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16 篇 河北农业大学
15 篇 河南科技大学
15 篇 西北农林科技大学
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13 篇 吉林农业大学
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排序：

Generation of an Attenuated Tian Tan Vaccinia Virus by Deletion of the Ribonucleotide Reductase large Subunit

Generation of an Attenuated Tian Tan Vaccinia Virus by Delet...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者： Shifu Kan Xiao Li Ningyi Jin Genetic Engineering Laboratory of PLA Academy of Military Medical Sciences of PLA

Vaccinia virus(VV) provided prophylactic immunity to variola virus,however,s ignificant adverse health effects have been reported following vaccine administration. In recent years,VV has also been successfully used as a live vaccine vector for i nfectious *** is therefore necessary to ensure the safty of vaccinia-based vac cine vectors. Vaccinia virus Tian Tan(VTT) is a member of the orthopoxvirus genus,whic h is the most relevant to *** was also reported that TI4L gene was correlate d to *** approach adopted in this study involved gene integration at a sit e of TI4L locus using the well-characterized Cre-loxP site-specific gene recombinatio n system,which has been used widely in animal cells and analysis of gene function. Cre recombinase catalyzes site-specific and irreversible cleavage of DNA segments flanked by unique 34 bp loxP target *** conditional gene-targeting techn

关键词： Generation of an Attenuated Tian Tan Vaccinia Virus by Deletion of the Ribonucleotide Reductase large Subunit

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肉鸡HSP70基因克隆、原核表达及单克隆抗体制备

肉鸡HSP70基因克隆、原核表达及单克隆抗体制备

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：孙培明吴晓东赵永刚刘雨田王志亮鲍恩东南京农业大学动物医学院农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心南京农业大学动物医学院

利用RT-PCR方法扩增了肉鸡HSP70 mRNA,将其扩增产物克隆到PGEM-T Easy载体和原核表达载体pET-28a(+)上,进一步转化至大肠杆菌BL-21中,用IPTG诱导表达重组肉鸡HSP70。以纯化的重组肉鸡HSP70制备多克隆抗体,免疫印迹分析说明重组肉鸡HSP70... 详细信息

利用RT-PCR方法扩增了肉鸡HSP70 mRNA,将其扩增产物克隆到PGEM-T Easy载体和原核表达载体pET-28a(+)上,进一步转化至大肠杆菌BL-21中,用IPTG诱导表达重组肉鸡HSP70。以纯化的重组肉鸡HSP70制备多克隆抗体,免疫印迹分析说明重组肉鸡HSP70 具有很好的免疫原性。以纯化的重组肉鸡HSP70免疫BALB／c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,获得2株分泌肉鸡HSP70单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步通过免疫印迹分析筛选出 1株高特异性的肉鸡HSP70单克隆抗体,命名为BH70-1。免疫组织化学结果显示,单克隆抗体BH70-1具有很好的组织亲和力,是一种理想的抗体。

关键词：热休克蛋白70 原核表达单克隆抗体免疫印迹免疫组织化学肉鸡

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果子狸SARS-CoV实验性感染的病理学研究

果子狸SARS-CoV实验性感染的病理学研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：肖一红孟庆文尹训南关云涛刘永刚李昌文王牟平孔宪刚吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

目的:果子狸SARS-CoV实验性感染的病理学研究。方法:在人源SARS-CoV分离株BJ01(有29个核苷酸的缺失序列)和GD01(无29个核苷酸的缺失序列)实验性感染果子狸的基础上,对其肺、脾、淋巴结、肝、小肠、肾、气管、大脑、胰腺、性腺、胃、心... 详细信息

目的:果子狸SARS-CoV实验性感染的病理学研究。方法:在人源SARS-CoV分离株BJ01(有29个核苷酸的缺失序列)和GD01(无29个核苷酸的缺失序列)实验性感染果子狸的基础上,对其肺、脾、淋巴结、肝、小肠、肾、气管、大脑、胰腺、性腺、胃、心组织进行病理组织学观察,同时用原位杂交技术(in situ hybridization,ISH)方法对SARS-CoV 在组织器官中的分布进行检测。结果:攻毒后不同时期,肺、脾、淋巴结、肝、小肠、肾和大脑有不同程度的病理变化,胰腺、性腺、胃、心无病理变化,并在肺、小肠、大脑中检测到了SARS-CoV基因,在肝、脾、肾、气管、胰腺、性腺、胃、心中未检到,与在SARS 患者检测结果基本相符。结论:果子狸实验性感染SARS-CoV可导致与人类相似的病理学变化和病原分布,表明果子狸可以作为评价SARS-CoV疫苗及治疗药物的动物模型。

关键词：果子狸病理变化 ISH SARS-CoV

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通过嵌合体途径提高体细胞再克隆牛效率的研究

通过嵌合体途径提高体细胞再克隆牛效率的研究

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十四届学术研讨会

作者：陈秀萍李荣丁方荣李松戴蕴平李宁中国农业大学农业生物技术国家重点实验室北京100193

尽管许多哺乳动物都已被成功克隆，但克隆效率非常低，仅有低于5％的重组胚胎可以发育成个体，再克隆的效率则更低。体细胞克隆效率低主要体现在克隆胚胎质量差(与正常胚胎相比细胞数少、凋亡细胞数多)，克隆胎儿妊娠率低，流产率高、... 详细信息

尽管许多哺乳动物都已被成功克隆，但克隆效率非常低，仅有低于5％的重组胚胎可以发育成个体，再克隆的效率则更低。体细胞克隆效率低主要体现在克隆胚胎质量差(与正常胚胎相比细胞数少、凋亡细胞数多)，克隆胎儿妊娠率低，流产率高、出生后健康状况不艮。据统计，80％以上的克隆胎儿面临流产，出生的50％以上的克隆动物因器官发育不全出现早期夭折，存活的克隆后代往往存在各种生理异常，因而提高大型家畜动物的克隆效率成为克隆技术应用于生产的瓶颈问题。通过嵌合体途径，利用IVF来源胚胎的卵裂球改善体细胞重编程状况、补偿克隆胚胎发育过程中的缺陷(如滋养层细胞数少导致的胎盘异常，器官异常发育等)，将有助于提高再克隆胚胎的体内、外发育能力，不仅可以提高再克隆的效率，加快克隆技术应用到生产的进程，而且如果乳腺中含有大部分转基因目的成分，将提高转基因大家畜n乳腺生物反应器”的制作效率，必将加快转基因牛核心群扩繁的进程，并可推广到转基因山羊、绵羊、猪和兔的基础群的生产和扩繁。此外，如果得到的后代为生殖嵌合，可以将其遗传物质遗传给后代，将为良种家畜品质资源的保护提供一条新途径。本研究以本实验室已经建立的转hLF基因克隆牛的耳成纤维细胞系为核供体细胞，得到再克隆胚胎，然后通过显微注射将一个8-细胞期IVF胚胎的卵裂球注射到同一发育时期的8-细胞再克隆胚胎中，制作嵌合体胚胎。从亚细胞水平比较再克隆胚胎和嵌合体胚胎两者的体外发育能力，主要包括囊胚发育率，ICM、TE细胞数、总细胞数、ICM：CM比值。并通过胚胎移植比较两者体内发育能力，主要包括受体牛妊娠率、妊娠35天的胎牛数、出生牛教以及断奶数，以期通过此方法提高转基因克隆牛的再克隆胚胎的体内外发育能力。结果显示：(1)两者囊胚发育率相当，但嵌合体胚胎组的ICM、TE细胞数、总细胞数.ICM：CM比值均高于再克隆组;(2)嵌合体胚胎组的受体牛妊娠率、分娩率、犊牛出生率和存活率均高于对照组;(3)嵌合体组流产牛的各组织器官经PCR鉴定，均含GFP和hLF转基因;(4)经检测存活的4头再克隆嵌合体牛的血液，耳朵和尾巴样本中有2头为转基因阳性。

关键词：牛繁殖技术体细胞核克隆胚胎胚胎发育嵌合体

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Effect Comparison of Canine Intravenous Pyelography(IVP)by Two Kinds of Hypotonic Medicines

Effect Comparison of Canine Intravenous Pyelography(IVP)by T...

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中国畜牧兽医学会兽医影像技术学分会第七次全体会员代表大会暨第十四次学术研讨会

作者： LI Tian-ying LI Qian-yong ZHANF Dezhi HE Yuan WANG Qinghua Rongchang Campus Southwestern University

[Objective]This paper aimed to provide references for pet dog kidney and urinary track diseases' x-ray radiography diagnosis.[Method]Experimental dogs were gave two kinds of hypotonic medicines(Vitamin K3 and anisodamine) in advance,non-compression hypotonic(IVP) was done and radiography effects of this two hypotonic medicines were compared later in order to finally discuss clinical practical application value of canine(IVP) using hypotonic medicines.[Result]3.5 mg/*** anisodamine dosage was injected before radiography,10 minutes after radiography was the best time to take photo,and the development of experimental dog's bilateral renal contour,renal pelvis and front segment of ureter was basically *** regarding radiography by 1.6 mg/*** vitamin K3,the best photo was got 10 minutes later after radiography,and the development of experimental dog's bilateral renal contour,renal pelvis and front segment of ureter was clear.[Conclusion]Vitamin K3,as a kind of hypotonic medicine used in pet clinical(IVP),had characteristics of safety,low dosage and better practical radiography effect,was obviously better than anisodamine,and could be properly promoted in pet clinical(IVP).

关键词： Vitamin K3 Anisodamine Canine Intravenous pyelography

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粪肠球菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立与应用

粪肠球菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立与应用

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十三次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第三次学术研讨会、中国兽医病理学家第三次学术研讨会

作者：李博张欣刘娜刘彦威刘利强刘建钗河北工程大学生命科学与食品工程学院河北省禽病研究技术工程中心

粪肠球菌是人和动物胃肠道内广泛存在的一种重要的机会致病菌,通常不引起动物发病。但近年来滥用抗生素现象在养禽业十分严重,使得禽类感染粪肠球菌的病例逐年增多,且不同成长阶段的禽类均会感染。为了建立一种快速、特异、敏感的检测... 详细信息

粪肠球菌是人和动物胃肠道内广泛存在的一种重要的机会致病菌,通常不引起动物发病。但近年来滥用抗生素现象在养禽业十分严重,使得禽类感染粪肠球菌的病例逐年增多,且不同成长阶段的禽类均会感染。为了建立一种快速、特异、敏感的检测、诊断鸡粪肠球菌的方法,以对粪肠球菌感染的防治提供便捷的方法,本研究参照Gen Bank中已发表的鸡粪肠球菌全基因组,采用Primer Express5.0软件设计了一对特异引物,先通过常规的普通PCR检测引物的特异性,然后进行敏感性、特异性、重复性试验成功建立了检测鸡粪肠球菌的SYBR Green Ⅰ LC-PCR检测方法,并通过临床组织样品检测评价其临床实用性。结果显示所建立的SYBR Green Ⅰ LC-PCR检测方法标准曲线线性关系良好,相关系数R=0.955;在敏感性实验结果中,对粪肠球菌可检测的最低浓度可达10～1 CFU/m L,而常规PCR只能检出10～3 CFU/m L,敏感性高于常规PCR约100倍;在特异性实验结果中,不与屎肠球菌、小肠肠球菌、金黄色葡萄球菌、奇异变形杆菌、沙门氏菌、绿脓杆菌、大肠杆菌等禽源致病原发生交叉反应;重复性试验结果中,同一个浓度,4个平行定量PCR扩增曲线走向基本一致,变异系数小于2%,说明该定量PCR方法重复性好,比较稳定。从患禽采集的肝脏和肾脏样本的DNA作为模板,经SYBR Green Ⅰ LC-PCR方法进行检测,结果均出现了特异性扩增曲线。此检测结果表明该方法对粪肠球菌病临床样本的检测具有很好的特异性和敏感性,并且操作简单便捷、节省时间,可应用于鸡粪肠球菌的日常检测和早期临床诊断。

关键词：粪肠球菌 SYBR Green PCR 建立与应用检测方法

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O型口蹄疫病毒Akesu／58在牛体内的定位及其致病机理的研究

O型口蹄疫病毒Akesu／58在牛体内的定位及其致病机理的研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：王雯慧常惠芸黄立军马军武林彤邵军军马金玲刘在新刘湘涛陈怀涛谢庆阁甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所中国农业科学院兰州兽医研究所中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所

为明确我国最具有代表性的重要毒株O型口蹄疫病毒Akesu／58在宿主体内的精确定位及其对宿主的致病作用,本实验以口蹄疫易感动物牛为研究对象,通过舌皮内接种建立人工感染模型,应用亲和免疫组织化学技术、组织病理学技术、电子显微镜技... 详细信息

为明确我国最具有代表性的重要毒株O型口蹄疫病毒Akesu／58在宿主体内的精确定位及其对宿主的致病作用,本实验以口蹄疫易感动物牛为研究对象,通过舌皮内接种建立人工感染模型,应用亲和免疫组织化学技术、组织病理学技术、电子显微镜技术及分子生物学技术, 对Akesu／58在不同感染时期、不同器官组织中的微观和亚微观水平的定位进行跟踪检测,同时详细观察Akesu／58的靶组织和靶细胞的宏观、微观、亚微观病理学变化特点。结果表明, O型口蹄疫病毒Akesu／58对牛具有很强的致病性,实验组牛均表现良性口蹄疫的典型症状。大体剖检可见口腔不同部位黏膜、前后蹄部无毛处皮肤及前胃黏膜均有不同程度的水疱病变,其中前胃的特征性水疱病变在临床鉴别诊断中有着十分重要的意义。口蹄疫特征性水疱

关键词：口蹄疫病毒靶组织靶细胞 Akesu 棘细胞

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热应激对猪肠道结构及功能的影响

热应激对猪肠道结构及功能的影响

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：胡艳欣佘锐萍张发明肖冲郭延军刘风华中国农业大学动物医学院中国农业大学动物医学院中国农业大学动物医学院中国农业大学动物医学院中国农业大学动物医学院北京农学院

目的:观察热应激对猪肠道黏膜结构的损伤作用,以揭示热应激降低猪增重率的机理。方法:12头小型猪随机分成热应激组和常温对照组两组。人工气候室内,热应激组模拟夏季炎热气候,气温从26～39℃24h循环变温,在39℃时维持4h;常温对照组在22... 详细信息

目的:观察热应激对猪肠道黏膜结构的损伤作用,以揭示热应激降低猪增重率的机理。方法:12头小型猪随机分成热应激组和常温对照组两组。人工气候室内,热应激组模拟夏季炎热气候,气温从26～39℃24h循环变温,在39℃时维持4h;常温对照组在22℃下饲养。试验持续10d,分别于热应激前、热应激第5d和热应激结束时称重,计算各组的体重增长率。热应激10d后39℃高温持续期结束时剖杀试验猪,取其十二指肠、空肠及回肠进行固定、石蜡切片、染色,染色和扫描电镜HE．染色切片观察肠黏膜形态交化,并检测肠绒毛长度、宽度、隐窝深度,绒毛长度／隐窝深度:PAS染色切片检测肠黏膜上皮内杯状细胞数量的变化;用Gomori氏改良法染色切片观测肠黏膜碱性磷酸酶活性的变化。结果: 与对照组相比较,热应激组猪的体重增长率显著下降(P<0．05);热应激后猪肠黏膜结构严重损伤;各段肠的绒毛长度、宽度、隐窝深度,绒毛长度／隐窝深度均出现不同程度的降低, 其中回肠绒毛长度减少较为显著(P<0．05),各肠段绒毛宽度的减少均差异显著(P<0．05);肠黏膜上皮内杯状细胞数量增多,其中回肠差异显著(P<0．05);热应激组猪的肠黏膜上皮细胞表面的碱性磷酸酶活性明显降低。结论:热应激可引起猪肠道黏膜结构严重损伤,以致小肠的消化吸收功能严重受阻,这是造成猪热应激掉膘减重的主要机制之一。

关键词：猪热应激小肠结构杯状细胞 AKP

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牛分枝杆菌mce4E蛋白对牛肺泡巨噬细胞iNOS、TNF-α、IL-6和IL-12表达的影响

牛分枝杆菌mce4E蛋白对牛肺泡巨噬细胞iNOS、TNF-α、IL-6和IL-12...

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：徐广贤赵德明周向梅尹晓敏杨建民中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室

越来越多的研究证实mce家族蛋白与结核杆菌的毒力有关,为了探讨mce4E蛋白在牛分支杆菌致病机理中的作用,我们用重组表达的mce4E蛋白、MtbPPD、MbPPD、BCG和 ConA刺激肺泡巨噬细胞48小时后,用real-time PCR检测牛肺泡巨噬细胞TNF-α、iNO... 详细信息

越来越多的研究证实mce家族蛋白与结核杆菌的毒力有关,为了探讨mce4E蛋白在牛分支杆菌致病机理中的作用,我们用重组表达的mce4E蛋白、MtbPPD、MbPPD、BCG和 ConA刺激肺泡巨噬细胞48小时后,用real-time PCR检测牛肺泡巨噬细胞TNF-α、iNO、 IL-6、IL-12细胞因子mRNA的表达量的变化,与空白对照组相比,mce4E、MtbPPD、MbPPD、 BCG、ConA均能够使巨噬细胞的TNF-α mRNA表达上调(P<0．05);mce4E蛋白抑制巨噬细胞 iNO的mRNA表达(P<0．05);MtbPPD和ConA对巨噬细胞iNO的mRNA表达没有影响,MbPPD 和BCG促使巨噬细胞iNO的mRNA表达上调(P<0．05);mce4E、MtbPPD、MbPPD、BCG、ConA 能够使IL-6的mRNA表达上调(P<0．05);mce4E蛋白和ConA对巨噬细胞的IL-12表达没有影响,MtbPPD、MbPPD和BCG能够促使巨噬细胞IL-12 mRNA表达上调(P<0．05)。用不同剂量的mce4E蛋白刺激牛肺泡巨噬细胞48小时后,用MTT检测肺泡巨噬细胞的存活率,结果表明,与空白组比较各剂量的mce4E蛋白对巨噬细胞的活性都有显著的抑制作用(P<0．05), 说明mce4E蛋白对巨噬细胞的活性有显著的抑制作用。

关键词：牛分枝杆菌 mce4E蛋白牛肺泡巨噬细胞 real-time PCR

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鸡包涵体肝炎过程中血液免疫细胞变化规律的研究

鸡包涵体肝炎过程中血液免疫细胞变化规律的研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：王纯洁敖日格乐斯日古楞贾德刚赵怀平内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古农业大学动物科学与医学学院

为了研究鸡包涵体肝炎(IBH)过程中血液免疫细胞变化规律,FAV-8型禽腺病毒接种2日龄SPF雏鸡,分别在攻毒后1,3,5,7,9,12,15,20,25,30天(dpi),取攻毒组和对照组各10只,心脏采血致死,分离血液白细胞进行CD3、CD4、CD8、Bu-1、 K1、Ia、TCR... 详细信息

为了研究鸡包涵体肝炎(IBH)过程中血液免疫细胞变化规律,FAV-8型禽腺病毒接种2日龄SPF雏鸡,分别在攻毒后1,3,5,7,9,12,15,20,25,30天(dpi),取攻毒组和对照组各10只,心脏采血致死,分离血液白细胞进行CD3、CD4、CD8、Bu-1、 K1、Ia、TCRγδ、CD18阳性免疫细胞的流式细胞仪检测。结果:(1)血液Ia+M(?)在1、9 和20 dpi显著高于对照,3-5和30 dpi显著低于对照;K1在7到9 dpi、15到20 dpi和 30 dDi显著高于对照,1、12和25 dpi显著低于对照;MHC I+M(?)只有在第3天显著高于对照,第1、5-7、15和30天都显著低于对照。血液单核细胞早期凋亡,只在病变高峰期第5 天显著高于对照;而晚期凋亡即坏死,攻毒组均显著高于对照,说明单核细胞与病毒作用后不仅有凋亡,而且坏死更明显。(2)血液Bu-1a+淋巴细胞只有在9到15 dpi显著高于对照, 1到3和7、20 dpi显著低于对照,而5和25dpi无显著变化。(4)CD8+T细胞受损最重, CD3-T和CD4+T细胞虽有损伤,但显著或不显著高于对照的多些。CD3+T淋巴细胞12 dpi极显著高于对照,1、30 dpi极显著和显著低于对照;血液TCRγδ+T细胞仅在7 dpi显著低于对照。以上结果表明,IBH患病鸡反复发病并呈现不完全恢复是因为淋巴细胞和单核细胞的大量损伤和凋亡所致。

关键词：鸡包涵体肝炎淋巴细胞单核细胞流式细胞术凋亡

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