猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)是一种广泛分布的人畜共患病原菌,严重危害着人类健康和养猪业的发展。本文诣在研究SsnA基因做为分子诊断标识在对SS2感染的鉴别诊断中所起的作用。本实验中以SS2-LT菌株基因组DNA为模板,通...
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猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)是一种广泛分布的人畜共患病原菌,严重危害着人类健康和养猪业的发展。本文诣在研究SsnA基因做为分子诊断标识在对SS2感染的鉴别诊断中所起的作用。本实验中以SS2-LT菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增SsnA基因片段,将该片段克隆到表达载体pET-28a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,获得大小为46 KD的融合蛋白,经SDS-PAGE和Western-blot分析表明,重组蛋白质具有抗原反应活性。以纯化的融合蛋白作为包被抗原,建立了SsnA-ELISA鉴别诊断方法,对已知背景的人工感染及疫苗免疫血清和临床血清进行检测,比较感染血清和免疫血清的检测结果。发现两者具有显著的差异(P<0.05),表明建立的SsnA-ELISA方法具有良好的检测效果。利用该方法对采集自8个省份的1446份血清进行检测,显示SS2的阳性率为0%～14.77%,平均阳性率为5.39%。本研究结果表明:猪链球菌2型分泌核酸酶(SsnA)可以作为一个良好的鉴别感染的分子诊断标识;对临床血清的检测结果表明感染及流行与气候环境存在明显的关系。
本试验探讨了三种不同分割液对水牛胚胎分割效果的影响。借助显微操作仪，将体外受精培养的水牛桑椹胚(第5 d)和囊胚(第6-7 d)分割，体外培养半胚，观察其发育情况。结果显示：在PBS+0.2 M S(蔗糖)与PBS+5％PVP中分割桑椹胚，其分割成...
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本试验探讨了三种不同分割液对水牛胚胎分割效果的影响。借助显微操作仪，将体外受精培养的水牛桑椹胚(第5 d)和囊胚(第6-7 d)分割，体外培养半胚，观察其发育情况。结果显示：在PBS+0.2 M S(蔗糖)与PBS+5％PVP中分割桑椹胚，其分割成功率显著高于PBS(71.67％、67.26％VS 55.44％)(P＜0.05)，而半胚的囊胚发育率及囊胚细胞数三者均无差异显著性(P＞0.05);在PBS+0.2 M S(蔗糖)与PBS+5％PVP中分割囊胚，其分割成功率显著高于PBS(79.13％、76.73％VS 65.25％)(P＜0.05)，而半胚培养的囊胚发育率及囊胚细胞数三者差异均无显著性(P＞0.05);说明在PBS中分别添加0.2 M的蔗糖和5％的PVP有利于提高水牛桑椹胚和囊胚的分割成功率。
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