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13 篇 吉林农业大学
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作者

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18 篇 赵德明
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中国绵羊PRNd基因克隆与序列分析

中国绵羊PRNd基因克隆与序列分析

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：霍桂桃赵德明尹晓敏周向梅中国农业大学国家海绵状脑病实验室中国农业大学国家海绵状脑病实验室中国农业大学国家海绵状脑病实验室中国农业大学国家海绵状脑病实验室

根据已报道的哺乳动物PRNd基因序列设计引物对,采用PCR方法扩增绵羊doppel基因,将其克隆到T-Easy载体,序列测定及分析表明所克隆的绵羊PRNd基因片段为537bp,编码 179个氨基酸的前体蛋白,推测其分子量约20．6kD。与已报道的绵羊(GeneBan... 详细信息

根据已报道的哺乳动物PRNd基因序列设计引物对,采用PCR方法扩增绵羊doppel基因,将其克隆到T-Easy载体,序列测定及分析表明所克隆的绵羊PRNd基因片段为537bp,编码 179个氨基酸的前体蛋白,推测其分子量约20．6kD。与已报道的绵羊(GeneBank收录号为 AY017311)、牛(Genebank收录号为NM174158)的相应序列作比较分析,核苷酸序列同源性分别为99．78％和97．58％,其编码的氨基酸同源性分别为100％和94．94％。

关键词：绵羊 PRNd 序列分析

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鼠痘病毒的分子检测和病理学研究

鼠痘病毒的分子检测和病理学研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：安学芳胡薛英余思义王汉中中国科学院武汉病毒所病毒学国家重点实验室华中农业大学动物医学院湖北省疾控中心健康教育所中国科学院武汉病毒所病毒学国家重点实验室

根据痘病毒A-型包涵体蛋白基因序列合成一对特异引物,建立了能有效区别不同类型痘病毒的PCR方法,并利用该方法对一株新分离的鼠痘病毒进行了鉴定,证明该病毒属于鼠脱脚病痘病毒。病理学研究表明,该病毒侵害小鼠体内的主要实质器官, 引... 详细信息

根据痘病毒A-型包涵体蛋白基因序列合成一对特异引物,建立了能有效区别不同类型痘病毒的PCR方法,并利用该方法对一株新分离的鼠痘病毒进行了鉴定,证明该病毒属于鼠脱脚病痘病毒。病理学研究表明,该病毒侵害小鼠体内的主要实质器官, 引起肝、脾、肺、肾等组织均有不同程度的病变。

关键词：痘病毒分子检测组织病理

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处理重组牛朊蛋白对接种金黄地鼠脑组织朊蛋白的效应

处理重组牛朊蛋白对接种金黄地鼠脑组织朊蛋白的效应

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：宁章勇赵德明于博孔小明华南农业大学兽医学院中国农业大学国家动物传染性海绵状脑病实验室华南农业大学兽医学院华南农业大学兽医学院

将纯化的重组牛朊蛋白经理化因子处理后,脑内接种金黄地鼠。临床观察200天后, 对大脑、小脑和脑干,进行了蛋白酶抗性朊蛋白的Western Blot检测和朊蛋白基因表达的绝对定量。结果表明,处理的重组牛朊蛋白对金黄地鼠脑组织检测部位的基因... 详细信息

将纯化的重组牛朊蛋白经理化因子处理后,脑内接种金黄地鼠。临床观察200天后, 对大脑、小脑和脑干,进行了蛋白酶抗性朊蛋白的Western Blot检测和朊蛋白基因表达的绝对定量。结果表明,处理的重组牛朊蛋白对金黄地鼠脑组织检测部位的基因表达有一定的影响,但是与对照组相比差异不显著;接种后在检测时间内处理重组牛朊蛋白没有导致金黄地鼠脑内酶抗性朊蛋白的出现。研究结果为重组朊蛋白的生物学提供了基础数据。

关键词：牛朊蛋白金黄地鼠脑基因表达酶抗性朊蛋白

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免疫组化法对鸡体内新城疫病毒融合蛋白抗原的检测

免疫组化法对鸡体内新城疫病毒融合蛋白抗原的检测

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：吴力力陈立功王小波万洪全扬州大学兽医学院河北农业大学动物科技学院扬州大学兽医学院扬州大学兽医学院

本文对鹅新城疫病毒(NDV)对鸡的组织嗜性进行了研究。用3株鹅新城疫病毒强毒株分别人工感染25日龄雏鸡,以单克隆抗体介导的免疫组化法检测攻毒鸡体内NDV抗原的分布及定位。结果发现,实验鸡多种组织器官中能检测到病毒抗原;在能检测到病... 详细信息

本文对鹅新城疫病毒(NDV)对鸡的组织嗜性进行了研究。用3株鹅新城疫病毒强毒株分别人工感染25日龄雏鸡,以单克隆抗体介导的免疫组化法检测攻毒鸡体内NDV抗原的分布及定位。结果发现,实验鸡多种组织器官中能检测到病毒抗原;在能检测到病毒抗原的器官中,病毒抗原主要定位于淋巴细胞、网状细胞、巨噬细胞、肝细胞及各种上皮细胞的胞浆内。本研究结果鹅NDV强毒株对鸡是一种泛嗜性病毒。

关键词：新城疫病毒组织嗜性免疫组化

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朊蛋白在奶牛生殖系统特异性表达的研究

朊蛋白在奶牛生殖系统特异性表达的研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：张太翔赵德明中国农业大学国家动物海绵状脑病实验室中国农业大学国家动物海绵状脑病实验室

利用实时荧光定量RT-PCR技术,采用GAPDH基因做内参照,对奶牛生殖系统的12个不同部位组织提取总RNA,进行PrP基因表达的定量研究。结果发现,雌雄奶牛的生殖系统各部分组织都有PrP基因表达,其中雌性奶牛的卵巢、子宫、子宫阜呈现高的表达量... 详细信息

利用实时荧光定量RT-PCR技术,采用GAPDH基因做内参照,对奶牛生殖系统的12个不同部位组织提取总RNA,进行PrP基因表达的定量研究。结果发现,雌雄奶牛的生殖系统各部分组织都有PrP基因表达,其中雌性奶牛的卵巢、子宫、子宫阜呈现高的表达量,雄性奶牛的睾丸、附睾呈现高的表达量。本研究的结果对于探讨朊蛋白的基本功能和生殖系统在传染性海绵状病理发生中的作用,提供了基础数据。

关键词：动物传染性海绵状脑病 PrP基因实时荧光定量RT-PCR

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IBV优势表位嵌合基因的DNA疫苗构建与免疫原性研究

IBV优势表位嵌合基因的DNA疫苗构建与免疫原性研究

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会

作者：田浪王红宁鲁丹张云飞王霆康润敏四川农业大学动物医学院四川大学生命科学学院四川大学动物疾病防控生物工程研究中心四川大学“985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台四川大学生命科学学院四川大学动物疾病防控生物工程研究中心四川大学"985工程"西南资源环境与灾害防治科技创新平台

目的:为了研制出一种新型安全、高效的IBV DNA疫苗。方法:通过文献报道和计算机软件分析筛选出IBV结构蛋白基因S1、S2、N基因的T、B细胞的优势抗原表位共7段,各表位分别位于S1 （24-150 AA）、（240-255 AA）、（290-400 AA）、（532- 5... 详细信息

目的:为了研制出一种新型安全、高效的IBV DNA疫苗。方法:通过文献报道和计算机软件分析筛选出IBV结构蛋白基因S1、S2、N基因的T、B细胞的优势抗原表位共7段,各表位分别位于S1 （24-150 AA）、（240-255 AA）、（290-400 AA）、（532- 537 AA）,S2（1-65 AA）,N（1-120AA）、（290-410 AA）。用人工合成及PCR方法将7个抗原表位串联成一条全新的嵌合基因F,各相邻表位间以柔性氨基酸（GA/GP）作为接头,同时引入免疫刺激基元CpG基序,将嵌合基因F亚克隆进真核表达质粒pVAX1,阳性重组质粒命名为pVAX-F。将质粒pVAX-F通过脂质体转染COS-7细胞,用间接免疫荧光试验检测目的蛋白的表达。经大量提取质粒pVAX-F用脂质体按适当比例包裹后,经腿部肌肉多点注射7日龄非免疫雏鸡,免疫剂量为100 ug/只,2周后加强免疫。二免后5周用IBV肾型强毒(EID为10～7)进行攻毒保护性实验,攻毒剂量为100EID。结果:酶切、PCR鉴定及测序表明7个IBV优势抗原表位已成功串联成大小为1743 bp的表位嵌合基因F,间接荧光免疫试验检测出真核表达质粒pVAX-F在COS-7细胞中表达了目的蛋白;动物试验表明pVAX-F二免后1周,雏鸡外周血T淋巴细胞亚群（CD4、CD8T淋巴细胞）含量均有显著上升,血清中特异性ELISA抗体水平明显增加;经同型强毒的攻击后,pVAX-F组保护率为80.0%（12/15）。结论:成功串联了IBV优势抗原表位嵌合基因,嵌合基因真核表达质粒pVAX-F能够为免疫鸡提供较好的免疫保护力,为IBV新型候选DNA疫苗的设计和应用提供了新的思路。

关键词：传染性支气管炎病毒(IBV) 抗原表位嵌合基因 DNA疫苗免疫原性

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热应激对猪肠道结构及功能的影响

热应激对猪肠道结构及功能的影响

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术会议

作者：胡艳欣佘锐萍张发明肖冲郭延军刘风华中国农业大学动物医学院北京海淀100094 北京农学院北京102206

目的:观察热应激对猪肠道黏膜结构的损伤作用,以揭示热应激降低猪增重率的机理.方法:12头小型猪随机分成热应激组和常温对照组两组.人工气候室内,热应激组模拟夏季炎热气候,气温从26～39C24h循环变温,在39C时维持4h;常温对照组在22C下饲... 详细信息

目的:观察热应激对猪肠道黏膜结构的损伤作用,以揭示热应激降低猪增重率的机理.方法:12头小型猪随机分成热应激组和常温对照组两组.人工气候室内,热应激组模拟夏季炎热气候,气温从26～39C24h循环变温,在39C时维持4h;常温对照组在22C下饲养.试验持续10d,分别于热应激前、热应激第5d和热应激结束时称重,计算各组的体重增长率.热应激10d后39C高温持续期结束时剖杀试验猪,取其十二指肠、空肠及回肠进行固定、石蜡切片、染色,染色和扫描电镜 HE.染色切片观察肠黏膜形态变化,并检测肠绒毛长度、宽度、隐窝深度,绒毛长度/隐窝深度;PAS染色切片检测肠黏膜上皮内杯状细胞数量的变化;用Gomori氏改良法染色切片观测肠黏膜碱性磷酸酶活性的变化.结果:与对照组相比较,热应激组猪的体重增长率显著下降(P＜0.05);热应激后猪肠黏膜结构严重损伤;各段肠的绒毛长度、宽度、隐窝深度,绒毛长度/隐窝深度均出现不同程度的降低,其中回肠绒毛长度减少较为显著(P＜0.05),各肠段绒毛宽度的减少均差异显著(P＜0.05);肠黏膜上皮内杯状细胞数量增多,其中回肠差异显著(P＜0.05);热应激组猪的肠黏膜上皮细胞表面的碱性磷酸酶活性明显降低.结论:热应激可引起猪肠道黏膜结构严重损伤,以致小肠的消化吸收功能严重受阻,这是造成猪热应激掉膘减重的主要机制之一.

关键词：猪热应激肠道结构黏膜结构消化吸收功能

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PRRSV重组核衣壳蛋白在大肠杆菌中的高效表达

PRRSV重组核衣壳蛋白在大肠杆菌中的高效表达

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：杨利峰

猪呼吸与繁殖综合征(PRRS)自1987年在美国、1990年在欧洲被发现以来,几乎传遍世界所有养猪国家。我国不少地方都发现了不同程度的PRRSV感染,国外学者研究证明不同PRRSV分离株具有不同血清学或病原学特征。根据抗原性差异以及基因组的同... 详细信息

猪呼吸与繁殖综合征(PRRS)自1987年在美国、1990年在欧洲被发现以来,几乎传遍世界所有养猪国家。我国不少地方都发现了不同程度的PRRSV感染,国外学者研究证明不同PRRSV分离株具有不同血清学或病原学特征。根据抗原性差异以及基因组的同源性比较,目前国际上将分离到的PRRSV根据其抗原性分为欧洲型和美洲型。该病主要引起母猪繁殖障碍、仔猪呼吸道症状以及初生猪、断奶猪死亡率增高。PRRS在全球各地猪场广泛流行, 给养猪业造成巨大经济损失,是美洲和欧洲一些国家养猪业危害最严重的传染病之一。 PRRSV基因组含有8个开放阅读框,编码特异性病毒蛋白。ORF2～ORF7编码病毒的结

关键词： PRRSV 核衣壳蛋白表达

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新疆绵羊β-乳球蛋白(BLG)5’端上游调控区的克隆与序列分析

新疆绵羊β-乳球蛋白(BLG)5’端上游调控区的克隆与序列分析

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：王鹏雁陈创夫蒋建军李彦芳新疆石河子大学动物科技学院新疆石河子大学动物科技学院新疆石河子大学动物科技学院新疆石河子大学动物科技学院

用聚合酶链式反应(PCR)技术,从新疆绵羊全血中扩增了β-乳球蛋白上游调控区 890bp的片段。通过T4DNA连接酶将其连接于质粒载体pGEM-T上,转化至受体菌DH5 α中。提取质粒经PCR扩增、酶切鉴定,证明重组质粒pT-BLG中含有β-乳球蛋白上游调... 详细信息

用聚合酶链式反应(PCR)技术,从新疆绵羊全血中扩增了β-乳球蛋白上游调控区 890bp的片段。通过T4DNA连接酶将其连接于质粒载体pGEM-T上,转化至受体菌DH5 α中。提取质粒经PCR扩增、酶切鉴定,证明重组质粒pT-BLG中含有β-乳球蛋白上游调控区基因片段。经核苷酸序列分析,克隆的片段与发表的基因序列高度一致。

关键词：绵羊 β-乳球蛋白上游调控区基因克隆

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绵羊人工感染致绵羊脑炎链球菌病理组织学观察

绵羊人工感染致绵羊脑炎链球菌病理组织学观察

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：柳建新周霞田晶华朱翠萍新疆石河子大学动物科技学院新疆石河子大学动物科技学院新疆石河子大学动物科技学院新疆石河子大学动物科技学院

经鉴定为粪肠球菌的菌株人工感染羔羊,死亡及出现临床症状的羊只剖检,观察病理形态学变化。结果:小脑神经细胞急性肿胀、神经细胞液化;大脑有噬神经原现象和卫星现象,肝细胞、肾上管上皮细胞变性、坏死、肾间质出血;脾脏的动脉周围淋巴... 详细信息

经鉴定为粪肠球菌的菌株人工感染羔羊,死亡及出现临床症状的羊只剖检,观察病理形态学变化。结果:小脑神经细胞急性肿胀、神经细胞液化;大脑有噬神经原现象和卫星现象,肝细胞、肾上管上皮细胞变性、坏死、肾间质出血;脾脏的动脉周围淋巴鞘出现有许多上皮样细胞组成的上皮样细胞结节,有些区域出血。结果表明粪肠球菌引起羔羊出现的神经症状是非化脓性脑炎引起的,同时还伴随败血症变化。

关键词：肠球菌粪肠球菌病理形态学

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