检索结果-内蒙古大学图书馆

您好，读者！请登录

内蒙古大学图书馆

首页
概况
党建
资源
服务
科研支持
- 论文收录引用证明
- 科技查新
知识产权
档案馆
帮助

咨询与建议

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

您的常用邮箱：*

您的手机号码：*

问题描述：

当前已输入0个字，您还可以输入200个字

全部搜索
期刊论文
图书
学位论文
标准
纸本馆藏
外文资源发现
数据库导航
超星发现

高级检索

时间限定

出版年份：

文献类型

图书期刊文献学位论文多媒体

馆藏选择

电子馆藏纸本馆藏

核心期刊

全部期刊 SCI 收录期刊 SSCI 收录期刊 EI 收录期刊 CSCD 收录期刊 CSSCI 收录期刊

语言

中文英文

文献类型

期刊文献图书学位论文标准纸本馆藏

帮助

文字说明：

T=题名（书名、题名），A=作者（责任者），K=主题词，P=出版物名称，PU=出版社名称，O=机构（作者单位、学位授予单位、专利申请人），L=中图分类号，C=学科分类号，U=全部字段，Y=年（出版发行年、学位年度、标准发布年）

检索规则说明：

AND代表“并且”；OR代表“或者”；NOT代表“不包含”；(注意必须大写,运算符两边需空一格)

检索范例：

范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
范例二：P=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT K=Visual AND Y=2011-2016

分类表

所选分类

>> <<

限定检索结果

文献类型

1,352 篇 会议
7 篇 期刊文献

馆藏范围

1,359 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

1,301 篇 农学
- 929 篇 兽医学
- 313 篇 畜牧学
- 42 篇 林学
- 14 篇 作物学
- 10 篇 水产
- 1 篇 植物保护
39 篇 工学
- 37 篇 生物工程
- 2 篇 化学工程与技术
33 篇 医学
- 9 篇 基础医学(可授医学...
- 9 篇 中西医结合
- 8 篇 临床医学
- 5 篇 公共卫生与预防医...
- 5 篇 药学(可授医学、理...
- 5 篇 中药学(可授医学、...
- 1 篇 口腔医学
- 1 篇 中医学
- 1 篇 医学技术（可授医学...
24 篇 理学
- 24 篇 生物学
3 篇 历史学
- 3 篇 中国史
3 篇 管理学
- 2 篇 农林经济管理
- 1 篇 管理科学与工程(可...
2 篇 经济学
- 2 篇 应用经济学
1 篇 教育学
- 1 篇 教育学

主题

29 篇 犬
26 篇 prrsv
26 篇 分离鉴定
22 篇 单克隆抗体
22 篇 禽流感病毒
21 篇 原核表达
20 篇 elisa
19 篇 猪
18 篇 检测方法
17 篇 免疫组织化学
17 篇 小鼠
16 篇 新城疫病毒
16 篇 序列分析
14 篇 坦布苏病毒
14 篇 pcr
14 篇 rt-pcr
14 篇 大肠杆菌
13 篇 禽流感
13 篇 鸡
13 篇 免疫组化

机构

131 篇 中国农业大学
57 篇 南京农业大学
56 篇 吉林大学
47 篇 内蒙古农业大学
46 篇 西北农林科技大学
44 篇 广西大学
43 篇 山东农业大学
42 篇 河南科技大学
41 篇 河南农业大学
39 篇 华南农业大学
39 篇 东北农业大学
33 篇 中国农业科学院哈...
33 篇 华中农业大学
30 篇 扬州大学
29 篇 佛山科学技术学院
27 篇 安徽农业大学
27 篇 军事医学科学院军...
25 篇 四川农业大学
25 篇 吉林农业大学
25 篇 中国农业科学院上...

作者

28 篇 马学恩
24 篇 程相朝
21 篇 罗军荣
21 篇 周建华
20 篇 郁川
18 篇 赵德明
18 篇 张春杰
18 篇 吴志明
18 篇 闫若潜
17 篇 金宁一
16 篇 王川庆
15 篇 彭克美
15 篇 雷治海
14 篇 周恩民
14 篇 杜卫华
14 篇 朱化彬
14 篇 高华
14 篇 涂长春
14 篇 郝海生
14 篇 张大丙

语言

1,339 篇 中文
20 篇 英文

检索条件"任意字段=中国畜牧兽医学会禽病学分会第十六次学术研讨会"

共 1359 条记录，以下是1241-1250 订阅

全选清除本页清除全部题录导出标记到"检索档案"

详细简洁

排序：

新型兔出血症病毒(RHDV2)研究进展

新型兔出血症病毒(RHDV2)研究进展

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：谭永贵朱杰郭慧敏孟春春李传峰陈宗艳刘光清中国农业科学院上海兽医研究所

2010年8月首次在法国发现一起新的非典型兔出血症疫情,该发病兔的病期,死亡率以及高亚急性形式等明显不同点于经典兔出血症,法国***-Recule等研究人员在法国西北部兔场检测出该兔出血症病原为一种新的兔出血症病毒,其与经典RHDV和RHDV-... 详细信息

2010年8月首次在法国发现一起新的非典型兔出血症疫情,该发病兔的病期,死亡率以及高亚急性形式等明显不同点于经典兔出血症,法国***-Recule等研究人员在法国西北部兔场检测出该兔出血症病原为一种新的兔出血症病毒,其与经典RHDV和RHDV-a基因序列差异明显,被称为RHDV2。该病毒引起的主要病理变化为肝脏坏死,多器官出血或充血,实质脏器水肿等类似于经典兔出血症。该病传播迅速,2011-2012年间传播到西班牙,葡萄牙,意大利,英格兰等西欧国家,尤其是在伊利比亚半岛有取代经典兔兔出血症的趋势。研究发现,该病原能够感染幼龄家兔而且是唯一一个能够跨物种感染的兔病毒属成员。该病传播迅速,特别是在野兔种群密度较大的地区疫情较为严重,而某一地区没有或者野兔种群稀少的地区,不会发病或者是疫情很少见,该病原兔子数量锐减,严重威胁以兔为食物链中心的生态平衡。因此,对该病原的研究对于控制该病原的传播具有非常重大的意义。RHDV2单股正链RNA病毒,基因组全长为7447bp无囊膜结构,呈球形,病毒颗粒直径为32-44nm,呈正二十面体对称结构。和其他兔病毒属一样,RHDV2基因组有两个开放阅读框,ORF1和ORF2;ORF1(10-7044bp)编码一个含有2344个氨基酸(257 kDa)的多聚蛋白,该多聚蛋白由病毒编码的蛋白酶酶解成多个非结构蛋白NSP1(2A)NSP2(2B)NSP3(2C核苷酸水解酶)NSP4(3A)NSP5(3B VPg)NSP6(3C蛋白酶)NSP7(3C RNA复制酶)和衣壳蛋白VP1。RHDV-N11基因组全长7447nt,5′非编码区9nt。3′非编码区69nt,长于经典RHDV和RHDVa的3′非编码区(59bp)。利用RHDV2衣壳蛋白VP1的核酸和氨基酸序列与其他兔病毒属成员进行同源性分析:序列分析结果显示,核酸序列同源性分别为RHDV(RHDVa)82.4%;RCV82%;RCV-A1 80.6%;EBHSV 70.4%。氨基酸序列同源性分别为RHDV(RHDVa)89.2%;RCV 89.2%;RCV-A1 87.4%;EBHSV 76.7%。目前对该病毒的研究主要集中在宿主细胞受体研究,与经典兔出血症病毒抗原交叉保护方面以及引起毒力差异的分子机制。因RHDV2是唯一一个能够跨物种感染的兔病毒属成员,而且研究发现,RHDV2结合组织血型抗原的区域与GII型人诺如病毒类似,这个结果说明杯状病毒结合HBGA的方式是保守的。这些基础研究将为控制杯状病毒的传播带来巨大的推动作用。

关键词： RHDV2 基因组兔出血症病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的胶体金免疫层析检测方法建立

基于猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的胶体金免疫层析检测方法建立

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：魏艳秋朱卫霞袁万哲陈立功李潭清宋勤叶河北农业大学动物医学院河北省兽用生物制品工程技术研究中心

引言/目的 2010年以来,由猪流行性腹泻病毒（PEDV）变异毒株引起的PED在我国广泛流行,给养猪业造成了巨大经济损失。PED的临床症状与猪传染性胃肠炎、轮状病毒感染等其他肠道传染病极易混淆,建立PEDV快速检测方法具有重要的实践意义。... 详细信息

引言/目的 2010年以来,由猪流行性腹泻病毒（PEDV）变异毒株引起的PED在我国广泛流行,给养猪业造成了巨大经济损失。PED的临床症状与猪传染性胃肠炎、轮状病毒感染等其他肠道传染病极易混淆,建立PEDV快速检测方法具有重要的实践意义。核蛋白（N蛋白）是PEDV的主要结构蛋白,保守性强,是病毒感染早期诊断和疫病监测的主要靶蛋白。本研究旨在制备N蛋白单克隆抗体（McAb）,建立基于McAb的PEDV胶体金免疫层析方法。材料与方法以重组PEDVN蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术,应用ELISA筛选分泌PEDVN蛋白McAb的阳性杂交瘤细胞;通过ELISA鉴定抗体的类和亚类;应用Western blot和免疫组化鉴定分泌抗体的免疫原性和特异性。进而应用柠檬酸三钠还原法制备胶体金悬液;以McAb标记胶体金颗粒,吸附于玻璃纤维素膜上,制备金标垫;以针对N蛋白不同表位的另一株McAb和羊抗鼠IgM印迹于硝酸纤维膜,分别作为检测线与质控线,组装试纸条;用该试纸条检测腹泻仔猪小肠内容物,评价其应用性。结果与讨论获得了4株分泌抗PEDVN蛋白McAb的杂交瘤细胞（A7、E10、F7、C1株）。4株杂交瘤细胞分泌的McAb均为IgM类,分别识别不同抗原表位,均能够与PEDV N蛋白,或与猪小肠绒毛上皮细胞内的PEDV特异结合。连续将4株杂交瘤细胞传至30代,抗体效价稳定在1:100～1:800之间,表明杂交瘤细胞具有良好的抗体分泌稳定性。A7、E10、F7、C1株杂交瘤细胞诱导产生的腹水抗体效价分别为1:10～6、1:10～5、1:10～3和1:10～2。用McAb A7、F7和羊抗鼠IgM组装的试纸条能够特异地与PEDV阳性小肠内容物反应,与PRRSV、CSFV、PCV和PRV等病毒无非特异反应。试纸条与RT-PCR对13份腹泻仔猪小肠内容物的阳性检出率分别为38.46%和46.15%,两者的符合率为83-3%。该结果表明,利用抗PEDVN蛋白单克隆抗体建立的PEDV胶体金免疫层析试纸条能够快速、特异地检测PEDV,可用于现场诊断。结论制备了4株能够稳定分泌PEDV N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,初步成功组装了基于单克隆抗体的PEDV检测胶体金免疫层析试纸条,为PEDV胶体金试纸条的进一步研发搭建了技术平台。

关键词：胶体金免疫层析检测方法杂交瘤细胞猪流行性腹泻病毒单克隆抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

河南地区2014-2015年猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因的遗传变异分析

河南地区2014-2015年猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因的遗传变异...

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：郭天准周峰崔丹丹王新港赵军陈陆杨霞王新卫王川庆河南农业大学牧医工程学院

引言猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的一种以母猪的繁殖障碍和仔猪的呼吸系统疾病为特征的传染病,并可导致免疫抑制,是严重威胁全球养猪业的主要疫病之一。其病原基因组具有高度变异性。目前我国PR... 详细信息

引言猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的一种以母猪的繁殖障碍和仔猪的呼吸系统疾病为特征的传染病,并可导致免疫抑制,是严重威胁全球养猪业的主要疫病之一。其病原基因组具有高度变异性。目前我国PRRSV毒株的流行呈现多样化趋势,从而给该病的诊断和防控带来很大困难。本研究旨在对2014-2015年采自河南不同地区疑似PRRS临床样品进行RT-PCR检测,并对阳性样品的NSP2基因进行序列测定与分析,以揭示河南地区PRRS最新流行动态及NSP2基因的遗传变异情况。材料与方法采集河南不同地区118个养殖场共250份疑似PRRS临床样品,经RT-PCR检测为阳性后,对其NSP2基因进行扩增并测序。利用DNAstar和MEGA5.0等软件与国内外PRRSV参考毒株进行序列比对及遗传进化分析。结果与讨论从250份临床疑似样品中共检测到PRRSV阳性样品58份,阳性率为23.2%;其中缺失变异株51份,占总阳性率的87.9%,经典毒株7份,占总阳性率的12.1%;豫东地区阳性率最高（33.3%）,其次是豫北和豫南地区（分别为24.8%和24.2%）,豫中地区阳性率最低（17.0%）。豫西地区阳性率为17.6%,且均为缺失变异株。其他地区虽然检测到经典毒株,但阳性率均在4.2%以下。已获得29个NSP2部分基因序列并录入GenBank数据库。29个NSP2基因推导的氨基酸序列同源性为50.4%8.5%,与欧洲型LV株同源性较低,与美洲型CH-1a株、JXA1株、VR-2332株和NADC30株等同源性较高。遗传进化分析显示,29个毒株分别属于以NADC30株为代表的亚群1和以JXA1株为代表的亚群4,提示目前河南地区PRRSV流行毒株呈现两极分化态势,主要以HP-PRRSV和NADC30-Like毒株为主。29株NSP2基因推导的氨基酸序列与JXA1株和NADC30株具有相似的变异特点,但也存在差异。其中NANY-3株不连续缺失55个氨基酸,与HUBQJ1-2株和HZ-31株具有相似的缺失特征,这种变异与其毒力的相关性还有待验证;XINX-1等17个毒株不连续缺失132个氨基酸,与NADC30株和HENAN-XINX株具有相似的缺失特征,证实NADC30-Like毒株已在河南地区厂泛流行。综上所述,河南地区PRRS流行现状比较复杂,可能与不同地区的疫苗使用种类、猪只流动状况、养殖模式和饲养管理等因素相关,因此需要持续对PRRSV流行毒株的分子特点及致病性等方面进行实时监测和深入研究,以便及时监控疫情变化并采取有效的防控措施。

关键词：阳性率猪繁殖与呼吸综合征病毒变异分析 PRRSV 河南地区

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

山羊源BVDV1与BVDV3的发现与鉴定

山羊源BVDV1与BVDV3的发现与鉴定

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：毛立李文良杨蕾蕾郝飞张纹纹江杰元江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

引言牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrh ea virus,BVDV)属于黄病毒科瘟病毒属,可造成持续性感染和免疫抑制。目前报道的BVDV共有三种,BVDV1、BVDV 2和BVDV 3,BVDV 3又被称为HoBi样瘟病毒(HoBi like pestivirus)或Atypical pestivirus。目前,国内针对山羊源BVDV的研究报道很少,本研究主要对江苏省山羊养殖场内BVDV的流行分布情况进行调查。材料与方法样品:2011年至2013年从江苏省6个地区共采集样品238份,其中73份样品来自腹泻或流产山羊,其余165份来自健康山羊。样品检测及数据分析:提取样品RNA,用瘟病毒5'-UTR区域通用引物进行(Panpesti generic primers)RT-PCR检测,扩增其5'-UTR基因,连接至pMD-18-T载体并测序。用DNAstar、MEGA5.1等生物学软件分析测序结果,并与标准毒株以及国内外分离毒株的5'-LTR进行进化分析。结果与讨论根据RT-PCR检测及测序,在采集样品的6个地区中,共有5个地区检测到BVDV。在238份样品中,共31份样品为BVDV阳性,阳性率为13.0%(31/238)。31份阳性样品中,有17份样品来自表现临床症状的动物,其中6份来自流产山羊,9份来自腹泻山羊,2份来自弱羔。结果表明,无论山羊是否具有临床症状,都存在BVDV感染。BVDV感染可能导致流产与腹泻,但是需要进一步验证。通过DNAstar进行比对,31份BVDV阳性样品中共存在9个代表毒株。用MEGA5.1进一步进化分析,其中8株为BVDV 1,1株为BVDV3。8株BVDV 1可以分为4个亚型:BVDV 1b(n=3),BVDV 1p(n=1),BVDV 1m(n=2)和BVDV 1o(n=2)。目前,在国内动物中流行的BVDV共有10个亚型,BVDV-1a,BVDV-1b,BVDV-1c,BVDV-1d,BVDV-1 m,BVDV-1o,BVDV-1p,BVDV-1q,BVDV-lu和BVDV-2a。本次山羊BVDV流行病学调查中所发现的四个BVDV 1亚型均在已经报道的亚型之中,并与现有报道中牛的BVDV的四个亚型的同源性较高,山羊与牛感染BVDV可能存在跨种感染。BVDV 3自然感染牛可以导致发病,出现呼吸道症状及流产,但是目前报道的自然感染宿主仅限于牛,未见其它动物感染BVDV 3。本研究首次发现山羊可自然感染BVDV 3,扩大了BVDV 3的宿主范围。经序列分析,该BVDV3毒株与之前在国内发现的HoBi样瘟病毒JS12/01的同源性高达98%。该BVDV3感染是否属于个例,及BVDV3何时及通过何种途径感染山羊都有待继续研究。

关键词： BVDV3 瘟病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

单抗阻断ELISA检测鸭坦布苏病毒抗体方法的建立

单抗阻断ELISA检测鸭坦布苏病毒抗体方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：章丽娇李占鸿张清水何伟勇苏敬良中国农业大学动物医学院

引言鸭坦布苏病毒是一种可引起鸭产蛋量急剧下降的新发病毒,其爆发与广泛流行给我国家禽养殖业造成了严重的经济损失。疫病的诊断是防治的重要基础。前期研究已成功制备出具有中和作用的特异性针对鸭坦布苏病毒E蛋白的单克隆抗体10F,本... 详细信息

引言鸭坦布苏病毒是一种可引起鸭产蛋量急剧下降的新发病毒,其爆发与广泛流行给我国家禽养殖业造成了严重的经济损失。疫病的诊断是防治的重要基础。前期研究已成功制备出具有中和作用的特异性针对鸭坦布苏病毒E蛋白的单克隆抗体10F,本研究以该单抗为基础建立了高特异性与高灵敏度的阻断ELISA方法用于坦布苏病毒抗体的检测,为疾病的诊断提供了有力手段。材料与方法 ELISA检测中包被抗原和单抗工作浓度的确定以超速离心浓缩的坦布苏病毒作为包被抗原,纯化的10F腹水单抗作为第一抗体,HRP标记的羊抗鼠IgG作为二抗,采用方阵滴定法确定抗原与单抗的最佳工作浓度。单抗阻断ELIS方法的建立以上一步确定的最佳抗原浓度包被酶联板,待检鸭血清样本作1:10稀释倍数。加入有抗原包被酶联反应孔,作用1小时后,洗板,加入工作浓度的单抗,反应1小时后再加入工作浓度的HRP标记的羊抗鼠IgG,反应后加底物显色,读取OD450nm值。同时设立不加待检血清对照孔(OD450nm0%)与不加单抗对照孔(OD450nm100%),以此计算阻抑率(PI)=(OD450nm0%-OD450nm待检血清)/(OD450nm0%-OD450nm100%)。以200份阴性血清阻抑率的平均值+3SD作为阴阳性临界值。特异性检测将建立的阻断ELISA方法与噬斑减少中和试验进行对比试验,验证其特异性。结果与讨论方阵滴定法确定抗原包被浓度为6μg/mL,单抗工作浓度为1μg/mL。200份阴性血清阻抑率的平均值为-2.54%,标准差为8.67%,因此计算得到阴阳性临界值为23.47%。选取8份阳性血清以1:10开始作2倍系列递进稀释,分别进行阻断ELISA和中和试验检测,结果显示8份阳性血清的中和效价(PRNT50)为1:160-1:320,而阻断ELISA方法可达1:2560-1:5120,表明阻断ELISA方法的灵敏度显著高于中和试验。随机对80份来自北京房山某鸭场的鸭血清同时噬斑减数中和试验与阻断ELISA方法进行检测,结果显示中和试验检测到47份阳性血清,阻断ELISA方法检测到48份阳性血清,表明若以中和试验作为评价方法,阻断ELISA方法的特异性可达96.97%。选取20份不同抗体水平的阳性血清同时用噬斑减数中和试验与阻断ELISA测定效价,线性回归分析结果显示相关系数r=0.71,p<0.05,表明该阻断ELISA与中和试验具有良好的相关性。批内与批间重复试验变异率分别为5.38%与9.26%,表明该阻断ELISA方法具有良好的重复性。结论本研究建立的单抗阻断ELISA方法特异性为96.79%,与噬斑减数中和试验的相关性较好,灵敏度高,重复性好,可用于临床上鸭坦布苏病毒血清抗体的检测。

关键词： ELISA 鸭坦布苏病毒中和试验阳性血清

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

牛肠道病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

牛肠道病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：朱彤赵贵民沈付娆侯佩莉王洪梅李杰何洪彬山东省农业科学院奶牛研究中心

引言/目的牛肠道病毒(BEV)是近年来在我国部分牛场新发现的一种消化道病毒病病原。牛感染肠道病毒BEV后,表现为轻微下痢和呼吸道症状,食欲下降,严重者便血,产奶量大幅下降。因此,亟需建立针对BEV快速有效的检测方法。材料与方法针对BEV... 详细信息

引言/目的牛肠道病毒(BEV)是近年来在我国部分牛场新发现的一种消化道病毒病病原。牛感染肠道病毒BEV后,表现为轻微下痢和呼吸道症状,食欲下降,严重者便血,产奶量大幅下降。因此,亟需建立针对BEV快速有效的检测方法。材料与方法针对BEV 3D基因的保守区设计引物,提取病毒RNA,反转录cDNA,并进行PCR扩增和电泳检测,凝胶回收PCR产物,克隆、测序,获得阳性标准品;以阳性标准品为模板,优化BEV SYBRGreen I荧光定量RT-PCR反应体系、反应条件,制作标准曲线,建立检测方法;采用该方法分别以牛冠状病毒、牛轮状病毒、牛病毒性腹泻病毒等病毒的cDNA/DNA为模板进行特异性实验;比较SYBRGreenI实时荧光定量RT-PCR法和RT-PCR方法的灵敏性;进行批内、批间的重复性试验,验证该荧光定量RT-PCR方法的重复性及稳定性;还对送检的41份疑似临床样品和3份气溶胶进行检测。结果与讨论通过对SYBR Green I实时荧光定量PCR条件进行优化,建立了最佳的反应体系与条件;BEV标准样品的溶解曲线为单一波峰,而其它病毒及阴性对照没有出现熔点峰,表明本方法特异性好。本方法检测BEV最低模板拷贝数为7.13,比RT-PCR高10倍;其批内、批间重复性试验结果的变异系数均小于0.22%,重复性好。通过对送检样本进行检测,实时荧光定量PCR方法检出阳性率为43.18%,RT-PCR方法检出阳性率为38.64%。SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法与Northern blotting、竞争性PCR、RT-PCR半定量检测等传统的mRNA定量方法技术相比,具有操作简便、快速高效的特点,且灵敏度和特异性更高;与TaqMan荧光定量PCR相比,无需设计和优化荧光探针,价格便宜,适用性好,更适于临床样本检测。结论本研究建立的SYBRGreen I实时荧光定量RT-PCR检测方法具有特异、稳定、高效的优点,既可以用于临床检测,又可对环境中的BEV进行动态监测,为BEV流行病学调查、诊断提供了有力的技术支持。

关键词：牛肠道病毒实时荧光定量初步应用检测方法 RT-PCR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

山羊副流感病毒3型JS2013株对豚鼠的致病性

山羊副流感病毒3型JS2013株对豚鼠的致病性

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：郝飞王鈡毓李文良毛立杨蕾蕾张纹纹江杰元江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

引言/目的呼吸道疾病是危害养羊业尤其是圈舍养羊的重要疫病之一,给养羊业带来巨大的经济损失。副流感病毒3型（PIV3）属于副黏病毒科呼吸道病毒属,是人和动物呼吸道重要病原。2014年本实验室从表现为严重呼吸道症状的山羊临床病料中首... 详细信息

引言/目的呼吸道疾病是危害养羊业尤其是圈舍养羊的重要疫病之一,给养羊业带来巨大的经济损失。副流感病毒3型（PIV3）属于副黏病毒科呼吸道病毒属,是人和动物呼吸道重要病原。2014年本实验室从表现为严重呼吸道症状的山羊临床病料中首次成功分离鉴定出山羊副流感病毒3型（Caprine parainfluenza virus type 3,CPIV3）,通过基因组测序,病原学特性研究证实其不同于其他PIV3,随后通过人工感染试验证明了该病毒对山羊的致病性。PIV3广泛存在于自然界,可引起各年龄阶段儿童或幼龄哺乳动物发病,导致小儿或幼龄动物轻重不等的呼吸道感染,如感冒、咳嗽、重症喉气管支气管炎、毛细支气管炎和肺炎。已有研究报道豚鼠作为动物模型研究人副流感病毒3型和牛副流感病毒3型感染后呼吸道反应性和气道炎症,因此本研究使用豚鼠研究CPTV3 JS2013株的致病性。材料方法通过豚鼠鼻内接种CPIV3(10TCID只),观察接毒后豚鼠产生的临床症状,通过病毒血症、病理组织学变化及HI抗体检测综合分析CPIV3 JS2013在豚鼠体内的复制及机体组织病理损伤等情况,借此评价此病毒对豚鼠的致病性。结果与讨论滴鼻感染阴性豚鼠后,普遍出现精神倦怠、食欲减退和不喜走动的症状,在3-7天检出病毒血症,在2-14天表现明显的流鼻涕、打喷嚏和眼分泌物增多及腹式呼吸的临床症状,并伴有较高的死亡率。感染后可从3-14天的肺组织中检出病毒。剖检观察感染组豚鼠,豚鼠肺出现实变和肿大的症状,病理组织学观察鉴定发现感染组豚鼠肺组织出现肺泡间隔增宽、肺泡融合、炎性细胞浸润等变化,但随着感染时间的增长,感染组实验豚鼠的肺部组织病变逐渐减轻。HI试验表明豚鼠感染此病毒后第3天开始出现血凝抑制抗体,21天后血凝抑制抗体仍保持较高的水平,血凝抑制效价集中在1/16～1/64。结论本研究首次证明了CPIV3 JS2013株对豚鼠具有致病性,豚鼠感染后,可产生明显的呼吸道症状,死亡率很高。并导致肺组织出现严重的病理变化,同时产生病毒血症,刺激机体的特异性免疫反应。本研究证明豚鼠可作为山羊副流感病毒3型理想的实验动物感染模型,为今后进一步研究CPIV3感染过程和致病性提供依据。

关键词：病毒血症临床症状 PIV 副流感病毒呼吸道症状 JS2013

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡白细胞介素-10单克隆抗体的制备与鉴定

鸡白细胞介素-10单克隆抗体的制备与鉴定

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：高俊峰王永强李晓齐曹红郑世军中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室

引言白细胞介素-10（IL-10）是一种主要由Th2细胞分泌的重要的细胞因子。2004年,LisaRothwell等最先克隆出了鸡IL-10（chIL-10）基因,其编码一条175个氨基酸的多肽,其中有21个氨基酸组成信号肽,成熟肽段长154个氨基酸,鸡IL-10与人IL-10... 详细信息

引言白细胞介素-10（IL-10）是一种主要由Th2细胞分泌的重要的细胞因子。2004年,LisaRothwell等最先克隆出了鸡IL-10（chIL-10）基因,其编码一条175个氨基酸的多肽,其中有21个氨基酸组成信号肽,成熟肽段长154个氨基酸,鸡IL-10与人IL-10和鼠IL-10的氨基酸序列同源性仅为45%和42%,具有较强的种属特异性。本研究克隆了去信号肽鸡的IL-10基因,在大肠杆菌中进行了表达,制备了其单克隆抗体,并鉴定了单抗特性,为进一步研究鸡IL-10的生物学功能奠定基础。材料与方法 Ecoli Rosetta（DE3）感受态细胞、空载质粒、SP2/0细胞等由中国农业大学免疫生物学实验室保存。细胞融合、阳性杂交瘤细胞的亚克隆与筛选过程均参照文献Current Protocol in Immunology进行。利用小鼠腹水大量制备单抗,并用辛酸-饱和硫酸铵法对其进行纯化,以间接ELISA、Western Blot等方法对所获得的单克隆抗体进行抗体重链类型分析、亲和力测定、抗体识别区分析等特性鉴定。结果与讨论从MDCC-MSB1细胞的cDNA中克隆到去信号肽鸡IL-10基因,构建到原核表达载体并诱导表达及纯化得到目的蛋白His-chIL-10和GST-chIL-10,分别用于免疫小鼠和阳性克隆的筛选。阳性细胞株经3次亚克隆后,获得3株稳定分泌鸡IL-10抗体的杂交瘤细胞,分别命名为4B2、4F3、1E3。经间接ELISA测定,以上3株杂交瘤细胞腹水效价都为1:3.2×10～6,亲和力解离常数（K）分别为1.05×10、5.01×10以及7.59×10。抗体重链类型分别为IgG2a、IgG2a以及IgG1。经Western Blot试验证明,三株单抗均能特异地识别原核表达的鸡IL-10蛋白,也能识别真核表达的鸡IL-10蛋白,4B2、4F3识别的抗原表位区域为鸡IL-10 N端的1～52 aa,1E3识别的抗原表位区域为鸡IL-10 N端的52～102aa。国内外在检测鸡IL-10动态变化时还停留在mRNA水平,还未见在蛋白水平上检测鸡IL-10的报道。本研究制备的单抗可用于建立鸡IL-10蛋白质水平的检测方法,为研究鸡IL-10的生物学作用奠定了基础。结论本研究成功获得三株高亲和力、特异性好的能稳定分泌鸡IL-10单抗的杂交瘤细胞,为进一步研究鸡IL-10的功能提供了重要工具。

关键词：杂交瘤细胞信号肽制备与鉴定单克隆抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

金黄色葡萄球菌FnBPA蛋白N2N3亚区域B细胞表位分析

金黄色葡萄球菌FnBPA蛋白N2N3亚区域B细胞表位分析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：魏玉华马金柱宋佰芬于永忠张华于立权孙虎男崔玉东黑龙江八一农垦大学生命科技学院

金黄色葡萄球菌(***)是一种能够引起人和动物感染的革兰氏阳性细菌。在人类,常引起局部软组织化脓性感染、肺炎、心内膜炎、骨髓炎、脓毒性关节炎,严重的可致败血症、脓毒败血症等全身感染,甚至死亡;在动物,常引起鸡的皮肤脓疱、化脓性... 详细信息

金黄色葡萄球菌(***)是一种能够引起人和动物感染的革兰氏阳性细菌。在人类,常引起局部软组织化脓性感染、肺炎、心内膜炎、骨髓炎、脓毒性关节炎,严重的可致败血症、脓毒败血症等全身感染,甚至死亡;在动物,常引起鸡的皮肤脓疱、化脓性关节炎,牛、羊的急性或慢性乳房炎,猪的流产、皮炎,马属动物的创伤感染、脓肿、蜂窝织炎等。随着抗生素在临床治疗中的广泛应用,出现了大量***耐药菌株,致使抗生素治疗越来越无济于事。因此,使用疫苗免疫预防***感染已成为目前研究的焦点。纤连蛋白结合蛋白A(FnBPA)是介导***粘附到组织细胞的重要分子,而且能够诱导机体产生良好免疫保护作用。FnBPA蛋白分为A区和D区,D区能够与纤连蛋白结合,其诱导免疫的B细胞表位已经明确;A区域分为三个亚区域(N1、N2、N3),其中N2N3能够与纤维蛋白原和弹性蛋白结合,但其诱导免疫应答的B细胞表位尚不清楚。因此,本研究制备了抗S aureus FnBPA蛋白A区N2N3亚区的单克隆抗体,并分析鉴定了B细胞表位。本实验根据已发表的***基因序列设计引物,通过PCR方法扩增N2N3基因,经T-A克隆后将目的基因与质粒pET32a(+)连接,构建的重组质粒转化至大肠杆菌BL21感受态细胞,阳性克隆经IPTG诱导表达后,纯化表达的目的蛋白,并以纯化的N2N3蛋白制成免疫原,肌肉接种6-8周龄的雌性BAIB/c小鼠。通过杂交瘤技术及有限稀释法筛选出10株稳定分泌抗体的单克隆杂交瘤细胞株,并对纯化后的单抗进行亚类、特异性及分泌稳定性进行鉴定,结果10株单抗均为IgG1,且与N2N3发生特异性反应。利用噬菌体展示技术对N2N3蛋白B细胞表位进行淘选,用ELISA方法筛选亲和力高的阳性克隆,并进行DNA测序。经过序列分析,获得1个与单抗亲和力高的表位,对应的N2N3氯基酸序列是IETFNKANNRFSH。人工合成该表位基因进行原核表达,并用该McAb对表达产物进行Westernblotting分析,其反应性良好。将该表位序列的氨基酸进行点突变,确定了构成表位的关键氨基酸;进一步采用全菌体ELISA和间接免疫荧光试验证明该表位暴露在菌体表面;用该表位主动免疫后攻毒显示,该表位提供的免疫保护率能够达到40%。以上结果为进一步研究新型多抗原表位疫苗和建立检测方法提供参考。

关键词：金黄色葡萄球菌 N2N3蛋白单克隆抗体 B细胞表位

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

狂犬病毒G抗体新型红细胞凝集试验检测方法的建立

狂犬病毒G抗体新型红细胞凝集试验检测方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：周松峰廖文军白安斌覃绍敏袁书智袁洁林俊赵武吴健敏广西兽医研究所广西南宁惠朋动物药业有限责任公司广东省农业科学院动物卫生研究所

目的疫苗免疫是有效控制狂犬病传播的重要手段,本研究建立一种简便、快速、直观、可现场操作的定量检测狂犬病毒G抗体的新型红细胞凝集试验方法,为农村等基层单位开展狂犬病监测及疫苗免疫效果评估提供一种简便、快速、可现场操作的检... 详细信息

目的疫苗免疫是有效控制狂犬病传播的重要手段,本研究建立一种简便、快速、直观、可现场操作的定量检测狂犬病毒G抗体的新型红细胞凝集试验方法,为农村等基层单位开展狂犬病监测及疫苗免疫效果评估提供一种简便、快速、可现场操作的检测方法。材料与方法采用重叠延伸(SOE)PCR方法将抗人红细胞H抗原单链抗体基因(2E8ScFv)和狂犬病毒G基因主要抗原表位区(KG基因)拼接成融合基因2E8KG,进而构建原核表达质粒pET-Trx-2E8KG。通过原核表达、纯化、复性获得既能够与人不同血型红细胞结合,又能够与狂犬病毒(RV)高免血清反应的双功能融合蛋白。以此双功能融合蛋白为检测抗原,以人"O"型红细胞作为指示细胞,建立了快速检测狂犬病毒G抗体的方法。结果与讨论本研究借助表面抗原背景清楚的人红细胞作为指示剂,以非凝集型抗人红细胞表面H抗原单链抗体为桥梁,通过检测抗原的桥联作用结合人红细胞,产生肉眼可见的凝集,以一种全新的视角建立动物病原微生物快速检测技术。通过方阵滴定试验筛选出检测抗原最佳稀释度为1:16,对应的工作浓度为106.26μg/mL,血清最佳稀释度为1:16,作用时间30min。利用该方法检测犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)阳性血清均无凝集,与RV标准阳性血清反应出现强凝集,表明该方法特异性强。用不同批次制备的检测抗原重复检测狂犬病毒阳、阴性血清,检测结果具有很好的重复性。将新型红细胞凝集试验与荧光抗体病毒中和试验(FAVNT)作平行比对,通过对临床1225份犬血清的检测,结果发现血凝价大于或等于1:16(相当于FAVNT试验中和效价0.5IU/mL)为免疫抗体合格;新型红细胞凝集试验检测结果与FAVNT方法一致性分析的Kappa值为0.78>0.75,检测结果的符合率为88.82%,灵敏度和特异度分别为96.13%、81.32%。从检测结果看本检测技术在特异性方面仍需努力,估计与检测抗原提纯度不够有关,应在下一步制备工艺方面进一步努力,获取纯度更好的检测抗原。此外,在检测结果判断时间仍较长,我们拟进行检测抗原的可溶性表达以提高诊断抗原的生物活性,提高快速检测的时间。结论初步建立了基于2E8Kg双功能融合蛋白为检测抗原的检测狂犬病病毒G抗体的新型红细胞凝集试验,为基层单位(尤其是农村散养犬)开展狂犬病免疫效果评估提供了一种简便、快速、敏感、特异、仅凭肉眼就可以判断结果的检测方法。

关键词：狂犬病毒阳性血清红细胞凝集试验检测方法

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

没有更多数据了...

全选清除本页清除全部题录导出标记到“检索档案”

共136页 << < 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 > >>

检索报告对象比较合并检索0

隐藏清空

合并搜索

回到顶部

执行限定条件

内容：

评分：

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

订阅名称：

通借通还

温馨提示：

图书名称：

借书校区：

取书校区：

手机号码：

邮箱地址：

一卡通帐号：

电话和邮箱必须正确填写，我们会与您联系确认。

联系人：

所在院系：

联系邮箱：

联系电话：

内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号邮编: 010021

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：