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36 篇 中国农业科学院哈...
33 篇 甘肃农业大学
33 篇 广东省农业科学院...
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以轮状病毒感染的猪小肠上皮细胞为模型研究轮状病毒和益生菌对肠上皮细胞屏障功能的影响

以轮状病毒感染的猪小肠上皮细胞为模型研究轮状病毒和益生菌对肠...

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：刘芳宁 Tammy Bui 杨增岐西北农林科技大学动物医学院

本研究中嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus,LA)或者鼠李糖乳酸杆菌(Lactobacillusrhamnosus GG,LGG)在猪轮状病毒(Porcine rotavirus,pRV)OSU或人轮状病毒(Human rotavirus,hRV)Wa接种IPEC-J2细胞前24 h和接种细胞后1 h被用来处理细胞。结果表明pRV感染可使IPEC-J2细胞单层跨膜电阻(Trans-epithelial electrical resistance,TEER)在感染后6-18 h显著下降,但在接种后24 h恢复到正常水平,这和RV感染在体内引起的病程相似,进一步说明了IPEC-J2细胞功能接近正常猪小肠上皮细胞。LA可以有效阻止pRV感染造成的细胞单层TEER下降,但LGG对pRV感染造成的细胞单层TEER变化没有明显影响。在病毒接种后24 h,LA或LGG处理或/和pRV感染细胞对细胞的通透性和紧密连接(Tight junction,TJ)蛋白(occludin、ZO-1、claudin-1、claudin-3和claudin-4)及粘合连接(Aherents junction,AJ)蛋白(a-catenin和β-catenin)在细胞上的分布没有明显影响,这可能与pRV感染后采样时间过晚有关。LGG明显提高正常肠上皮细胞的TEER及AJ蛋白a-catenin和β-catenin的表达量,说明LGG对肠屏障功能有维持和增强作用。但在LA或LGG处理和/或pRV感染期间(病毒接种后6～18 h),随着TEER的变化,细胞单层通透性和细胞中TJ和AJ蛋白数量和分布是否随时间而改变,还需进一步的研究检测。pRV感染的IPEC-J2细胞模型是一个完全同源模型,这个模型对研究益生菌对RV感染肠上皮细胞屏障功能的影响非常有用。

关键词：轮转病毒益生菌肠上皮细胞屏障功能

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鸭瘟病毒UL46基因的转录时相和表达时相分析

鸭瘟病毒UL46基因的转录时相和表达时相分析

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：路立婷程安春汪铭书蒋金凤朱德康贾仁勇罗启慧陈孝跃四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川农业大学动物微生态工程研究中心

本实验根据DPV UL46基因和鸭β-actin内参基因序列分别设计了目标基因引物U3/U4(扩增产物为121bp)和内参基因引物U1/U2(扩增产物为178bp)。在测定完UL46基因的标准曲线和熔解曲线后,利用总RNA抽提试剂盒分别提取感染DPV后的2h、4h、6h... 详细信息

本实验根据DPV UL46基因和鸭β-actin内参基因序列分别设计了目标基因引物U3/U4(扩增产物为121bp)和内参基因引物U1/U2(扩增产物为178bp)。在测定完UL46基因的标准曲线和熔解曲线后,利用总RNA抽提试剂盒分别提取感染DPV后的2h、4h、6h、8h、12h、18h、24h、30h、36h、42h、48h、54h、60h、66h、72h和80h不同时间段的DEF mRNA并进行反转录,然后以cDNA为模板,SYBR GreenⅠ染料法进行荧光定量PCR扩增。结果表明,UL46基因的转录在12h左右时开始增加,随着时间的延长,转录量逐渐增加,在24h左右显著增加并在54h左右达到峰值,此后表达量逐渐降低。收集感染DPV不同时间段的DEF,反复冻融3次裂解细胞并提取病毒蛋白,使用纯化后的兔抗UL46M IgG通过Western blot对DPV感染的DEF中的UL46蛋白的表达时相进行分析,结果显示DPV UL46蛋白感染宿主细胞后12h可见约81.8kD的特异性条带,随时间推移表达量逐渐增多,在60h左右达到最大值,符合晚期基因的表达谱特征,同时与UL46基因的转录时相相符。转录时相和表达时相结果说明UL46基因的转录表达规律符合基因由转录到翻译的生命周期规律,且具有先转录后表达的模式,也表明了DPV UL46基因是一个晚期基因。

关键词： DPV UL46基因转录表达时相分析

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Microencapsulation of Lactobacillus brevis and preliminary evaluation of their therapeutic effect on the diarrhea of neonatal calf

Microencapsulation of Lactobacillus brevis and preliminary e...

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者： Xue-Feng Qi,Hong-Ming Liu,Xian-Jun Zhao~* (College of Veterinary Medicine of Northwest A & F University,Yangling,Shaanxi,712100,China

Microcapsules of Lactobacillus brevis were prepared using spray drying technique,and the resistance of the microencapsulated form of this microorganism to drying at high temperature and simulated gastrointestinal conditions were *** therapeutic effect of these microcapsules on the diarrhea of neonatal calf was also evaluated using *** results showed that the completely release of the encapsulated bacteria took place after 60 min in contact with simulated intestinal *** bacteria were resistant at least for 90 min to simulated gastric juice(pH 1.2) or simulated intestinal juice(pH 7.2),and microencapsulated form of the microorganisms was more resistant to drying at 85℃than free ***-PCR profiles of diarrhea calves treated with probiotic capsules were similar to that of control health calves at 3 days post administration,suggesting that administration of these probiotic capsules may have strong positive effect on the treatment of neonatal calf diarrhea.

关键词： Microencapsulation Lactobacillus brevis Diarrhea of neonatal calf ERIC-PCR

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枯草芽孢杆菌B1对高脂日粮诱导小鼠氧化应激的保护作用

枯草芽孢杆菌B1对高脂日粮诱导小鼠氧化应激的保护作用

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：周绪霞吴红照李卫芬文静崔志文浙江大学动物科学学院饲料科学研究所浙江大学动物分子营养学教育部重点实验室

将45只ICR雄性小鼠,随机均分为三组,每组3个重复,每个重复5只:A组为空白对照组,饲喂小鼠基础日粮;B组为氧化应激组,饲喂高脂日粮;C组为益生菌组,在高脂日粮中添加10～8CFU/g枯草芽孢杆菌B1制剂,试验期为30d。试验结束后测定了各处理组... 详细信息

将45只ICR雄性小鼠,随机均分为三组,每组3个重复,每个重复5只:A组为空白对照组,饲喂小鼠基础日粮;B组为氧化应激组,饲喂高脂日粮;C组为益生菌组,在高脂日粮中添加10～8CFU/g枯草芽孢杆菌B1制剂,试验期为30d。试验结束后测定了各处理组小鼠增重、血脂等血清生化指标及血清抗氧化功能。结果表明:高脂日粮显著增加了小鼠的末期体重（8.57%,P<0.01）和日增重（58.33%,P<0.05）,而芽孢杆菌B1则显著降低了高脂日粮引起的小鼠的增重（P<0.01）。血清生化指标测定表明,高脂日粮显著升高了小鼠血清中的总胆固醇（Total cholesterol,TC）含量、葡萄糖浓度和谷丙转氨酶（Glutamic-pyruvic transaminase,GPT）活性,并显著降低了血清抗O活力、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GSH-Px）活性及还原型谷胱甘肽（Reducedglutathione,GSH,P<0.01）含量,而添加芽孢杆菌B1则使小鼠血清中葡萄糖浓度、尿素氮含量、谷草转氨酶（Glutamic-oxalacetic transaminase,GOT）和GPT活性均显著降低（P<0.05）,并显著提高了小鼠血清总抗氧化能力（P<0.05）。以上结果提示枯草芽孢杆菌B1能够有效地提高小鼠血清抗氧化活性、保护小鼠机体免受高脂日粮对小鼠的损伤,并减轻高脂日粮引起的小鼠肥胖。

关键词：枯草芽孢杆菌高脂日粮抗氧化小鼠

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微生态制剂对文蛤非特异性免疫因子影响的研究

微生态制剂对文蛤非特异性免疫因子影响的研究

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：常维山山东农业大学动物科技学院

在实验生态条件下,观察芽胞杆菌浓度分别为10～5cfu/L、10～6cfu/L和10～7cfu/L的微生态制剂对文蛤暴露后第1d,3d,7d,21d,28d和恢复原生态14d后对文蛤消化腺中的抗菌活力、溶菌活力、超氧化物歧化酶活力(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力的影... 详细信息

在实验生态条件下,观察芽胞杆菌浓度分别为10～5cfu/L、10～6cfu/L和10～7cfu/L的微生态制剂对文蛤暴露后第1d,3d,7d,21d,28d和恢复原生态14d后对文蛤消化腺中的抗菌活力、溶菌活力、超氧化物歧化酶活力(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力的影响,确定微生态制剂对文蛤非特异性免疫力的影响;用副溶血弧菌对诱导28 d后的文蛤进行攻毒实验,测定免疫保护率,以确定微生态制剂对文蛤抗病力的影响。结果表明,各浓度组的微生态制剂均能显著提高文蛤非特异性免疫因子的活力,对消化腺抗菌活力和SOD活性的促进作用尤为显著,且不同浓度试验组之间的免疫因子活力也有显著差异。与对照组相比,溶菌活力和CAT活力在第7d就出现显著性增高(P<0.05),抗菌活力和SOD活力在第14d与对照组出现显著性差异(P<0.05);恢复试验14d后,溶菌活力和SOD活力恢复到对照组的水平;抗菌活力和CAT活力仍明显高于对照组(P<0.05)。攻毒试验结果显示,试验组的免疫保护率分别达到22.2%、27.8%和44.4%,对照组文蛤死亡率达到90%,表明所用微生态制剂可以促进文蛤的非特异性免疫功能。

关键词：微生态制剂芽孢杆菌文蛤非特异性免疫因子免疫保护率

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鸡β-防御素-1对鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因DNA疫苗的免疫佐剂作用

鸡β-防御素-1对鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因DNA疫苗的免疫佐剂...

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：杨小梅张辉华谢青梅马静云罗艳娜毕英佐曹永长佛山科技学院生命科学院华南农业大学动物科学院中山大学生命科学学院

本文旨在研究鸡β-防御素-1(AvBD1)对鸡IBDV VP2基因DNA疫苗的免疫佐剂作用。通过基因工程技术,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-AvBD1与pcDNA3.1(+)-VP2。14日龄岭南黄肉鸡随机分成5组,分别免疫PBS、空质粒载体pcDNA3.1(+)、重组质粒pcDNA... 详细信息

本文旨在研究鸡β-防御素-1(AvBD1)对鸡IBDV VP2基因DNA疫苗的免疫佐剂作用。通过基因工程技术,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-AvBD1与pcDNA3.1(+)-VP2。14日龄岭南黄肉鸡随机分成5组,分别免疫PBS、空质粒载体pcDNA3.1(+)、重组质粒pcDNA3.1(+)-VP2、重组质粒pcDNA3.1(+)-AvBD1与pcDNA3.1(+)-VP2联合免疫、IBD弱毒苗。免疫后收集不同时期的外周血血清样本,用ELISA方法检测血清中IBDV VP2特异性抗体水平,CD3+、CD4+与CD8+的含量通过流式细胞仪进行检测。结果表明,联合免疫组(即pcDNA3.1(+)-AvBD1与pcDNA3.1(+)-VP2共同免疫)VP2特异性抗体水平显著高于其他组(P<0.05);单独免疫质粒pcDNA3.1(+)-VP2组VP2特异性抗体水平与免疫IBD弱毒苗组相当,显著高于PBS组与空质粒载体pcDNA3.1(+)组(P<0.05)。在二免后的第7天,联合免疫组外周血中CD3+、CD4+与CD8+T淋巴细胞的含量也显著高于单独免疫质粒pcDNA3.1(+)-VP2组(P<0.05),其他时间无显著性差异。IBDV攻毒后的保护率也是联合免疫组高于单独免疫pcDNA3.1(+)-VP2组。这些结果表明鸡AvBD1可以作为一种免疫佐剂用于增强IBDV VP2基因DNA疫苗的免疫力。

关键词：鸡β-防御素-1 免疫佐剂 IBDV DNA疫苗

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芽孢杆菌微生态制剂对肉鸡肠道生长性能的影响研究

芽孢杆菌微生态制剂对肉鸡肠道生长性能的影响研究

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：张亚兰古从伟潘康成赵爽吴敏峰四川农业大学动物医学院北京中农劲腾生物技术有限公司

本文研究两种芽孢杆菌制剂对肉鸡生长性能的影响。选用100羽7日龄的艾维茵肉鸡,随机为空白对照组,抗生素组,甘露聚糖组,Pab02组和PAS38组,每组20只。空白对照组饲喂基础日粮,抗生素对照组饲喂基础日粮的基础上添加0.1%硫酸新霉素,甘露... 详细信息

本文研究两种芽孢杆菌制剂对肉鸡生长性能的影响。选用100羽7日龄的艾维茵肉鸡,随机为空白对照组,抗生素组,甘露聚糖组,Pab02组和PAS38组,每组20只。空白对照组饲喂基础日粮,抗生素对照组饲喂基础日粮的基础上添加0.1%硫酸新霉素,甘露聚糖对照组饲喂基础日粮的基础上添加0.2%甘露聚糖制剂,Pab02组与PAS38组分别饲喂基础日粮添加0.1%枯草芽孢杆菌Pa02制剂与0.1%枯草芽孢杆菌PAS38制剂,饲料含菌量均为1×10～6cfu/g,8、21日龄用新城疫疫苗进行免疫,每周进行称重,计算增重和料重比。结果,两芽孢杆菌组肉鸡末重、净增重、日平均重极显著高于空白对照组和甘露聚糖组(P<0.01),抗生素对照组极显著高于空白对照组(P<0.01)和显著高于甘露聚糖组(P<0.05),甘露聚糖组极显著高于空白对照组(P<0.01)。饲喂全期各试验组的增重改善率在17～28日龄均为最高,其中以Pab02组的增重改善率最明显,PAS38组其次。饲喂初期,微生态制剂对肉鸡料重比改善作用不如抗生素明显,但中后期微生态制剂Pab02及PAS38降低料重比效果良好,其中以微生态制剂PAS38组分别在肉鸡3、4周龄和5、6周龄龄期间对料重比的改善率最高。结果表明,利用芽孢杆菌Pab02和PAS38所制成微生态制剂按0.1%的剂量添加在日粮中于夏季饲喂肉鸡,能够抵抗热应激带来的消极影响,显著提高肉鸡增重与料肉比,提高其生长性能,并且其作用优于抗生素及寡糖制剂。

关键词：微生态制剂芽孢杆菌肉鸡生长性能

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芽孢杆菌Pab02喷雾制剂在预防和治疗肉鸡呼吸道感染中的作用

芽孢杆菌Pab02喷雾制剂在预防和治疗肉鸡呼吸道感染中的作用

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：古从伟潘康成张亚兰赵爽李思聪盛琴四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室

本文随机选取24只7日龄健康肉公鸡进行动物实验,随机分为4个组,每组6只。其中A组在感染金黄色葡萄球菌G1前后未作任何处理,B组在感染G1后喷雾芽孢杆菌Pab02,C组在感染G1前后均喷雾Pab02,D组在感染G1前喷雾Pab02。通过活菌计数结果显示,... 详细信息

本文随机选取24只7日龄健康肉公鸡进行动物实验,随机分为4个组,每组6只。其中A组在感染金黄色葡萄球菌G1前后未作任何处理,B组在感染G1后喷雾芽孢杆菌Pab02,C组在感染G1前后均喷雾Pab02,D组在感染G1前喷雾Pab02。通过活菌计数结果显示,在感染G1前后均喷雾Pab02不能显著改变喉部的细菌总数(P>0.05),但能显著减少气管中的细菌总数和整个呼吸道(喉部和气管)中的葡萄球菌数(P<0.05);在感染前喷雾Pab02或在感染后喷雾Pab02均不能显著改变呼吸道中的细菌总数(P>0.05),但能显著减少呼吸道中的葡萄球菌数(P<0.05)。通过V3-PCR-DGGE分析,在感染G1前后均喷雾Pab02或者仅在感染G 1前喷雾Pab02能够恢复呼吸道菌群多样性和相似性,而在感染G1后再喷雾Pab02不能恢复呼吸道菌群多样性和相似性。通过组织学方法观察肺组织的变化情况,结果显示,感染G1后,可见肺泡破裂融合,出血严重,炎性细胞大量增多,有炎性渗出物和严重化生灶;在感染前后均喷雾Pab02能使肺脏中淋巴小结增多,而且未见肺损伤;在感染前喷雾Pab02,能使肺内淋巴小结增多,炎性细胞增多,可见肺泡扩张现象;感染后喷雾Pab02,肺脏中可见肺泡破裂融合,炎性细胞大量增多,可见炎性渗出物和轻微化生灶。结果表明Pab02具有刺激肺脏免疫功能的作用,对呼吸系统感染金黄色葡萄球菌有预防和治疗作用,但是预防作用大于治疗作用。

关键词：呼吸道感染枯草芽孢杆菌预防和治疗

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黄芪多糖微生态制剂对鸡免疫功能的影响

黄芪多糖微生态制剂对鸡免疫功能的影响

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：李德庆石峰赵占召鹿双双董宣牛钟相山东农业大学动物科技学院

为了探明黄芪多糖微生态制剂对鸡免疫功能的作用效果。在鸡饮水中分别添加不同浓度黄芪多糖微生态制剂,并设黄芪多糖和空白对照,自由饮水,测定各组鸡HI抗体效价和免疫器官指数。经统计试验结果证明,24日龄时,饮用不同浓度（0.1%、0.3%、... 详细信息

为了探明黄芪多糖微生态制剂对鸡免疫功能的作用效果。在鸡饮水中分别添加不同浓度黄芪多糖微生态制剂,并设黄芪多糖和空白对照,自由饮水,测定各组鸡HI抗体效价和免疫器官指数。经统计试验结果证明,24日龄时,饮用不同浓度（0.1%、0.3%、0.5%）黄芪多糖微生物制剂的各组鸡平均抗体效价（nlog）分别为6.25、7.25、5.50,三组之间比较差异极显著（P=0.01）;饮用不同浓度（0.1%、0.3%、0.5%）黄芪多糖制剂的各组鸡抗体效价（nlog2）分别为4.50、3.75、4.50,三组之间比较差异不显著（P=0.05）。空白对照组平均抗体效价为5.25,黄芪多糖微生物制剂组和黄芪多糖制剂组与空白对照组之间比较差异分别为极显著（P=0.01）、显著（P=0.05）。同时,饮用不同浓度（0.1%、0.3%、0.5%）黄芪多糖微生物制剂和不同浓度（0.1%、0.3%、0.5%）黄芪多糖制剂的各组鸡的各器官指数之间比较差异均不显著（P=0.05）;黄芪多糖微生物制剂组与黄芪多糖制剂组之间、黄芪多糖微生物制剂组与空白对照组之间各器官指数整体比较差异也均不显著（P=0.05）,但黄芪多糖制剂组与空白对照组之间各器官指数整体比较差异显著（P=0.05）;但42日龄时,0.3%与0.5%浓度的黄芪多糖制剂组的胸腺指数差异显著（P=0.05）,0.1%与0.3%浓度黄芪多糖制剂组的法氏囊指数差异也显著（P=0.05）;黄芪多糖微生物制剂组、黄芪多糖制剂组以及空白对照组之间脾指数与胸腺指数整体比较差异均不显著（P=0.05）,但三者之间法氏囊指数差异极显著（P=0.01）。

关键词：黄芪多糖微生态制剂免疫功能抗体免疫器官指数

来源：评论

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鼠李糖乳杆菌对Caco-2细胞抗氧化功能和细胞因子分泌的影响

鼠李糖乳杆菌对Caco-2细胞抗氧化功能和细胞因子分泌的影响

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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：黄怡黄琴李卫芬余东游周绪霞浙江大学动物科学学院饲料科学研究所浙江大学动物分子营养学教育部重点实验室广西大学动物科学技术学院

通过体外细胞培养的方法研究了鼠李糖乳杆菌(***)对Caco-2细胞抗氧化和非特异免疫功能的影响。Caco-2细胞分别用PBS(A组)、*** K88(B组)和***(C组)处理,以及先用***预处理,再用*** K88处理(D组),用比浊法检测细胞培养上清的总抗氧化能力... 详细信息

通过体外细胞培养的方法研究了鼠李糖乳杆菌(***)对Caco-2细胞抗氧化和非特异免疫功能的影响。Caco-2细胞分别用PBS(A组)、*** K88(B组)和***(C组)处理,以及先用***预处理,再用*** K88处理(D组),用比浊法检测细胞培养上清的总抗氧化能力(Total antioxidative capability,T-AOC),以及细胞培养上清和细胞裂解液中的超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活力;用ELISA法检测细胞培养上清的增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL),IL-8和IL-10的含量。结果表明:与A组相比,B组细胞上清中T-AOC显著降低(P<0.01),SOD活力显著提高(P<0.01),但在细胞裂解液中SOD酶活力无显著变化;C组细胞上清中T-AOC显著高于A组和B组(P<0.01),但SOD则显著低于A组和B组(P<0.01),细胞裂解液中SOD活性高于A组(P<0.05)。大肠杆菌处理(处理B)能促进Caco-2细胞分泌APRIL(P<0.01),但不刺激白介素IL-8和IL-10的分泌;C组APRIL显著高于A组(P<0.01),但远低于B组(P<0.01),IL-8显著低于A和B组(P<0.01),而IL-10则显著高于A和B组(P<0.01)。与B组相比,D组APRIL显著减少(P<0.01),但IL-8和IL-10都显著增加(P<0.05和P<0.01)。以上结果说明,鼠李糖乳杆菌可提高Caco-2细胞的抗氧化功能,促进促炎细胞因子增殖诱导配体APRIL和抗炎细胞因子IL-10的分泌,抑制促炎细胞因子IL-8的产生;显著减轻肠上皮细胞对致病菌的炎症反应(APRIL显著降低),增强其免疫应答(显著提高IL-10和IL-8水平),表现出免疫保护和免疫佐剂的效果。

关键词：鼠李糖乳杆菌大肠杆菌 Caco-2细胞抗氧化细胞因子

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