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15 篇 西北农林科技大学
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作者

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18 篇 李升和
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果子狸SARS-CoV实验性感染的病理学研究

果子狸SARS-CoV实验性感染的病理学研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术会议

作者：肖一红孟庆文尹训南关云涛刘永刚李昌文王牟平孔宪刚吴东来中国农业科学院研究生院北京100081 中国农业科学院研究生院北京100081 中国农业科学院研究生院北京100081

目的:果子狸SARS-CoV实验性感染的病理学研究.方法:在人源SARS-CoV分离株BJ01(有29个核苷酸的缺失序列)和GD01(无29个核苷酸的缺失序列)实验性感染果子狸的基础上,对其肺、脾、淋巴结、肝、小肠、肾、气管、大脑、胰腺、性腺、胃、心组... 详细信息

目的:果子狸SARS-CoV实验性感染的病理学研究.方法:在人源SARS-CoV分离株BJ01(有29个核苷酸的缺失序列)和GD01(无29个核苷酸的缺失序列)实验性感染果子狸的基础上,对其肺、脾、淋巴结、肝、小肠、肾、气管、大脑、胰腺、性腺、胃、心组织进行病理组织学观察,同时用原位杂交技术(in situ hybridization,ISH)方法对SARS-CoV在组织器官中的分布进行检测.结果:攻毒后不同时期,肺、脾、淋巴结、肝、小肠、肾和大脑有不同程度的病理变化,胰腺、性腺、胃、心无病理变化,并在肺、小肠、大脑中检测到了SARS-CoV基因,在肝、脾、肾、气管、胰腺、性腺、胃、心中未检到,与在SARS患者检测结果基本相符.结论:果子狸实验性感染SARS-CoV可导致与人类相似的病理学变化和病原分布,表明果子狸可以作为评价SARS-CoV疫苗及治疗药物的动物模型.

关键词：果子狸病理变化 SARS-CoV 病理组织学动物模型病原分布

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大肠杆菌O157:H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

大肠杆菌O157:H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：夏兴霞王永山孟祥升朱国强张雪寒何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心扬州大学兽医学院

用*** O157:H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。其中,ID3、2E7和2H7三株为O157:H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效价分别为... 详细信息

用*** O157:H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。其中,ID3、2E7和2H7三株为O157:H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效价分别为103、105和106。用纯化的单克隆抗体2E7标记胶体金,制备金标抗体玻璃纤维素膜;将纯化的2H7和羊抗鼠IgG分别作为检测和对照捕捉抗体包被于硝酸纤维素膜(NC)上;组装成双抗夹心法O157:H7胶体金免疫层析检测试纸条。用该试纸条可特异检测O157:H7,敏感度为106CFU/ml,与相同单克隆抗体2H7和2E7建立的O157:H7夹心ELISA检测方法的敏感度相当,试纸条简便快速,在1～5 min内可得出检测结果,便于O157:H7的临床快速诊断与现场检测样品的快速筛查。

关键词：大肠杆菌O157:H7 单克隆抗体(mAb) 胶体金免疫层析试纸条人兽共患病

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开展创新性实验教学,提高组胚课教学质量

开展创新性实验教学,提高组胚课教学质量

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中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十四次学术研讨会

作者：彭克美唐文花刘华珍何文波陈曦华中农业大学动物科技-动物医学院华中农业大学动物科技-动物医学院华中农业大学动物科技-动物医学院华中农业大学动物科技-动物医学院华中农业大学动物科技-动物医学院

我国教育改革的一个重要目标,就是要改变普遍存在的学生被动接受理论知识、缺乏创新性训练的学习方式,倡导学生主动参与的探究式学习。创新性实验教学是以学生为主体,以先进性和开放性的教学理念为载体,以创新性实验设备为工具,通过创... 详细信息

我国教育改革的一个重要目标,就是要改变普遍存在的学生被动接受理论知识、缺乏创新性训练的学习方式,倡导学生主动参与的探究式学习。创新性实验教学是以学生为主体,以先进性和开放性的教学理念为载体,以创新性实验设备为工具,通过创新性、综合性、开发性的实验来激发学生的主观能动性、激发学生的主动创造思维,从而达到培养学生创新意识和提高实践能力的教学目的。创新性实验教学为现代教育的重要组成部分,而开展创新性实验教学为教学改革和实验环境改革提供保障,为培养大学生创新意识和创新能力提供保障。组织胚胎学是动物医学、动物科学、动物检疫、水产养殖等专业重要的专业基础课。本文结合现代教育理念和本课程的特点,强调要培养学生的创新精神和动手能力,提高组胚课的教学质量。

关键词：创新性实验教学胚胎学显微摄像显微镜下教学质量

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牛肌肉生成抑制素基因单核苷酸多态性分析

牛肌肉生成抑制素基因单核苷酸多态性分析

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十四届学术研讨会

作者：岳续朋藏立胜赵锐锋李喜春赵志辉张嘉保吉林大学实验动物中心吉林长春130062 吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 吉林省长春优质肉牛繁育中心吉林长春130062 吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 吉林大学实验动物中心吉林长春130062

[目的]寻找一种有效的遗传标记，为培育优质种牛核心群和双肌牛品系，重新认识西门塔尔牛与夏洛来牛以及改良中国特色地方品种提供理论依据。[方法]应用PCR-SSCP分析方法，对94头肉牛(公牛45头：西门塔尔34头，夏洛来11头;母牛49头：西... 详细信息

[目的]寻找一种有效的遗传标记，为培育优质种牛核心群和双肌牛品系，重新认识西门塔尔牛与夏洛来牛以及改良中国特色地方品种提供理论依据。[方法]应用PCR-SSCP分析方法，对94头肉牛(公牛45头：西门塔尔34头，夏洛来11头;母牛49头：西门塔尔24头，夏洛来25头)的MSTN三个外显子进行了多态性分析。[结果]结果表明：第一外显子存在两种基因型，分别为从型和AB型。经测序发现，第一外显子第4bp处存在C→G的碱基突变，导致编码的氨基酸由谷氨酰胺(Gln)→谷氨酸(Glu)。[结论]统计结果显示：等位基因B的含量低，而且只在西门塔尔品种内含0.0266。利用SPSS软件软件做最小二乘分析，结果表明B等位基因与西门塔尔牛的成年体重和犊牛出生重呈显著正相关。

关键词：遗传标记基因多态性单核苷酸谷氨酰胺牛肌肉生成

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鸡IL-18毕赤酵母表达产物部分生物学特性的研究

鸡IL-18毕赤酵母表达产物部分生物学特性的研究

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会

作者：程相朝张春杰李银聚吴庭才刘一尘赵敏俞晓丽河南科技大学动物科技学院

白细胞介素18（Interleukin-18,IL- 18）是一种多功能细胞因子,其作用主要有诱生IFN-γ,增强NK细胞和CTL细胞毒作用,促进Th1细胞增殖,诱导产生Th1类细胞因子等作用。目前,国内外关于IL-18的研究主要集中在人和鼠,而对禽IL-18的研究则较... 详细信息

白细胞介素18（Interleukin-18,IL- 18）是一种多功能细胞因子,其作用主要有诱生IFN-γ,增强NK细胞和CTL细胞毒作用,促进Th1细胞增殖,诱导产生Th1类细胞因子等作用。目前,国内外关于IL-18的研究主要集中在人和鼠,而对禽IL-18的研究则较少,特别是真核表达系统的研究则更少。毕赤酵母（Picha pastoris）表达系统是近年来发展迅速的一个优秀的真核表达系统,目前为止,已成功的表达了多种来自病毒、细菌、真菌、动植物和人的蛋白,它克服了原核表达系统不能表达结构复杂的蛋白质,表达的蛋白多形成不溶性包涵体,表达蛋白产量低等缺陷。但尽管如此,目的基因在毕赤酵母表达系统中的表达及表达产物的生物学活性还会受到诸多因素的影响。为此,本实验通过琼脂扩散试验、Western blotting、淋巴细胞转化试验来初步探讨ChIL-18（鸡白细胞介素18）毕赤酵母表达产物的部分生物学活性。结果显示:在琼脂扩散试验中,ChIL-18毕赤酵母表达产物能够与抗ChIL-18免疫血清发生反应而形成沉淀线;采用SDS-PAGE从诱导表达的菌体蛋白中分离出ChIL- 18蛋白条带,转移到NC膜上进行Western blotting检测表明,表达产物是与ChIL-18相符的约23ku的蛋白产物,且能够与抗ChIL-18免疫血清发生免疫学反应;淋巴细胞转化试验中,首先用淋巴细胞分离液对鸡的淋巴细胞进行分离并培养,利用形态学方法和MTT法分别检测淋巴细胞的转化率及刺激指数。结果发现:形态学方法培养后,经ChIL-18,Co- nA刺激后已转化的细胞分别占66.5%,60.5%,未经刺激的占13%;MTT法显示,培养后的细胞培养液经酶标测定仪检测发现ChIL-18组,ConA组,对照组的OD分别为0.703,0.619,0.399;刺激指数（SI）ChIL-18组,ConA组,分别为1.762,1.551。表明,ChIL-18毕赤酵母表达产物对淋巴细胞具有明显诱导转化作用。结论:ChIL-18经毕赤酵母表达系统表达的产物,具有良好的免疫学活性和刺激淋巴细胞增殖的活性。

关键词：毕赤酵母 ChIL-18 淋巴细胞转化试验 Western blotting

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免疫组化法对鸡体内新城疫病毒融合蛋白抗原的检测

免疫组化法对鸡体内新城疫病毒融合蛋白抗原的检测

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：吴力力陈立功王小波万洪全扬州大学兽医学院河北农业大学动物科技学院扬州大学兽医学院扬州大学兽医学院

本文对鹅新城疫病毒(NDV)对鸡的组织嗜性进行了研究。用3株鹅新城疫病毒强毒株分别人工感染25日龄雏鸡,以单克隆抗体介导的免疫组化法检测攻毒鸡体内NDV抗原的分布及定位。结果发现,实验鸡多种组织器官中能检测到病毒抗原;在能检测到病... 详细信息

本文对鹅新城疫病毒(NDV)对鸡的组织嗜性进行了研究。用3株鹅新城疫病毒强毒株分别人工感染25日龄雏鸡,以单克隆抗体介导的免疫组化法检测攻毒鸡体内NDV抗原的分布及定位。结果发现,实验鸡多种组织器官中能检测到病毒抗原;在能检测到病毒抗原的器官中,病毒抗原主要定位于淋巴细胞、网状细胞、巨噬细胞、肝细胞及各种上皮细胞的胞浆内。本研究结果鹅NDV强毒株对鸡是一种泛嗜性病毒。

关键词：新城疫病毒组织嗜性免疫组化

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处理重组牛朊蛋白对接种金黄地鼠脑组织朊蛋白的效应

处理重组牛朊蛋白对接种金黄地鼠脑组织朊蛋白的效应

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：宁章勇赵德明于博孔小明华南农业大学兽医学院中国农业大学国家动物传染性海绵状脑病实验室华南农业大学兽医学院华南农业大学兽医学院

将纯化的重组牛朊蛋白经理化因子处理后,脑内接种金黄地鼠。临床观察200天后, 对大脑、小脑和脑干,进行了蛋白酶抗性朊蛋白的Western Blot检测和朊蛋白基因表达的绝对定量。结果表明,处理的重组牛朊蛋白对金黄地鼠脑组织检测部位的基因... 详细信息

将纯化的重组牛朊蛋白经理化因子处理后,脑内接种金黄地鼠。临床观察200天后, 对大脑、小脑和脑干,进行了蛋白酶抗性朊蛋白的Western Blot检测和朊蛋白基因表达的绝对定量。结果表明,处理的重组牛朊蛋白对金黄地鼠脑组织检测部位的基因表达有一定的影响,但是与对照组相比差异不显著;接种后在检测时间内处理重组牛朊蛋白没有导致金黄地鼠脑内酶抗性朊蛋白的出现。研究结果为重组朊蛋白的生物学提供了基础数据。

关键词：牛朊蛋白金黄地鼠脑基因表达酶抗性朊蛋白

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传染性法氏囊病病毒感染细胞内源性microRNA表达差异分析

传染性法氏囊病病毒感染细胞内源性microRNA表达差异分析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：欧阳伟王永山王永强王笑梅朱向东毕振威范红结江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室南京农业大学动物医学院

细胞内源性microRNA(miRNA)在宿主与病原相互作用过程中发挥着重要的调节功能。为了分析细胞内源性miRNA与传染性法氏囊病病毒(IBDV)的相互作用,用IBDV弱毒和强毒分别感染鸡胚成纤维细胞(CEF)和SPF鸡,24 h后,取感染CEF和法氏囊组织,提... 详细信息

细胞内源性microRNA(miRNA)在宿主与病原相互作用过程中发挥着重要的调节功能。为了分析细胞内源性miRNA与传染性法氏囊病病毒(IBDV)的相互作用,用IBDV弱毒和强毒分别感染鸡胚成纤维细胞(CEF)和SPF鸡,24 h后,取感染CEF和法氏囊组织,提取细胞总RNA,用Hy3/Hy5双色荧光标记,与miRNA芯片杂交,经芯片内标准化、芯片间标准化、表达差异比较以及聚类分析。结果显示:在IBDV弱毒感染的CEF中,有17个细胞内源性miRNA表达上调,17个miRNA表达下调;在IBDV强毒感染的鸡法氏囊组织细胞中,有30个细胞内源性miRNA表达上调,18个miRNA表达下调。根据表达差异显著的miRNA序列设计引物,用荧光定量RT-PCR方法验证芯片检测结果,两种方法的检测结果一致。本实验结果表明,IBDV感染可诱导细胞内源性miRNA表达变化,这些上调/下调的miRNA调控细胞内多种代谢和信号传导途径发生异常,引起细胞及组织器官发生病理变化。

关键词：传染性法氏囊病病毒(IBDV) microRNA(miRNA) 芯片荧光定量PCR 分析

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变态后期中国林蛙性腺的形态与组织学观察

变态后期中国林蛙性腺的形态与组织学观察

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中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十四次学术研讨会

作者：王春生白秀娟东北农业大学动物科技学院东北农业大学动物科技学院

中国林蛙为无尾两栖类,其成体具有重要经济价值。迄今为止,虽然在成蛙的人工繁殖及养殖技术等方法的研究获得了大量的成果,但是,与其相比,有关幼蛙的形态学研究报道甚少, 尚未见到有关林蛙变态期性腺发育的研究报道。为了探明幼蛙性别... 详细信息

中国林蛙为无尾两栖类,其成体具有重要经济价值。迄今为止,虽然在成蛙的人工繁殖及养殖技术等方法的研究获得了大量的成果,但是,与其相比,有关幼蛙的形态学研究报道甚少, 尚未见到有关林蛙变态期性腺发育的研究报道。为了探明幼蛙性别分化后的精巢或卵巢的形态和组织学特点,本研究以变态后期中国林蛙为实验动物,采用大体解剖学、常规石蜡切片、H-E染色等方法,对雌雄各10例变态后期性腺的形态及组织结构进行了观察。其结果:(1)变态后期雌性幼蛙的卵巢呈无色透明、细长;卵巢上面附着浅黄色鸡冠型的脂肪体,两侧脂肪体大小不等,左大右小;卵巢位于脊柱下,与呈白色柱状的肾脏和肾上腺相邻;变态后期雄性幼蛙的精巢呈圆形或椭圆形,精巢上面也附着有类似雌性卵巢附着的浅黄色鸡冠型的脂肪体;精巢的位置与雌性卵巢的位置相近;(2)雄性变态后期的精巢可分为皮质部和髓质部,在皮质深部可见有大而圆形细胞核,且染色浅的精原细胞,其周围的间质细胞呈扁平;(3)雌性变态后期的卵巢皮质和髓质区分不明显,皮质可见有卵原细胞,细胞核大,圆形,染色浅,在其周围有一层扁平的卵泡细胞。上述结果表明,中国林蛙在变态后期,其性腺已处于分化状态,但是,精原细胞和卵原细胞尚末向初级精母细胞或初级卵母细胞分化。有关中国林蛙的性别分化期有待于进一步探讨。

关键词：中国林蛙变态后期性腺组织学

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猪细小病毒体外培养适应毒株(HJ)的培育及动物感染试验

猪细小病毒体外培养适应毒株(HJ)的培育及动物感染试验

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：李胜斌危艳武唐青海吴洪丽刘建波郭龙军王一平刘丹刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

从初产母猪流产胎儿的肠系膜淋巴结中分离到一株猪细小病毒(PPV),采用无污染的猪睾丸传代细胞系(ST)对该毒株传代,培育成一株细胞适应毒株,命名为PPV-HJ毒株。该毒株经ST细胞连续传50代,于第25代起毒价显著提升,第40代毒价维持稳定(107.... 详细信息

从初产母猪流产胎儿的肠系膜淋巴结中分离到一株猪细小病毒(PPV),采用无污染的猪睾丸传代细胞系(ST)对该毒株传代,培育成一株细胞适应毒株,命名为PPV-HJ毒株。该毒株经ST细胞连续传50代,于第25代起毒价显著提升,第40代毒价维持稳定(107.2 TCID50/mL)。采用免疫过氧化物酶单层细胞染色试验(IPMA)检测表明,该病毒感染细胞后病毒抗原主要分布在细胞核中,病毒感染的阳性细胞染成棕红色。免疫电镜观察到PPV粒子与抗体结合形成的免疫复合物,呈实心小颗粒样粒子,直径约21 nm。经病毒基因克隆测序证实,该毒株的NS1基因序列与GenBank中PPV-ZJ毒株同源性最高,达98.41%。用该毒株第50代培养物(1×107.2 TCID50/mL)接种35日龄仔猪,临床未表现明显症状,迫杀后未观察到明显病理学变化,PCR法在猪的肺脏、扁桃体、腹股沟淋巴结、颌下淋巴结、小肠中检测到病毒核酸,表明该毒株对靶动物具有一定的感染性,但毒力随传代而明显减弱趋势。本研究成功地培育出一株体外细胞培养适应毒株,其繁殖性能稳定,为今后开展PPV与猪圆环病毒2型(PCV2)混合感染的协同致病性研究,以及联合疫苗的创制奠定了基础。

关键词：猪细小病毒病毒分离鉴定毒株培育

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