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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十四届学术研讨会

作者：韩伟东朱化彬陈龙王宗礼郝海生杜卫华王栋中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京 100193 甘肃农业大学动物科学技术学院兰州 730070 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京 100193 甘肃农业大学动物科学技术学院兰州 730070 农业部畜牧业司北京 100026

本文从蛋白质组学研究的技术手段，蛋白质组学在人类不育及精卵相互识别并结合的机理研究、免疫法开展男性避孕方法的研究及蛋白质组学研究方法在家畜繁殖环节中的应用等几个方面阐述了蛋白质组学在人类生殖及动物繁殖环节相关研究中的... 详细信息

本文从蛋白质组学研究的技术手段，蛋白质组学在人类不育及精卵相互识别并结合的机理研究、免疫法开展男性避孕方法的研究及蛋白质组学研究方法在家畜繁殖环节中的应用等几个方面阐述了蛋白质组学在人类生殖及动物繁殖环节相关研究中的重要作用，说明蛋白质组学已经成为生命科学未来发展的主要分支之一，为揭示生命个体的蛋白质动态变化提供了技术手段和理论基础，并将在药物开发，生命活动机理研究等方面发挥巨大作用，也必将会在家畜繁殖学领域发挥其应有的作用。

关键词：精子蛋白蛋白质组学精卵识别避孕方法家畜繁殖动态变化

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鸡源志贺菌IpaC基因的克隆及原核表达

鸡源志贺菌IpaC基因的克隆及原核表达

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：苗银萍蒋大伟许兰菊王川庆尤晓楠李克宇河南农业大学牧医工程学院

本研究对鸡源志贺菌IpaC基因进行了克隆、重组表达与鉴定及蛋白纯化。首先,应用PCR方法从志贺菌毒力大质粒中扩增出大小为1092 bp的目的基因,与国内外发表的10株人源志贺菌IpaC序列进行同源性分析、结果表明鸡源志贺菌IpaC基因与参考菌... 详细信息

本研究对鸡源志贺菌IpaC基因进行了克隆、重组表达与鉴定及蛋白纯化。首先,应用PCR方法从志贺菌毒力大质粒中扩增出大小为1092 bp的目的基因,与国内外发表的10株人源志贺菌IpaC序列进行同源性分析、结果表明鸡源志贺菌IpaC基因与参考菌株的核苷酸序列同源性为97.3%-99.8%、氨基酸序列同源性为96.4%-99.7%。进化树结果显示,与参考株AL391753相似性较大,它们在同一个分支上。然后,将该基因克隆至载体pET32a(+)中,构建了原核表达载体pET32a(+)-IpaC,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达并进行表达条件的优化。SDS-PAGE电泳结果显示:在相对分子量约63 kDa处出现条带,而对照组无目的条带产生。最佳表达条件确定为诱导前培养3 h、IPTG终浓度为1.0 mmol/L、加入IPTG诱导4 h。最后,大量表达目的蛋白并裂解细菌进行可溶性鉴定,结果蛋白既存在上清中也存在包涵体中。上清蛋白经Ni-AgaroseHis标签蛋白纯化试剂盒纯化后纯度可达90%以上。Western Blot分析显示,重组蛋白与ZMD-01株阳性血清发生特异性反应,证明表达产物具有良好的反应原性。

关键词：鸡源志贺菌 IpaC基因克隆表达与鉴定蛋白纯化

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高致病性猪蓝耳病弱毒活疫苗免疫后血液中持续带毒及抗体消长规律的研究

高致病性猪蓝耳病弱毒活疫苗免疫后血液中持续带毒及抗体消长规律...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：安春霞闫若潜王东方张盼盼赵雪丽王淑娟赵明军吴志明河南省动物疫病预防控制中心

为科学评价高致病性猪蓝耳病(PRRS)弱毒活疫苗的临床应用效果,对猪蓝耳病防控提供参考依据;选择3个规模养猪场,涉及6个疫苗厂家,共采集样品600份,连续跟踪监测了PRRS弱毒活疫苗在猪群中首免、二免、三免后血液中持续性带毒时间和免疫后... 详细信息

为科学评价高致病性猪蓝耳病(PRRS)弱毒活疫苗的临床应用效果,对猪蓝耳病防控提供参考依据;选择3个规模养猪场,涉及6个疫苗厂家,共采集样品600份,连续跟踪监测了PRRS弱毒活疫苗在猪群中首免、二免、三免后血液中持续性带毒时间和免疫后抗体消长情况。结果显示,用PRRS弱毒活疫苗经过首免和二免后,血液中持续带毒时间为4w;而经过三次免疫,血液中持续带毒时间为1w;血清抗体检测结果显示,抗体较低时(S/P值小于2.0)进行免疫可有效产生抗体,高抗体水平下,明显缩短机体带毒时间;抗体较高时(S/P值大于2.4)免疫弱毒活疫苗,高抗体可中和病毒,免疫效果较差。提示高致病性猪蓝耳病活疫苗可产生有效的保护抗体来阻断野毒的攻击。做好高致病蓝耳病防控工作,必须加强免疫,提高猪群PRRS抗体的水平与整齐度,同时加强饲养管理。

关键词：弱毒活疫苗抗体水平病原学检测高致病性猪蓝耳病猪繁殖与呼吸综合症抗体消长规律

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宁夏屠宰场猪流感流行病学调查

宁夏屠宰场猪流感流行病学调查

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：李知新周秀玲李忠宋权儒王磊李志红马龙赵燕李靖宁宁夏动物疾病预防控制中心

为调查宁夏生猪屠宰场猪流感流行情况,采集2009年12月至2011年4月份猪双孔鼻拭子和对应血清,同时收集2010年4月至2011年10月每月送检的猪双孔鼻拭子。采用血凝抑制试验对1600份血清样本进行H1和H3亚型抗体检测;采用RT-PCR方法对2391份... 详细信息

为调查宁夏生猪屠宰场猪流感流行情况,采集2009年12月至2011年4月份猪双孔鼻拭子和对应血清,同时收集2010年4月至2011年10月每月送检的猪双孔鼻拭子。采用血凝抑制试验对1600份血清样本进行H1和H3亚型抗体检测;采用RT-PCR方法对2391份鼻拭子进行病原学检测。血清学调查结果显示,SIV隐性感染阳性样品247份,阳性率为15.4%,临床感染阳性样品414份,阳性率25.9%;病原学调查结果表明,对鼻双孔拭子检测SIV阳性率为12.7%,对血清学检测阳性样本616份进行RT-PCR检测,阳性率为70.9%,对血清学检测阴性样品984份进行RT-PCR检测,阳性率为13.3%;调查发现,我区屠宰场SIV隐性感染十分普遍,11月份-4月份生猪带毒率和发病率较高,制约了宁夏养猪业的发展;生猪长途调运屠宰能加速猪流感病毒的扩散和蔓延;同时由于与其它病原微生物混合感染日趋复杂化,使得对猪病防控的难度也越来越大。

关键词：猪流感血凝抑制试验 H1亚型 H3亚型 RT-PCR

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综合防治奶牛乳腺炎

综合防治奶牛乳腺炎

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：郑爱武魏刚才新乡市畜牧局河南科技学院

奶牛乳腺炎是影响奶牛业发展的主要疾病,采取怎样的措施来制止其发病率、提高奶牛抵抗力一直是兽医界专家亟待解决的问题。乳腺炎已成为困绕奶业快速发展,严重影响奶牛健康和乳品质量的重要疾病之一。本文从多年的临床治疗实践中提出了... 详细信息

奶牛乳腺炎是影响奶牛业发展的主要疾病,采取怎样的措施来制止其发病率、提高奶牛抵抗力一直是兽医界专家亟待解决的问题。乳腺炎已成为困绕奶业快速发展,严重影响奶牛健康和乳品质量的重要疾病之一。本文从多年的临床治疗实践中提出了乳腺炎的发病机理、原因以及综合防治措施,为提高奶牛健康水平和乳品质量,进一步提高奶牛养殖效益,提供帮助。

关键词：乳腺炎危害防治净化

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人源福氏志贺菌对鸡肠上皮原代细胞侵袭特性研究

人源福氏志贺菌对鸡肠上皮原代细胞侵袭特性研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：师润陈陆杨霞王川庆刘红英王新卫常洪涛姚惠霞河南农业大学牧医工程学院

[目的]研究人源志贺菌对鸡肠细胞的侵袭力和侵袭特性,进一步验证了人源志贺菌对鸡的致病性和对其肠细胞的侵染特性。[方法]采用Hela细胞庆大霉素保护实验和细胞免疫组化的方法,研究分离的ZD02株的毒力。随后采用细胞免疫组织化学方法研... 详细信息

[目的]研究人源志贺菌对鸡肠细胞的侵袭力和侵袭特性,进一步验证了人源志贺菌对鸡的致病性和对其肠细胞的侵染特性。[方法]采用Hela细胞庆大霉素保护实验和细胞免疫组化的方法,研究分离的ZD02株的毒力。随后采用细胞免疫组织化学方法研究ZD02株对鸡肠上皮细胞的侵袭力和相关侵袭特性。[结果]ZD02株能够侵入Hela细胞中,在30、60、90、120min的侵袭率分别为1.43%、2.43%、2.56%、2.62%,证明ZD02株具有毒力。鸡肠上皮细胞免疫组化结果显示,ZD02株在1h内未侵入到肠细胞中,在随后的2～3h,ZD02株能侵入细胞中。在4h后,ZD02从裂解的肠细胞中释放出来。细胞侵袭率随感染时间的延长升高,且福氏志贺菌总是从细胞底侧部侵袭。[结论]人源福氏志贺菌对鸡肠上皮细胞有一定侵袭力,为进一步验证志贺菌人禽互传的可能性提供实验依据。除此之外,鸡肠上皮原代细胞模型可用干研究志贺菌的致病机理。

关键词：人源福氏志贺菌 Hela细胞原代鸡肠上皮细胞侵袭

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鸡基因工程复合抗病毒制剂冻干保护剂的筛选

鸡基因工程复合抗病毒制剂冻干保护剂的筛选

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：张代宝吴志明赵明军王淑娟谢彩华张林海闫若潜河南科技大学动物科技学院河南省动物疫病预防控制中心

采用不同高压灭菌条件处理的不同比例的脱脂奶粉、蔗糖、海藻糖以及维生素C组成的保护剂配方对鸡基因工程复合抗病毒制剂进行冻干,冻干后通过外观检查、pH值检测、复水性检测及效价测定比较筛选出了理想的冻干保护剂,之后将普通水剂型... 详细信息

采用不同高压灭菌条件处理的不同比例的脱脂奶粉、蔗糖、海藻糖以及维生素C组成的保护剂配方对鸡基因工程复合抗病毒制剂进行冻干,冻干后通过外观检查、pH值检测、复水性检测及效价测定比较筛选出了理想的冻干保护剂,之后将普通水剂型和冻干型鸡基因工程复合抗病毒制剂分别置于4℃、-20℃、-70℃条件下进行保存期试验,结果表明采用脱脂奶粉+蔗糖、脱脂奶粉+蔗糖+海藻糖+维生素C两种配方对鸡基因工程复合抗病毒制剂的保护效果最好,冻干后效价仍为220,普通水剂和冻干型鸡基因工程复合抗病毒制剂在-70℃保存条件下保存360天内效价均未降低,普通水剂分别于90d、180d后效价开始明显下降,而冻干型鸡基因工程复合抗病毒制剂的效价均无明显降低,稳定性良好。本研究初步筛选出了鸡基因工程抗病毒制剂的冻干配方,显著延长了其保存期,为鸡基因工程抗病毒制剂规模化生产和推广应用奠定了基础。

关键词：鸡基因工程抗病毒制剂冻干保护剂保存期

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鹅巴氏杆菌的分离鉴定及其病理学观察

鹅巴氏杆菌的分离鉴定及其病理学观察

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：刘丽颖贺文琦陆慧君宋德光赵魁成军高丰吉林大学畜牧兽医学院吉林大学畜牧兽医学院吉林大学畜牧兽医学院吉林大学畜牧兽医学院吉林大学畜牧兽医学院吉林大学畜牧兽医学院吉林大学畜牧兽医学院

通过镜检、培养、琼扩试验、生化鉴定及动物回归等试验从临床表现为神经症状,眼观主要病变为肝肿大,表面和切面有灰白色坏死灶的病鹅体内分离出禽巴氏杆菌,其主要病理组织学变化为部分肝小叶内含有一个或多个凝固性坏死灶;大脑皮层血管... 详细信息

通过镜检、培养、琼扩试验、生化鉴定及动物回归等试验从临床表现为神经症状,眼观主要病变为肝肿大,表面和切面有灰白色坏死灶的病鹅体内分离出禽巴氏杆菌,其主要病理组织学变化为部分肝小叶内含有一个或多个凝固性坏死灶;大脑皮层血管周围有多量的嗜中性白细胞浸润,形成明显“血管套”,呈化脓性脑炎变化。通过电镜观察、SPF鸡胚接种、 HI试验等排除了禽流感、新城疫等病毒感染的可能性。该项研究为禽巴氏杆菌病的诊断提供了临床资料。

关键词：鹅巴氏杆菌分离鉴定病理学

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世界禽病会议第十四届学术研讨会侧记

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中国家禽 2005年第18期27卷 58-58页

作者：周蛟刘月焕

应世界禽病会议第十四届学术研讨会组委会的邀请,在中国畜牧兽医学会指导下,禽病学分会理事长周蛟研究员任团长,副理事长兼秘书长杨汉春教授任秘书长,禽病学分会组团于2005年8月21日赴土耳其最大港口城市伊斯坦布尔参加第十四届世界禽... 详细信息

应世界禽病会议第十四届学术研讨会组委会的邀请,在中国畜牧兽医学会指导下,禽病学分会理事长周蛟研究员任团长,副理事长兼秘书长杨汉春教授任秘书长,禽病学分会组团于2005年8月21日赴土耳其最大港口城市伊斯坦布尔参加第十四届世界禽病学术研讨会.出席此次会议的中国代表团共有28人,扬州大学的刘秀梵教授、广西大学的韦平教授和山东农业大学的崔治中教授是本次会议专门邀请并且安排在本届研讨会上作报告的代表.出席此次会议的代表来自世界48个国家,会议注册人数约764人.

关键词：学术研讨会会议禽病世界中国畜牧兽医学会山东农业大学副理事长伊斯坦布尔港口城市

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第二信使cAMP/cGMP信号通路元件蛋白在中国荷斯坦奶牛卵巢中的定位研究

第二信使cAMP/cGMP信号通路元件蛋白在中国荷斯坦奶牛卵巢中的定...

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十四届学术研讨会

作者：王正朝石放雄南京农业大学动物科技学院动物繁育研究所江苏南京210095

为了研究第二信使cAMP/cGMP通路对哺乳动物卵巢卵泡发育的调控作用，本试验应用七种特异性抗体(sGCα、sGC β、nNOs、FOX01、PDE4、PKB/Akt和Inhibin α)对中国荷斯坦奶牛卵巢卵泡细胞进行免疫组织化学定位。结果表明PKB主要存在于原... 详细信息

为了研究第二信使cAMP/cGMP通路对哺乳动物卵巢卵泡发育的调控作用，本试验应用七种特异性抗体(sGCα、sGC β、nNOs、FOX01、PDE4、PKB/Akt和Inhibin α)对中国荷斯坦奶牛卵巢卵泡细胞进行免疫组织化学定位。结果表明PKB主要存在于原始卵泡、腔前卵泡和有腔卵泡颗粒细胞，黄体细胞中没有;FOx01主要位于原始卵泡、腔前卵泡和有腔卵泡颗粒细胞;PDE4仅位于部分有腔卵泡的颗粒细胞;抑制素α、nNOs、sGC α和β存在于各级卵泡的颗粒细胞层，其中sGC α和β主要存在于原始卵泡和腔前卵泡的颗粒细胞。这七种蛋白的阶段/细胞特异性表达表明它们在中国荷斯坦卵巢卵泡的发育、闭锁和黄体化过程中起非常重要的作用。

关键词：免疫组织化学颗粒细胞荷斯坦奶牛卵泡发育调控作用特异性抗体腔前卵泡

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