 详细信息

54头40-42日龄周龄左右的仔猪,分别接种HuN4-F80弱毒和HuN4强毒株,检测并比较病毒抗原的数量及分布。免疫荧光及免疫组化结果显示HuN4组各脏器的病理抗原阳性检出率均明显高于HuN4-F80组和对照组。阳性细胞散在分布于红、白髓交界处的树突状细胞和巨噬细胞内。在大脑,淋巴结及肾脏和小肠中也可检测到阳性细胞,大脑的阳性细胞表达在血管周围浸润细胞中,在淋巴结内表达在树突细胞及巨噬细胞的胞浆内,肾小球毛细血管上皮细胞中也可检测到阳性细胞,小肠粘膜固有层内的巨噬细胞中也有阳性细胞出现。PRRSV抗原出现的细胞类型及在特定脏器中表达的抗原阳性细胞的分布在各接种组中无差异。

关键词： PRRSV 免疫荧光免疫组化巨噬细胞

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细菌对阳离子抗菌肽产生耐药性的分子策略

细菌对阳离子抗菌肽产生耐药性的分子策略

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

作者：彭开松龚月娟佘锐萍祁克宗涂健安徽农业大学动物科技学院安徽农业大学资源与环境学院中国农业大学动物医学院

生物源的阳离子抗菌肽是物种亿万年进化中保留的有效天然防御(免疫)因子,已成为近年国内外寻求传统抗生素替代品的焦点,并部分进入了临床试验阶段。但目前对阳离子抗菌肽和细菌之间斗争的许多细节,还没有彻底阐明,至于阳离子抗菌肽的耐... 详细信息

生物源的阳离子抗菌肽是物种亿万年进化中保留的有效天然防御(免疫)因子,已成为近年国内外寻求传统抗生素替代品的焦点,并部分进入了临床试验阶段。但目前对阳离子抗菌肽和细菌之间斗争的许多细节,还没有彻底阐明,至于阳离子抗菌肽的耐药性问题国内研究者关注甚少。本文对阳离子抗菌肽耐药性的现状、耐药机制及调节进行了综述,并重点讨论了细菌对阳离子抗菌肽产生耐药性的分子策略,期望对当前国内阳离子抗菌肽的研究有所参考。同时,对阳离子抗菌肽的研究与开发中应该注意其对机体免疫调节的作用。

关键词：阳离子抗微生物肽细菌耐药机制

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