一前言猪乙型脑炎病毒(JEV)能在BHK-21、VERO等细胞上生长繁殖。通常主要通过免疫荧光方法或细胞病变观察来了解病毒在体外的复制动态。但这些方法只是反映病毒在空间上的复制状况,而不能准确反映病毒在细胞内的增殖规律及向细胞外释放病毒的动态变化规律。实时荧光定量RT-PCR方法能在不同时间点准确测定细胞混悬液和细胞上清中的病毒核酸载量,从而了解病毒的体外复制动态。因此,本研究在参考前人基础上建立了检测JEV NS3基因的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR方法,用此方法测定JEV的体外复制动态,并与TCID50方法进行了比较,为猪乙型脑炎疫苗的研制提供技术和理论参考。
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