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热应激对猪肠道结构及功能的影响

热应激对猪肠道结构及功能的影响

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术会议

作者：胡艳欣佘锐萍张发明肖冲郭延军刘风华中国农业大学动物医学院北京海淀100094 北京农学院北京102206

目的:观察热应激对猪肠道黏膜结构的损伤作用,以揭示热应激降低猪增重率的机理.方法:12头小型猪随机分成热应激组和常温对照组两组.人工气候室内,热应激组模拟夏季炎热气候,气温从26～39C24h循环变温,在39C时维持4h;常温对照组在22C下饲... 详细信息

目的:观察热应激对猪肠道黏膜结构的损伤作用,以揭示热应激降低猪增重率的机理.方法:12头小型猪随机分成热应激组和常温对照组两组.人工气候室内,热应激组模拟夏季炎热气候,气温从26～39C24h循环变温,在39C时维持4h;常温对照组在22C下饲养.试验持续10d,分别于热应激前、热应激第5d和热应激结束时称重,计算各组的体重增长率.热应激10d后39C高温持续期结束时剖杀试验猪,取其十二指肠、空肠及回肠进行固定、石蜡切片、染色,染色和扫描电镜 HE.染色切片观察肠黏膜形态变化,并检测肠绒毛长度、宽度、隐窝深度,绒毛长度/隐窝深度;PAS染色切片检测肠黏膜上皮内杯状细胞数量的变化;用Gomori氏改良法染色切片观测肠黏膜碱性磷酸酶活性的变化.结果:与对照组相比较,热应激组猪的体重增长率显著下降(P＜0.05);热应激后猪肠黏膜结构严重损伤;各段肠的绒毛长度、宽度、隐窝深度,绒毛长度/隐窝深度均出现不同程度的降低,其中回肠绒毛长度减少较为显著(P＜0.05),各肠段绒毛宽度的减少均差异显著(P＜0.05);肠黏膜上皮内杯状细胞数量增多,其中回肠差异显著(P＜0.05);热应激组猪的肠黏膜上皮细胞表面的碱性磷酸酶活性明显降低.结论:热应激可引起猪肠道黏膜结构严重损伤,以致小肠的消化吸收功能严重受阻,这是造成猪热应激掉膘减重的主要机制之一.

关键词：猪热应激肠道结构黏膜结构消化吸收功能

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绵羊人工感染致绵羊脑炎链球菌病理组织学观察

绵羊人工感染致绵羊脑炎链球菌病理组织学观察

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：柳建新周霞田晶华朱翠萍新疆石河子大学动物科技学院新疆石河子大学动物科技学院新疆石河子大学动物科技学院新疆石河子大学动物科技学院

经鉴定为粪肠球菌的菌株人工感染羔羊,死亡及出现临床症状的羊只剖检,观察病理形态学变化。结果:小脑神经细胞急性肿胀、神经细胞液化;大脑有噬神经原现象和卫星现象,肝细胞、肾上管上皮细胞变性、坏死、肾间质出血;脾脏的动脉周围淋巴... 详细信息

经鉴定为粪肠球菌的菌株人工感染羔羊,死亡及出现临床症状的羊只剖检,观察病理形态学变化。结果:小脑神经细胞急性肿胀、神经细胞液化;大脑有噬神经原现象和卫星现象,肝细胞、肾上管上皮细胞变性、坏死、肾间质出血;脾脏的动脉周围淋巴鞘出现有许多上皮样细胞组成的上皮样细胞结节,有些区域出血。结果表明粪肠球菌引起羔羊出现的神经症状是非化脓性脑炎引起的,同时还伴随败血症变化。

关键词：肠球菌粪肠球菌病理形态学

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毛驴皮肤纤维瘤病理组织学观察

毛驴皮肤纤维瘤病理组织学观察

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：田晶华陈创夫柳建新盛今良王鹏雁王昕鹏石河子大学动物科学院石河子大学动物科学院石河子大学动物科学院石河子大学动物科学院石河子大学动物科学院石河子大学动物科学院

将多年收集的毛驴纤维瘤31例,经临床调查及病理组织学观察、分析、结果表明:毛驴纤维瘤多发于耳下、肩胛周围、以及雄性驴外生殖器、四肢皮下等部位,外型为结节状、球状等,瘤体表面有毛或无毛、出血、肉芽组织样。组织学观察,可为炎性... 详细信息

将多年收集的毛驴纤维瘤31例,经临床调查及病理组织学观察、分析、结果表明:毛驴纤维瘤多发于耳下、肩胛周围、以及雄性驴外生殖器、四肢皮下等部位,外型为结节状、球状等,瘤体表面有毛或无毛、出血、肉芽组织样。组织学观察,可为炎性纤维瘤、单纯性纤维瘤、坏死性纤维瘤、混合性纤维瘤。

关键词：毛驴纤维瘤病理学

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aFGF基因体内基因转移及其生物学效应

aFGF基因体内基因转移及其生物学效应

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：王惠芳冷维春张素阁刘兰芬高丰尹维田济南军区总医院吉林大学济南军区总医院济南军区总医院吉林大学吉林大学

采用直接转移基冈方法将pMT-aFGF和pRSV-aFGF直接注射到小鼠的骨骼肌和 pRSV-aFGF直接注射到小鼠的心肌中,提取注射部位肌肉组织RNA进行狭线杂交,结果表明, pRSV-aFGF在小鼠的骨骼肌和心肌中可持续表达1-28天,但pMT-aFGF在骨骼肌中表达... 详细信息

采用直接转移基冈方法将pMT-aFGF和pRSV-aFGF直接注射到小鼠的骨骼肌和 pRSV-aFGF直接注射到小鼠的心肌中,提取注射部位肌肉组织RNA进行狭线杂交,结果表明, pRSV-aFGF在小鼠的骨骼肌和心肌中可持续表达1-28天,但pMT-aFGF在骨骼肌中表达持续时间短,且较弱。免疫组织化学结果表明,aFGF主要分布于全身组织器官的血管,大脑神经原和神经胶质细胞,病理组织学观察显示aFGF在骨骼肌和心肌中具有诱导血管再生的作用。本研究结果为缺血性肌营养不良的基因治疗提供了理论和实践依据。

关键词： aFGF 基因转移生物学效应

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IBV优势表位嵌合基因的DNA疫苗构建与免疫原性研究

IBV优势表位嵌合基因的DNA疫苗构建与免疫原性研究

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会

作者：田浪王红宁鲁丹张云飞王霆康润敏四川农业大学动物医学院四川大学生命科学学院四川大学动物疾病防控生物工程研究中心四川大学“985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台四川大学生命科学学院四川大学动物疾病防控生物工程研究中心四川大学"985工程"西南资源环境与灾害防治科技创新平台

目的:为了研制出一种新型安全、高效的IBV DNA疫苗。方法:通过文献报道和计算机软件分析筛选出IBV结构蛋白基因S1、S2、N基因的T、B细胞的优势抗原表位共7段,各表位分别位于S1 （24-150 AA）、（240-255 AA）、（290-400 AA）、（532- 5... 详细信息

目的:为了研制出一种新型安全、高效的IBV DNA疫苗。方法:通过文献报道和计算机软件分析筛选出IBV结构蛋白基因S1、S2、N基因的T、B细胞的优势抗原表位共7段,各表位分别位于S1 （24-150 AA）、（240-255 AA）、（290-400 AA）、（532- 537 AA）,S2（1-65 AA）,N（1-120AA）、（290-410 AA）。用人工合成及PCR方法将7个抗原表位串联成一条全新的嵌合基因F,各相邻表位间以柔性氨基酸（GA/GP）作为接头,同时引入免疫刺激基元CpG基序,将嵌合基因F亚克隆进真核表达质粒pVAX1,阳性重组质粒命名为pVAX-F。将质粒pVAX-F通过脂质体转染COS-7细胞,用间接免疫荧光试验检测目的蛋白的表达。经大量提取质粒pVAX-F用脂质体按适当比例包裹后,经腿部肌肉多点注射7日龄非免疫雏鸡,免疫剂量为100 ug/只,2周后加强免疫。二免后5周用IBV肾型强毒(EID为10～7)进行攻毒保护性实验,攻毒剂量为100EID。结果:酶切、PCR鉴定及测序表明7个IBV优势抗原表位已成功串联成大小为1743 bp的表位嵌合基因F,间接荧光免疫试验检测出真核表达质粒pVAX-F在COS-7细胞中表达了目的蛋白;动物试验表明pVAX-F二免后1周,雏鸡外周血T淋巴细胞亚群（CD4、CD8T淋巴细胞）含量均有显著上升,血清中特异性ELISA抗体水平明显增加;经同型强毒的攻击后,pVAX-F组保护率为80.0%（12/15）。结论:成功串联了IBV优势抗原表位嵌合基因,嵌合基因真核表达质粒pVAX-F能够为免疫鸡提供较好的免疫保护力,为IBV新型候选DNA疫苗的设计和应用提供了新的思路。

关键词：传染性支气管炎病毒(IBV) 抗原表位嵌合基因 DNA疫苗免疫原性

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鸡源和鸵鸟源新城疫强毒株对不同新城疫抗体效价的鸵鸟的致病性研究及鸵鸟新城疫实验病理学观察

鸡源和鸵鸟源新城疫强毒株对不同新城疫抗体效价的鸵鸟的致病性研...

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：尹燕博单虎山东省莱阳农学院动物科技学院山东省莱阳农学院动物科技学院

为了解鸡源和鸵鸟源新城疫毒株对鸵鸟的致病性、临床症状和病理变化的差异,以及不同免疫状态下鸵鸟对新城疫强毒株攻击的敏感性,我们用标准鸡源新城疫强毒株F48E9和经过鉴定的鸵鸟源新城疫强毒株O-XJ99-12,对不同免疫状态下2-4月龄鸵鸟... 详细信息

为了解鸡源和鸵鸟源新城疫毒株对鸵鸟的致病性、临床症状和病理变化的差异,以及不同免疫状态下鸵鸟对新城疫强毒株攻击的敏感性,我们用标准鸡源新城疫强毒株F48E9和经过鉴定的鸵鸟源新城疫强毒株O-XJ99-12,对不同免疫状态下2-4月龄鸵鸟进行了人工发病实验。 1．材料和方法 1．1 试验用鸵鸟及分组 40只2-3月龄健康雏鸵鸟,由济南黄河鸵鸟养殖场、山东淄博奎盛鸵鸟场、山东寿光

关键词：新城疫强毒攻毒试验新城疫抗体效价病理学观察

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株不同代次水平的毒力比较试验

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株不同代次水平的毒力比较试验

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：危艳武范培虎郭龙军吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

为了阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HBR毒株在体外传代过程中发生的毒力及遗传变异情况,本试验采用第5代、10代和125代PRRSVVIBR株病毒进行了人工感染试验。结果表明,低代次(第5和10代)病毒接种组可复制出以"高热综合... 详细信息

为了阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HBR毒株在体外传代过程中发生的毒力及遗传变异情况,本试验采用第5代、10代和125代PRRSVVIBR株病毒进行了人工感染试验。结果表明,低代次(第5和10代)病毒接种组可复制出以"高热综合征"为特点的症候群,第5代毒株感染组死亡率达40%(2/5),第10代感染组症状明显减轻且无死亡,第125代毒株感染组基本无临床症状。这3个代次的毒株感染组于第3 d检测病毒血症呈阳性,第7～14 d到达高峰,第125代于21 d消失,较第5和10代毒株提前1 w。病毒感染后抗原检测主要分布于脾脏、扁桃体、淋巴结等组织,第5和10代毒株感染组脏器出现严重的病理损伤,第125代毒株感染组仅见轻微病理损伤。对3个代次毒株的ORF5、ORF6和ORF7测序显示,仅在ORF5出现了3个氨基酸位点突变,第29位:第5、10代为缬氨酸→第125代为丙氨酸;第32位:第5、125代为丝氨酸,第10代为甘氨酸;第196位:第5、10代为谷氨酰胺→第125代为精氨酸。研究表明,低代次毒株能够完全复制出典型的"猪高热综合征",而高代次毒株无明显临床症状,证明该毒株经细胞传代后毒力下降。鉴于高代次毒株感染动物仍能够引起毒血症和持续感染,表明其仍具一定毒力,作为疫苗种毒需要进一步毒力弱化。

关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒传代毒株毒力比较

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IBV结构蛋白对鸡CD4+CD8+淋巴细胞亚群影响的研究

IBV结构蛋白对鸡CD4+CD8+淋巴细胞亚群影响的研究

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会

作者：汪雪王红宁阳泰鲁丹张云飞唐俊妮四川大学生命科学学院动物疾病防控生物工程研究中心

在禽传染性支气管炎免疫过程中,细胞免疫不但可以对最初的感染具有抑制作用,而且在抗IBV感染中起主要保护作用。而CD4T淋巴细胞和CD8T淋巴细胞数量是衡量机体细胞免疫水平的重要标志。为了研究比较IBV三种主要结构蛋白（S1,M和N）对CD4... 详细信息

在禽传染性支气管炎免疫过程中,细胞免疫不但可以对最初的感染具有抑制作用,而且在抗IBV感染中起主要保护作用。而CD4T淋巴细胞和CD8T淋巴细胞数量是衡量机体细胞免疫水平的重要标志。为了研究比较IBV三种主要结构蛋白（S1,M和N）对CD4、CD8T淋巴细胞亚群的不同影响,进一步探索IBV主要结构蛋白的免疫机制。本试验制备分别含有传染性支气管炎病毒（IBV）核衣壳蛋（N）、膜蛋白（M）和纤突蛋白（S1）的质粒（pVAX1-N,pVAX1-M,pVAX1-S1）,免疫鸡。将健康雏鸡随机分为5组,分别为:PBS组、pVAX1组、pVAX1-S1组、pVAX1-M组、pVAX1- N组,每组15只。以空载体和PBS为空白对照,100μg/只,腿部肌肉多点注射,于7日龄首次免疫,14日龄二次免疫。免疫后7、14、21d随机经颈或翅静脉采血,采用流式细胞仪（FACS）对免疫鸡外周血中CD4、CD8T淋巴细胞数进行检测,应用SPSS等软件进行数据分析。结果显示:（1）所有试验组的CD4T淋巴细胞数在免疫后1～3周左右均高于空白对照组,pVAX1-N组在免疫后3周内CD4T淋巴细胞数均高于其他组,且差异极显著（P<0.01）。（2）各试验组CD8T淋巴细胞数在免疫后也均高于空白对照组,pVAX1-N组在免疫后3周内的CD8T淋巴细胞数值高于其他组,显著极差异（P<0.01）。由此可见,IBV的N蛋白可明显诱导CD8 T淋巴细胞的CTL免疫作用和CD4T淋巴细胞的辅助性免疫作用,其细胞免疫原性远高于S1蛋白和M蛋白,所以N蛋白不仅是IBV特异CTL的主要抗原,也是辅助性T淋(巴细胞免疫的主要抗原。

关键词：结构蛋白 IBV CD8 CD4 淋巴细胞亚群

来源：评论

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高致病性PRRSV与PCV2共感染协同致病性试验

高致病性PRRSV与PCV2共感染协同致病性试验

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：范培虎危艳武郭龙军吴洪丽黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

为阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的协同致病作用,澄清两种病毒不同时间顺序共感染与其协同致病力之间的关系。选取35日龄阴性健康猪30头,随机分6组,PCV2/HP-PRRSV顺序共感染组、HP-PRRSV/PCV2顺... 详细信息

为阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的协同致病作用,澄清两种病毒不同时间顺序共感染与其协同致病力之间的关系。选取35日龄阴性健康猪30头,随机分6组,PCV2/HP-PRRSV顺序共感染组、HP-PRRSV/PCV2顺序共感染组、HP-PRRSV+PCV2同时共感染组、HP-PRRSV感染组、PCV2感染组、未接种对照组。感染后每天测量体温、观察临床症状,每周称量体重、采血。用流式细胞仪检测血液中的CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+、γδT、NK细胞及粒细胞和单核细胞变化;免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)检测这两种病毒抗体变化;用ELISA法检测血清中IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-2、GM-CSF细胞因子变化;用荧光定量PCR法检测血清和组织中病毒载量。对各组试验猪进行组织病理学观察。试验结果表明,HP-PRRSV/PCV2顺序共感染组临床症状最严重,死亡率达60%;组织和血清中病毒载量显著高于其它组,抗体滴度明显低于其它组;淋巴细胞亚群及细胞因子(尤以TNF-α)变化也最为明显。临床猪群中HP-PRRSV和PCV2普遍存在共感染,猪群感染HP-PRRSV后再感染PCV2,可明显提高猪群发病率和死亡率。本研究对临床HP-PRRSV和PCV2的综合防制提供科学依据。

关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型共感染协同致病性

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抗猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白单克隆抗体制备及鉴定

抗猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白单克隆抗体制备及鉴定

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：张龙刘建波黄立平郭龙军危艳武唐青海吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

为表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白用于单抗的制备,以含PTTV1全长基因组的质粒(pMD18-TTV1-SY13)为模板,用高保真PCR法扩增PTTV1-ORF1(1501～2475 nt)编码的Cap蛋白C末端截短序列(324 aa),引物两端设计了SalⅠ和NotⅠ酶切位点,将PC... 详细信息

为表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白用于单抗的制备,以含PTTV1全长基因组的质粒(pMD18-TTV1-SY13)为模板,用高保真PCR法扩增PTTV1-ORF1(1501～2475 nt)编码的Cap蛋白C末端截短序列(324 aa),引物两端设计了SalⅠ和NotⅠ酶切位点,将PCR产物克隆到pGEX-6P-1载体,构建的重组质粒命名为pGEX-TTV1-ORF--C1。将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株后进行诱导表达,获得了含GST标签的PTTV1-rCap重组融合蛋白,经SDS-PAGE电泳分析和Western blot鉴定,目的蛋白获得了高效表达,分子量约为64.0 kDa,以包涵体形式存在。用纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术获得了8株稳定分泌抗PTTV1-rCap蛋白的杂交瘤细胞株,依次命名为1H4、1E9、1E11、4G12、5C5、7B8、8C2、8G2,单抗亚类鉴定均为IgG1,轻链为κ型;单抗培养上清效价为400～3200倍,腹水为4.0×105～6.4×106倍;有7株单抗与PTTV1-rCap蛋白产生特异性反应,另1株单抗(1E11)呈阴性,可能针对构象表位。为验证8株单抗与真核表达的Cap蛋白的免疫反应性,将全长与截短的PTTV1-ORFI基因片段克隆到pcDNA3.1/V5-His TOPO表达载体,转染293T细胞进行蛋白表达,采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测表明,这8株单抗均能够与表达的Cap蛋白产生特异性反应。本研究表达的PTTVl-Cap蛋白及制备的单抗,为该病毒诊断方法的建立及抗原表位的鉴定奠定了基础。

关键词：猪输血传播病毒1型(PTTV1) 重组Cap蛋白单克隆抗体鉴定

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